导读:本文包含了不相容质粒共表达论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:霍乱毒素,增强型绿色荧光蛋白,嵌合蛋白,不相容质粒
不相容质粒共表达论文文献综述
周小芬,林卫萍,何华红,李想,张焜[1]（2015）在《不相容双质粒共表达霍乱毒素类似嵌合蛋白》一文中研究指出霍乱毒素由5个B亚基(CTB)和l个A亚基(CTA)(包括CTA1和CTA2)组成。该蛋白结构可帮助有毒的CTA1分子进入细胞。本研究拟利用原核不相容双质粒共表达系统获得霍乱毒素类似嵌合蛋白,用于大分子蛋白质黏膜给药的载体研究。将CTB基因片段克隆至载体p ET-28a中,获得重组质粒p ET-28a-CTB;以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)代替有毒的CTA1,在CTA2序列N端融合穿膜肽(TAT),将EGFP-CTA2-TAT基因克隆至载体p ET-22b(+)中,获得重组质粒p ET-22b-EGFP-CTA2-TAT。利用p ET-28a-CTB和p ET-22b-EGFP-CTA2-TAT二者不同抗性,将双质粒分步转化到大肠杆菌BL21中。表达条件为0.75 mmol/L IPTG、20℃、200 r/min诱导20 h,重组嵌合蛋白能以可溶形式表达。经过Ni-NTA、Sephadex G-75纯化,Western blotting对蛋白质特异性进行鉴定,确定获得(CTB)5/EGFP-CTA2-TAT嵌合蛋白。(本文来源于《基因组学与应用生物学》期刊2015年07期）
孙剑,王健琪,翟朝阳[2]（2006）在《不相容双质粒共表达人内皮抑素及简化人纤溶酶原饼环区5》一文中研究指出目的构建人内皮抑素(humanendostatin,hES)原核表达质粒pET28a/hES并与简化人纤溶酶原饼环区5(predigestedhumanplasminogenkringle5,predhPK-5)在大肠杆菌中实现共表达。方法RT-PCR法从人肝癌组织中扩增人内皮抑素基因,利用基因克隆技术构建原核表达质粒pET28a/hES。在卡那霉素与氨苄青霉素的选择压力下,将其与pGEX-1λT/predhPK-5共同转化E.coliBL21(DE3),并诱导表达重组蛋白。同时从连续培养时间与传代次数两方面检测了共转化子的稳定性。结果成功构建了重组质粒pET28a/hES,其与pGEX-1λT/predh-PK-5的共转化子在双抗生素压力下可以共存,并在E.coliBL21(DE3)中成功共表达了人内皮抑素及简化的人纤溶酶原饼环区5,其表达量分别占蛋白总量的20%和21%。在双抗性培养基中培养16h及传代120代,共转化子存活率均大于75%,具有较好的稳定性。结论不相容质粒pET28a/hES与pGEX-1λT/predhPK-5在大肠杆菌中的成功共表达,对基因共表达方法作了有益探索,验证了不相容质粒共表达方法的可行性。(本文来源于《四川大学学报(医学版)》期刊2006年06期）
孙剑[3]（2006）在《不相容双质粒共表达人内皮抑素及简化人纤溶酶原饼环区5》一文中研究指出目的构建人内皮抑素(human Endostatin)原核表达质粒pET28a/hES，并与简化人纤溶酶原饼环区(predigested human PlasminogenKringle5,predhPK-5)在大肠杆菌中实现共表达。方法以RT-PCR法从人肝癌组织中扩增人内皮抑素基因，利用基因克隆技术构建原核表达质粒pET28a/hES并与pGEX-1λT/predhPK-5共同转化E.coliBL21(DE3)诱导表达。结果成功构建pET28a/hES，其与pGEX-1λT/predhPK-5的共转化子在双抗生素压力下可以共存，并在E.coH BL21(DE3)中成功共表达了人内皮抑素及简化的人纤溶酶原饼环区5。结论构建了人内皮抑素原核表达质粒pET28a/hES，为进一步研究打下基础。利用不相容质粒共表达了人内皮抑素及简化人纤溶酶原饼环区5，对基因共表达方法作了有益探索，验证了不相容质粒共表达方法的可行性。(本文来源于《四川大学》期刊2006-09-01）
范立强,袁勤生,吴祥甫[4]（2002）在《不相容双质粒共表达大肠杆菌肉碱脱水酶基因caiB及其辅因子合成酶基因caiE》一文中研究指出基因 cai B和基因 cai E分别编码肉碱脱水酶及其辅因子合成酶 ,携带这两个基因的重组菌可以共表达两个外源蛋白 ,得到高活性肉碱脱水酶。分别构建这两个基因的表达质粒 p ET2 8cai B和 p ET2 2 cai E,利用双抗生素筛选法 ,获得能稳定遗传的双质粒转化子。经 IPTG诱导 ,两个基因共表达 ,表达量分别占菌体总蛋白的 39%和 2 0 % ,共转化菌的酶活力比 p ET2 8cai B单转化菌提高了 2 .3倍 ,并由此建立了不相容双质粒共表达外源基因的新方法(本文来源于《中国医药工业杂志》期刊2002年03期）
不相容质粒共表达论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的构建人内皮抑素(humanendostatin,hES)原核表达质粒pET28a/hES并与简化人纤溶酶原饼环区5(predigestedhumanplasminogenkringle5,predhPK-5)在大肠杆菌中实现共表达。方法RT-PCR法从人肝癌组织中扩增人内皮抑素基因,利用基因克隆技术构建原核表达质粒pET28a/hES。在卡那霉素与氨苄青霉素的选择压力下,将其与pGEX-1λT/predhPK-5共同转化E.coliBL21(DE3),并诱导表达重组蛋白。同时从连续培养时间与传代次数两方面检测了共转化子的稳定性。结果成功构建了重组质粒pET28a/hES,其与pGEX-1λT/predh-PK-5的共转化子在双抗生素压力下可以共存,并在E.coliBL21(DE3)中成功共表达了人内皮抑素及简化的人纤溶酶原饼环区5,其表达量分别占蛋白总量的20%和21%。在双抗性培养基中培养16h及传代120代,共转化子存活率均大于75%,具有较好的稳定性。结论不相容质粒pET28a/hES与pGEX-1λT/predhPK-5在大肠杆菌中的成功共表达,对基因共表达方法作了有益探索,验证了不相容质粒共表达方法的可行性。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
不相容质粒共表达论文参考文献
[1].周小芬,林卫萍,何华红,李想,张焜.不相容双质粒共表达霍乱毒素类似嵌合蛋白[J].基因组学与应用生物学.2015
[2].孙剑,王健琪,翟朝阳.不相容双质粒共表达人内皮抑素及简化人纤溶酶原饼环区5[J].四川大学学报(医学版).2006
[3].孙剑.不相容双质粒共表达人内皮抑素及简化人纤溶酶原饼环区5[D].四川大学.2006
[4].范立强,袁勤生,吴祥甫.不相容双质粒共表达大肠杆菌肉碱脱水酶基因caiB及其辅因子合成酶基因caiE[J].中国医药工业杂志.2002