一、SPF及清洁级种兔的培育（论文文献综述）
曹永慧[1]（2016）在《不同等级环境中肉兔骨骼肌性状与MyoG基因表达量及其DNA甲基化分析》文中认为随着养兔业生产水平的不断提高和市场消费需求的改变,兔的肌肉性状逐渐成为将来育种工作中的热点。肌肉性状的形成受到遗传、营养水平和生存环境等因素的共同影响,在表观遗传水平上研究环境对肌肉生长性状的分子调控机制,对改善动物肉品质和满足人们对肉质安全性的需求具有积极的意义。在Myo D基因家族中,Myo G基因是唯一的在所有骨骼肌细胞系中均可表达的基因,在骨骼肌分化过程中Myo G基因是起关键作用的因子,此基因通过调节成肌细胞的融合和肌纤维的形成在肌肉分化的过程中发挥关键作用。因此本实验旨在利用Myo G基因作为本研究的表观遗传分子的候选基因,利用BSP和Q-PCR作为主要的分子实验方法选取青岛康大兔业发展有限公司连续培育六年的84日龄肉兔为试验群体,其中普通环境新西兰兔和SPF环境新西兰兔6只,作为试验材料来研究不同等级环境对肉兔生产性能的影响及其Myo G基因甲基化频率和表达量与屠宰性状的相关性分析。主要的实验结果如下:（1）对两种不同等级环境新西兰兔的屠宰生产性状分析,结果显示SPF环境新西兰兔宰前活重、全净膛重、后腿重重量显着高于普通环境中新西兰兔（P<0.05）;SPF级兔的主要器官系数与普通级兔的主要器官系数相比,虽然心和肺差异不明显（P>0.05）,但其余的几个器官SPF级均显着低于普通级新西兰兔（P<0.05）。（2）对两种不同等级环境的新西兰兔的背最长肌进行切片实验,分析两种环境中新西兰兔的肌纤维性状的差异,结果显示SPF级新西兰兔的肌纤维直径显着小于普通环境（P<0.05）,密度显着大于普通环境（P<0.05）。（3）对两种不同等级环境的新西兰兔的后腿、背最长肌进行荧光定量分析,结果显示SPF环境新西兰肉兔的后腿Myo G基因表达量显着高于普通环境的后腿的表达量（P<0.05）,SPF环境新西兰肉兔背腰Myo G基因表达量显着低于普通环境（P<0.05）,而且还发现在两种环境中都有后腿表达量>背腰的表达量的规律。（4）对两种环境中的新西兰兔的后腿和背最长肌分别进行Myo G基因启动子区域即转录起始位点上游595bp至下游500bp左右的区域的甲基化分析,整体上发现转录起始位点上游-80bp至下游+506bp区域处于高甲基化状态（>60%）;启动子区-331bp至-61bp区域处于低甲基化状态（<40%）;Myo G基因启动子区域-593bp至-346bp区域处于中度甲基化状态（40%-60%）。而且发现两种环境中的新西兰兔后腿在Myo G基因启动子区域-80bp至+328bp的甲基化频率存在明显的差异,即在Myo G基因启动子-80bp至+328bp区域,SPF级环境肉兔后腿的甲基化率显着小于普通级环境兔子后腿甲基化率（P<0.05）;两种环境中的新西兰兔背腰在Myo G基因启动子区域-80bp至+506bp的甲基化频率存在明显的差异,即在Myo G基因启动子-80bp至+506bp区域,SPF级环境肉兔背腰的甲基化率显着大于普通级环境兔子背腰甲基化率（P<0.05）。（5）通过对Myo G基因的启动子区域的转录因子及其相关的结合位点预测分析再通过相关研究分析,推测AP-2、NF1F、E2F等对甲基化敏感的转录因子能在Moy G基因甲基化与其表达的关系上中起着不可忽视的影响作用,SP1、CTCF、YY1F等转录因子属于DNA甲基化非依赖性结合因子可能在Moy G基因甲基化与其表达的关系上作用不是很大。以上结果可推测,在一定程度上环境可通过DNA甲基化的表观遗传修饰的分子调控机制来影响肉兔的生产性状,并可推测Myo G基因的甲基化多态性可能作为未来的分子育种的分子标记。
李增强,孙淑华,孟金萍,王艳蓉,杨旭,张琨,刘云波[2]（2009）在《无菌兔、SPF兔和普通兔脏器系数的比较》文中研究说明目的对普通级新西兰兔进行剖宫产,获得无菌兔,比较无菌兔、SPF兔和普通级兔的脏器系数。方法采取剖宫产手术获得无菌兔,在无菌隔离器内人工哺乳饲养。用电子天平和刻度尺测量无菌兔、SPF兔和普通兔心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、脑等脏器的脏器重量和长度,计算脏器系数。结果经检测无菌兔符合国家标准;无菌级、SPF级和普通级新西兰兔在左颌下腺、右颌下腺、心脏、肺、胆囊、脾脏、左肾上腺、右肾上腺、子宫+卵巢、左睾丸、胃长、蚓突长度、盲肠长度、盲肠总重、盲肠干重、胃总重、胃干重等17项指标差异显着（P<0.05）;脑、肝脏、左肾、右肾、胰脏、右睾丸、胃宽、小肠长度、直肠长度、大肠长度等10项指标差异不显着（P>0.05）。结论不同等级微生物环境对新西兰兔脏器系数有显着影响。
李增强,孙淑华,孟金萍,王艳蓉,杨旭,张琨,刘云波[3]（2008）在《SPF级与普通级新西兰兔血液学参数的比较》文中研究表明目的对普通级新西兰兔进行剖宫产,获得SPF兔,比较SPF兔和普通级兔血液学参数。方法采取剖宫产手术培育成无菌兔,接种正常寄生菌使之SPF化。耳缘静脉采血,自动生化分析仪测定SPF兔、普通级兔血液学参数。结果经检测SPF兔符合国家SPF兔标准;SPF兔和普通级新西兰兔白细胞数、血红蛋白、红细胞容积、中性粒细胞百分比、嗜酸性粒细胞百分比、嗜碱性粒细胞百分比、中性粒细胞数、单核细胞数、嗜酸性粒细胞数、嗜碱性粒细胞数、总蛋白、球蛋白、白蛋白/球蛋白、谷酰转肽酶、葡萄糖、钙、高密度脂蛋白胆固醇等参数差异极显着（P<0.01）;血小板数、淋巴细胞百分比、肌酐差异显着（P<0.05）;红细胞数、平均红细胞体积、平均血红蛋白含量、平均血红蛋白浓度、红细胞体积分布宽度、平均血小板体积、单核细胞百分比、淋巴细胞数、白蛋白、丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、总胆红素、碱性磷酸酶、尿素氮、尿酸、磷、总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、磷酸肌酸激酶、乳酸脱氢酶差异不显着（P>0.05）。结论不同等级微生物环境对新西兰兔血液学指标有显着影响。
涂新明,寿克让[4]（2001）在《SPF及清洁级种兔的培育》文中研究说明目的 建立SPF级和清洁级兔的种群和生产基地 ,建立在清洁级环境中饲养、繁殖清洁级兔的技术 ,提高实验动物用兔的质量。方法 利用子宫摘除术 ,在无菌隔离器中剥离子宫取仔 ,用人工哺乳方法将仔兔培育成无菌兔 ,再将双岐杆菌等 5种微生物接种到无菌兔体内 ,使其成为无特定病原体 （SPF）兔 ,并进一步在清洁级环境中培育成清洁级兔。结果 共做 10批 ,剖孕兔 2 0只 ,每批得仔兔 10～ 15只 ,人工哺乳成活率为 7 1%～ 82 %。共育成 5 2只 ,并已开始繁殖。人工培育出的SPF兔和清洁级兔 ,经国家动物标准检测室 （药品生物制品监定所 ）检测均合乎相应级别的国家标准。结论 人工哺乳培育SPF兔并转化成清洁级兔的技术已经成熟 ,具有可重复性和可操作性
林丹红[5]（1998）在《试论科研课题的申报与中标——兼谈我院的现状与特点》文中认为可申报的课题类别１．１课题来源：申报中医药课题可以从几个方面进行。①行政主管部门的指令性课题，是卫生部、国家中医药管理局或省科委、卫生厅等行政机构根据卫生事业发展的规划要求下达的研究任务。如：“国家八·五攻关课题”、“福建省科技重点发展项目”等。②基...
二、SPF及清洁级种兔的培育（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、SPF及清洁级种兔的培育（论文提纲范文）
（1）不同等级环境中肉兔骨骼肌性状与MyoG基因表达量及其DNA甲基化分析（论文提纲范文）
| 符号说明 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 1.1 肌肉的发育与品质性能的研究 |
| 1.1.1 肌肉的发育 |
| 1.1.2 肌纤维与肌肉品质性能的关系 |
| 1.1.3 骨骼肌卫星细胞与肌肉品质的关系 |
| 1.2 与肌肉生长性能相关的功能基因（MyoG) |
| 1.2.1 MyoG基因的结构与功能特点 |
| 1.2.2 MyoG基因对肌肉性状作用的研究进展 |
| 1.2.3 MyoG基因的DNA甲基化研究 |
| 1.3 DNA甲基化 |
| 1.3.1 DNA甲基化的分子调控机制 |
| 1.3.2 影响DNA甲基化的因素 |
| 1.3.2.1 环境因素 |
| 1.3.2.2 营养物质 |
| 1.3.2.3 化学因子 |
| 1.3.2.4 物理因子 |
| 1.3.2.5 温度 |
| 1.3.2.6 DNMT |
| 1.3.2.7 RNAi |
| 1.3.2.8 组蛋白的表观修饰 |
| 1.3.3 DNA甲基化在动植物生产中的应用 |
| 1.3.3.1 DNA甲基化在动植物杂种优势中的应用 |
| 1.3.3.2 DNA甲基化在动植物分子标记中的应用 |
| 1.4 不同等级清洁环境中动物的研究 |
| 1.4.1 不同等级清洁环境中鼠的研究 |
| 1.4.2 不同等级清洁环境中家兔的研究 |
| 1.4.3 不同等级清洁环境中鸡的研究 |
| 1.5 本研究的目的和意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 试验动物 |
| 2.1.1 饲料及配方 |
| 2.1.2 实验动物的饲养管理 |
| 2.2 样品采集 |
| 2.3 主要试剂与仪器 |
| 2.3.1 主要试剂配置 |
| 2.3.2 主要的试剂 |
| 2.3.3 主要的实验仪器 |
| 2.4 实验方法 |
| 2.4.1 新西兰肉兔肌肉组织DNA提取 |
| 2.4.2 甲基化克隆测序 |
| 2.4.3 新西兰肉兔肌肉组织RNA提取 |
| 2.4.4 背腰肉切片 |
| 2.5 统计分析 |
| 2.6 关键的应用软件 |
| 3 实验结果与分析 |
| 3.1 两种不同环境新西兰肉兔的屠宰生产性状分析 |
| 3.2 两种不同环境背腰肌肉组织切片 |
| 3.3 两种不同环境MyoG定量结果及其分析 |
| 3.3.1 RNA提取结果 |
| 3.3.2 MyoG基因定量引物检测 |
| 3.3.3 后腿和背腰MyoG定量结果 |
| 3.4 不同环境MyoG甲基化水平分析 |
| 3.4.1 MyoG基因BSP引物设计 |
| 3.4.2 不同环境肉兔背腰MyoG基因甲基化结果 |
| 3.4.3 不同环境肉兔后退MyoG基因甲基化结果 |
| 3.5 MyoG启动子区的转录因子分析 |
| 4 讨论 |
| 4.1 两种不同等级环境肉兔生产性状的讨论 |
| 4.2 两种不同等级环境肉兔肌纤维性状的讨论 |
| 4.3 两种不同等级环境肉兔MyoG基因在背腰最长肌和后腿肌中基因表达量的讨论 |
| 4.4 两种不同等级环境肉兔MyoG基因在背腰最长肌和后腿肌中的甲基化状态的讨论 |
| 4.5 对MyoG启动子区的转录因子的讨论 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（2）无菌兔、SPF兔和普通兔脏器系数的比较（论文提纲范文）
| 1 材料和方法 |
| 1.1 新西兰兔 |
| 1.2 饲料及配方 |
| 1.3 无菌检测 |
| 1.4 样品采集 |
| 1.5 统计学处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 无菌检测结果 |
| 2.2 脏器系数统计结果 |
| 3 讨论 |
（3）SPF级与普通级新西兰兔血液学参数的比较（论文提纲范文）
| 1 材料和方法 |
| 1.1 新西兰兔 |
| 1.2 SPF兔微生物检测 |
| 1.3 样品采集 |
| 1.4 仪器及测定方法 |
| 1.5 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 SPF兔微生物检测结果 |
| 2.2 血常规测定结果 |
| 2.3 血生化测定结果 |
| 3 讨论 |
| 3.1 SPF级和普通级新西兰兔血常规差异分析 |
| 3.2 SPF级和普通级新西兰兔血生化差异分析 |
（4）SPF及清洁级种兔的培育（论文提纲范文）
| 1 材料和方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 3.1 人工乳成分 |
| 3.2 人工乳消毒方法 |
| 3.3 人工哺乳期间, 不同时期, 人工乳蛋白含量或人工乳奶粉含量的变化 |
| 3.4 人工哺乳方法 |
| 3.5 人工哺乳成活率 |
| 3.6 断奶 |
| 3.7 温度 |
四、SPF及清洁级种兔的培育（论文参考文献）
- [1]不同等级环境中肉兔骨骼肌性状与MyoG基因表达量及其DNA甲基化分析[D]. 曹永慧. 山东农业大学, 2016(03)
- [2]无菌兔、SPF兔和普通兔脏器系数的比较[J]. 李增强,孙淑华,孟金萍,王艳蓉,杨旭,张琨,刘云波. 中国比较医学杂志, 2009(01)
- [3]SPF级与普通级新西兰兔血液学参数的比较[J]. 李增强,孙淑华,孟金萍,王艳蓉,杨旭,张琨,刘云波. 中国比较医学杂志, 2008(04)
- [4]SPF及清洁级种兔的培育[J]. 涂新明,寿克让. 中国实验动物学杂志, 2001(04)
- [5]试论科研课题的申报与中标——兼谈我院的现状与特点[J]. 林丹红. 福建中医学院学报, 1998(04)