导读:本文包含了抗体的制备论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:半抗原,马兜铃酸A,单克隆抗体
抗体的制备论文文献综述
卢庆鹏,张英杰,于雪芝,沈建忠,王战辉[1]（2019）在《马兜铃酸A单克隆抗体的制备》一文中研究指出[目的]马兜铃酸A (AAA)是一种天然存在于马兜铃属及细辛属植物中的具有致癌性和肾毒性的硝基菲羧酸。长期服用或食用含有马兜铃酸A的中药制剂、保健品以及食品可导致肾病以及肝癌的发生,严重影响着人类生命健康。本研究合成了马兜铃酸A的半抗原,制备出了高灵敏度的马兜铃酸A单克隆抗体,为马兜铃酸A的快速检测奠定了基础。[方法]基于马兜铃酸A的结构特点,使用4-氨基丁酸法合成马兜铃酸A半抗原(AAA-4HS),通过活泼酯法将半抗原与钥孔血蓝蛋白、牛血清白蛋白以及卵清蛋白偶联得到免疫原(AAA-4HS-KLH、AAA-4HS-BSA)和包被原(AAA-4HS-OVA)。通过免疫小鼠,基于细胞融合技术,筛选并制备抗马兜铃酸A单克隆抗体。[结果]马兜铃酸A人工半抗原AAA-4HS经HPLC-MS鉴定成功,完全抗原(AAA-4HS-BSA)经基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱鉴定合成成功,其偶联比为10:1。制备获得的单克隆抗体对马兜铃酸A的半数抑制浓度为1.0ng/mL,对其结构类似物交叉反应率均小于2%。[结论]本研究成功制备了灵敏度高、特异性强的抗马兜铃酸A单克隆抗体,为检测保健品以及食品中马兜铃酸A的免疫分析方法的建立奠定了基础。(本文来源于《中国畜牧兽医学会兽医食品卫生学分会第十五次学术交流会论文集》期刊2019-12-12）
江海洋,李培培,张英杰,温凯,王战辉[2]（2019）在《氟虫腈及其代谢物单克隆抗体的制备》一文中研究指出[目的]苯并吡唑类广谱杀虫剂氟虫腈(Fipronil,FPN)可损伤肝脏、肾脏及甲状腺,对机体产生较强的毒害作用。本研究的目的是根据氟虫腈的结构特点设计合成半抗原,制备高灵敏度的氟虫腈及其代谢物的单克隆抗体,为鸡蛋及其他食品中氟虫腈及其代谢物的免疫学检测方法的建立奠定基础。[方法]选择氟虫腈作为靶标物质,以脱叁氟甲亚硫酰基氟虫腈为原料,使用己二酸酐化学合成法合成氟虫腈半抗原(FPN2),通过活泼酯法将其与钥孔血蓝蛋白(KLH)、牛血清白蛋白(BSA)以及卵清白蛋白(OVA)偶联得到免疫原(FPN2-EDC-KLH、FPN2-EDC-BSA)和包被原(FPN2-EDC-OVA)。通过免疫小鼠,血清检测,细胞融合,克隆筛选等制备氟虫腈及其代谢物的单克隆抗体。[结果]半抗原经液相色谱-质谱(HPLC-MS)鉴定合成成功,完全抗原经基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定,测得与BSA偶联率为18.13:1,完全抗原合成成功。制备获得4株单克隆抗体mAb19F8、3G8、6B8、7F11,经间接竞争ELISA鉴定,对氟虫腈的半数抑制浓度(IC_(50))分别为2.490 ng/mL、2.936 ng/mL、5.642 ng/mL、4.191 ng/mL,其中mAb19F8对其结构类似物氟甲腈、氟虫腈砜、氟虫腈硫醚交叉反应率分别为31.23%、21.24%、88.83%。[结论]本研究成功制备了高灵敏度的氟虫腈单克隆抗体,该抗体可识别氟虫腈及其代谢物,为检测鸡蛋以及其他食品中氟虫腈及其代谢物的免疫学分析方法的建立奠定了基础。(本文来源于《中国畜牧兽医学会兽医食品卫生学分会第十五次学术交流会论文集》期刊2019-12-12）
刘明刚,刘睿,王战辉,沈建忠[3]（2019）在《氯丙那林单克隆抗体的制备及其间接竞争ELISA检测方法的建立》一文中研究指出[目的]氯丙那林是一种选择性β_2-受体激动剂类药物,是国家明令禁止用于所有食品动物促生长的药物之一,对其进行灵敏、快速检测是控制其非法使用的重要手段。本研究的目的是设计合成氯丙那林半抗原、全抗原,制备高亲和力氯丙那林单克隆抗体,并建立可用于检测氯丙那林残留的间接竞争ELISA检测方法。[方法]以2-氯苯甲醛为原料分别合成氯丙那林半抗原CLP-1、CLP-2和CLP-3。通过碳二亚胺法将半抗原分别与钥孔血蓝蛋白(KLH)、牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵白蛋白(OVA)进行偶联,将人工抗原CLP-1/2/3-KLH/BSA免疫雌性Balb/c小鼠,检测血清效价和抑制,使用杂交瘤细胞筛选技术获得细胞株,通过小鼠体内诱生法制备单抗。分别以CLP-1/2/3-BSA/OVA为包被原,优化ELISA条件,建立间接竞争ELISA检测方法。[结果]半抗原CLP-1/2/3经质谱和核磁鉴定,叁种半抗原均合成成功,全抗原CLP-1/2/3-BSA经MALDI-TOF鉴定合成成功,CLP-1/2/3-KLH/OVA全抗原经抗体检测鉴定合成成功。小鼠经免疫并筛选,获得单克隆抗体10B10,经鉴定该抗体重链亚型为IgG1,轻链亚型为kappa。ELISA优化结果显示,单克隆抗体最佳稀释倍数为1:100000,最佳包被原为CLP-3-BSA,最佳包被浓度为0.02μg/ml,最佳反应温度为25℃,最佳反应PBS缓冲液盐离子浓度为250mM,抗体对氯丙那林的半数抑制浓度(IC_(50))为0.068μg/L,R~2=0.99898,线性范围为0.026μg/L/L-0.177μg/L/L,对妥布特罗、克伦特罗、溴布特罗、奇帕特罗、莱克多巴胺、马布特罗的交叉反应率为147.8%,1.09%,0.56%,0.36%,0.26%,0.10%。[结论]成功合成了3种氯丙那林新型半抗原,制备出了高亲和力单克隆抗体,可耐受250mM缓冲溶液。建立了快速、灵敏的间接竞争ELISA检测方法,为检测动物源性食品中氯丙那林残留奠定了基础,具有一定的研究价值和应用价值。(本文来源于《中国畜牧兽医学会兽医食品卫生学分会第十五次学术交流会论文集》期刊2019-12-12）
魏博帆,王景娅,孙妍妍,王露,李晓哲[4]（2019）在《家蚕化学感受蛋白CSP9的抗体制备及表达分析》一文中研究指出为了制备家蚕CSP9的多克隆抗体,研究该蛋白在家蚕中的表达特征和功能。利用PCR扩增家蚕csp9基因,构建其原核表达载体,诱导CSP9蛋白表达并纯化。纯化后的CSP9蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,Western杂交检测CSP9在家蚕中的表达特征。最终成功构建csp9/pET-28a原核表达载体,并纯化获得与预测分子量一致的CSP9蛋白;成功制备了CSP9多克隆抗体。Western杂交结果表明,CSP9在家蚕不同时期和不同组织中都有特异表达。本研究成功表达纯化并制备了家蚕CSP9多克隆抗体,分析了CSP9在家蚕中的表达特征,为后续该蛋白在家蚕中的功能和调控研究奠定了基础。(本文来源于《中国农学通报》期刊2019年34期）
欧兰香,陈振,王佳颖,解光宁,王岩[5]（2019）在《重组人脂蛋白相关磷脂酶A2的原核表达及单克隆抗体制备》一文中研究指出目的构建重组人脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)的原核表达质粒,制备重组人Lp-PLA2,并通过免疫诱导获得人Lp-PLA2的单克隆抗体。方法以人cDNA文库为模板,通过PCR的方法获得PLA2G7基因的编码区序列,并与原核表达载体pET32a进行连接,构建原核表达质粒,转化大肠杆菌Rostta(DE3)。通过在30℃0.2mmol/L异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)条件下诱导蛋白表达,经过纯化获得重组人Lp-PLA2;免疫Balb/c小鼠,制备单克隆抗体;并通过酶联免疫吸附试验法测定效价,检测抗体特异性。结果通过NotⅠ和SalⅠ双酶切及测序证实原核表达质粒构建成功;经纯化得到47×103左右的蛋白,与Lp-PLA2抗体进行蛋白免疫印迹法杂交呈阳性,表明已得到重组人Lp-PLA2。通过对小鼠免疫,最终获得单克隆抗体,效价为1∶2×106,与纤维蛋白原、C-反应蛋白无交叉反应。结论成功获得重组人Lp-PLA2,并制备得到了效价较高的单克隆抗体,为后续Lp-PLA2检测试剂盒的开发奠定了基础。(本文来源于《国际检验医学杂志》期刊2019年22期）
董雪,徐雨昕,郭晶,龚忠阔,夏霖亚[6]（2019）在《重组人源抗血管内皮生长因子单克隆抗体的制备及鉴定》一文中研究指出通过优化密码子获得带有信号肽的人源抗血管内皮生长因子(VEGF)抗体的重链和轻链DNA序列,分别构建表达载体pcDNA-VEGFH和pcDNA-VEGFV,将表达载体共转染HEK-293细胞后,与C6胶质瘤细胞共培养,并将所得蛋白进行分离纯化.实验结果表明:pcDNA-VEGFH和pcDNA-VEGFV共转染HEK-293F细胞,可显着抑制C6细胞增殖(P<0.01);转染24～144h后的细胞培养上清液中均有蛋白表达;所得纯化蛋白和标准品一致;纯化所得抗体蛋白能明显抑制C6细胞增殖(P<0.05～0.01),与标准品抑制效果相似.(本文来源于《吉林大学学报(理学版)》期刊2019年06期）
张康,张璇,闫遵祥,王磊,张凯[7]（2019）在《牛病毒性腹泻病毒Core蛋白的原核表达及多克隆抗体制备》一文中研究指出为制备牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的Core蛋白及其多克隆抗体,根据Core蛋白的编码基因序列,设计合成一对特异性引物,利用RT-PCR扩增BVDV Core基因并定向插入Pet30a载体中,构建重组质粒Pet30a-Core,经酶切鉴定后转化大肠埃希菌TOP 10感受态细胞,筛选获得阳性重组菌,以IPTG进行诱导后成功表达出分子质量为20 ku的重组Core蛋白。将诱导表达的蛋白产物经融合蛋白的Ni柱亲和法进行纯化,利用纯化的重组蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,并利用间接ELISA法测出多克隆抗体效价达到1∶512 000。蛋白质印迹法(Western blot)和间接免疫荧光试验(IFA)证实,多克隆抗体可与细胞中的BVDV抗原发生反应,具有良好的免疫原性和特异性。本实验成功制备了BVDV重组Core蛋白的兔源多克隆抗体,为BVDV的检测及其Core蛋白功能研究奠定了基础。(本文来源于《浙江农业学报》期刊2019年11期）
李言言,刘阿华,王毅,宁梦夏,马文涛[8]（2019）在《山羊乳酪蛋白单克隆抗体的制备与鉴定》一文中研究指出制备山羊乳酪蛋白单克隆抗体可以为检测乳品中山羊乳成分提供免疫学检测手段。以山羊酪蛋白免疫Balb/c小鼠,应用细胞融合技术,制备特异性识别山羊乳酪蛋白的单克隆抗体,对获得的阳性杂交瘤细胞进行连续传代和反复冻存以测定其稳定性,并对其分泌的单克隆抗体应用ELISA进行抗体特异性分析,对特异性识别山羊乳酪蛋白的单克隆抗体进行抗体亚型鉴定和染色体组型分析。最终,成功的筛选出可以分泌特异性识别山羊乳酪蛋白的单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞株,被命名为7H。经染色体组型分析,染色体数目为102条;单克隆抗体7H类别为IGg1,轻链为κ;经连续传代和反复冻存,ELISA检测细胞上清抗体发现其OD450nm值无显着性差异。(本文来源于《动物医学进展》期刊2019年11期）
高利萍,武月章,杨雪花,陈冬冬,肖康[9]（2019）在《MiniSOG蛋白的单克隆抗体制备及初步研究》一文中研究指出单线态氧产生者(mini singlet oxygen generator,miniSOG)是改造于拟南芥向光素2蛋白而获得的小分子荧光黄素蛋白,由106个氨基酸残基组成。miniSOG被广泛用于电镜及荧光显微镜,并被广泛用于发色团辅助的光灭活(Chromophore-assisted light inactivation,CALI)蛋白、DNA或RNA,并结合免疫光敏用于癌症的治疗,以及结合细胞消融用于神经科学、免疫生物学等。但是目前国内并无商品化的miniSOG抗体,为了辅助课题研究,制备抗miniSOG蛋白的单克隆抗体,本研究根据miniSOG基因的ORF区序列构建miniSOG-GST重组蛋白的原核表达载体PGEX-4T-1-miniSOG,然后将该重组质粒转化于BL21感受态大肠杆菌中,异丙基硫代半乳糖苷(Isopropylβ-DThiogalactoside,IPTG)诱导融合蛋白的表达,并经亲和层析方法进行纯化。将纯化后的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术制备单克隆抗体。筛选获得稳定分泌抗miniSOG的单克隆抗体细胞株,最终选取性能最优的4F9细胞株进行小鼠腹水制备并纯化。单抗4F9亚型为IgG1/Kappa,腹水滴度达到1∶200 000,纯化抗体灵敏度达到5 ng/mL。并通过Western Blot、免疫荧光及免疫组化方法进行特异性鉴定,该单克隆抗体能特异性识别转染细胞和转基因小鼠脑组织中的miniSOG蛋白。本研究在国内首次制备了miniSOG单克隆抗体,将丰富其在其它方面的应用。(本文来源于《病毒学报》期刊2019年06期）
魏晓雷,叶汉梅,罗智[10]（2019）在《黄颡鱼自噬相关基因LC3B和Beclin1的原核表达及多克隆抗体制备》一文中研究指出为深入研究黄颡鱼Pelteobagrus fulvidraco自噬的发生过程和机制,从黄颡鱼cDNA中克隆获得372和1344 bp的黄颡鱼LC3B(PfLC3B)和Beclin1(PfBeclin1)基因编码序列,并成功构建了pET32a(+)-PfLC3B和pET32a(+)-PfBeclin1重组表达载体,分别采用亲和层析和包涵体纯化的方法得到了纯度较高的重组PfLC3B和PfBeclin1蛋白;以重组PfLC3B和PfBeclin1蛋白免疫Balb/C小鼠,制备多克隆抗体。通过Western blot鉴定了PfLC3B和PfBeclin1抗血清可以分别特异性识别重组PfLC3B和PfBeclin1蛋白; PfLC3B抗血清可以特异性识别黄颡鱼内源性LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ蛋白, PfBeclin1抗血清可以特异性识别黄颡鱼内源性Beclin1蛋白。蛋白水平的组织分布显示,黄颡鱼LC3和Beclin1蛋白在肝脏中表达水平均较高,在肾脏和脾脏中的表达水平较低。综上所述,研究成功制备了黄颡鱼LC3B和Beclin1的多克隆抗体,为深入研究黄颡鱼自噬机制提供了有力工具。(本文来源于《水生生物学报》期刊2019年06期）
抗体的制备论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
[目的]苯并吡唑类广谱杀虫剂氟虫腈(Fipronil,FPN)可损伤肝脏、肾脏及甲状腺,对机体产生较强的毒害作用。本研究的目的是根据氟虫腈的结构特点设计合成半抗原,制备高灵敏度的氟虫腈及其代谢物的单克隆抗体,为鸡蛋及其他食品中氟虫腈及其代谢物的免疫学检测方法的建立奠定基础。[方法]选择氟虫腈作为靶标物质,以脱叁氟甲亚硫酰基氟虫腈为原料,使用己二酸酐化学合成法合成氟虫腈半抗原(FPN2),通过活泼酯法将其与钥孔血蓝蛋白(KLH)、牛血清白蛋白(BSA)以及卵清白蛋白(OVA)偶联得到免疫原(FPN2-EDC-KLH、FPN2-EDC-BSA)和包被原(FPN2-EDC-OVA)。通过免疫小鼠,血清检测,细胞融合,克隆筛选等制备氟虫腈及其代谢物的单克隆抗体。[结果]半抗原经液相色谱-质谱(HPLC-MS)鉴定合成成功,完全抗原经基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定,测得与BSA偶联率为18.13:1,完全抗原合成成功。制备获得4株单克隆抗体mAb19F8、3G8、6B8、7F11,经间接竞争ELISA鉴定,对氟虫腈的半数抑制浓度(IC_(50))分别为2.490 ng/mL、2.936 ng/mL、5.642 ng/mL、4.191 ng/mL,其中mAb19F8对其结构类似物氟甲腈、氟虫腈砜、氟虫腈硫醚交叉反应率分别为31.23%、21.24%、88.83%。[结论]本研究成功制备了高灵敏度的氟虫腈单克隆抗体,该抗体可识别氟虫腈及其代谢物,为检测鸡蛋以及其他食品中氟虫腈及其代谢物的免疫学分析方法的建立奠定了基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
抗体的制备论文参考文献
[1].卢庆鹏,张英杰,于雪芝,沈建忠,王战辉.马兜铃酸A单克隆抗体的制备[C].中国畜牧兽医学会兽医食品卫生学分会第十五次学术交流会论文集.2019
[2].江海洋,李培培,张英杰,温凯,王战辉.氟虫腈及其代谢物单克隆抗体的制备[C].中国畜牧兽医学会兽医食品卫生学分会第十五次学术交流会论文集.2019
[3].刘明刚,刘睿,王战辉,沈建忠.氯丙那林单克隆抗体的制备及其间接竞争ELISA检测方法的建立[C].中国畜牧兽医学会兽医食品卫生学分会第十五次学术交流会论文集.2019
[4].魏博帆,王景娅,孙妍妍,王露,李晓哲.家蚕化学感受蛋白CSP9的抗体制备及表达分析[J].中国农学通报.2019
[5].欧兰香,陈振,王佳颖,解光宁,王岩.重组人脂蛋白相关磷脂酶A2的原核表达及单克隆抗体制备[J].国际检验医学杂志.2019
[6].董雪,徐雨昕,郭晶,龚忠阔,夏霖亚.重组人源抗血管内皮生长因子单克隆抗体的制备及鉴定[J].吉林大学学报(理学版).2019
[7].张康,张璇,闫遵祥,王磊,张凯.牛病毒性腹泻病毒Core蛋白的原核表达及多克隆抗体制备[J].浙江农业学报.2019
[8].李言言,刘阿华,王毅,宁梦夏,马文涛.山羊乳酪蛋白单克隆抗体的制备与鉴定[J].动物医学进展.2019
[9].高利萍,武月章,杨雪花,陈冬冬,肖康.MiniSOG蛋白的单克隆抗体制备及初步研究[J].病毒学报.2019
[10].魏晓雷,叶汉梅,罗智.黄颡鱼自噬相关基因LC3B和Beclin1的原核表达及多克隆抗体制备[J].水生生物学报.2019