功能性二聚体论文-彭鹏

功能性二聚体论文-彭鹏

导读:本文包含了功能性二聚体论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:TREK-1,TREK-2,串联二聚体,双电极电压钳

功能性二聚体论文文献综述

彭鹏[1](2017)在《双孔钾离子通道TREK-1和TREK-2功能性串联二聚体载体的构建》一文中研究指出目的:双孔钾离子通道形成二聚体形式发挥功能的特性导致针对其研究的任何操作都会涉及两个亚基,给研究带来诸多不便。本研究旨在探讨分别在两分子双孔钾离子通道TREK-1和TREK-2间加入柔性多肽连接构建串联二聚体载体的可行性。方法:利用PCR技术在两个单体TREK-1分子之间加入柔性多肽连接,构建其串联二聚体载体(pGH19-tdTREK-1)。将上述载体在体外转录成cRNA并显微注射至非洲爪蟾卵母细胞,培养2448小时后采用双电极电压钳技术记录电流。观察细胞外钡离子和不同pH值外液对该串联二聚体通道表达的影响,并与天然二聚体通道的反应相比较。用上述方法构建TREK-2串联二聚体载体(WT-WT),观察2-氨基乙基联苯基硼酸酯(2-APB)和胞外酸(pH0)对TREK-2串联二聚体载体通道电流的影响。用蛋白印迹法检测TREK-2和TREK-2串联二聚体在爪蟾卵母细胞和HEK 293细胞的蛋白表达。结果:串联二聚体TdTREK-1可在爪蟾卵母细胞中高效表达,该通道形成的电流可被胞外钡离子抑制,也可被胞外液酸化所抑制,并且该串联二聚体通道对这些胞外刺激因素的反应程度与天然二聚体相似。TREK-2串联二聚体载体的电流和药理学特性也与TREK-2天然二聚体相似,且表达出的蛋白确实为串联的二聚体,该二聚体未被降解为单分子形式。结论:人为加入柔性多肽连接序列构建TREK-1功能性串联二聚体和TREK-2功能性串联二聚体载体通道并不影响通道的表达及特性,证明该实验方案可行。这将为我们将来操作单个亚基,进而深入研究TREK-1、TREK-2的结构与功能打下良好的基础。(本文来源于《中国人民解放军医学院》期刊2017-05-25)

彭鹏,卓仁恭,郑建全,魏晓莉,马晓芸[2](2016)在《双孔钾离子通道TREK-1功能性串联二聚体载体的构建》一文中研究指出目的探讨在双孔钾离子通道(K2P)TREK-1(TWIK related K+channel 1)分子间加入柔性linker构建串联二聚体载体的可行性。方法利用PCR技术在两个单体TREK-1分子之间加入一个linker,构建串联二聚体载体(p GH19-td TREK-1)。将上述载体体外转录成cRNA并显微注射至爪蟾卵母细胞,培养24~48 h后采用双电极电压钳技术记录电流。观察胞外钡离子和不同p H值外液对该串联二聚体通道表达的影响,并与天然二聚体通道的反应相比较。结果串联二聚体Td TREK-1可在爪蟾卵母细胞中高效表达,该通道形成的电流可被胞外钡离子抑制,也可被胞外液酸化所抑制,而该串联二聚体通道对这些胞外刺激因素的反应程度与天然二聚体相似。结论人为加入柔性linker序列构建串联二聚体TREK-1通道并不影响通道的表达及门控特性,证明该实验方案可行。这将为操作单个亚基,进而深入研究TREK-1的结构与功能打下良好的基础。(本文来源于《军事医学》期刊2016年09期)

功能性二聚体论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的探讨在双孔钾离子通道(K2P)TREK-1(TWIK related K+channel 1)分子间加入柔性linker构建串联二聚体载体的可行性。方法利用PCR技术在两个单体TREK-1分子之间加入一个linker,构建串联二聚体载体(p GH19-td TREK-1)。将上述载体体外转录成cRNA并显微注射至爪蟾卵母细胞,培养24~48 h后采用双电极电压钳技术记录电流。观察胞外钡离子和不同p H值外液对该串联二聚体通道表达的影响,并与天然二聚体通道的反应相比较。结果串联二聚体Td TREK-1可在爪蟾卵母细胞中高效表达,该通道形成的电流可被胞外钡离子抑制,也可被胞外液酸化所抑制,而该串联二聚体通道对这些胞外刺激因素的反应程度与天然二聚体相似。结论人为加入柔性linker序列构建串联二聚体TREK-1通道并不影响通道的表达及门控特性,证明该实验方案可行。这将为操作单个亚基,进而深入研究TREK-1的结构与功能打下良好的基础。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

功能性二聚体论文参考文献

[1].彭鹏.双孔钾离子通道TREK-1和TREK-2功能性串联二聚体载体的构建[D].中国人民解放军医学院.2017

[2].彭鹏,卓仁恭,郑建全,魏晓莉,马晓芸.双孔钾离子通道TREK-1功能性串联二聚体载体的构建[J].军事医学.2016

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