异源性表达论文-虞夏清,王盼乔,翟于菲,朱早兵,赵勤政

异源性表达论文-虞夏清,王盼乔,翟于菲,朱早兵,赵勤政

导读:本文包含了异源性表达论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:甜瓜属,多倍体化,叶片,延迟成熟

异源性表达论文文献综述

虞夏清,王盼乔,翟于菲,朱早兵,赵勤政[1](2018)在《甜瓜属异源多倍体化引起叶片延迟成熟及部分同源基因的冗余与非加性表达》一文中研究指出异源多倍体化是植物进化的主要动力之一,是研究植物进化,丰富生物多样性的重要生物过程。黄瓜遗传基础狭窄,利用黄瓜(Cucumis sativus)与其近缘野生种酸黄瓜(C.hystrix)之间的远缘杂交和基因组加倍创制的甜瓜属人工异源四倍体(C.×hytivus)是拓宽黄瓜遗传基础的重要材料,同时也是研究异源多倍体化相关机制的理想模型。本研究对甜瓜属人工异源四倍体及其亲本进行研究,发现甜瓜属人工异源四倍体存在叶片延迟成熟的特异表型,表现在叶面积与光合能力增长缓慢、叶绿素与类胡萝卜素含量偏低以及库-源转化异常等方面。同时,该人工异源四倍体的叶绿体排列松散,内部结构紊乱,可见甜瓜属的多倍体化事件对叶绿体的正常发育造成了显着影响。在该人工异源四倍体中,叶绿素的生物合成关键基因HEMA1、HEME2和POR表现为较亲本显着下调表达的非加性表达特征,推测叶绿素生物合成受阻为其叶绿素缺乏的主要因素。基因克隆证实来自双亲的部分同源基因在异源四倍体中均得以保留,并在异源四倍体中存在融合了双亲基因序列的HEMA1嵌合基因。本研究在一定程度上揭示了甜瓜属异源多倍体化产生表型变异的分子机理,对于不同染色体基数的物种间异源多倍体的创制与应用提供了参考。(本文来源于《中国园艺学会第八届黄瓜学术研讨会暨新品种展示观摩活动会议手册》期刊2018-10-12)

史钰芳[2](2017)在《青蒿素对异源性表达于爪蟾卵母细胞的人超极化激活环核苷酸门控阳离子通道的抑制作用》一文中研究指出青蒿素是从中药青篙中提取的有过氧基团的倍半萜内酯药物[10-12],作为一种有效的抗疟药物已被长期并广泛用于临床,其药理及毒理作用亦被广泛研究。鉴于在治疗疟疾患者中观察到的较高的药物安全性,青蒿素亦被用于治疗其他疾病,如感染,肿瘤,炎症,自身免疫性疾病、白血病、局麻剂、心律失常等。青蒿素能阻断豚鼠心室肌细胞外向整流钾电流、增加豚鼠心肌细胞电压依赖性钙内流及改善离子通道活性[13],青蒿素能以浓度及时间依赖方式阻断电压门控钠通道、内向整流钾电流及钙通道[14-16],进而发挥其抑制动作电位复极化和去极化的作用。青蒿素可能通过上述机制发挥抗心律失常作用,但潜在机制尚不十分清楚。HCN通道编码If电流,If电流由Na+(主要)、K+及少量Ca2+(具体分子作用不详)介导。已被证明在多种动物心肌肥厚模型中If和HCN mRNA的表达上调[17-20]。Stillitano等报道[21]在心衰患者的心房和心室中HCN2和HCN4通道的mRNA和蛋白水平均成倍数增长。If密度的增长能明显升高心室肌细胞发生异位的、类似起搏功能的动作电位的发生率,从而导致心律失常[22-24]。因此我们推断,在疾病状态中If的过度表达可能在心律失常发生机制中起关键作用。青蒿素是否对hHCN通道电流有作用尚无临床报道。在本研究中,将人HCN1,2,4异源性表达于爪蟾卵母细胞中,通过双电极电压钳技术观察青蒿素对hHCN通道的作用。研究发现,青蒿素能以浓度和使用依赖性方式减少hHCN通道电流。其电药理学特性与通道的“开放状态”抑制剂一致。青蒿素能有效阻断hHCN通道,其抗心律失常作用机制可能与其能阻滞If电流有关。(本文来源于《武汉大学》期刊2017-09-01)

杨洁,贺松[3](2014)在《乳酸乳球菌Nisin抗性基因的异源性表达和活性研究》一文中研究指出目的评估乳酸乳球菌Nisin抗性基因在德氏乳杆菌保加利亚亚种的表达活性,为建立食品级筛选标记做准备。方法将新鲜牛奶接种于含有400μg/ml乳酸链球菌素的M17平板上,在分离的菌株中筛选乳酸乳球菌,同时提取其基因组DNA和质粒DNA,根据已公布的Nisin抗性基因序列设计一对引物,以提取的基因组DNA和质粒DNA为模板进行PCR扩增,产物进行电泳分析。将目的基因插入到大肠杆菌乳杆菌穿梭质粒—pMG36e中,并在德式乳杆菌保加利亚亚种中观察目的基因的表达活性及其作为筛选标记的活性。结果成功筛选出对Nisin具有抗性的乳酸乳球菌,进行目的基因扩增后成功将目的基因转化到L6032中,并表达出Nisin抗性。结论在德式乳杆菌保加利亚亚种中成功克隆及表达出Nisin抗性基因。(本文来源于《实验与检验医学》期刊2014年04期)

樊庆[4](2008)在《大肠癌中活化凝血因子Ⅶ的异源性表达及其与大肠癌转移关系的研究》一文中研究指出近年来的研究显示,外源性凝血机制与很多的病理过程密切相关,这些病理过程包括炎症反应,动脉粥样硬化,肿瘤的生成生长和转移等。本实验室经过多年研究发现并证明了TF在大肠癌组织中的表达以及TF/FⅦa促进的大肠癌肝转移,增强大肠癌细胞在体和体外的侵袭能力。先前的实验多数都着眼TF/FⅦa复合分子当中的TF的研究。本实验则针对该复合分子中的另一重要元素FⅦa,发现了FⅦa在大肠癌当中的肝外异源性表达,并且证明了其表达情况和大肠癌的肝转移,淋巴结转移密切相关。同时发现缺氧可以诱导FⅦa表达的上调。目的:研究大肠癌组织和大肠癌肿瘤细胞系中FⅦ的异源性表达情况,进一步探讨这种异源性表达和大肠癌肿瘤肝转移、淋巴结转移的关联性,研究缺氧对于大肠癌肿瘤细胞系中FⅦ异源性表达的影响。材料与方法:以我院新近(2006年1月至2007年6月间)手术切除的大肠癌肿瘤标本和同一病例的大肠正常粘膜共45例,以及大肠癌细胞系LoVo SW-480 HT-29为研究对象。通过RT-PCR方法首先检验FⅦmRNA在大肠癌组织和细胞系中的是否有异源性表达,进一步通过实时定量RT-PCR(Real-Time RT-PCR)方法检测FⅦmRNA在不同Dukes分期以及淋巴结转移情况下的大肠癌组织当中的表达量的差异性。通过免疫组织化学方法检测FⅦ在大肠癌组织当中的异源性合成。并通过Western-Blot方法检测FⅦ在不同Dukes分期的大肠癌组织当中合成的差异。从细胞学水平检测普通培养条件和缺氧(O2<1%)条件培养24小时FⅦ在叁种大肠癌肿瘤细胞中表达量的变化。结果:RT-PCR发现在大肠癌组织和叁种大肠癌肿瘤细胞当中均有表达,而在正常粘膜当中没有表达。实时定量RT-PCR(Real-Time RT-PCR)证明了在不同的Dukes分期的大肠癌肿瘤组织当中的FⅦ表达存在差异,从A期到D期,表达量逐渐提高,尤其是D期与其他各期存在明显的差异。有淋巴结转移组的大肠癌组织当中的FⅦ表达量也高于无淋巴结转移组,且差异具有统计学差异。缺氧培养24小时后FⅦ在叁种大肠癌细胞当中的表达量均升高,且具有统计学差异。结论:大肠癌组织当中和大肠癌细胞当中存在异源性的活性凝血因子ⅦmRNA的表达和蛋白的合成;大肠癌组织当中的FⅦ表达量和肿瘤的Dukes分期以及淋巴结的转移密切相关,可能具有促进大肠癌肿瘤的侵袭和转移能力,但与淋巴结转移数目无关;缺氧可以上调大肠癌细胞系中FⅦ的表达量。(本文来源于《北京大学》期刊2008-04-01)

刘丹妮[5](2008)在《老年大鼠HCN4质粒在HEK293细胞异源性表达后电流特征的实验研究》一文中研究指出心脏节律的形成和维持依赖于起搏细胞动作电位4相自动除极化。在动作电位(AP)结束时,心脏起搏细胞去极化使膜电位逐渐增高接近新动作电位启动的阈值,产生周而复始的电活动。作为组织自动除极最主要电流之一,起搏电流(pace maker current,If)无论在自律细胞的起搏[1],还是工作肌细胞异位节律增高方面均起着关键性作用。编码If通道的基因家族在鼠和人类已经被克隆[2,3],分别是HCN1~HCN4,超极化激活环核苷酸门控阳离子通道(HCN)基因是心脏正常起搏活动至关重要的分子基础,起博电流表现为广泛的区域电压依赖性,心脏主要表达HCN2和HCN4[4],在窦房结HCN含量最高的是HCN4占绝对优势的亚型,占总HCN mRNA的80%以上[5,6,7]。本研究旨在创新性的建立系统、简单、适用异源性表达系统,利用全细胞膜片钳技术研究克隆HCN4亚型电生理的特征,明确它对起搏电流(If)的贡献,探讨起搏电流与老年阵发性房颤(PAF)异位起源点的内在联系,揭示If在老年PAF启动中的作用。本课题的目的在于寻找老年PAF起源点产生的机制,为从源头阻断老年PAF奠定理论基础,并为以后药物干预提供新靶点,对于提高老年PAF治愈率,降低病死率将有重要的实用价值。本研究包括以下叁个章节,分述如下:第一章起搏通道HCN4质粒的构建及鉴定目的构建HCN4基因和携带绿色荧光蛋白基因(GFP)标记的质粒表达载体pTracer-HCN4-GFP。方法回收质粒DNA片段与载体连接,重组质粒经转化、筛选、提取、鉴定后进行序列测定。同时质粒经双酶切鉴定为目的基因片段。结果成功构建pTracer-HCN4真核表达载体。结论通过酶切鉴定和测序得到证实,起搏通道HCN4基因转入质粒pTracer-CMV2。第二章起搏通道HCN4质粒的转染HEK293细胞进行蛋白mRNA表达目的观察起搏通道HCN4质粒经脂质体瞬时转染细胞进行蛋白表达。方法HCN4质粒在传代培养的HEK293细胞中瞬时转染,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染细胞HCN4基因表达。结果1.在HEK293细胞中脂质体介导mHCN4基因转染成功。2.瞬时转染mHCN4后6~8h,荧光显微镜观察:可见转染细胞的胞核和胞浆区均有GFP表达,发出明亮的绿光;细胞核内表达明显,细胞膜表达为主,核周区也有表达。3.采用RT-PCR方法,扩增出HCN4片段,PCR产物经琼脂糖凝胶电泳分析观察到与预期大小一致的DNA片段。结论脂质体转染后24h,RT-PCR方法和绿色荧光标记基因检测到目的基因及其蛋白的表达,转染后48h较24h蛋白表达有增加的趋势。第叁章HCN4质粒在HEK293细胞异源性表达后的电流记录目的观察应用含目的基因HCN4和携带绿色荧光蛋白基因(GFP)标记的质粒表达载体pTracer-HCN4-GFP进行共转染,结合全细胞膜片钳技术记录转染细胞后mHCN4通道电流的特征。方法瞬时转染HEK293细胞行全细胞膜片钳记录。结果记录到一系列超极化内向离子流,该电流呈电压、时间依赖性,没有明显的失活,在-150mV时电流幅值为(540±24.1)pA,半最大激活电位(V1/2)为(-105.7±12.0)mV,稳态激活曲线斜率(k)为-15.7mV,HCN4电流翻转电位为(-84.0±7.9)mV。结论(1)成功构建起搏通道HCN4基因的细胞模型。(2)转染mHCN4基因的HEK293细胞在全细胞膜片钳记录到超极化阳离子电流,加入2mmol/LCsCl后电流几乎完全被阻断提示HCN4质粒转染HEK293细胞不仅有蛋白表达,而且具有起搏通道的功能。(本文来源于《宁夏医学院》期刊2008-04-01)

刘晓燕,郑建全[6](2005)在《异源性表达载体——爪蟾卵母细胞的内源性离子通道》一文中研究指出作为异源性表达载体,非洲爪蟾卵母细胞用于各种蛋白的表达,包括受体、离子通道、转运体等,为研究所表达蛋白的结构、功能及药理学特性提供了重要的手段,已在生命科学研究领域内得到了广泛的应用。本文就近年来对爪蟾卵母细胞内源性离子通道的研究进展作一综述,以期对全面、客观的解释和评价爪蟾卵母细胞所表达的异源性离子通道的研究结果提供帮助。(本文来源于《军事医学科学院院刊》期刊2005年02期)

王水良,贺智敏,朱建华,侯德富,陈主初[7](2004)在《人CYP450 2E1异源性表达模型的建立及底物的表达诱导作用》一文中研究指出目的 :探讨化学致癌物二亚硝基哌嗪 (DNP)对人CYP2E1异源表达的诱导作用。方法 :脂质体介导法将外源人CYP2E1cDNA导入NIH 3T3细胞 ,G4 18筛选后挑取克隆 ,Southernblot鉴定外源基因的整合 ,用不同浓度乙醇和DNP处理阳性克隆 ,RT -PCR和Westernblotting检测各组细胞CYP2E1表达水平。结果 :获得二个具有外源基因CYP2E1cDNA整合及稳定表达的细胞克隆 ;随着乙醇和DNP处理浓度的提高 ,细胞CYP2E1mRNA和蛋白质水平的表达增强。结论 :DNP与乙醇能稳定诱导CYP2E1异源表达 ,其作用可能与其mRNA转录增强有关 ;DNP致癌可能与CYP2E1对其原位代谢活化相关。(本文来源于《中国病理生理杂志》期刊2004年02期)

李银聚,侯玉泽,赖良学,赵君,金宁一[8](2000)在《异源β-Casein基因启动子调控下的t-PAcDNA在兔乳腺中的暂性表达》一文中研究指出β-酪蛋白 (β-Casein)是哺乳动物乳汁中主要的蛋白质 ,其基因 5′侧翼调控区常作为乳腺定位表达的调控序列。表达载体 p SVL-βr-PA和 p SVL-βb-PA分别含有 1 .0 kb的大鼠β-Casein和 0 .6kg的牛β-Casein基因调控序列及 t-PAc DNA。采用基因直接注射方法将两种表达载体分别注入家兔乳腺中。溶圈试验结果显示 ,两种表达载体均能在兔乳腺细胞中得到表达 ,表达水平没有明显差异(本文来源于《江苏农业研究》期刊2000年01期)

异源性表达论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

青蒿素是从中药青篙中提取的有过氧基团的倍半萜内酯药物[10-12],作为一种有效的抗疟药物已被长期并广泛用于临床,其药理及毒理作用亦被广泛研究。鉴于在治疗疟疾患者中观察到的较高的药物安全性,青蒿素亦被用于治疗其他疾病,如感染,肿瘤,炎症,自身免疫性疾病、白血病、局麻剂、心律失常等。青蒿素能阻断豚鼠心室肌细胞外向整流钾电流、增加豚鼠心肌细胞电压依赖性钙内流及改善离子通道活性[13],青蒿素能以浓度及时间依赖方式阻断电压门控钠通道、内向整流钾电流及钙通道[14-16],进而发挥其抑制动作电位复极化和去极化的作用。青蒿素可能通过上述机制发挥抗心律失常作用,但潜在机制尚不十分清楚。HCN通道编码If电流,If电流由Na+(主要)、K+及少量Ca2+(具体分子作用不详)介导。已被证明在多种动物心肌肥厚模型中If和HCN mRNA的表达上调[17-20]。Stillitano等报道[21]在心衰患者的心房和心室中HCN2和HCN4通道的mRNA和蛋白水平均成倍数增长。If密度的增长能明显升高心室肌细胞发生异位的、类似起搏功能的动作电位的发生率,从而导致心律失常[22-24]。因此我们推断,在疾病状态中If的过度表达可能在心律失常发生机制中起关键作用。青蒿素是否对hHCN通道电流有作用尚无临床报道。在本研究中,将人HCN1,2,4异源性表达于爪蟾卵母细胞中,通过双电极电压钳技术观察青蒿素对hHCN通道的作用。研究发现,青蒿素能以浓度和使用依赖性方式减少hHCN通道电流。其电药理学特性与通道的“开放状态”抑制剂一致。青蒿素能有效阻断hHCN通道,其抗心律失常作用机制可能与其能阻滞If电流有关。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

异源性表达论文参考文献

[1].虞夏清,王盼乔,翟于菲,朱早兵,赵勤政.甜瓜属异源多倍体化引起叶片延迟成熟及部分同源基因的冗余与非加性表达[C].中国园艺学会第八届黄瓜学术研讨会暨新品种展示观摩活动会议手册.2018

[2].史钰芳.青蒿素对异源性表达于爪蟾卵母细胞的人超极化激活环核苷酸门控阳离子通道的抑制作用[D].武汉大学.2017

[3].杨洁,贺松.乳酸乳球菌Nisin抗性基因的异源性表达和活性研究[J].实验与检验医学.2014

[4].樊庆.大肠癌中活化凝血因子Ⅶ的异源性表达及其与大肠癌转移关系的研究[D].北京大学.2008

[5].刘丹妮.老年大鼠HCN4质粒在HEK293细胞异源性表达后电流特征的实验研究[D].宁夏医学院.2008

[6].刘晓燕,郑建全.异源性表达载体——爪蟾卵母细胞的内源性离子通道[J].军事医学科学院院刊.2005

[7].王水良,贺智敏,朱建华,侯德富,陈主初.人CYP4502E1异源性表达模型的建立及底物的表达诱导作用[J].中国病理生理杂志.2004

[8].李银聚,侯玉泽,赖良学,赵君,金宁一.异源β-Casein基因启动子调控下的t-PAcDNA在兔乳腺中的暂性表达[J].江苏农业研究.2000

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