低血清培养基论文-王家敏,马桂兰,冯玉萍,马伟,马祺

低血清培养基论文-王家敏,马桂兰,冯玉萍,马伟,马祺

导读:本文包含了低血清培养基论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:昆虫细胞,无血清培养基,悬浮培养,生长曲线

低血清培养基论文文献综述

王家敏,马桂兰,冯玉萍,马伟,马祺[1](2019)在《昆虫细胞无血清培养基的研究》一文中研究指出为开发昆虫细胞无血清悬浮培养基,以基础培养基Grace's Insect medium为基础,添加葡萄糖、水解乳蛋白、酵母粉和PF-68等组份后,分别接种Sf-21、Hi-five两种昆虫细胞进行无血清悬浮培养。结果显示:两株昆虫细胞生长均较好,均能够很好的全悬浮生长,Sf-21细胞最高密度可达(39.8±2.6)×105/ml,Hifive细胞最高密度可达(44.4±1.0)×105/ml。本研究为昆虫细胞培养提供一种无血清悬浮培养基配方,为我国利用昆虫细胞杆状病毒表达系统生产生物制品提供基础保障。(本文来源于《甘肃畜牧兽医》期刊2019年11期)

缪亚娜,熊文典,万爱妮,张晶晶,蔡燕飞[2](2019)在《表达HSA/IL2的重组CHO细胞的无血清培养基优化研究》一文中研究指出优化适合重组CHO细胞生长及表达人血清白蛋白与白介素2(HSA/IL2)的低成本无血清悬浮培养基。以无血清悬浮培养基M1为基础,考察了3种不同质量浓度(1.0、2.5、5.0、10.0 g/L)的蛋白水解物(酵母提取物(YE)、大豆蛋白胨(Soy)及胰蛋白胨(Tyr))对CHO细胞生长、细胞周期、细胞凋亡及HSA/IL2融合蛋白表达的影响。5 g/L的YE促进细胞生长,提高HSA/IL2表达量的效果最佳。流加培养过程中,在含5.0 g/L YE的培养基中CHO细胞密度可达9.95×10~6cells/mL,HSA/IL2表达量提高至104.06 mg/L,分别是对照组的1.42倍和1.51倍。细胞对数生长期时,YE可以提高细胞周期进展而利于细胞生长;细胞表达期时,YE可以提高细胞G1期比例,延长细胞表达期时间而利于HSA/IL2表达。(本文来源于《食品与生物技术学报》期刊2019年06期)

韩颢,白虹[3](2019)在《无血清培养基对深低温冻存复苏后的间充质干细胞免疫功能的研究》一文中研究指出目的:探讨无血清培养基对冻存后的间充质干细胞(HUC-MSCs)免疫调节功能的影响,明确其成脂成骨生物学特性,为临床应用奠定基础。方法:(1)分离脐带中的HUC-MSCs,传代纯化后深低温冻存。(2)冻融后的HUC-MSCs分别以含10%胎牛血清的培养基(SCM),无血清培养基两种培养条件培养。(3)观察两组细胞生长状态,革兰染色计数,计算细胞活率。(4)流式细胞术检测两组细胞的表面标志物。(5)成脂成骨诱导,茜红素染色和油红染色观察诱导情况。结果:(1)两组细胞均以漩涡状贴壁,无血清培养基培养的细胞体积略小。(2)在细胞总数及活性方面,两组细胞有些微差异,可忽略不计。(3)流式细胞术显示其对PE-CD34不表达,对PE-CD105、PE-CD90、PE-CD73、PE-CD44和PE-CD29高表达。(4)对无血清培养基(SFM)所培养得到的HUC-MSCs历经约21 d的成骨细胞和脂肪细胞专向分化诱导,发现其具有可媲美SCM培养的HUC-MSCs的分化能力。结论:无血清培养基同有血清培养基相比,对深低温冻存复苏后的间充质干细胞免疫调节功能无明显差异,可替代有血清培养基进行细胞培养。(本文来源于《天津医科大学学报》期刊2019年03期)

孙杰[4](2019)在《应用于间充质干细胞体外扩增的无血清培养基的研究》一文中研究指出间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)由于其优异的免疫调节及分化潜能,被公认为再生医学领域最有前景的细胞之一。但是供体组织直接分离出的MSCs数量有限,而现有的MSCs扩增用含血清培养基无法应用于临床,商业化无血清培养基又存在诸如对MSCs功能特性的维持能力较差等问题,导致MSCs相关的临床应用面临较大阻碍。究其原因,主要是对培养基中关键因子对细胞增殖及功能的影响及其相关机制的认识十分有限。而血清成分不明,商业化无血清培养基成分保密,因此无法基于这些培养基探究培养基组分对扩增的BMSCs生物学特性的影响,也无法精确调控细胞行为。针对上述问题,本文采用实验方法设计适合大鼠骨髓来源MSCs(Bone marrow-derived MSCs,BMSCs)体外扩增并维持其功能特性的无血清培养基,进一步探究关键组分转化生长因子(Transforming growth factor-β31,TGF-β31)对BMSCs增殖的影响及其分子机制。根据BMSCs的生物学特性和文献调研选择了19种无血清培养基的添加成分,采用Plackett-Burman设计方法,以细胞增殖作为响应值,从中发现TGF-β1、表皮生长因子、血小板源生长因子-BB和胰岛素这4种因子能显着促进BMSCs增殖;初步筛选并优化的无血清培养基OptM虽能支持BMSCs贴壁生长,但与含血清培养基和商业化无血清培养基相比仍显不足。为进一步促进OptM中细胞的贴附和生长,采用I型胶原蛋白对细胞培养板进行了预处理,通过应用最速上升法及响应面分析,优化TGF-β1、表皮生长因子及胰岛素浓度,建立了能显着促进BMSCs体外生长且成分明确的无血清培养基SM。采用该无血清培养基培养后的BMSCs可表达其特有的表面抗原及维持成骨、成脂分化潜能,干性基因的表达优于商业化无血清培养基。在此基础上,本研究探究了 TGF-β1调控BMSCs增殖的主要作用机制。研究结果表明,TGF-β1通过促进胞内FAK蛋白在397位点的磷酸化,诱导Akt-mTOR-S6K1信号通路的活化,提高cyclin D1的表达水平,加速BMSCs从G1期到S期进程,从而显着促进BMSCs的增殖。本研究建立的无血清培养基研发体系,为进一步研究BMSCs增殖和功能的影响因素及机制以精确调控BMSCs生物学行为并最终建立临床级BMSCs无血清培养体系奠定基础。(本文来源于《华东理工大学》期刊2019-04-11)

张松,乔自林,王家敏[5](2018)在《无血清培养基的研究进展》一文中研究指出血清组分的复杂性和不确定性及批次间的差异增加了疫苗等细胞产品生产及质量控制的难度,同时血清易引起细菌、真菌、病毒及支原体的污染,增加了疫苗生产的安全性隐患。并且血清本身价格也比较昂贵,这些均使得血清在生产和研究中的应用存在诸多不利。在培养基中添加血清对人们所造成的这些困扰,已经使得不论是科研人员还是工业生产企业对于无血清培养产生了强烈需求。有大量实践证明无血清培养基不仅能在很大程度上避免(本文来源于《江西畜牧兽医杂志》期刊2018年01期)

蒋飞黔[6](2017)在《Plackett-Burman和响应面法优化CHO细胞无血清培养基中关键营养成分》一文中研究指出为了提高CHO细胞在无血清培养基中的生长和蛋白表达能力。通过文献选择16种物质,利用Plackett-Burman实验法筛选有出显着影响的4种营养物质,再使用中心复合设计响应面法优化各成分含量,得到最优配比为腐胺0.07mg/L、柠檬酸铁132.5mg/L、磷酸二氢钠0.84mg/L和烟酰胺2mg/L,优化后获得无血清培养基性能优于同类商品化培养基。(本文来源于《化工管理》期刊2017年27期)

孙若思[7](2017)在《CHO细胞无血清培养基的筛选与优化》一文中研究指出目的:动物细胞培养技术是当今生物工程领域中的前沿技术之一,无论是在研究还是在生产实践方面都对当代生物技术有着重要的影响。虽然目前市售的商业化培养基已具有非常好的广谱性,但是却缺少针对性。针对某一细胞品种设计对应的培养基成分无疑是需要耗费大量的金钱和时间,利用多种市售的培养基进行不同比例的混合,可以在较短时间内使细胞培养得到针对性优化,从而提高产物的产量。方法:本文利用了市售的几种常用培养基,对CHO细胞进行培养,采用先筛选后优化组合的方式进行针对文中的CHO细胞培养进行优化。筛选和优化又分为两部分进行:一是基础培养基的筛选和优化;二是补料培养基的筛选和优化。在培养过程中检测细胞的活率、密度以及产物的表达量作为培养基的评价指标,用以考察培养基的优劣。结果:通过对基础培养基和补料培养基的筛选、优化,使得最终的利用混合培养基培养的细胞不论是在细胞密度、活率还是产物蛋白的表达量方面都优于单一培养基培养的细胞。通过优化使得基础培养基筛在最细胞高密度方面:混合培养基的平均最高密度高出单一培养基的平均最高密度9.8%;在最后细胞活率方面,混合培养基的最终平均活率高出单一培养基的最终平均活率11.8%;在最终蛋白产量方面,混合培养基的最终产量高出单一培养基的最终产量17.4%。通过优化补料培养基在最细胞高密度方面:混合培养基的平均最高密度高出单一培养基的平均最高密度11.0%;在最后细胞活率方面,混合培养基的最终平均活率高出单一培养基的最终平均活率26.6%;在最终蛋白产量方面,混合培养基的最终产量高出单一培养基的最终产量20.6%。结论通过初步筛选和优化组合的方式进行多种培养基的成分配比可以在短时间内提高细胞密度、提升细胞活率的维持时间从而提高目的蛋白的产量。(本文来源于《吉林大学》期刊2017-05-01)

武发菊,尚勇良,董文教,李菁,陶世宇[8](2016)在《BHK-21细胞无血清培养基添加因子的筛选》一文中研究指出为建立猪流行性腹泻病毒(PEDV)与猪伪狂犬病病毒(PRV)的快速鉴别检测方法,本研究根据GenBank已登录的PEDV膜蛋白M基因和PRV gE基因保守区域序列设计了2对特异性引物对,以PRV和PEDV混合总RNA为反转录模板,初步建立了PRV和PEDV的二重RT-PCR检测方法,并进行了特异性、敏感性、重复性验证和临床应用检测。结果表明该方法对2种病毒的检测灵敏度最低极限均为10 TCID_(50)/mL病毒含量,重复性好,特异性强,可特异性地扩增PEDV和PRV细胞培养物,但对其他7种病原对照扩增不出任何条带,对26份临床疑似PEDV和PRV感染样品检测结果与测序鉴定结果完全一致。本研究成功建立了PRV和PEDV的二重RT-PCR检测方法,为临床上猪流行性腹泻和猪伪狂犬病的快速鉴别检测诊断提供了方法。(本文来源于《中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会论文集》期刊2016-10-19)

孙燕,张香玲,陈军,刘鹏,马超[9](2016)在《无血清培养基培养Vero细胞制备狂犬病病毒工艺的建立》一文中研究指出目的建立无血清培养基(virus production-serum-free medium,VP-SFM)培养Vero细胞制备狂犬病病毒CTN-1V株的工艺。方法分别采用VP-SFM和含5%牛血清DMEM于方瓶中培养Vero细胞制备狂犬病病毒CTN-1V株,比较无血清培养基培养不同代次Vero细胞间及无血清与含血清培养基培养Vero细胞间制备的狂犬病病毒滴度及效力。将2 g/L微载体cytodex-1加至250 ml spinner flask中,加入Vero细胞,37℃培养3 d,按MOI=0.02接种狂犬病病毒CTN-1V株,检测病毒收获液的病毒滴度及效力,每天显微镜下观察细胞生长情况,计算细胞比生长速率。结果无血清培养基培养不同代次Vero细胞制备狂犬病病毒的滴度和效力差异无统计学意义(P>0.05);无血清和含血清培养基培养Vero细胞制备狂犬病病毒的滴度差异无统计学意义(P>0.05),但无血清培养基培养Vero细胞制备狂犬病病毒效力明显高于含血清的培养基(P<0.05)。搅拌瓶微载体系统培养Vero细胞制备狂犬病病毒,细胞贴壁均匀,生长良好,收获病毒液的平均病毒滴度为6.50 lg FFU/ml,平均病毒效力为6.77 IU/ml。结论初步建立了微载体系统无血清培养Vero细胞制备狂犬病病毒的工艺,为无血清规模化制备狂犬病疫苗奠定了基础。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2016年10期)

董慧君,鲁菲,张哲,曾宪卓,郭明辉[10](2016)在《无血清培养基分离肿瘤干细胞的研究进展》一文中研究指出肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)被认为是肿瘤形成、生长、转移以及复发的根本原因。CSCs的分离、鉴定为CSCs的研究及靶向CSCs疗法的开发奠定了基础。目前,无血清培养法已经是分离培养CSCs的常用方法。本文对无血清培养基(serum free medium,SFM)分离CSCs的研究进展作一综述。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2016年07期)

低血清培养基论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

优化适合重组CHO细胞生长及表达人血清白蛋白与白介素2(HSA/IL2)的低成本无血清悬浮培养基。以无血清悬浮培养基M1为基础,考察了3种不同质量浓度(1.0、2.5、5.0、10.0 g/L)的蛋白水解物(酵母提取物(YE)、大豆蛋白胨(Soy)及胰蛋白胨(Tyr))对CHO细胞生长、细胞周期、细胞凋亡及HSA/IL2融合蛋白表达的影响。5 g/L的YE促进细胞生长,提高HSA/IL2表达量的效果最佳。流加培养过程中,在含5.0 g/L YE的培养基中CHO细胞密度可达9.95×10~6cells/mL,HSA/IL2表达量提高至104.06 mg/L,分别是对照组的1.42倍和1.51倍。细胞对数生长期时,YE可以提高细胞周期进展而利于细胞生长;细胞表达期时,YE可以提高细胞G1期比例,延长细胞表达期时间而利于HSA/IL2表达。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

低血清培养基论文参考文献

[1].王家敏,马桂兰,冯玉萍,马伟,马祺.昆虫细胞无血清培养基的研究[J].甘肃畜牧兽医.2019

[2].缪亚娜,熊文典,万爱妮,张晶晶,蔡燕飞.表达HSA/IL2的重组CHO细胞的无血清培养基优化研究[J].食品与生物技术学报.2019

[3].韩颢,白虹.无血清培养基对深低温冻存复苏后的间充质干细胞免疫功能的研究[J].天津医科大学学报.2019

[4].孙杰.应用于间充质干细胞体外扩增的无血清培养基的研究[D].华东理工大学.2019

[5].张松,乔自林,王家敏.无血清培养基的研究进展[J].江西畜牧兽医杂志.2018

[6].蒋飞黔.Plackett-Burman和响应面法优化CHO细胞无血清培养基中关键营养成分[J].化工管理.2017

[7].孙若思.CHO细胞无血清培养基的筛选与优化[D].吉林大学.2017

[8].武发菊,尚勇良,董文教,李菁,陶世宇.BHK-21细胞无血清培养基添加因子的筛选[C].中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会论文集.2016

[9].孙燕,张香玲,陈军,刘鹏,马超.无血清培养基培养Vero细胞制备狂犬病病毒工艺的建立[J].中国生物制品学杂志.2016

[10].董慧君,鲁菲,张哲,曾宪卓,郭明辉.无血清培养基分离肿瘤干细胞的研究进展[J].中国生物制品学杂志.2016

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