骨髓腔注射论文-吴礼凤,孙平,麦燕兴,刘海明,徐艳花

骨髓腔注射论文-吴礼凤,孙平,麦燕兴,刘海明,徐艳花

导读:本文包含了骨髓腔注射论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:模拟失重,骨质疏松,骨髓间充质干细胞,骨密度

骨髓腔注射论文文献综述

吴礼凤,孙平,麦燕兴,刘海明,徐艳花[1](2012)在《骨髓腔注射骨髓间充质干细胞防治模拟失重大鼠的骨质疏松》一文中研究指出背景:模拟失重条件下自身骨髓间充质干细胞的增殖受到抑制,并且向成骨细胞分化的能力减弱,造成骨量减少与骨微结构的破坏,最终导致骨质疏松。目的:观察同种异体骨髓间充质干细胞骨髓腔注射对模拟失重大鼠胫骨骨密度和骨组织微结构的影响。方法:将雄性SD大鼠随机分为自由活动对照组、尾吊模拟失重组、细胞治疗组(尾吊模拟失重同时给予双侧胫骨骨髓腔注射成骨诱导的同种异体BMSCs细胞)。结果与结论:与自由活动对照组相比,尾吊模拟失重组胫骨骨密度、骨小梁面积百分比、骨小梁数量和厚度均显着降低(P<0.01),骨小梁分离度显着增加(P<0.01)。与尾吊模拟失重组相比,细胞治疗组中胫骨骨密度、骨小梁面积百分比、骨小梁数量和厚度均显着增加(P<0.01),骨小梁分离度显着降低(P<0.01)。说明骨髓腔注射能够增加模拟失重大鼠骨密度,改善骨超微结构,减缓骨量丢失,有效防治骨质疏松。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2012年19期)

吴礼凤[2](2012)在《同种异体骨髓间充质干细胞骨髓腔注射对模拟失重大鼠骨质疏松防治作用的实验研究》一文中研究指出研究背景:航天员长期的太空停留会发生骨量丢失,骨骼脱矿,骨密度降低和骨力学性能的下降,从而引起骨质疏松等一系列与骨代谢紊乱相关的疾病[1]。失重性骨质疏松的发生是因为空间飞行中体液头向转移、重力负荷力学作用消失,物体只表现为质量而不表现为重量的特殊力学环境—微重力(106—10-9g)环境对人体骨骼系统产生的病理生理改变。失重环境下的这种因骨骼的机械张力刺激减少引起的全身或局部骨量丢失,也称为废用性骨质疏松症。失重环境中骨骼系统的变化呈现进行性过程,长期的失重环境以及骨矿盐的持续丢失是航天飞行中人类所面临的严重生理反应之一,也是妨碍人类长期太空停留和探索外星球的主要障碍之一。研究表明,失重性骨质疏松发生时骨质量的变化并非在骨骼内平均分布,而是有部位特异性。以人体为例,腰椎、骨盆、下肢长骨变化尤为明显,上半身骨骼(胸椎、肋骨、上肢骨骼及头颅骨等)变化不大[2,3]。因此承重骨的疼痛和潜在的骨折危险是影响航天员生活质量,导致发病率增加的主要原因。传统上骨质疏松的治疗包括非药物治疗和药物治疗,非药物治疗包括改善营养状况、加强运动、纠正不良生活习惯等。抗骨质疏松的主要药物有骨矿化类药物、骨吸收抑制剂、骨形成促进剂等几大类,这些药物在治疗废用性骨质疏松上取得一定的疗效。局部细胞移植治疗联合全身药物治疗将可能成为失重环境下受累严重部位(即承重骨)骨质疏松症的另一种更为有效的治疗方法。骨形成包括骨髓间质干细胞(BMSCs)分化为成骨细胞和成骨细胞成熟为骨细胞两个过程目前国内外大量研究已证实,由于微重力下成骨细胞等缺乏必要的机械力刺激,使其增殖和分化功能下降,导致成熟的成骨细胞数量减少,骨形成下降,这是造成空间骨丢失的主要原因。同时失重环境下骨髓中BMSCs增殖受抑制,向成骨细胞分化的能力下降,从而进一步导致了成骨细胞数量的减少和骨形成的降低.。BMSCs因其取材方便,体外扩增、分离相对容易及伦理法律等方面的优势,已经成为各种组织器官细胞治疗和细胞工程的理想种子细胞。又因失重性骨质疏松主要发生在承重骨,因此可以设想在体外对同种异体BMSCs进行成骨诱导后,进行体内局部移植来防治失重导致的承重骨的骨质疏松症。目的:本研究旨在从体外分离培养骨髓间充质干细胞,并诱导向成骨细胞分化;通过对尾吊诱导的模拟失重骨质疏松大鼠给予双侧胫骨骨髓腔注射已分化的同种异体骨髓间充质干细胞,运用骨密度、骨超微结构观察、骨组织形态计量学分析等手段来综合评价骨髓腔注射BMSCs对模拟失重大鼠的承重骨骨质疏松的防治作用,为失重性骨质疏松的治疗探索一种新的方法。方法:1、根据BMSCs的贴壁特性,体外分离纯化BMSCs。通过镜下观察形态学变化、MTTT法检测其生长特性、流式细胞仪检测细胞表面抗原CD29、CD34和CD44,并进行成脂和成骨细胞多向诱导分化等方法综合来鉴定所分离的BMSCs。2、在体外将同种异体的BMSCs向成骨细胞分化诱导成功后,PBS重悬细胞,浓度为3.75×106/ml的细胞数。将3月龄雄性SD大鼠24只,随机平均分为3组:A组为正常对照组;B组为尾吊模拟失重组;C组为尾吊模拟失重同时经胫骨平台给予双侧胫骨骨髓腔注射200ul/侧已分化的BMSCs悬液的细胞治疗组,其他两组大鼠胫骨骨髓腔注射等体积PBS。B组和C组采用陈杰等改进的悬吊法造模,A组大鼠可自由活动。实验期28d后称重后处死、取双侧胫骨并剔除附着的软组织。取左侧胫骨测量骨密度;取左侧胫骨上1/3近心端制备电镜标本,在扫描电镜下观察胫骨近端松质骨超微结构;取大鼠右侧胫骨进行不脱钙骨包埋的骨组织形态计量学分析。统计学方法:所有数据采用均数±标准差表示,用SPSS13.0统计软件进行统计分析,采用组间两独立样本t检验及方差分析(One-way ANOVA)进行统计分析,LSD多重检验,P<0.05作为有显着性差异的检验标准。结果:1、用直接贴壁法可以分离和纯化具有间充质干细胞自我更新增殖及多向分化特性的BMSCs;油红0染色和茜素红染色结果显示,该实验所分离的BMSCs可被诱导分化为脂肪细胞和成骨细胞。2、BMSCs对模拟失重大鼠骨质疏松的防治作用:(1)尾吊28天后,A组大鼠与B组大鼠各指标的比较:①从骨密度方面,与A组相比,B组大鼠的胫骨骨密度显着降低(P=0.000),提示骨量减少,骨质疏松;②骨形态计量学结果显示,从静态学参数方面,与A组相比,B组大鼠的骨小梁面积百分数(%Tb.Ar)、骨小梁数目(Th.N)和骨小梁厚度(Tb.Th)均显着降低(P=0.000,P=0.000,P=0.000),而骨小梁分离度(Tb.Sp)显着增高(P=0.005),提示骨量减少,骨小梁结构疏松;从骨形成参数(动态参数):荧光标记周长百分率(%L.Pm)、单位骨小梁面积骨形成率(BFR/TV)、矿化沉积率(MAR)减少(P=0.000,P=0.000,P=0.000),提示骨形成减少;骨吸收参数即单位骨小梁面积上的破骨细胞数(Oc.N)增加,提示骨吸收活跃。③从扫描电镜低倍镜下观察,B组大鼠胫骨骨小梁数目较A组明显减少、断裂,骨小梁厚薄不均、形状各异,小梁间距离增大,骨小梁之间的连接破坏,立体网状结构消失。高倍镜下骨小梁表面的胶原纤维排列杂乱,结构变得松散,部分区域胶原消失,骨吸收现象明显,形成圆形或椭圆形骨的吸收陷窝,并出现微骨折。(2)B组大鼠与C组大鼠各指标的比较:①从骨密度方面,与B组大鼠比较,C组大鼠的胫骨骨密度显着提高(P=0.000);②从静态参数方面,C组大鼠与B组大鼠相比,%Tb.Ar、Tb.Th和Th.N显着增加(P=0.000,P=0.000,P=0.000),而Tb.Sp显着降低(P=0.011),提示骨量增加;%L.Pm、BFR/TV、MAR等骨形成参数增加(P=0.000,P=0.000,P=0.003);骨吸收参数Oc.N降低(P=0.000)。③扫描电镜低倍镜下观察C组大鼠骨小梁数目较B组明显增多,总体上分布较为均一,骨小梁间连接较为紧密,立体网状结构保持完整。高倍镜下骨胶原纤维较B组排列较规整、紧密,走向较清晰。结论:1、利用BMSCs的贴壁特性成功地从骨髓中分离和纯化,在体外可快速大量扩增,且反复传代后能保持其原有的形态特点和分化能力,显示其干细胞的特征;2、BMSCs在体外分别经成脂诱导液及成骨诱导液培养后可以向脂肪细胞和成骨细胞分化;3、通过尾吊法建立的大鼠废用性骨质疏松动物模型,出现骨量减少、骨密度下降,骨小梁骨形成减少,骨吸收增加,骨组织微结构改变并破坏,说明尾吊模拟失重大鼠骨质疏松模型成功建立;4、骨髓腔注射已向成骨细胞分化的BMSCs能够增加模拟失重大鼠承重骨的骨密度,促进骨小梁的骨形成,改善骨超微结构,有效减缓失重下的骨量丢失;5、BMSCs对模拟失重骨质疏松的防治作用,可能与BMSCs及成骨细胞数量增加,从而使骨形成增加有关;6、通过直接从骨髓腔注射、增加外源性的BMSCs可以防治模拟失重承重骨骨质疏松的发生,为失重性骨质疏松提供了一种新的治疗思路,进一步为BMSCs移植在骨质疏松的治疗中提供了实验依据。(本文来源于《南方医科大学》期刊2012-04-01)

骨髓腔注射论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

研究背景:航天员长期的太空停留会发生骨量丢失,骨骼脱矿,骨密度降低和骨力学性能的下降,从而引起骨质疏松等一系列与骨代谢紊乱相关的疾病[1]。失重性骨质疏松的发生是因为空间飞行中体液头向转移、重力负荷力学作用消失,物体只表现为质量而不表现为重量的特殊力学环境—微重力(106—10-9g)环境对人体骨骼系统产生的病理生理改变。失重环境下的这种因骨骼的机械张力刺激减少引起的全身或局部骨量丢失,也称为废用性骨质疏松症。失重环境中骨骼系统的变化呈现进行性过程,长期的失重环境以及骨矿盐的持续丢失是航天飞行中人类所面临的严重生理反应之一,也是妨碍人类长期太空停留和探索外星球的主要障碍之一。研究表明,失重性骨质疏松发生时骨质量的变化并非在骨骼内平均分布,而是有部位特异性。以人体为例,腰椎、骨盆、下肢长骨变化尤为明显,上半身骨骼(胸椎、肋骨、上肢骨骼及头颅骨等)变化不大[2,3]。因此承重骨的疼痛和潜在的骨折危险是影响航天员生活质量,导致发病率增加的主要原因。传统上骨质疏松的治疗包括非药物治疗和药物治疗,非药物治疗包括改善营养状况、加强运动、纠正不良生活习惯等。抗骨质疏松的主要药物有骨矿化类药物、骨吸收抑制剂、骨形成促进剂等几大类,这些药物在治疗废用性骨质疏松上取得一定的疗效。局部细胞移植治疗联合全身药物治疗将可能成为失重环境下受累严重部位(即承重骨)骨质疏松症的另一种更为有效的治疗方法。骨形成包括骨髓间质干细胞(BMSCs)分化为成骨细胞和成骨细胞成熟为骨细胞两个过程目前国内外大量研究已证实,由于微重力下成骨细胞等缺乏必要的机械力刺激,使其增殖和分化功能下降,导致成熟的成骨细胞数量减少,骨形成下降,这是造成空间骨丢失的主要原因。同时失重环境下骨髓中BMSCs增殖受抑制,向成骨细胞分化的能力下降,从而进一步导致了成骨细胞数量的减少和骨形成的降低.。BMSCs因其取材方便,体外扩增、分离相对容易及伦理法律等方面的优势,已经成为各种组织器官细胞治疗和细胞工程的理想种子细胞。又因失重性骨质疏松主要发生在承重骨,因此可以设想在体外对同种异体BMSCs进行成骨诱导后,进行体内局部移植来防治失重导致的承重骨的骨质疏松症。目的:本研究旨在从体外分离培养骨髓间充质干细胞,并诱导向成骨细胞分化;通过对尾吊诱导的模拟失重骨质疏松大鼠给予双侧胫骨骨髓腔注射已分化的同种异体骨髓间充质干细胞,运用骨密度、骨超微结构观察、骨组织形态计量学分析等手段来综合评价骨髓腔注射BMSCs对模拟失重大鼠的承重骨骨质疏松的防治作用,为失重性骨质疏松的治疗探索一种新的方法。方法:1、根据BMSCs的贴壁特性,体外分离纯化BMSCs。通过镜下观察形态学变化、MTTT法检测其生长特性、流式细胞仪检测细胞表面抗原CD29、CD34和CD44,并进行成脂和成骨细胞多向诱导分化等方法综合来鉴定所分离的BMSCs。2、在体外将同种异体的BMSCs向成骨细胞分化诱导成功后,PBS重悬细胞,浓度为3.75×106/ml的细胞数。将3月龄雄性SD大鼠24只,随机平均分为3组:A组为正常对照组;B组为尾吊模拟失重组;C组为尾吊模拟失重同时经胫骨平台给予双侧胫骨骨髓腔注射200ul/侧已分化的BMSCs悬液的细胞治疗组,其他两组大鼠胫骨骨髓腔注射等体积PBS。B组和C组采用陈杰等改进的悬吊法造模,A组大鼠可自由活动。实验期28d后称重后处死、取双侧胫骨并剔除附着的软组织。取左侧胫骨测量骨密度;取左侧胫骨上1/3近心端制备电镜标本,在扫描电镜下观察胫骨近端松质骨超微结构;取大鼠右侧胫骨进行不脱钙骨包埋的骨组织形态计量学分析。统计学方法:所有数据采用均数±标准差表示,用SPSS13.0统计软件进行统计分析,采用组间两独立样本t检验及方差分析(One-way ANOVA)进行统计分析,LSD多重检验,P<0.05作为有显着性差异的检验标准。结果:1、用直接贴壁法可以分离和纯化具有间充质干细胞自我更新增殖及多向分化特性的BMSCs;油红0染色和茜素红染色结果显示,该实验所分离的BMSCs可被诱导分化为脂肪细胞和成骨细胞。2、BMSCs对模拟失重大鼠骨质疏松的防治作用:(1)尾吊28天后,A组大鼠与B组大鼠各指标的比较:①从骨密度方面,与A组相比,B组大鼠的胫骨骨密度显着降低(P=0.000),提示骨量减少,骨质疏松;②骨形态计量学结果显示,从静态学参数方面,与A组相比,B组大鼠的骨小梁面积百分数(%Tb.Ar)、骨小梁数目(Th.N)和骨小梁厚度(Tb.Th)均显着降低(P=0.000,P=0.000,P=0.000),而骨小梁分离度(Tb.Sp)显着增高(P=0.005),提示骨量减少,骨小梁结构疏松;从骨形成参数(动态参数):荧光标记周长百分率(%L.Pm)、单位骨小梁面积骨形成率(BFR/TV)、矿化沉积率(MAR)减少(P=0.000,P=0.000,P=0.000),提示骨形成减少;骨吸收参数即单位骨小梁面积上的破骨细胞数(Oc.N)增加,提示骨吸收活跃。③从扫描电镜低倍镜下观察,B组大鼠胫骨骨小梁数目较A组明显减少、断裂,骨小梁厚薄不均、形状各异,小梁间距离增大,骨小梁之间的连接破坏,立体网状结构消失。高倍镜下骨小梁表面的胶原纤维排列杂乱,结构变得松散,部分区域胶原消失,骨吸收现象明显,形成圆形或椭圆形骨的吸收陷窝,并出现微骨折。(2)B组大鼠与C组大鼠各指标的比较:①从骨密度方面,与B组大鼠比较,C组大鼠的胫骨骨密度显着提高(P=0.000);②从静态参数方面,C组大鼠与B组大鼠相比,%Tb.Ar、Tb.Th和Th.N显着增加(P=0.000,P=0.000,P=0.000),而Tb.Sp显着降低(P=0.011),提示骨量增加;%L.Pm、BFR/TV、MAR等骨形成参数增加(P=0.000,P=0.000,P=0.003);骨吸收参数Oc.N降低(P=0.000)。③扫描电镜低倍镜下观察C组大鼠骨小梁数目较B组明显增多,总体上分布较为均一,骨小梁间连接较为紧密,立体网状结构保持完整。高倍镜下骨胶原纤维较B组排列较规整、紧密,走向较清晰。结论:1、利用BMSCs的贴壁特性成功地从骨髓中分离和纯化,在体外可快速大量扩增,且反复传代后能保持其原有的形态特点和分化能力,显示其干细胞的特征;2、BMSCs在体外分别经成脂诱导液及成骨诱导液培养后可以向脂肪细胞和成骨细胞分化;3、通过尾吊法建立的大鼠废用性骨质疏松动物模型,出现骨量减少、骨密度下降,骨小梁骨形成减少,骨吸收增加,骨组织微结构改变并破坏,说明尾吊模拟失重大鼠骨质疏松模型成功建立;4、骨髓腔注射已向成骨细胞分化的BMSCs能够增加模拟失重大鼠承重骨的骨密度,促进骨小梁的骨形成,改善骨超微结构,有效减缓失重下的骨量丢失;5、BMSCs对模拟失重骨质疏松的防治作用,可能与BMSCs及成骨细胞数量增加,从而使骨形成增加有关;6、通过直接从骨髓腔注射、增加外源性的BMSCs可以防治模拟失重承重骨骨质疏松的发生,为失重性骨质疏松提供了一种新的治疗思路,进一步为BMSCs移植在骨质疏松的治疗中提供了实验依据。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

骨髓腔注射论文参考文献

[1].吴礼凤,孙平,麦燕兴,刘海明,徐艳花.骨髓腔注射骨髓间充质干细胞防治模拟失重大鼠的骨质疏松[J].中国组织工程研究.2012

[2].吴礼凤.同种异体骨髓间充质干细胞骨髓腔注射对模拟失重大鼠骨质疏松防治作用的实验研究[D].南方医科大学.2012

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