导读:本文包含了免疫微球论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:造血器官坏死病病毒,基质蛋白M,微球疫苗,免疫原性
免疫微球论文文献综述
潘璇,田晟源,田洋,李全振,赵宝华[1]（2019）在《虹鳟鱼IHNV-M蛋白微球疫苗的制备及其免疫效果》一文中研究指出使用本实验室保存的重组菌株BL21(DE3)(pET-22b-m)经过IPTG诱导,并且经SDS-PAGE验证,在21.6 Ku处有目的蛋白表达;运用乳化-复乳化的方法,制备IHNV-M蛋白微球疫苗。运用灌胃的方法,将制备好的IHNV-M蛋白微球疫苗免疫虹鳟鱼后,经ELISA测定血清中抗体效价。普通虹鳟鱼组和美国金鳟鱼血清中抗体效价分别为1∶128 000和1∶25 600。(本文来源于《河北渔业》期刊2019年11期）
邓翠芳,林天玉,林启钱,乔佳鑫,华宝玉[2]（2019）在《副猪嗜血杆菌微球疫苗制备及免疫效果研究》一文中研究指出副猪嗜血杆菌感染是猪场主要细菌性疾病之一,而疫苗免疫为控制副猪嗜血杆菌感染的重要手段。本研究以壳聚糖和海藻酸钠为微球壁材,以副猪嗜血杆菌LY02株(血清5型)裂解蛋白为抗原,通过乳化交联法制备了副猪嗜血杆菌微球疫苗。微球平均粒径为2.58μM,微球的平均包封率为68.3%,平均载药率为3.56%。体外释放试验结果显示,微球具有良好的缓释性能,抗原释放时间超过30 d。小鼠免疫试验显示该微球疫苗对血清5型副猪嗜血杆菌的攻毒保护率达90%。该微球疫苗的研究为副猪嗜血杆菌病疫苗开发提供了一个新的思路。(本文来源于《上海畜牧兽医通讯》期刊2019年05期）
王鼎文,姚尧,张爱琳,张华[3]（2019）在《免疫磁性微球的制备及形态表征》一文中研究指出本研究主要以Fe~(2+),Fe~(3+)为制备原料,在强碱性溶液条件下采用化学共沉淀法制备Fe_3O_4纳米磁性微球,运用X射线粉末衍射法(X-ray diffraction,XRD)分析所制备Fe_3O_4磁性微球的纯度及形态结构,并对纳米磁性四氧化叁铁微球表面进行氨基化修饰和表面包埋抗体蛋白,以此来制备出具有免疫磁性的纳米微球。结果表明:通过称量氨基化前纳米磁性微球的重量和氨基化后纳米磁性微球的重量,可以得出制备出的Fe_3O_4磁性微球浓度为9.15 mg/mL,氨基化处理后的磁性微球浓度为12.85 mg/mL;在对其X射线粉末衍射法分析得出,所制备的免疫磁性微球具有超顺磁性且按照Fe~(2+)和Fe~(3+)的摩尔比值是1.75:2,所制备的免疫磁性微球的纯度较高。(本文来源于《智慧健康》期刊2019年22期）
李洪贞,夏艳,单佳妮,季杰[4]（2019）在《艾塞那肽微球在食蟹猴体内的免疫原性及药代动力学比较研究》一文中研究指出目的:考察艾塞那肽微球单次皮下注射给予食蟹猴的免疫原性及药代动力学特征,并与市售药Byduren比较。方法:选用16只食蟹猴,雌雄各半,分性别随机分成受试物组和市售品组(n=8),分别单次皮下注射给予受试物/市售品0.44mg·kg-1。于给药前、给药后2、4、6、8、10w采集全血,分离血浆,采用ELISA法分析血浆中抗艾塞那肽抗体产生情况;于给药前(0h)、给药后0.5、1、3、6、12h,1、2、3、5、7、10、14、17、21、24、28、31、35、38、42、45、49、52、56、63、70d采集全血,分离血浆,采用ELISA法分析血浆中艾塞那肽浓度,WinnonLin计算各药代参数。结果:给药后2w受试物组1只动物产生抗药抗体,给药后4w受试物、市售品分别有4只、3只动物抗药抗体产生,至给药后70d,两组各有7只动物产生抗药抗体,且抗体的滴度影响血浆艾塞那肽浓度,滴度大于1:125的动物血浆药物浓度及系统暴露量明显升高。受试物、市售品皮下注射给予食蟹猴后,血药浓度随时间的变化趋势基本一致,给药后的前6h有一个初始释放,此后药物低浓度释放,药物的主要释放在给药后约10d开始,28d左右达峰,至给药后70d两组动物艾塞那肽仍持续释放。结论:单次皮下注射给予食蟹猴后,艾塞那肽微球在两组动物体内具有相似的免疫原性和相似的药代特征。(本文来源于《四川生理科学杂志》期刊2019年03期）
唐毓,苏瑞红,侯美佳,孙思萌,冯启峥[5]（2019）在《以免疫纳米微球为凝集原的犬细小病毒2型抗体凝集检测方法的建立》一文中研究指出为建立以红色聚苯乙烯纳米微球为载体的犬细小病毒(CPV)抗体检测的间接凝集方法,本研究表达纯化了CPV-2 VP2截短的重组蛋白rsVP2,并以rsVP2为致敏原与纳米微球偶联制备了免疫彩色纳米微球;通过对反应条件的优化,建立了一种快速检测CPV-2抗体的间接凝集方法。特异性试验结果显示,致敏微球仅与CPV-2阳性血清发生凝集反应,不与犬瘟热病毒、狂犬病病毒和犬腺病毒的阳性血清发生凝聚反应,特异性强;该凝集方法检测血清中和抗体的最低效价为1∶256;同一批次制备的3份致敏微球、3个不同批次制备的致敏微球以及4℃保存90 d的致敏微球与CPV-2阳性血清的凝集反应特异性一致,凝集程度无明显差异,重复性稳定性均较好。该间接凝集检测方法对40份血清样品的检测结果与Immuno Comb~? Canine VacciCheck试剂盒(Dot-ELISA)检测结果的阳性符合率为97%。本研究建立的间接凝集方法为幼犬CPV-2母源抗体或免疫犬CPV-2抗体检测提供了一种快速、简便、准确、经济的方法。(本文来源于《中国预防兽医学报》期刊2019年06期）
苏瑞红,冯启峥,唐毓,侯美佳,孙思萌[6]（2019）在《基于免疫彩色纳米微球的犬瘟热病毒抗体检测凝集试验》一文中研究指出为建立以红色聚苯乙烯纳米微球为载体,快速检测幼犬犬瘟热病毒(CDV)母源抗体或免疫犬抗体水平的间接凝集试验,本研究表达纯化了CDV H截短的重组蛋白rsH2,并以rsH为致敏原与纳米微球偶联制备了免疫彩色纳米微球;通过间接凝集反应条件的优化,特异性、敏感性、稳定性试验和临床样品的检测,建立了一种快速检测CDV抗体的间接凝集试验。特异性结果显示,致敏微球仅与CDV阳性血清发生凝集反应,不与狂犬病病毒、犬腺病毒和犬细小病毒的阳性血清发生凝集反应,特异性强;凝集试验可检测血清中和抗体的最低效价为1∶35;不同批次制备的致敏微球和4℃保存90 d的致敏微球的凝集反应特异性一致,凝集程度无明显差异,重复性稳定性好;该凝集试验对45份血清样品的检测结果与CDV抗体检测试剂盒检测结果的阳性符合率为100%。上述结果表明,本研究建立的检测CDV抗体的间接凝集试验具有良好的特异性、敏感性和稳定性,为CDV抗体检测提供了一种快速、简便、准确、经济的检测方法。(本文来源于《中国兽医科学》期刊2019年08期）
郭亮[7]（2019）在《磁性荧光微球制备及其在荧光免疫层析检测中的应用》一文中研究指出双功能磁性荧光微球是指具有超顺磁性及荧光两重特性的聚合物微球。表面修饰生物识别元件的磁性荧光微球可与目标物特异性结合,使目标物具有荧光及磁信号,已被较多地应用于生物组织双信号成像。在分析检测领域,磁性荧光微球可同时应用于磁富集净化和制备荧光(磁)探针,实现复杂样品中痕量待测物的检测。循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)是癌症(转移)早期诊断及预后的重要生物指标。由于癌症转移早期患者血液中CTC含量极低,且复杂的血液成分会干扰CTC的分离检测,临床检测中常采用磁性微球分离富集CTCs。本研究建立了在氨基化磁性硅球表面一步直接自组装羧基化量子点(quantum dots,QDs)制备双功能磁性荧光微球(magnetic fluorescent beads,MFBs)的新方法。该方法可简便、快速地制备磁性荧光微球。通过优化自组装体系中乙醇含量、溶液pH值及量子点用量等因素调控纳米粒子间的自组装效率,本研究制备得到粒径约180 nm,具有较好荧光强度及分散性的水溶性双功能磁性荧光微球。应用链霉亲和素修饰的磁性荧光微球及生物素化EpCAM抗体,本研究成功实现了人乳腺癌细胞MCF-7的磁捕获及荧光检测。免疫层析试纸条因具有操作简便、检测快速、便于携带且价格便宜等优点,作为现场即时检测技术被广泛应用于环境监控、食品分析及体外诊断等领域。但是复杂样品中的痕量待测物常因基质干扰效应和待测物浓度偏低而无法应用免疫层析试纸条检测。采用免疫磁分离技术特异性富集净化待测物可简单、方便地解决上述问题。为实现复杂样品中痕量待测物的现场即时检测,本研究以量子点及四氧化叁铁纳米粒子(IONPs)为原料制备得到兼具高荧光强度和磁响应性的新型双功能核壳式MFBs。以抗体功能化MFB为免疫探针,分别建立了集磁富集净化和荧光免疫层析检测为一体的竞争及夹心荧光免疫层析检测新方法,并将其成功应用于老抽酱油中小分子待测物黄曲霉毒素B_1(AFB_1)及血清中大分子待测物人类免疫缺陷病毒p24蛋白(HIV p24)的检测。本研究采用简便的一步超声乳化法将油胺修饰的CdSe/ZnS量子点及油酸修饰的IONPs包裹于聚甲基丙烯酸甲酯和马来酸酐十八碳烯混合物中制备得到具有核壳式结构的MFBs。其中,QDs和IONPs主要分布于聚合物微球的外壳,从而提高了微球的荧光强度和磁响应性。通过采用不同的超声功率(104.5 W和85.5 W)本研究制备得到两种不同粒径(180 nm和250 nm)的核壳式MFBs并分别用于竞争和夹心荧光免疫层析检测。两种核壳式MFBs的磁含量均为11.8%,磁饱和强度分别为18.2和14.1 emu/g,是OA-IONP磁饱和强度的45.4%和35.3%,具有良好的磁响应性。两种核壳式MFBs的荧光强度分别是QDs的226倍和367倍,可有效提高试纸条检测灵敏度。将不同浓度(0-40 mg/mL)的核壳式MFBs喷涂至试纸条上,考察MFBs高浓度聚集时IONPs的荧光内滤效应对试纸条荧光强度的影响。结果表明,提高MFBs浓度可使试纸条荧光强度持续增至近60000a.u.,不会因荧光内滤效应导致试纸条荧光强度下降。因此,该核壳式MFBs可作为荧光免疫层析检测的探针,且可通过提高MFB探针用量提高待测物磁捕获效率及荧光信号,实现更高灵敏度及更宽线性范围的定量检测。以抗AFB_1抗体标记的180 nm核壳式MFBs为探针,本研究建立了老抽酱油中黄曲霉毒素B_1的荧光竞争免疫层析(MFB-cICA)检测新方法。该方法中MFBs作为免疫磁吸附剂可消除老抽酱油的基质干扰效应,同时富集浓缩酱油中的AFB_1。在最佳条件下,此方法检测酱油提取液中AFB_1的线性检测范围为5–150 pg/mL,半抑制浓度为27.3±3 pg/mL(n=3),最低检测限为2.84 pg/mL;检测酱油中AFB_1的最低检测限为48.69 pg/mL。特异性实验结果显示该方法与AFG_1有一定程度的交叉反应,与黄曲霉毒素B_2、伏马菌素B_1、赭曲霉毒素A、桔霉素、玉米赤霉烯酮及脱氧雪腐镰刀菌烯醇等真菌毒素无交叉反应。老抽酱油提取液加标实验结果显示,该方法加标回收率为89.4-103.4,批内变异系数小于5.10%,批间变异系数小于7.30%,具有良好的准确度及精密度。进一步将MFB-cICA检测实际样品结果与超高效液相色谱–荧光检测法检测结果进行比对,结果表明两者具有良好的一致性。以抗HIV p24抗体标记的250 nm核壳式MFBs为探针,本研究建立了人血清中HIV p24蛋白的荧光夹心免疫层析检测法(MFB-sICA)。利用MFBs从700μL加标PBS缓冲液中浓缩富集HIV p24,当富集因子为10时可将MFB-sICA检测p24蛋白的灵敏度提高8.16倍。在此基础上进一步建立定量检测人血清中p24抗原的免疫层析新方法,定量检测线性范围为0.244–1000 ng/mL,最低检测灵敏度为0.16 ng/mL。血清加标HIV p24测试结果表明,加标回收率为87.53%-111.57%,批内变异系数小于3.76%,批间变异系数小于14.94%,表明该方法具有良好的准确度及精密度。特异性实验结果表明,该方法与C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、前列腺特异抗原(PSA)、癌胚抗原(CEA)以及人甲胎蛋白(AFP)等血清中常见疾病标记物无任何交叉反应,表明该方法具有良好的特异性。(本文来源于《南昌大学》期刊2019-05-17）
黄焕宜,肖树荣,谢淑贤,何国华,刘玉玲[8]（2019）在《应用免疫磁性微球快速鉴定金黄色葡萄球菌》一文中研究指出目的探讨建立免疫磁性微球快速检测金黄色葡萄球菌(金葡菌)的方法。方法使用共沉淀法制备Fe3O4纳米磁性微球,再偶联鼠抗金萄菌抗体制备免疫磁性微球。观察免疫磁性微球在不同条件下对金葡菌的捕获效能。结果免疫磁性微球对金葡菌的捕获效能高于普通磁性微球(P <0.05);免疫磁性微球和金葡菌作用5～15 min时,对金葡菌的捕获效能从42%增加至69%;30 min时捕获效能达到峰值(83%),不同作用时间内免疫磁性微球对金葡菌的捕获效能差异有统计学意义(P <0.05);金葡菌菌悬液浓度为1×10~3～1×10~6cfu/ml时,免疫磁性微球的捕获效能随浓度增高而降低(P <0.05);免疫磁性微球对金葡菌的捕获效能(53%～63%)显着高于大肠杆菌(11%～18%),差异有统计学意义(P <0.05)。结论应用免疫磁性微球检测金葡菌,捕获效能高,特异性强。(本文来源于《中国国境卫生检疫杂志》期刊2019年02期）
赵云虎[9]（2019）在《抗淋球菌CppB单克隆抗体的制备及荧光微球免疫层析检测方法的建立》一文中研究指出目的由于淋病奈瑟菌的高变异性和高感染率,淋病已经成为全球性公共卫生问题之一,简便快速诊断是控制其广泛转播的重要手段。本研究的主要目的是制备抗淋病奈瑟菌隐蔽性质粒蛋白B(CppB蛋白)的单克隆抗体,并建立一种基于荧光微球的免疫层析试纸条快速检测淋球菌感染。方法筛选并收集广东省皮肤病医院2017年微生物室分离的115株淋病奈瑟菌和93株非淋球菌,共16种常见致病菌,并经qRT-PCR验证淋球菌cppB基因的广谱性和特异性。以酶切酶连的方式构建重组质粒pGEX-6P-1-cppB,并通过PCR和D NA测序验证重组质粒。以大肠杆菌原核表达系统表达GST-CppB融合蛋白,使用GST-SefinoseTM试剂盒获得纯化的GST-CppB融合蛋白,并通过SDS-PAGE和We stem Blot验证融合蛋白。将纯化的GST-CppB融合蛋白免疫雌性BALb/c小鼠,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,并通过间接ELISA测定单克隆抗体的亚型和效价,通过Western Blot鉴定单克隆抗体的反应性和特异性。以单克隆抗体为检测抗体,喷涂多克隆抗体(兔源)为检测线(T线),喷涂羊抗鼠IgG为质控线(C线),建立基于荧光微球为信号的免疫层析试纸条,并验证试纸条的灵敏度、特异性和稳定性。结果 qRT-PCR检测淋病奈瑟菌cppB基因的阳性率为96.52%(111/115),特异性为100%,证明cppB基于普遍存在于淋球菌中,而不存在于其他常见致病菌(0/93)。PCR扩增证明成功构建了重组质粒pGEX-6P-1-cppB,DNA测序后比对证明插入pGEX-6P-1质粒中的cppB基因与GeneBank公布的cppB基因序列(FMSZ01000040.1)完全一致。SDS-PAGE染色结果表明,经诱导后的重组宿主能够大量表达GST-CppB融合蛋白,Western Blot(以GST抗体为一抗)结果与SDS-PAGE的结果一致。纯化后的GST-CppB融合蛋白经染色后证明,已获得纯度较高的GST-CppB蛋白。通过杂交瘤技术获得4种单克隆细胞株,其亚型分别为2株IgG1(FH1,G3),1 株IgG2a(C11),1 株IgG2b(E1),所有单抗的效价均大于1:64000,其中MAb-E1的效价最高。Western Blot结果显示,MAb-F11对淋病奈瑟菌的反应性最好,阳性率可达87.83%(101/115),特异性为100%,与qRT-PCR验证cppB基因的结果就有一致性。另外,我们发现了 CppB的突变体,命名为CppB-2。与正常序列相比,CppB-2基因缺失54bp,位于429-482,导致CppB-2蛋白仅为21.93kd,略低于CppB(23.94kd)。荧光微球免疫层析试纸条检测CppB蛋白的灵敏度为20ng/ml,检测淋病奈瑟菌的灵敏度为1x105CFU/ml,且试纸条的阳性率为82.61%(95/115)。与Western Blot结果一致的是,常见的致病菌在免疫层析试纸条上均为阴性,表明试纸条也具有高特异性。结论CppB蛋白在淋病奈瑟菌中普遍存在,可作为区分淋球菌和其他常见致病菌的靶标,基于CppB蛋白的单克隆抗体制备的免疫层析试纸条,有望成为筛查淋病的重要工具,但敏感性尚待提高。(本文来源于《安徽医科大学》期刊2019-04-01）
李思慧,林伟强,魏赵延,吴凯[10]（2019）在《荧光微球免疫层析技术定量检测抗缪勒氏管激素方法的确定》一文中研究指出利用免疫层析技术与荧光微球标记技术相结合的方式,依据双抗体夹心原理,制备抗缪勒氏管激素免疫层析试纸条;并从灵敏度、特异性、精密度、稳定性等方面进行全面的方法学评价。利用免疫荧光层析法建立抗缪勒氏管激素(AMH)检测试剂盒,并对试剂盒的各项指标进行评价,建立一种能够定量检测血清抗缪勒氏管激素的荧光微球免疫层析方法,用于评估卵巢储备,并对试纸条进行性能评估。结果表明,试剂盒的线性范围为0.10～20 ng/mL,线性相关系数r≥0.990,检出限不高于0.10ng/mL,重复性检测结果的变异系数CV小于15%,批间差检测结果的变异系数CV小于20%,试剂盒特异性高,与FSH和LH无交叉反应,有效期大于12个月,且与罗氏AMH试剂盒的相关性良好,回归方程为Y=0.9957X+0.0019,R2=0.999 7。免疫荧光层析法能有效的检测血清中抗缪勒氏管激素的含量,该方法稳定性好,具有良好的应用前景。(本文来源于《生物化工》期刊2019年01期）
免疫微球论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
副猪嗜血杆菌感染是猪场主要细菌性疾病之一,而疫苗免疫为控制副猪嗜血杆菌感染的重要手段。本研究以壳聚糖和海藻酸钠为微球壁材,以副猪嗜血杆菌LY02株(血清5型)裂解蛋白为抗原,通过乳化交联法制备了副猪嗜血杆菌微球疫苗。微球平均粒径为2.58μM,微球的平均包封率为68.3%,平均载药率为3.56%。体外释放试验结果显示,微球具有良好的缓释性能,抗原释放时间超过30 d。小鼠免疫试验显示该微球疫苗对血清5型副猪嗜血杆菌的攻毒保护率达90%。该微球疫苗的研究为副猪嗜血杆菌病疫苗开发提供了一个新的思路。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
免疫微球论文参考文献
[1].潘璇,田晟源,田洋,李全振,赵宝华.虹鳟鱼IHNV-M蛋白微球疫苗的制备及其免疫效果[J].河北渔业.2019
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[5].唐毓,苏瑞红,侯美佳,孙思萌,冯启峥.以免疫纳米微球为凝集原的犬细小病毒2型抗体凝集检测方法的建立[J].中国预防兽医学报.2019
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[8].黄焕宜,肖树荣,谢淑贤,何国华,刘玉玲.应用免疫磁性微球快速鉴定金黄色葡萄球菌[J].中国国境卫生检疫杂志.2019
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