免疫磁珠富集论文-万宇平,吴小胜,贾芳芳,李静,王兆芹

免疫磁珠富集论文-万宇平,吴小胜,贾芳芳,李静,王兆芹

导读:本文包含了免疫磁珠富集论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:沙丁胺醇,单克隆抗体,免疫磁珠分离富集试剂盒

免疫磁珠富集论文文献综述

万宇平,吴小胜,贾芳芳,李静,王兆芹[1](2019)在《一种沙丁胺醇免疫磁珠分离富集试剂盒的研制》一文中研究指出通过沙丁胺醇与对氨基苯甲酸反应,制备出沙丁胺醇免疫磁珠分离富集试剂盒,试剂盒对样品中沙丁胺醇的捕获量为20 ng/mL,与沙丁胺醇结构或者功能相似的竞争药物:克仑特罗、莱克多巴胺、苯乙醇胺A、溴氯布特罗、溴布特罗、特布他林、羟甲基沙丁胺醇、西马特罗、妥布特罗、马喷特罗、赛布特罗、克仑潘特、奇帕特罗、喷布特罗、克仑丙罗、马布特罗、氯丙那林等17种药物进行特异性反应时,均无交叉反应。(本文来源于《安徽农业科学》期刊2019年03期)

刘玉梅,王兆芹,贾芳芳,万宇平,杜美红[2](2019)在《一种玉米赤霉烯酮免疫磁珠分离富集试剂盒的研制》一文中研究指出通过玉米赤霉烯酮与对苯二胺反应,制备出玉米赤霉烯酮免疫磁珠分离富集试剂盒,试剂盒对样品中玉米赤霉烯酮的捕获量为50ng/ml,与玉米赤霉烯酮结构或者功能相似的竞争药物:黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素M1、T-2毒素、赭曲霉毒素A、展青霉素等5种药物进行特异性反应时,均无交叉反应。(本文来源于《山东畜牧兽医》期刊2019年02期)

任慧子,陈健[3](2018)在《EPCAM联合CK8免疫磁珠富集恶性胸水腺癌细胞》一文中研究指出目的:研究上皮细胞粘附分子(EPCAM)联合细胞角蛋白8(CK8)免疫磁珠富集和鉴定恶性胸水肺腺癌细胞的方法。方法:用羧基磁珠制备EPCAM、CK8两种免疫磁珠,对30例晚期肺腺癌患者胸水中腺癌细胞进行富集,HE染色和免疫细胞化学法鉴定细胞。结果:两种磁珠联合检测胸水中肺腺癌细胞检出率达96%。结论:EPCAM联合CK8免疫磁珠可富集恶性胸水中腺癌细胞。(本文来源于《甘肃医药》期刊2018年09期)

张磊,黄慧玲,杨昂,张茜,郑春红[4](2018)在《免疫磁珠法阴性富集循环肿瘤细胞方法的建立》一文中研究指出循环肿瘤细胞(circulating tumor cell,CTC)检测对于肿瘤的早期发现、临床诊断、病情监测等具有重要意义,但CTC在肿瘤患者外周血中极为稀少,约为1~10个/m L,而正常成人外周血中血细胞数量为10~9个/mL,白细胞的数量是(4~10)×10~6个/mL[1-2]。CTC远低于血液中其他类型的细胞,数量的稀少使得血液CTC检测极具挑战性,加上CTC产生的复杂性、(本文来源于《检验医学》期刊2018年08期)

梁冰,纪雪,孙洋,周伟,孙诗雯[5](2018)在《基于免疫磁珠快速富集分离土壤中炭疽芽孢方法的建立》一文中研究指出目的建立基于免疫磁珠快速富集分离土壤中炭疽芽孢的方法。方法将炭疽芽孢杆菌疫苗株培养形成芽孢,灭活后免疫家兔,获得多克隆抗体,与磁珠偶联制备免疫磁珠,并检测其在纯炭疽芽孢稀释液中对炭疽芽孢富集分离的敏感性。通过对模拟土壤样品中炭疽芽孢抽提效果的比较,选择最优的芽孢抽提液及抽提条件。采用多重PCR法评价免疫磁珠对土壤中的炭疽芽孢在PLET平板培养基上富集分离的效果。结果 10 mg磁珠经活化后与500μL抗体偶联效果最佳,制备的免疫磁珠在纯炭疽芽孢稀释液中,富集分离的敏感性可达19 cfu/mL。以0.5%Triton X-100蔗糖PBS溶液作为芽孢抽提液,经1 000×g离心5 min后芽孢提取率最高。在模拟土壤样品中,检测敏感性可达100 cfu/g土壤,PLET平板培养基检测的阳性率达30%。结论本研究建立的免疫磁珠法简单实用,适用于土壤等各种类型环境样品中炭疽芽孢的检测。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2018年07期)

刘妍[6](2018)在《基于叁维大孔径反蛋白石结构光子晶体免疫磁珠富集、净化与HPLC-FLD检测OTA、AFB_1及ZEN的研究》一文中研究指出真菌毒素毒性强,是农产品中常见的污染物,对人类健康具有极大的危害。目前真菌毒素的检测方法有很多种,但存在成本高,灵敏度低,检测时间长,操作复杂,试剂用量大,样品前处理繁琐等缺点。因此,开发一种简单快速、低成本、高灵敏度,集富集、净化与检测一体的技术尤为重要。本文建立了一套基于叁维大孔径反蛋白石结构光子晶体免疫磁珠富集、净化与高效液相色谱荧光检测(HPLC-FLD)真菌毒素的方法。通过实验室搭建的微流控平台,采用自组装法及胶体晶体化液滴模板高温锻烧法最终制备得出叁维大孔径的磁性二氧化硅反蛋白石结构光子晶体微球(MSIPCMs)。对制备微球的实验条件进行了初步的探索,实验得出:磁性颗粒采用10-50 nm 2.5%Fe304分散液;Si02纳米粒子选择5 nm的超细Si02颗粒;优化确定了 PS浓度为10%,Si02浓度为 18%,Si02:PS(v/v)=1:5,Fe3O4:Si02(v/v)=1:4,经过金相显微镜、扫描电子显微镜观察表征,发现此条件下制备的微球效果最好。最终采用不同反射峰位置的聚苯乙烯(PS)纳米颗粒,制备得到不同孔径的磁性二氧化硅反蛋白石结构光子晶体微球。从表征结果得出:微球磁性良好,色泽鲜明,大小均一,边缘光滑,内部无较大缺陷,排列整齐,结构完整,并具有大范围有序的孔道结构。建立了基于叁维大孔径反蛋白石结构光子晶体免疫磁珠富集、净化与高效液相色谱荧光检测(HPLC-FLD)赭曲霉毒素A的方法。将制备得到的微球进行表面化学修饰连接功能性基团并偶联抗体,利用抗原抗体特异性反应富集、净化毒素,洗脱后采用HPLC-FLD检测。对几个关键条件进行优化,实验得出:最佳功能化基团为醛基;毒素与抗体结合时间仅需20min;洗脱剂为混合洗脱液(甲醇:乙腈(v/v)=1:1);采用OTA-Ab浓度为60μg/mL,毒素的最大富集量为200ng/mL,回收率均可达到80%以上,效果较好。叁种谷物加标回收率的试验,结果分别为:大米76.75%±3.53%~79.16%±1.30%,小麦 70.01%±5.05%~72.31%±3.39%,玉米 74.64%±3.97%~82.14%±3.53%。采用已建立的方法将其应用于AFB,、ZEN毒素富集、净化检测中,进一步优化了洗脱时间,结果显示:每次洗脱时间仅需20min,洗脱3次,共需60min。经优化得出:洗脱AFB1、ZEN均采用混合洗脱液(甲醇:乙腈(v/v)=1:1)效果最好。其中,AFB1抗体浓度确定为60μg/mL,毒素的最大富集量为200ng/mL;ZEN抗体浓度确定为12μg/mL,毒素的最大富集量为400ng/mL。在叁种谷物中AFB1的加标回收率结果分别为:大米76.12%± 1.67%~82.04%±4.46%,小麦70.23%±1.78%~73.76%±1.45%,玉米 70.37%±5.58%~74.17%± 2.23%。在叁种谷物中 ZEN 的加标回收率结果分别为:大米 72.57%±4.24~76.02%±5.37%,小麦 80.60± 1.32%~83.14%±7.09%,玉米 82.89%±1.79%~100.12%±5.58%。经验证此方法快速简便高效,准确度高,精密度好,稳定可行,适用于不同种类的真菌毒素的富集净化检测。(本文来源于《南京师范大学》期刊2018-04-10)

刘阳,刘文侠,孙力军,施琦,邱妹[7](2018)在《基于NHS基团修饰的副溶血性弧菌免疫磁珠制备及其富集性能评价》一文中研究指出[目的]制备NHS基团修饰的副溶血弧菌免疫磁珠并评价其富集性能。[方法]采用偶联率确定免疫磁珠最佳制备条件(磁珠粒径、偶联时间和抗体加入量),采用捕捉率确定免疫磁珠最佳富集条件(菌悬液p H、孵育时间和免疫磁珠加入量),并通过方法的特异性、灵敏度、精密度和稳定性评价免疫磁珠富集性能。[结果]0.1 m L N2型NHS磁珠可与0.2 m L副溶血弧菌抗血清偶联2 h制备IMB_(VP),加入到副溶血弧菌菌悬液(p H 7.0~7.4)中孵育2 h,IMB_(VP)最佳工作液体积为0.4 m L。该方法特异性好、灵敏度高(15 cfu/50 m L)、精密度高(批内变异系数和批间变异系数均在3%~6%)、稳定性好(准确度大于91%)。[结论]自制副溶血弧菌免疫磁珠富集性能好,方法工作效率高,成本低,为副溶血弧菌高效快速检测提供了可靠的富集手段。(本文来源于《安徽农业科学》期刊2018年06期)

李诗瑶,程慧,杨硕[8](2018)在《免疫磁珠富集在食品中黄曲霉毒素B_1的应用》一文中研究指出本文介绍了黄曲霉素、超顺磁性磁珠以及对食品中黄曲霉素B_1的主要提取方法,并对近年来利用免疫磁珠富集法联合其他方法进行食品中黄曲霉素B_1检测的进展进行了综述。(本文来源于《食品安全导刊》期刊2018年03期)

赵枰,洪煜婧,陈相,鲁晓燕,洪宏[9](2017)在《免疫磁珠负性富集结合免疫荧光抗体技术检测卵巢癌患者外周血CTCs的方法建立和应用》一文中研究指出目的建立基于细胞学水平的循环肿瘤细胞负性富集技术来检测卵巢上皮性癌(卵巢癌)患者外周血循环肿瘤细胞。方法体外培养卵巢癌SKOV-3细胞,按一定比例掺入到2 ml健康人外周静脉血中,应用免疫磁珠为基础的负性富集结合免疫荧光抗体技术对循环肿瘤细胞进行定量检测。评价该方法富集靶细胞的回收率,并用上述方法检测32例卵巢癌患者和10例对照者外周血中的循环肿瘤细胞。结果①在健康志愿者2 ml外周血掺入不同数目SKOV-3细胞的条件下,肿瘤细胞的回收率在64%~80%之间,掺入细胞间回归方程为Y=0.782X-1.408,相关系数为0.998。②10例对照者外周血中未检测到CK8/18+,18例卵巢癌患者的外周血中检测到CK8/18+,阳性率为56.3%(18/32,X~2=7.681,P<0.01)。③CTCs阳性与远处转移密切相关(X~2=5.776,P<0.05)。结论免疫磁珠负性富集结合免疫荧光抗体技术检测卵巢癌患者外周血循环肿瘤细胞的方法可能具有一定的临床应用价值。(本文来源于《现代检验医学杂志》期刊2017年03期)

朱海妹[10](2017)在《免疫磁珠阴性法富集胸水脱落细胞对恶性胸腔积液诊断价值的研究》一文中研究指出研究背景胸腔积液(pleural effusion)是胸膜疾病最常见的临床表现之一,根据临床影响因素和患者预后的不同,胸腔积液往往分为两种类别,即良性胸腔积液(benign pleural effusion,BPE)和恶性胸腔积液(malignant pleural effusion,MPE)。由于两种类型胸腔积液的病因和预后存在很大区别,因此对于两者的准确鉴别尤为重要。但是长期以来,良恶性胸腔积液的鉴别诊断一直是困扰临床医生的一大问题。尽管胸腔积液中找到肿瘤细胞的是诊断胸腔积液的“金标准”,但是其阳性率各方报道变异很大,在40%‐87%之间[1]。此外,对于胸水细胞学阴性的胸腔积液,目前使用的一些指标,如乳酸脱氢酶(LDH)、腺苷脱氢酶(ADA)、癌胚抗原(CEA)等,在某种程度上有一定的鉴别价值,但是这些标志物的特异性和敏感性不十分理想。故探讨一种敏感度及特异度高的鉴别良恶性胸腔积液辅助检测方法,为临床诊断提供依据非常必要。近年来,循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)检测逐渐进入精准医学时代。目前已有众多研究者在探索CTC的诊断价值、预后价值、疗效监测和预测肿瘤复发等方面作出了很大贡献。作为血液中的“稀有细胞”,CTC的检测在技术层面上的要求通常很高。Cellsearch系统长期以来作为CTC检测的“金标准”;但是在深入研究和临床使用过程中,Cellsearch系统的局限性逐渐显现出来,主要是由于无法检测到发生“上皮—间质转化”(epithelial‐mesenchymal transition,EMT),造成假阴性结果。随着技术的不断革新,免疫磁珠分选法悄然进入科学家的视野。这种细胞富集法与Cellsearch系统不同,它不依赖上皮标志物的表达,可富集到发生EMT的肿瘤细胞。免疫磁珠分选法分为阳性和阴性分选法。由于阳性分选法受到肿瘤细胞异质性的影响,且可能引起肿瘤细胞内部分子信号通路的活化。而阴性分选法通过去除标本中的白细胞和红细胞等成分,使得富集到的CTC处于自然状态,且不依赖肿瘤细胞表面分子的表达,因而阴性分选法适用于任何肿瘤类型的CTC富集,应用更为广泛。通过方法学的改进,目前阴性富集理论上回收率能够达到100%[2]。富集后的细胞成分经过免疫荧光染色后可去除白细胞,采用荧光原位杂交技术进一步鉴定后可用于后续的功能分析。CTC鉴定方法主要有基于肿瘤细胞表面抗原表达、细胞特异性m RNA表达以及染色体核型异常等而进行的实验方法。荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)已被证实可用于前列腺癌、结直肠癌、乳腺癌、肺癌、膀胱癌等上皮来源肿瘤的细胞鉴定。FISH不依赖肿瘤细胞表面分子标记物的表达,因而可以检测上皮细胞特异性标记物表达弱化或消失的CTC,同时可以在显微镜下直观的观察到恶性的CTC肿瘤细胞。研究目的探讨免疫磁珠阴性富集法联合FISH技术和免疫荧光染色——SOP‐im FISH技术[3],找到胸水脱落细胞(胸水“CTC”)对诊断恶性胸腔积液的价值。研究方法(一)研究对象:于2015年3月至2017年1月期间在广州市第一人民医院住院的胸腔积液患者,并且符合纳入及排除标准。(二)实验方法:采用免疫磁珠阴性分选法富集胸腔积液和外周血中的CTC,通过FISH杂交信号和免疫荧光染色CD45抗原鉴定所富集的细胞是否为CTCs。同时收集胸水传统细胞学检查结果进行对比分析。(叁)实验设计1.样本分组:分为两组,即恶性胸腔积液组(实验组)与良性胸腔积液组(对照组)。1.1恶性胸腔积液病例来源1.1.1纳入标准(1)年龄≧18岁,性别不限(妊娠期、哺乳期女性除外);(2)体格检查和(或)影像学检查证实胸腔积液;(3)经组织病理学或细胞学确诊为恶性肿瘤;(4)能耐受胸腔穿刺抽液;(5)自愿参加本研究者。1.1.2排除标准(1)妊娠期、哺乳期的女性;(2)组织病理学或细胞学未证实为恶性肿瘤;(3)行手术、放化疗后3个月内者;(4)伴有严重心血管、肝、肾等疾病不能耐受胸腔穿刺术;(5)依从性差或拒绝参加此项研究的患者。1.2良性胸腔积液病例来源1.2.1纳入标准(1)年龄≧18岁,性别不限(妊娠期、哺乳期女性除外);(2)表现为渗出液的非恶性胸腔积液,包括结核性胸膜炎、肺炎等其他非恶性疾病所致的胸腔积液;(3)既往无恶性肿瘤疾病病史患者。(4)自愿参加此研究,并能积极配合的患者。1.2.2排除标准(1)妊娠期、哺乳期的女性;(2)因心力衰竭、低蛋白血症、肾病综合征等其他疾病所致的胸腔积液表现为漏出液者;(3)胸腔积液为包裹性或由于量少等其他原因无法行胸腔穿刺引流术者。(4)既往恶性肿瘤病史。2.标本收集:实验组选取2015年3月至2017年1月期间广州市第一人民医院住院患者,经组织病理学或细胞学确诊为恶性胸腔积液共46例,原发病因包括肺腺癌18例、乳腺癌4例、肺鳞癌3例、小细胞肺癌3例、非霍奇金淋巴瘤2例、恶性胸膜间皮瘤1例、鼻咽癌1例、消化道恶性肿瘤7例(食管癌1例、胃癌2例、胰腺癌1例、乙状结肠癌1例、肝癌1例、直肠癌1例)、盆腔恶性肿瘤7例(子宫内膜癌1例、宫颈癌1例、肾癌1例、膀胱癌1例、前列腺癌1例、盆腔囊腺癌1例、卵巢癌1例)。对照组选取同期住院患者,胸腔积液表现为渗出液的肺部良性疾病住院患者27例,包括结核性胸腔积液12例、类肺炎胸腔积液15例。两组均采集血液和胸腔积液。3.统计方法:实验数据均采用SPSS13.0软件包进行统计分析,双侧检验,检验标准设为0.05。计量资料采用均数±标准差(X±S)表示;分类变量:四格表采用Pearson2检验或2检验的连续性校正计算公式。研究结果1.一般资料的比较:本研究共入组患者73例,年龄29~91岁,平均66.9±14.6岁。其中实验组46例,男性28例,女性18例,年龄41~91岁,平均68.17±13.22岁。对照组共27例,男性21例,女性6例,年龄29~90岁,平均64.19±16.71岁。实验组和对照组在性别、年龄、临床表现、胸水性质及影像学检查方面无差异(P均>0.05),两组数据具有可比性。2.实验组共纳入46例标本,其中胸水“CTC”阳性34例,阴性12例;胸水传统细胞学检查阳性21例,阴性25例;外周血CTC阳性20例,阴性26例。对照组共纳入27例标本,其中胸水“CTC”假阳性3例,阴性24例;胸水传统细胞学检查假阳性1例,阴性26例;外周血CTC假阳性2例,阴性25例。3.实验组与对照组胸水“CTC”的比较:实验组胸水“CTC”阳性率(73.9%,34/46)与对照组(11.1%,3/27)相比,阳性率明显更高,2=26.846,P=0.000<0.5,差异具有统计学意义。4.实验组胸水“CTC”与外周血CTC的比较:胸水“CTC”阳性率较外周血CTC阳性率(43.5%,20/46)明显更高,差异具有统计学意义(2=8.788,P=0.003)。5.实验组胸水“CTC”与胸水传统细胞学阳性率的比较:胸水“CTC”阳性率为73.9%,胸水传统细胞学阳性率45.7%(21/46),两者比较2=7.64,P=0.006,差异具有统计学意义。6.胸水“CTC”、外周血CTC、胸水传统细胞学检查叁者比较:胸水“CTC”的阳性率和敏感性最高,特异性最低;胸水传统细胞学检查的特异性最高,阳性率和敏感性次于胸水“CTC”;外周血CTC的阳性率、敏感性均次于胸水“CTC”,但特异性高于胸水“CTC”。7.胸腔来源恶性肿瘤与其他部位来源恶性肿瘤所致胸腔积液中,胸水“CTC”阳性率的比较:胸腔来源恶性肿瘤组胸水“CTC”阳性率为58.7%(27/46),其他部位来源恶性肿瘤组胸水“CTC”阳性率为15.2%(7/46),两者比较2=14.988,P=0.000,差异具有统计学意义。研究结论SOP‐im FISH技术能检测出胸水中的脱落细胞,并且与胸水传统细胞学检查及外周血CTC检测相比,胸水“CTC”检测的阳性率、敏感性最高。综合来看,胸水“CTC”诊断恶性胸腔积液的效能最高,其诊断的阳性率为73.9%,敏感性为73.9%,特异性为88.9%。并且与外周血CTC检测相比,胸水“CTC”检测具有更高的恶性肿瘤诊断价值。(本文来源于《广州医科大学》期刊2017-05-01)

免疫磁珠富集论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

通过玉米赤霉烯酮与对苯二胺反应,制备出玉米赤霉烯酮免疫磁珠分离富集试剂盒,试剂盒对样品中玉米赤霉烯酮的捕获量为50ng/ml,与玉米赤霉烯酮结构或者功能相似的竞争药物:黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素M1、T-2毒素、赭曲霉毒素A、展青霉素等5种药物进行特异性反应时,均无交叉反应。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

免疫磁珠富集论文参考文献

[1].万宇平,吴小胜,贾芳芳,李静,王兆芹.一种沙丁胺醇免疫磁珠分离富集试剂盒的研制[J].安徽农业科学.2019

[2].刘玉梅,王兆芹,贾芳芳,万宇平,杜美红.一种玉米赤霉烯酮免疫磁珠分离富集试剂盒的研制[J].山东畜牧兽医.2019

[3].任慧子,陈健.EPCAM联合CK8免疫磁珠富集恶性胸水腺癌细胞[J].甘肃医药.2018

[4].张磊,黄慧玲,杨昂,张茜,郑春红.免疫磁珠法阴性富集循环肿瘤细胞方法的建立[J].检验医学.2018

[5].梁冰,纪雪,孙洋,周伟,孙诗雯.基于免疫磁珠快速富集分离土壤中炭疽芽孢方法的建立[J].中国生物制品学杂志.2018

[6].刘妍.基于叁维大孔径反蛋白石结构光子晶体免疫磁珠富集、净化与HPLC-FLD检测OTA、AFB_1及ZEN的研究[D].南京师范大学.2018

[7].刘阳,刘文侠,孙力军,施琦,邱妹.基于NHS基团修饰的副溶血性弧菌免疫磁珠制备及其富集性能评价[J].安徽农业科学.2018

[8].李诗瑶,程慧,杨硕.免疫磁珠富集在食品中黄曲霉毒素B_1的应用[J].食品安全导刊.2018

[9].赵枰,洪煜婧,陈相,鲁晓燕,洪宏.免疫磁珠负性富集结合免疫荧光抗体技术检测卵巢癌患者外周血CTCs的方法建立和应用[J].现代检验医学杂志.2017

[10].朱海妹.免疫磁珠阴性法富集胸水脱落细胞对恶性胸腔积液诊断价值的研究[D].广州医科大学.2017

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