蓝果忍冬论文-谢佳璇

蓝果忍冬论文-谢佳璇

导读:本文包含了蓝果忍冬论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:蓝果忍冬,多酚,抗氧化活性,抗糖基化活性

蓝果忍冬论文文献综述

谢佳璇[1](2019)在《蓝果忍冬果实和叶片多酚的鉴定及体外活性分析》一文中研究指出蓝果忍冬(Lonicera caerulea L.)因果实和叶片中富含丰富的酚类物质而被人们所熟知,具有一定的研究价值。本试验于2018年6月开始,以蓝果忍冬主栽品种“蓝精灵”的成熟果实、果实采摘后的生理成熟叶片作为试材,所有材料均来采自东北农业大学小浆果资源圃。利用固相萃取技术(SPE)将果实和叶片的多酚粗提液进行分离,得到不同的组成成分(非花色苷多酚、花色苷、多糖),利用液相色谱与质谱联用法(HPLC-PAD和HPLC-ESI-MS~2)对果实和叶片中的多酚物质进行鉴定,测定果实和叶片中不同组分及多酚粗提液的抗氧化活性(DPPH、ABTS、FRAP、ORAC)、抗糖基化活性(BSA-GLU体系,BSA-MGO体系)、抗α-淀粉酶活性、总酚含量(TPC)及总花色苷含量(TAC),对不同组分的体外活性进行评估,探究果实和叶片中起主要作用的生物活性组分,并比较果实和叶片之间的差异,从而为蓝果忍冬的开发利用提供理论依据。主要研究结果如下:(1)从果实中共鉴定出29种多酚化合物,其中花色苷有8种,非花色苷多酚有21种,以及柠檬酸、龙胆酸两种非多酚化合物。从叶片中共鉴定出29种多酚化合物,其中花色苷有6种,非花色苷多酚有23种,以及龙胆酸、断氧化马钱子苷两种非多酚化合物。(2)果实和叶片中共有的花青素有4种,分别是:矢车菊素-3,5-双葡萄糖苷、矢车菊素-3-葡萄糖苷、矢车菊素-3-芸香糖苷、飞燕草素-3-芸香糖苷。果实中特有的花青素有4种,叶片中特有的花青素有2种。果实和叶片中共有的非花色苷多酚化合物有14种,分别是:4种黄酮醇(槲皮素-3-乙酰基葡萄糖苷、槲皮素-3-葡萄糖苷、槲皮素-3-芸香糖苷、异鼠李素-3-芸香糖苷),2种黄烷醇(表儿茶素、原花青素二聚体),8种酚酸(奎宁酸、5-p-香豆酰奎宁酸、5-咖啡酰奎宁酸、二咖啡酰奎宁酸、3-咖啡酰奎宁酸、4-咖啡酰奎宁酸、p-香豆酸葡萄糖、3-阿魏酰奎宁酸)。果实中特有的非花色苷多酚有7种,叶片中特有的非花色苷多酚有9种,同时,果实和叶片中都有龙胆酸。(3)首次从果实中鉴定出4种非花色苷多酚化合物:奎宁酸、5-p-香豆酰奎宁酸、芹菜素-7-β-D-(4"-咖啡酰基)葡萄糖苷酸、3-阿魏酰奎宁酸。叶片中的6种花色苷首次被鉴定出来。同时,有13种非花色苷多酚化合物首次被鉴定,分别是:槲皮素-3-乙酰基葡萄糖苷、异鼠李素-3-芸香糖苷、异鼠李素-3-葡萄糖苷、山萘酚-3-(6''-乙酰基)葡萄糖苷-7-鼠李糖苷、表儿茶素、原花青素二聚体、奎宁酸、5-p-香豆酰奎宁酸、3-阿魏酰奎宁酸、橙皮素-7芸香糖苷、染料木黄酮-7-葡萄糖苷、3,5,8-叁羟基-6,7,3',4'-四甲氧基黄酮、Gallomyrtucommulone C。(4)矢车菊素-3-葡萄糖苷是蓝果忍冬果实中主要的花色苷成分,其单体含量高达81%。绿原酸是果实中主要的非花色苷成分,槲皮素类化合物是果实中主要的类黄酮化合物。槲皮素和绿原酸是蓝果忍冬叶片中非花色苷多酚的主要成分。(5)抗氧化活性测定结果表明,果实中花色苷组分对DPPH、ABTS、FRAP、ORAC的抗氧化活性最高,分别为:287.24 mg Trolox/g DW、265.54 mg Trolox/g DW、60.17 mg Trolox/g DW、210.56 mg FeSO_4·7H_2O/g DW,是果实多酚粗提液的7~40倍,非花色苷多酚的2~7倍,多糖的60~300倍。叶片中非花色苷多酚组分的抗氧化活性最高,分别为:15.53 mg Trolox/g DW、27.82 mg Trolox/g DW、16.17 mg Trolox/g DW、95.83 mg FeSO_4·7H_2O/g DW,是其他组分的3~30倍。同时果实的抗氧化活性明显大于叶片,其中果实中花色苷组分的抗氧化活性是叶片非花色苷多酚组分的3~10倍。(6)抗糖基化活性测定结果表明,果实中花色苷组分的抗糖基化活性最高,其对AGEs、二酪氨酸、N-甲酰犬尿氨酸、犬尿氨酸和MGO诱导的AGEs的抑制率分别为:74.21%、78.48%、81.29%、38.50%和89.12%,是其他组分的1.1~455.9倍。叶片中非花色苷多酚组分的抗糖基化活性最高,其对AGEs、二酪氨酸、N-甲酰犬尿氨酸、犬尿氨酸和MGO诱导的AGEs的抑制率分别为:42.79%、39.07%、43.36%、12.66%和50.17%,是其他组分的1.5~80.9倍。同时,果实的抗糖基化活性总体上高于叶片,是叶片的1~3倍,多糖无明显抗糖基化活性。(7)抗α-淀粉酶活性测定结果表明,果实中花色苷组分的抗α-淀粉酶活性最强,为10.31mmol AE/g。叶片中非花色组分的抗α-淀粉酶活性最强,为12.18 mmol AE/g。同时,叶片中的非花色苷多酚组分对α-淀粉酶的抑制作用略高于果实中的花色苷组分,多糖无抗α-淀粉酶活性。(8)果实中非花色苷多酚组分的TPC最高,为222.45 mg GA/g DW,叶片中非花色苷多酚组分的TPC最高,为76.68 mg GA/g DW。果实中花色苷组分的TAC为37.85 mg C3G/g DW,叶片中花色苷组分的TAC为0.36 mg C3G/g DW。果实的TPC,TAC均高于叶片。(9)相关性分析表明,果实和叶片中的TPC与抗氧化活性、抗糖基化活性呈显着正相关,而与抗α-淀粉酶活性则无明显相关性。果实和叶片中的TAC与抗氧化活性、抗糖基化活性、抗α-淀粉酶活性均呈显着正相关。同时,果实和叶片的抗氧化活性与抗糖基化活性、抗α-淀粉酶活性均呈显着正相关。(本文来源于《东北农业大学》期刊2019-06-01)

刘化禹[2](2019)在《蓝果忍冬花色苷合成bHLH转录因子筛选及LcTT8功能验证》一文中研究指出蓝果忍冬(Lonicera caerulea L.)具有极高的花色苷含量,是提取可食用天然色素的良好资源,更是极具发展潜力的经济保健型果实。蓝果忍冬果实着色是花色苷积累的过程,bHLH蛋白是调控着花色苷生物合成的重要转录因子。然而,关于蓝果忍冬花色苷合成的分子调控机理未见有研究报道。研究蓝果忍冬花色苷合成的调控机制,既能为培育保健型植物品种提供理论基础,同时也可为植物抗逆分子机理的研究提供参考。本研究以蓝果忍冬品种“蓓蕾”为材料,通过转录组测序、生物信息学分析、构建LcTT8-EGFP绿色荧光载体和pBI121-LcTT8过表达载体、转基因、亚细胞定位、实时荧光定量PCR、ELISA酶联免疫吸附、pH示差法、高效液相色谱法(HPLC)等方法,筛选出了参与蓝果忍冬果实花色苷生物合成的bHLH转录因子LcTT8,并进行了基因功能验证。主要研究结果如下:(1)蓝果忍冬bHLH转录因子家族鉴定分析通过NCBI CDD、MEME方法结合蓝果忍冬bHLH家族进化树分析了蓝果忍冬bHLH转录因子蛋白保守结构域和保守基序进行鉴定,结果表明:有43个bHLH转录因子都包含bHLH家族保守结构域HLH(PF00010)或bHLH-MYC_N(PF14215)。几乎所有43个蓝果忍冬bHLH蛋白都含有Motif 1或Motif 2,Motif 1和Motif 2共同构成了蓝果忍冬bHLH转录因子的basic helix-loop-helix保守结构域。并且,研究结果表明,含有类似保守基序的bHLH转录因子之间具有更近的进化关系。(2)蓝果忍冬花色苷生物合成相关的bHLH转录因子的筛选通过blastx将43条蓝果忍冬bHLH家族序列比对到蛋白数据库Nr、Swiss-Prot、KEGG、COG(evalue<0.00001),得到这些序列的蛋白功能注释信息,结果表明:CL484.Contig3_All、Unigene21245_All、Unigene38564_All和Unigene7373_All与花色苷生物合成相关。将43条蓝果忍冬bHLHs和225条拟南芥bHLHs合并构建进化树预测蓝果忍冬转录因子的功能,结果表明:蓝果忍冬bHLHs可分成14个亚族,CL484.Contig3_All和Unigene21245_All聚类在主要调控花色苷合成的Ⅲ f亚族。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析了43个蓝果忍冬bHLHs基因在不同组织部位、不同果实发育期的表达模式,结果表明:果实中的CL484.Contig3_All表达量显着高于根、茎、叶、花;且当果实发育到转色期时CL484.Contig3_All表达量剧烈增高。最终筛选出蓝果忍冬果实中调节花色苷生物合成的转录因子CL484.Contig3_All。(3)蓝果忍冬TT8基因的克隆和生物信息学分析通过对蓝果忍冬转录组数据装配得到CL484.Contig3_All的CDs区,命名为LcTT8。将LcTT8基因与克隆载体连接,转入大肠杆菌测序,得到LcTT8核苷酸序列长度为2049bp。LcTT8蛋白质为酸性蛋白(等电点pI为5.09),含有682个氨基酸,分子量为75928.12。预测LcTT8定位在细胞核,可能包含2个蛋白跨膜螺旋结构域,无信号肽位点。同时对LcTT8进行了蛋白叁维结构建模预测。将LcTT8与其他植物TT8进行多重序列比对,发现它们具有相似的保守序列。进化树显示蓝果忍冬TT8和甜樱桃(Prunus avium)TT8进化关系最近。(4)蓝果忍冬TT8的亚细胞定位和基因表达分析利用拟南芥原生质体转化法进行了亚细胞定位分析,在转入空载体的拟南芥原生质体中核、膜、质均可见明亮的绿色荧光,而在转入LcTT8-EGFP融合表达载体绿色荧光只富集在细胞核中。通过qRT-PCR分析LcTT8在蓝果忍冬不同组织和不同果实时期的表达模式,结果发现,LcTT8在根、茎、叶、花中表达量低,在果实中表达量极高,是其他部位的4-23倍;果实发育期间,LcTT8表达量先增后减,在果实转色初期达到峰值。(5)蓝果忍冬TT8基因的功能验证构建pBI121-LcTT8重组载体,利用烟草遗传转化体系对LcTT8基因进行功能验证,结果表明,LcTT8转基因烟草的叶片、种皮颜色出现不同程度的加深。pH示差法测量花色苷含量发现,转基因烟草叶片的花色苷含量上升。通过对LcTT8转基因烟草叶片的花色苷合成基因CHS、CHI、F3H、DFR、ANS进行qRT-PCR分析,结果表明,相比野生烟草,LcTT8转基因烟草叶片的F3H、DFR、ANS基因表达量大幅上调。检测LcTT8转基因烟草叶片花色苷合成相关酶活性,结果表明,LcTT8转基因烟草的DFR、ANS酶活性上调最为明显。通过花色苷含量检测和HPLC分析花色苷组分,结果表明,转基因烟草叶片花色苷含量比野生烟草高,且主要是矢车菊素-3-O-葡萄糖苷高于野生烟草。(本文来源于《东北农业大学》期刊2019-06-01)

郭良川[3](2019)在《蚯蚓粪对蓝果忍冬果实品质及根际微生物影响的研究》一文中研究指出蚯蚓粪作为有机肥可以改良土壤性状,增加土壤养分,促进植物生长发育,但蚯蚓粪对蓝果忍冬果实品质及土壤微生物的影响还不清楚。本试验于2017-2018年在东北农业大学蓝果忍冬种质资源圃进行盆栽试验,盆高32cm,内径32cm,以2a生‘蓝精灵’(蓓蕾(♀)?蓝鸟(♂))为试验材料,设置4个不同配比(E1:20%蚯蚓粪+80%园土;E2:40%蚯蚓粪+60%园土;E3:60%蚯蚓粪+40%园土;E4:80%蚯蚓粪+20%园土),以未添加蚯蚓粪的正常园土为对照,研究添加不同比例的蚯蚓粪对蓝果忍冬植株生长发育、果实品质及土壤微生物的影响,旨在为蓝果忍冬的精确施肥提供科学依据,主要研究结果如下:(1)添加不同比例蚯蚓粪对蓝果忍冬植株影响不同,40%蚯蚓粪处理下蓝果忍冬在各个时期都生长良好,株高明显高于其它处理,在成熟期达到69.47cm,是对照的1.14倍;另外在此处理下新生枝条最多;20%蚯蚓粪处理下在各个时期茎粗值最大,在成熟期达到9.1mm,高于对照5.8%。(2)不同比例蚯蚓粪对蓝果忍冬果实重量、大小影响不同,40%蚯蚓粪处理下蓝果忍冬平均单果重达到1.29g,比对照增加18.66%,果实平均横径达到27.09mm,比对照增加15.03%,纵径达到9.27mm,比对照增加10.75%。(3)不同比例蚯蚓粪配比对蓝果忍冬果实品质影响不同,20%与80%处理下蓝果忍冬可滴定酸含量明显低于对照,分别是对照的70.34%和64.57%;40%处理可显着增加蓝果忍冬可溶性糖含量,在成熟时达到9.2%,是对照的1.18倍;20%处理下蓝果忍冬的可溶性固形物质含量最高,其它处理之间差异不显着,但都高于对照。(4)添加40%蚯蚓粪能显着提高蓝果忍冬的座果率和产量,座果率达到69%,是对照的1.64倍,平均单株产量达到26.26g,是对照的1.42倍,座果率和平均单株产量都随蚯蚓粪比例的增加呈现出先升高后下降的趋势。(5)添加蚯蚓粪可增强蓝果忍冬根际土壤酶活性,在整个生长时期,蔗糖酶活性呈现出先增强后平稳的趋势;脲酶活性呈现出先增强后降低的趋势,转色期时,各个处理达到峰值;过氧化氢酶活性呈现出持续增强的趋势;磷酸酶活性在盛花期最强,随后呈现出持续下降的趋势。80%处理下蔗糖酶、脲酶、过氧化氢酶、磷酸酶活性最强,在成熟期分别是对照的1.9、2.45、1.21、1.86倍。(6)40%处理下蓝果忍冬根际土壤细菌、真菌、放线菌数量最多,达到5.29×10~7CFU·g~(-1),7.24×10~4CFU·g~(-1),7.78×10~6CFU·g~(-1),分别是对照的1.8、2.1、1.7倍。叁种微生物数量均随蚯蚓粪比例的增加呈现出先增多后减少的趋势,80%处理下细菌数量低于对照,是对照的87.76%,其他处理下叁种微生物的数量均高于对照,且各个处理之间差异显着。(7)蓝果忍冬根际土壤微生物生物量碳氮随蚯蚓粪比例的增加而增加,生物量碳氮具有相同的变化趋势,80%处理下均达到最大值,分别为158mg·kg~(-1)和85.33mg·kg~(-1),是对照的3.95和4.3倍。各个处理之间差异显着。(本文来源于《东北农业大学》期刊2019-06-01)

谢佳璇,张妍,秦栋,刘佩,刘化禹[4](2019)在《蓝果忍冬不同发育时期叶片类黄酮化合物及抗氧化活性分析》一文中研究指出【目的】探究蓝果忍冬主栽品种‘L4’、‘Berel’在果实采摘后不同发育时期叶片中的类黄酮种类、含量及抗氧化活性的变化,比较两品种之间的差异,确定蓝果忍冬叶片的最佳采收时期,为蓝果忍冬叶片的合理开发利用提供科研依据。【方法】以果实采摘后不同发育时期(06-09-08-06)的‘L4’、‘Berel’叶片为试料,采用液相色谱与质谱联用法对不同发育时期2个品种叶片的类黄酮种类及含量进行测定,并测定叶片对DPPH·自由基的清除能力和对铁离子的还原能力(FRAP)。【结果】(1)从蓝果忍冬品种‘L4’叶片中分离鉴定出了11种类黄酮成分;从‘Berel’叶片中分离鉴定出10种类黄酮成分,与‘L4’相比缺少了山奈酚3-O-芸香糖苷。槲皮素苷为‘L4’和‘Berel’叶片中主要的类黄酮化合物,占总类黄酮含量的56%~57%。(2)06-23采摘的‘L4’、‘Berel’叶片中的总类黄酮含量最高,分别为37.21和20.61 mg/g,显着高于其他时期;同时该时期叶片的抗氧化活性均显着高于其他时期,‘L4’、‘Berel’对DPPH·自由基的清除能力分别为51.90,25.07 mg/g,FRAP分别为125.66,91.73 mg/g。(3)叶片提取物的抗氧化活性与叶片中的总类黄酮含量呈显着正相关。【结论】‘L4’叶片中的类黄酮种类、含量及抗氧化能力均优于‘Berel’,可作为一种天然类黄酮提取的良好来源,06-23是蓝果忍冬叶片的最佳采收期。(本文来源于《西北农林科技大学学报(自然科学版)》期刊2019年11期)

刘化禹,娄爽,秦栋,张妍,谢佳璇[5](2019)在《蓝果忍冬果柄离区形成中内源激素含量与细胞壁相关酶活性的变化特征》一文中研究指出以蓝果忍冬易落果品种‘海参崴’和不易落果品种‘蓓蕾’为试材,制作石蜡切片观察果柄离区的解剖结构,用高效液相色谱法测定果柄离区内源激素含量,并用酶联免疫吸附测定试剂盒测细胞壁相关酶活性,分析蓝果忍冬不同品种果柄离区形成过程中内源激素含量与细胞壁相关酶活性的变化特征,探讨二者与果实脱落的关系。结果表明:(1)‘蓓蕾’果柄离区在整个果实生长期均无明显断裂,‘海参崴’果柄离区在果实成熟期开始断裂,最终仅靠维管束连接。(2)海参崴’和‘蓓蕾’果柄离区激素水平和变化存在明显差异,在果实成熟期‘海参崴’的脱落酸(ABA)和乙烯(ETH)含量高于‘蓓蕾’,而生长素(IAA)和玉米素(ZT)含量低于‘蓓蕾’;在转色期赤霉素(GA3)含量低于‘蓓蕾’。(3)进入果实成熟期后‘海参崴’的纤维素酶(Cx)、β-葡萄糖苷酶(β-glu)活性升高,到转色期后期多聚半乳糖醛酸酶(PG)、果胶甲酯酶(PME)活性达到峰值;在整个果实生长期‘蓓蕾’的Cx活性基本没有变化,PG、PME、β-glu活性在生长早期即达到峰值,进入果实成熟期呈下降趋势。(4)‘海参崴’果柄离区Cx活性与IAA/ABA显着负相关(P<0.05);‘蓓蕾’果柄离区β-glu活性与IAA/ABA显着负相关(P<0.05),其PME活性与ABA含量呈极显着正相关关系(P<0.01)。研究认为,‘海参崴’果实易脱落主要与果实成熟期果柄离区ABA含量增加和IAA含量降低及细胞壁代谢酶Cx和PG活性变化有关,且Cx活性受IAA和ABA相对含量比值的负调节;‘蓓蕾’果柄离区PME活性增强也可以促进其果实脱落,PME活性受ABA含量的变化正向调节。(本文来源于《西北植物学报》期刊2019年01期)

薛晓晓,秦栋,霍俊伟,刘庆帅,刘化禹[6](2018)在《不同植物生长调节剂对蓝果忍冬叶片愈伤组织诱导的影响》一文中研究指出以蓝果忍冬品种"邱雷姆"和"娜雷姆"无菌苗的叶片为外植体,通过添加一种或多种生长调节剂诱导愈伤组织,旨在为蓝果忍冬的组培快繁体系建立奠定基础。结果表明:不同的生长调节剂对蓝果忍冬叶片愈伤组织的诱导不同,单独添加2,4-D(0.5-2mg/L)可有效诱导蓝果忍冬叶片产生愈伤组织,出愈率可达100%;单独添加6-BA和TDZ并不能诱导蓝果忍冬叶片产生愈伤组织;6-BA(1-2mg/L)与2,4-D(0.2、0.5、1.0mg/L)配合使用可改善愈伤组织状态,使绿色致密型愈伤组织增加,愈伤量增多;添加6-BA、IBA、KT组合的叁种生长调节剂,品种邱蕾姆的出愈率和愈伤量好于品种娜蕾姆,叁种添加方式相比较而言,6-BA与2,4-D组合诱导效果相对较好。(本文来源于《中国农业文摘-农业工程》期刊2018年05期)

霍俊伟,薛晓晓,秦栋,刘庆帅,刘化禹[7](2018)在《不同植物生长调节剂对蓝果忍冬叶片愈伤组织诱导的影响》一文中研究指出以蓝果忍冬品种邱雷姆和娜雷姆无菌苗叶片为外植体,添加一种或多种生长调节剂诱导愈伤组织,结果表明,不同生长调节剂对蓝果忍冬叶片愈伤组织诱导影响不同,单独添加2,4-D(0.5~2 mg·L-1)可有效诱导蓝果忍冬叶片产生愈伤组织,出愈率达100%;单独添加6-BA和TDZ无法诱导蓝果忍冬叶片产生愈伤组织;6-BA(1~2 mg·L-1)与2,4-D(0.2、0.5、1.0 mg·L-1)配合使用可改善愈伤组织状态,增加绿色致密型愈伤组织,愈伤量增多;添加6-BA、IBA、KT组合的叁种生长调节剂,品种邱蕾姆出愈率和愈伤量优于娜蕾姆,叁种添加方式比较而言,6-BA与2,4-D组合诱导效果相对较好。研究可为蓝果忍冬组培快繁体系建立奠定基础。(本文来源于《东北农业大学学报》期刊2018年06期)

薛晓晓[8](2018)在《不同生长调节剂对蓝果忍冬组培和再生体系影响的研究》一文中研究指出以蓝果忍冬鲜食品种“邱雷姆”和“娜雷姆”为材料,以休眠芽萌发的带芽茎段为外植体,通过初代培养、继代增殖培养建立了组培快繁体系,以组培无菌苗的叶片、茎段为外植体,通过添加一种或多种生长调节剂诱导愈伤组织、诱导愈伤组织再生不定芽、诱导丛生芽生根建立离体植株再生体系,旨在为蓝果忍冬的苗木快繁、资源保存、生物技术育种等奠定基础。主要结果如下:(1)不同生长调节剂对两个品种增殖培养的影响不同,两品种适用的增殖培养基也不同,邱雷姆增殖系数较高的为处理2:MS+2.0 mg/L 6-BA+0.15 mg/L NAA,增殖系数为5.06,娜雷姆增殖系数较高的为处理7:3/4 MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA增殖系数为5.3。(2)不同的生长调节剂对蓝果忍冬叶片愈伤组织的诱导效果不同,单独添加2,4-D(0.5-2 mg/L)可有效诱导蓝果忍冬叶片产生愈伤组织,出愈率可达100%;单独添加6-BA和TDZ并不能诱导蓝果忍冬叶片产生愈伤组织;6-BA(1-2 mg/L)与2,4-D(0.2、0.5、1.0mg/L)配合使用可改善愈伤组织状态,使绿色致密型愈伤组织增加,愈伤量增多;添加6-BA、IBA、KT组合的叁种生长调节剂,邱雷姆愈伤组织诱导率为60%-100%,娜雷姆诱导率稍低,为54%-95%,且愈伤量也表现为邱雷姆多余娜雷姆。叁种添加方式相比较而言,6-BA与2,4-D组合诱导效果相对较好。(3)6-BA、IBA、KT叁种生长调节剂中,IBA对两个品系茎段愈伤组织诱导都有显着影响,KT对娜雷姆茎段愈伤诱导有显着影响,对邱雷姆茎段愈伤诱导无显着影响,对邱雷姆而言,6-BA比KT的影响力大,6-BA和KT的F值分别为10.188和3.245。对娜雷姆而言,KT比6-BA的作用大,6-BA和KT的F值分别为20.663和33.027。娜雷姆茎段愈伤诱导培养为:MS+6-BA 0.5 mg/L+IBA 0.2 mg/L+KT 1.0 mg/L,诱导率为77%,邱雷姆的茎段愈伤组织诱导培养基为:MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.3 mg/L+KT 0.5 mg/L诱导率为98%。(4)6-BA、IBA、KT组合诱导愈伤组织时,两品种叶片诱导率大于茎段诱导率,叶片愈伤量小于茎段愈伤量,邱雷姆茎段诱导率为49%-98%,叶片诱导率为60%-100%,娜雷姆茎段诱导率为1%-77%,叶片诱导率为54%-95%。茎段和叶片都适合做诱导愈伤组织的外植体,邱雷姆的诱导效果好于娜雷姆。(5)细胞分裂素类在蓝果忍冬愈伤组织的再生过程中发挥主导作用,生长素类起辅助作用,邱雷姆KT的芽诱导效果显着,好于6-BA,娜雷姆6-BA的诱导效果显着,好于KT。邱雷姆KT、6-BA、IBA的F值依次为3.512(p<0.05)、2.681(p>0.05)、0.265(p>0.05),娜雷姆KT、6-BA、IBA的F值依次为7.421(p<0.01)、9.052(p<0.01)、2.755(p>0.05)。两品种愈伤组织芽诱导培养基均可用MS+6-BA 1.5 mg/L+IBA 0.3 mg/L+KT 1.0 mg/L,邱雷姆和娜雷姆不定芽再生频率分别为83%和99%。(6)基本培养基和IBA是诱导生根的主导因素,且基本培养基的影响力大于IBA,NAA为次要因素。邱雷姆生根可选3/4 MS+0.5 mg/L IBA,娜雷姆生根可选:3/4 MS+1.0mg/L IBA。(7)适宜的暗处理时间可以缩短愈伤启动的时间,加快愈伤组织的生长。两品系合适的暗处理时间均为15天。(本文来源于《东北农业大学》期刊2018-06-01)

黄宁[9](2017)在《蓝果忍冬叶片类黄酮成分鉴定及抗氧化活性研究》一文中研究指出蓝果忍冬(Blue honeysuckle),又名蓝靛果,为忍冬科(Caprifoliaceae)忍冬属(Lonicera Linn)多年生落叶小灌木。其叶片对生,椭圆形,生长量大。蓝果忍冬种质资源丰富,因其果实富含花青苷而受到人们的关注,栽培面积也逐年扩大。蓝果忍冬叶片富含类黄酮,其抗氧化活性甚至高于果实,具有很高的研究和利用价值。但是,蓝果忍冬叶片几乎未得到任何重视。每年的修剪期都会剪下大量的叶片,如果能加以利用,不仅可以使叶片废弃物资源化从而增加果农收入,同时还可以补充人们对天然黄酮类保健品日益增长的需求。本研究选择东北农业大学小浆果种质资源圃的20个蓝果忍冬品种(系)不同生长时期的叶片为对象,利用高效液相色谱(HPLC)方法,对其叶片中的类黄酮种类及含量、叶片提取物的抗氧化活性以及叶片类黄酮含量与抗氧化活性的相关性进行了分析。具体研究结果如下:(1)采用HPLC-DAD-MS2从20个蓝果忍冬品种(系)叶片中鉴定出11种类黄酮成分,包括黄酮醇类化合物8种:槲皮素3-O-桑布双糖苷,山奈酚3-O-桑布双糖苷,槲皮素3-O-芸香糖苷,山奈酚3-O-芸香糖苷,山奈酚7-O-芸香糖苷,山奈酚3-O-新橙皮糖,异鼠李素7-O-芸香糖苷,槲皮素3-O-鼠李糖苷;黄酮苷类物质3种:芹黄素7-O-芸香糖苷,香叶木素-3-O-芸香糖苷和香叶木素3-O-葡萄糖苷。其中槲皮素苷为主要的黄酮苷,占黄酮苷总量的一半以上。(2)蓝果忍冬不同品种的叶片中的黄酮苷类物质的数量存在差异。在蓝果忍冬品种‘A2’中检测到11种黄酮苷,‘HSY-2’仅检测到6种,大多数品种叶片中黄酮苷类化合物在8~9种之间。(3)不同品种叶片黄酮苷类物质组成、含量及变化趋势不同,最佳采收期不同,所选3个代表性品种当中‘蓝鸟’适宜6月上旬采收,‘HSY-6’和‘A1’最佳采收时期为6月下旬。(4)分析20个品种的叶片在不同生长发育时期的抗氧化活性,综合DPPH法、FRAP法两种评价方法得出,6月上旬和7月下旬所采集的叶片抗氧化能力较强,显着高于9月下旬所采集的叶片。其中抗氧化活性较高的品种为‘光辉’、‘HSY-2’、‘HSY-6’和‘日本-5’,是天然抗氧化剂的良好来源。相关性分析表明蓝果忍冬叶片的类黄酮含量与抗氧化活性呈显着正相关。叶片类黄酮含量越高,抗氧化活性越强。(本文来源于《东北农业大学》期刊2017-06-01)

马旿晛[10](2016)在《优质蓝果忍冬(Lonicera caerulea L.)授粉品种选配研究》一文中研究指出蓝果忍冬(Lonicera cearulea Linn.)属忍冬科(Caprifoliaceae)、忍冬属(Lonicera),蓝果忍冬富含营养物质,包含丰富的维生素、氨基酸。蓝果忍冬的浆果可以加工成多种食品、饮品,并且可以提取天然的色素。蓝果忍冬属于异花授粉类果树,自花结实率比较低。目前,在蓝果忍冬生产中普遍存在果园栽植品种单一,果园配植品种花期相遇时间短,蓝果忍冬不能有效的相互作为授粉树等问题,这些因素不同程度的影响了蓝果忍冬产量的提升。在果园中,配植适合授粉树组合是蓝果忍冬优质高效生产的重要技术之一。本试验选用了蓝果忍冬主栽品种蓓蕾、一些国外引进的蓝果忍冬品种及其他品种和品系作为实验材料,于2015年春季对各品种蓝果忍冬的花期进行调查,4月下旬采集各品种花粉,对花粉的活性、亲和力进行测定,以花期与蓓蕾相遇的品种和蓓蕾进行相互授粉,调查生理坐果率,测定授粉后得到果实的品质。本研究的目的是选出花粉活力较强,花粉萌发率高,花粉亲和力高的适宜做授粉树的品种,通过研究花粉特性及授粉对蓓蕾品质的影响,选出最适宜与蓓蕾互相作为授粉树的品种。研究取得的主要结果如下:1、实验对26个蓝果忍冬品种的花期进行调查,在供试品种中,与主栽品种蓓蕾盛花期相遇的品种是:A1、A2、A3、A4、A5、HL-2、HL-3、HL-4、HL-6、HL-9、HL-10、HL-11、HL-12、MC-1、MC-3、CBS-2、CBS-3、CBS-4、CBS-6、L4、L5等。2、对各品种的自花坐果率进行调查得出,所有品种自花坐果率在0~8%之间,说明蓝果忍冬自交不亲和,不适宜栽种单一品种,应配置适宜的授粉树。3、通过对各个品种的花粉萌发率的测定,蓝鸟和A1的花粉萌发率最高均达到90%以上;萌发率在85%以上的有A1、A4、蓝鸟、HL-10、L4、L5等。不同品种的花粉,在培养6h、12h、16h叁个时间点进行观察记录,进行花粉萌发率随时间变化的比较,得出不同品种的花粉生活力有差距,同一品种的生活力也与培养的时间长短呈正相关。4、常温下贮藏蓝果忍冬的花粉在两个月后几乎完全丧失活力;在4℃条件下,花粉4个月后活力大概在15%左右;在-20℃条件下,6个月后活力完全丧失。通过花粉的贮藏性可以将花期早于蓓蕾的品种花粉进行贮藏待到蓓蕾盛花期时进行授粉,也可以将此应用于大量人工授粉上。5、通过实验调查各个品种对蓓蕾授粉后的坐果率得出:坐果率在3-96%之间,其中坐果率最高的品种是蓝鸟,坐果率高达96%。坐果率在45%以上的品种有A1、A2、A3、A4、A5、HL-10、MC-1、MC-3、CBS-4、CBS-6,坐果率最低的品种HL-5和HL-9。A1与A3的混合花粉对蓓蕾授粉的坐果率高于A1、A3单独对蓓蕾授粉的坐果率,说明同时栽种多种授粉树比栽种一种授粉树更能提高果实产量。蓝鸟、A1、A3、MC-1等4个品种的花期与蓓蕾蓝果忍冬的花期相遇的时间长,花量大,出粉量多,花粉的萌发率较高,授粉后蓝果忍冬坐果率在80%以上,果实的单果重较大,分别为:0.74g、0.79g、0.91g、0.82g;可滴定酸含量较低,分别为:2942.64 mg/100g、3432.72 mg/100g、3587.31 mg/100g、3259.85 mg/100g,可溶性糖含量较高,分别为:9364.78、9508.68、7979.92、8346.52。得出以上4个品种适宜作为蓓蕾的授粉树。6、试验表明,不同品种对蓓蕾授粉,对果实的单果重、可溶性固形物的含量、可滴定酸含量、硬度等的内在品质均有显着影响,可能存在花粉直感效应。(本文来源于《东北农业大学》期刊2016-12-01)

蓝果忍冬论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

蓝果忍冬(Lonicera caerulea L.)具有极高的花色苷含量,是提取可食用天然色素的良好资源,更是极具发展潜力的经济保健型果实。蓝果忍冬果实着色是花色苷积累的过程,bHLH蛋白是调控着花色苷生物合成的重要转录因子。然而,关于蓝果忍冬花色苷合成的分子调控机理未见有研究报道。研究蓝果忍冬花色苷合成的调控机制,既能为培育保健型植物品种提供理论基础,同时也可为植物抗逆分子机理的研究提供参考。本研究以蓝果忍冬品种“蓓蕾”为材料,通过转录组测序、生物信息学分析、构建LcTT8-EGFP绿色荧光载体和pBI121-LcTT8过表达载体、转基因、亚细胞定位、实时荧光定量PCR、ELISA酶联免疫吸附、pH示差法、高效液相色谱法(HPLC)等方法,筛选出了参与蓝果忍冬果实花色苷生物合成的bHLH转录因子LcTT8,并进行了基因功能验证。主要研究结果如下:(1)蓝果忍冬bHLH转录因子家族鉴定分析通过NCBI CDD、MEME方法结合蓝果忍冬bHLH家族进化树分析了蓝果忍冬bHLH转录因子蛋白保守结构域和保守基序进行鉴定,结果表明:有43个bHLH转录因子都包含bHLH家族保守结构域HLH(PF00010)或bHLH-MYC_N(PF14215)。几乎所有43个蓝果忍冬bHLH蛋白都含有Motif 1或Motif 2,Motif 1和Motif 2共同构成了蓝果忍冬bHLH转录因子的basic helix-loop-helix保守结构域。并且,研究结果表明,含有类似保守基序的bHLH转录因子之间具有更近的进化关系。(2)蓝果忍冬花色苷生物合成相关的bHLH转录因子的筛选通过blastx将43条蓝果忍冬bHLH家族序列比对到蛋白数据库Nr、Swiss-Prot、KEGG、COG(evalue<0.00001),得到这些序列的蛋白功能注释信息,结果表明:CL484.Contig3_All、Unigene21245_All、Unigene38564_All和Unigene7373_All与花色苷生物合成相关。将43条蓝果忍冬bHLHs和225条拟南芥bHLHs合并构建进化树预测蓝果忍冬转录因子的功能,结果表明:蓝果忍冬bHLHs可分成14个亚族,CL484.Contig3_All和Unigene21245_All聚类在主要调控花色苷合成的Ⅲ f亚族。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析了43个蓝果忍冬bHLHs基因在不同组织部位、不同果实发育期的表达模式,结果表明:果实中的CL484.Contig3_All表达量显着高于根、茎、叶、花;且当果实发育到转色期时CL484.Contig3_All表达量剧烈增高。最终筛选出蓝果忍冬果实中调节花色苷生物合成的转录因子CL484.Contig3_All。(3)蓝果忍冬TT8基因的克隆和生物信息学分析通过对蓝果忍冬转录组数据装配得到CL484.Contig3_All的CDs区,命名为LcTT8。将LcTT8基因与克隆载体连接,转入大肠杆菌测序,得到LcTT8核苷酸序列长度为2049bp。LcTT8蛋白质为酸性蛋白(等电点pI为5.09),含有682个氨基酸,分子量为75928.12。预测LcTT8定位在细胞核,可能包含2个蛋白跨膜螺旋结构域,无信号肽位点。同时对LcTT8进行了蛋白叁维结构建模预测。将LcTT8与其他植物TT8进行多重序列比对,发现它们具有相似的保守序列。进化树显示蓝果忍冬TT8和甜樱桃(Prunus avium)TT8进化关系最近。(4)蓝果忍冬TT8的亚细胞定位和基因表达分析利用拟南芥原生质体转化法进行了亚细胞定位分析,在转入空载体的拟南芥原生质体中核、膜、质均可见明亮的绿色荧光,而在转入LcTT8-EGFP融合表达载体绿色荧光只富集在细胞核中。通过qRT-PCR分析LcTT8在蓝果忍冬不同组织和不同果实时期的表达模式,结果发现,LcTT8在根、茎、叶、花中表达量低,在果实中表达量极高,是其他部位的4-23倍;果实发育期间,LcTT8表达量先增后减,在果实转色初期达到峰值。(5)蓝果忍冬TT8基因的功能验证构建pBI121-LcTT8重组载体,利用烟草遗传转化体系对LcTT8基因进行功能验证,结果表明,LcTT8转基因烟草的叶片、种皮颜色出现不同程度的加深。pH示差法测量花色苷含量发现,转基因烟草叶片的花色苷含量上升。通过对LcTT8转基因烟草叶片的花色苷合成基因CHS、CHI、F3H、DFR、ANS进行qRT-PCR分析,结果表明,相比野生烟草,LcTT8转基因烟草叶片的F3H、DFR、ANS基因表达量大幅上调。检测LcTT8转基因烟草叶片花色苷合成相关酶活性,结果表明,LcTT8转基因烟草的DFR、ANS酶活性上调最为明显。通过花色苷含量检测和HPLC分析花色苷组分,结果表明,转基因烟草叶片花色苷含量比野生烟草高,且主要是矢车菊素-3-O-葡萄糖苷高于野生烟草。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

蓝果忍冬论文参考文献

[1].谢佳璇.蓝果忍冬果实和叶片多酚的鉴定及体外活性分析[D].东北农业大学.2019

[2].刘化禹.蓝果忍冬花色苷合成bHLH转录因子筛选及LcTT8功能验证[D].东北农业大学.2019

[3].郭良川.蚯蚓粪对蓝果忍冬果实品质及根际微生物影响的研究[D].东北农业大学.2019

[4].谢佳璇,张妍,秦栋,刘佩,刘化禹.蓝果忍冬不同发育时期叶片类黄酮化合物及抗氧化活性分析[J].西北农林科技大学学报(自然科学版).2019

[5].刘化禹,娄爽,秦栋,张妍,谢佳璇.蓝果忍冬果柄离区形成中内源激素含量与细胞壁相关酶活性的变化特征[J].西北植物学报.2019

[6].薛晓晓,秦栋,霍俊伟,刘庆帅,刘化禹.不同植物生长调节剂对蓝果忍冬叶片愈伤组织诱导的影响[J].中国农业文摘-农业工程.2018

[7].霍俊伟,薛晓晓,秦栋,刘庆帅,刘化禹.不同植物生长调节剂对蓝果忍冬叶片愈伤组织诱导的影响[J].东北农业大学学报.2018

[8].薛晓晓.不同生长调节剂对蓝果忍冬组培和再生体系影响的研究[D].东北农业大学.2018

[9].黄宁.蓝果忍冬叶片类黄酮成分鉴定及抗氧化活性研究[D].东北农业大学.2017

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蓝果忍冬论文-谢佳璇
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