本文主要研究内容
作者张玲,林荣,宋祖坤,王男,杨海麟（2019）在《启动子串联及改造提高FAD为辅基的葡萄糖脱氢酶在Bacillus subtilis中的表达》一文中研究指出：以黄素腺嘌呤二核苷酸（flavin adenine dinucleotide,FAD）为辅基的葡萄糖脱氢酶（glucose dehydrogenase with FAD,FAD-GDH,EC 1.1.99.10）,与辅基结合紧密,催化效率高,是临床检测血糖指标的新型诊断用酶。将Burkholderia cepacia的FAD-GDH基因（gdh）构建含单启动PHpaⅡ的穿梭质粒p MA5-1,在蛋白酶缺陷型菌株Bacillus subtilis WB600中表达。为了获得该酶的高效表达,采用启动子串联及改造策略考察产酶情况。将4种启动子(PamyQ’,P43,PgsiB,Popuaa)分别与质粒上自带的启动子PHpaⅡ串联,结果表明PHpaⅡ-PamyQ’串联组合获得的FAD-GDH胞内酶活最高,为2 497 U/L,是串联前单启动子的2.7倍。为了减少发酵过程中,葡萄糖和甘油对产酶的抑制作用,在串联组合的基础上删去PamyQ’启动子中与碳代谢调控蛋白结合的cre位点,使胞内产酶水平提高至3 626 U/L,说明cre位点的去除能够减少碳代谢产物对启动子转录的抑制。本研究为新型诊断用酶FAD-GDH的菌种改造和工业化生产应用提供参考与借鉴。
Abstract
yi huang su xian piao ling er he gan suan （flavin adenine dinucleotide,FAD）wei fu ji de pu tao tang tuo qing mei （glucose dehydrogenase with FAD,FAD-GDH,EC 1.1.99.10）,yu fu ji jie ge jin mi ,cui hua xiao lv gao ,shi lin chuang jian ce xie tang zhi biao de xin xing zhen duan yong mei 。jiang Burkholderia cepaciade FAD-GDHji yin （gdh）gou jian han chan qi dong PHpaⅡde chuan suo zhi li p MA5-1,zai dan bai mei que xian xing jun zhu Bacillus subtilis WB600zhong biao da 。wei le huo de gai mei de gao xiao biao da ,cai yong qi dong zi chuan lian ji gai zao ce lve kao cha chan mei qing kuang 。jiang 4chong qi dong zi (PamyQ’,P43,PgsiB,Popuaa)fen bie yu zhi li shang zi dai de qi dong zi PHpaⅡchuan lian ,jie guo biao ming PHpaⅡ-PamyQ’chuan lian zu ge huo de de FAD-GDHbao nei mei huo zui gao ,wei 2 497 U/L,shi chuan lian qian chan qi dong zi de 2.7bei 。wei le jian shao fa jiao guo cheng zhong ,pu tao tang he gan you dui chan mei de yi zhi zuo yong ,zai chuan lian zu ge de ji chu shang shan qu PamyQ’qi dong zi zhong yu tan dai xie diao kong dan bai jie ge de crewei dian ,shi bao nei chan mei shui ping di gao zhi 3 626 U/L,shui ming crewei dian de qu chu neng gou jian shao tan dai xie chan wu dui qi dong zi zhuai lu de yi zhi 。ben yan jiu wei xin xing zhen duan yong mei FAD-GDHde jun chong gai zao he gong ye hua sheng chan ying yong di gong can kao yu jie jian 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自食品与发酵工业的张玲,林荣,宋祖坤,王男,杨海麟，发表于刊物食品与发酵工业2019年08期论文，是一篇关于黄素腺嘌呤二核苷酸论文,葡萄糖脱氢酶论文,枯草芽孢杆菌论文,串联启动子论文,位点论文,食品与发酵工业2019年08期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自食品与发酵工业2019年08期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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