地塞米松衍生物论文-郝坡,王翀,刘北忠,孟凡萍,王东生

地塞米松衍生物论文-郝坡,王翀,刘北忠,孟凡萍,王东生

导读:本文包含了地塞米松衍生物论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:白血病,酵母叁杂交,地塞米松衍生物,蛋白相互作用

地塞米松衍生物论文文献综述

郝坡,王翀,刘北忠,孟凡萍,王东生[1](2009)在《活细胞内筛选地塞米松衍生物作用靶蛋白的研究》一文中研究指出背景与目的:地塞米松衍生物(9-氟-16α-甲基11β,17-二羟基-3-氧-1,4-雄二烯-17β-羧酸)具有优于地塞米松的抗肿瘤活性,为探讨其抗肿瘤机制,本研究利用酵母叁杂交技术在活细胞内筛选与之相互作用的靶蛋白。方法:构建诱饵质粒pGBKT7-GRα-LBD,利用酵母叁杂交技术从人K562细胞cDNA文库中筛选与地塞米松衍生物相互作用的靶蛋白。结果:诱饵质粒成功构建,经Western blot分析可表达约31ku的诱饵蛋白,且诱饵蛋白没有毒性、渗漏和自激活现象。利用酵母叁杂交技术从人K562细胞cDNA文库中筛选到37个能与地塞米松衍生物相互作用的蛋白质,并经酵母回转实验验证,得到20个真阳性克隆。结论:通过酵母叁杂交技术在活细胞内筛选到20个与地塞米松衍生物有相互作用的蛋白。(本文来源于《癌症》期刊2009年03期)

刘畅,金丹婷,钟梁,刘北忠,王东生[2](2008)在《地塞米松衍生物对K562细胞增殖的抑制作用及机制》一文中研究指出目的:研究地塞米松衍生物对K562细胞的增殖抑制作用,并对其作用机制进行初步的探讨。方法:以地塞米松为原料合成并纯化得到新的衍生物。用不同浓度的地塞米松衍生物对K562细胞进行处理,通过MTT比色法检测细胞增殖抑制率,电镜法观察细胞凋亡的形态学变化,免疫细胞化学法测定细胞Bcl-2,Fas表达,比色法检测Caspase-3的活性变化。结果:地塞米松衍生物能抑制K562细胞的增殖,使Bcl-2表达降低,Fas表达上调,Caspase-3活性增强,诱导K562细胞凋亡。结论:地塞米松衍生物可能通过诱导K562细胞凋亡而抑制细胞增殖。其诱导细胞凋亡的机制可能与抑制Bcl-2蛋白的表达,上调Fas受体,进而激活细胞内的Caspase-3有关。(本文来源于《中国医院药学杂志》期刊2008年23期)

郝坡[3](2008)在《活细胞内筛选地塞米松衍生物作用靶蛋白的研究》一文中研究指出第一部分糖皮质激素受体结合域诱饵表达载体的构建和鉴定目的构建糖皮质激素受体α配体结合域(GRα-LBD)的诱饵表达载体,为小分子配体酵母叁杂交系统的建立奠定基础。方法RT-PCR扩增K562细胞的GRα-LBD,克隆入诱饵载体pGBKT7中,测序正确后,再把构建好的诱饵载体pGBKT7-GRα-LBD转化到酵母AH109细胞中,提取酵母蛋白,并用Western blot分析诱饵蛋白的表达情况。同时检测诱饵蛋白的毒性、渗漏和自激活作用。结果成功扩增了GRα-LBD,并分别成功克隆到pGBKT7中,测序结果正确。诱饵载体成功转化到酵母AH109细胞中,无毒性、渗漏和自激活作用,Western blot分析也证实了酵母细胞表达诱饵蛋白。结论成功构建了GRα-LBD酵母诱饵表达载体,为建立小分子配体酵母叁杂交系统奠定了基础。第二部分人K562细胞cDNA文库的扩增、纯化、鉴定和酵母细胞转化目的对预转化到大肠DH5α中的人K562细胞cDNA文库进行扩增,纯化和鉴定并将文库质粒转化酵母为下一步的靶蛋白的筛选做准备。方法对K562细胞cDNA文库进行扩增,提取文库质粒,将文库质粒转化酵母Y187细胞,并用PCR和酶切鉴定转化结果。结果成功的扩增人K562细胞cDNA文库,并验证了文库的多样性,将文库质粒成功转化酵母Y187细胞。结论K562细胞cDNA文库的成功扩增,纯化,鉴定,为进一步的文库筛选奠定了基础。第叁部分酵母叁杂交技术筛选地塞米松衍生物作用的靶蛋白目的通过酵母叁杂交技术在人K562细胞cDNA中筛选地塞米松衍生物作用的靶蛋白。方法通过将转化有诱饵质粒pGBKT7-GRα-LBD的酵母AH109细胞、转化有文库质粒的酵母Y187细胞和终浓度为0.4μg/ml的地塞米松衍生物叁种物质放到一起交配后,将交配后的细胞铺于SD/-Trp/-Leu/-His的缺陷培养基上,然后将SD/-Trp/-Leu/-His培养基上生长的克隆挑取到SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade /X-α-gal的缺陷培养基上进行营养缺陷筛选,重复挑取叁次后仍为蓝色的克隆可能是阳性克隆,然后提取酵母质粒并转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,提取大肠杆菌DH5α中的质粒,并通过对所提取的所有文库质粒进行PCR扩增和对PCR产物的单酶切分析,将文库质粒归类,归类后从每一类中随机选择一个代表,通过酵母回转实验进行验证。酵母回转实验阳性的质粒送上海生工测序,通过对测序结果的比对和进一步的分析来确定所筛选到的靶蛋白的特征。结果共测序43个,其中有6个是重复的,实际上我们共筛选到37个不同的蛋白,经过回转实验验证,证明20个是阳性克隆,其中一个是新蛋白。从中选择6个进行一对一的酵母交配实验后,发现DDX28和RanBP9/RanBPM是与地塞米松衍生物相互作用的靶蛋白。结论本研究我们筛选到了2个与地塞米松衍生物相互作用的靶蛋白,分别是DDX28和RanBP9/RanBPM。这将为地塞米松衍生物抗肿瘤的分子机制研究提供线索。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2008-05-01)

刘畅,金丹婷,钟梁,袁佩,刘北忠[4](2008)在《地塞米松衍生物的合成及其抗肿瘤活性研究》一文中研究指出A new dexamethasone derivative of 9-fluoro-16α-methyl-11,17-dihydroxy-3-oxo-1,4-androsladiene-17β-carboxylic acid from dexamethasone is synthesized by oxidization with periodic acid. The physicochemical property of the new derivative is identified with routine methods. Its structure is characterized by 1H NMR,13C NMR and ESI-MS spectra. The effect of the new derivative on K562 cell proliferation was detected by MTT, as well as the cell cycle by flow cytometry.The result show that the dexamethasone derivative had anti-tumor activities of K562 cell proliferation inhibition and cell cycle arresting from G0/G1 to S phase.(本文来源于《化学研究与应用》期刊2008年03期)

地塞米松衍生物论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的:研究地塞米松衍生物对K562细胞的增殖抑制作用,并对其作用机制进行初步的探讨。方法:以地塞米松为原料合成并纯化得到新的衍生物。用不同浓度的地塞米松衍生物对K562细胞进行处理,通过MTT比色法检测细胞增殖抑制率,电镜法观察细胞凋亡的形态学变化,免疫细胞化学法测定细胞Bcl-2,Fas表达,比色法检测Caspase-3的活性变化。结果:地塞米松衍生物能抑制K562细胞的增殖,使Bcl-2表达降低,Fas表达上调,Caspase-3活性增强,诱导K562细胞凋亡。结论:地塞米松衍生物可能通过诱导K562细胞凋亡而抑制细胞增殖。其诱导细胞凋亡的机制可能与抑制Bcl-2蛋白的表达,上调Fas受体,进而激活细胞内的Caspase-3有关。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

地塞米松衍生物论文参考文献

[1].郝坡,王翀,刘北忠,孟凡萍,王东生.活细胞内筛选地塞米松衍生物作用靶蛋白的研究[J].癌症.2009

[2].刘畅,金丹婷,钟梁,刘北忠,王东生.地塞米松衍生物对K562细胞增殖的抑制作用及机制[J].中国医院药学杂志.2008

[3].郝坡.活细胞内筛选地塞米松衍生物作用靶蛋白的研究[D].重庆医科大学.2008

[4].刘畅,金丹婷,钟梁,袁佩,刘北忠.地塞米松衍生物的合成及其抗肿瘤活性研究[J].化学研究与应用.2008

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