同种克隆论文-黄贻涛,蔡秀红,张子平,王国栋,邹志华

同种克隆论文-黄贻涛,蔡秀红,张子平,王国栋,邹志华

导读:本文包含了同种克隆论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:杂色鲍,同种移植炎症因子,高温,缺氧

同种克隆论文文献综述

黄贻涛,蔡秀红,张子平,王国栋,邹志华[1](2013)在《杂色鲍同种移植炎症因子1的克隆及其在应激下的表达》一文中研究指出同种移植炎症因子AIF-1(allograft inflammatory factor 1,AIF-1)是一种由干扰素γ诱导的含有EF-hand结构域的钙离子结合蛋白,其功能主要是参与移植排斥、免疫炎症反应、自身炎性和非炎性的损伤等。首次克隆了杂色鲍AIF-1基因cDNA全序列,命名为HdAIF-1,其全长为942 bp,开放阅读框为456 bp,编码151个氨基酸。实时荧光定量PCR结果表明:HdAIF-1在杂色鲍各组织中均有表达,其中在血淋巴和鳃中表达量最高。高温应激下,HdAIF-1在鳃组织中各时相表达均显着上调,并在温度升至31℃时达到最高。而血淋巴和肝胰腺中HdAIF-1在高温应激前4个时相表达无显着差异,到了96 h均显着上调。缺氧应激下,HdAIF-1在血淋巴中表达变化没有显着差异,而鳃中24 h显着下调,192 h显着上调。副溶血弧菌感染实验表明HdAIF-1基因在感染后3、24和48 h均检测到HdAIF-1的表达量显着上调。高温和缺氧应激以及弧菌感染均显示HdAIF-1基因表达量发生显着变化,说明HdAIF-1可能作为免疫因子在杂色鲍应激等状况下发挥重要作用。(本文来源于《水产学报》期刊2013年06期)

王利,魏勇,龙钟明,刘港彪,苟小兰[2](2012)在《齐口裂腹鱼同种移植炎症因子AIF-1的克隆及蛋白质结构预测》一文中研究指出同种移植炎症因子AIF-1是一种细胞质的钙离子结合蛋白。本研究采用RT-PCR方法从齐口裂腹鱼脾脏中克隆到AIF-1,并运用生物信息学方法预测其蛋白质结构。结果表明:齐口裂腹鱼AIF-1基因包含一个444 bp的完整阅读框,编码一个由147个氨基酸组成的蛋白。AIF-1蛋白预测分子量为16.5 KDa,理论pI为4.43,无信号肽,有一个跨膜区,二级结构以α-螺旋为主,未见β-折迭区。同源建模显示齐口裂腹鱼AIF-1蛋白与已测定的小神经胶质细胞特定蛋白具有非常相似的叁级结构。这为深入研究AIF-1分子结构和功能积累了参考资料。(本文来源于《西南农业学报》期刊2012年02期)

李军,陈金辉,张扬,喻子牛[3](2011)在《马氏珠母贝同种移植炎症因子-1的克隆和表达分析》一文中研究指出马氏珠母贝(Pinctada martensii)主要分布于我国广东、广西、海南、日本、印度以及澳大利亚沿海,是目前海水珍珠养殖的主要贝类。同种移植炎症因子-1(Allograft inflammatory factor-1 AIF-1)作为先天免疫的重要组成部分,它的分子机理和功能在哺乳动物中已经得到广泛的研究。然而在无脊椎动物中鲜有报道。研究表明,AIF-1不仅参与移植排斥反应,(本文来源于《中国动物学会·中国海洋湖沼学会贝类学分会第九次会员代表大会暨第十五次学术讨论会会议摘要集》期刊2011-11-01)

王晶[4](2010)在《人牛异种克隆与牛同种克隆的研究》一文中研究指出本研究分别以人包皮成纤维细胞和牛胎儿成纤维细胞为核供体,牛卵母细胞为受体,构建人-牛异种与牛同种克隆胚。成功建立了人和牛成纤维细胞系,并对人成纤维细胞F5、F10代细胞做了生长曲线和核型分析,结果表明,基本符合细胞生长规律,且88.5%、82.4%的染色体核型保持正常倍数(2n=64)。电激活法、化学激活法和精子提取物注射激活法都可激活牛卵母细胞,并使其发育至囊胚。叁种方法的最高卵裂率依次为,68.62 %、76.67%、75.44%,囊胚率为11.59%、15.22%、13.95%。血清饥饿和汇合处理的人成纤维细胞都可支持去核牛卵母细胞的发育,使用不同的电压、融合时间所得最高融合率为58.82%、62.19%,卵裂率为57.50%、60.23%,囊胚率为18.5%、20.1%。适当延长融合与激活的时间间隔有助于重构胚的发育。与牛同种克隆胚相比,人牛异种重构胚发育能力低,这种差异是显着的。(本文来源于《内蒙古农业大学》期刊2010-05-01)

雷钧,何凡,吴敏,郑翔,李舒媛[5](2010)在《抗白细胞介素6单克隆抗体治疗延长小鼠同种心脏移植物存活时间的实验研究》一文中研究指出目的观察应用抗白细胞介素6(IL-6)单克隆抗体(anti-IL-6 monoclonal antibody,anti-IL-6 mAb)对同种异体小鼠心脏移植排斥反应的抑制作用,并探讨其可能的作用机制。方法建立小鼠颈部异位心脏移植模型。实验动物随机分为同系移植组、移植治疗组(每日注射3 g/L anti-IL-6 mAb 0.1 mL)和移植模型组(注射等量生理盐水)。ELISA法检测受鼠移植术后第3、6天外周血IL-6的表达水平,观察各组移植心脏存活时间,病理分析检测排斥反应程度,流式细胞术(FCM)检测各组受鼠脾脏及移植心脏中CD4+CD25+调节性T细胞比例变化,RT-PCR检测移植心脏IL-6I、FN-γI、L-17、RORγt和Foxp3 mRNA的表达水平。结果①治疗组外周血IL-6表达水平较模型组明显降低(P<0.01);②治疗组移植心脏存活时间较模型组明显延长[(22.0±2.3)d vs(7.7±0.8)d,P<0.01],排斥反应病理分级明显下降(Stanford 2级);③治疗组移植心脏中IFN-γI、L-6I、L-17和RORγt mRNA表达水平较模型组显着下降(均P<0.05),脾脏及移植心脏中浸润的CD4+CD25+调节性T细胞比例及Foxp3 mRNA表达水平均明显升高,与模型组比较差异有统计学意义(均P<0.05)。结论anti-IL-6 mAb治疗可抑制Th1、Th17型细胞因子的分泌,促进CD4+CD25+Foxp3+T细胞产生,抑制单个核细胞浸润并有效延长小鼠同种移植心脏的存活时间。(本文来源于《华中科技大学学报(医学版)》期刊2010年02期)

李彬[6](2010)在《TLR4单克隆抗体诱导同种心脏移植免疫耐受的研究》一文中研究指出目的:在大鼠同种异体腹腔异位模型中,使用TLR4单克隆抗体(Toll like receptor 4 monoclonal antibodies,TLR4mab)预处理受体大鼠,研究TLR4mab对受体自身免疫调节以及其对同种异体移植免疫排斥反应的影响,探索其诱导受体大鼠产生免疫耐受的可能,进而揭示其机理。方法:将供体Wistar大鼠及受体SD大鼠随机分成两组, A组(空白组):仅行Wistar大鼠到SD大鼠腹腔异位心脏移植;B组(TLR4mab组):术前一天受体SD大鼠按100ug/kg腹腔注射TLR4mab,行Wistar大鼠到SD大鼠腹腔异位心脏移植,手术成功后以每两天100ug/kg腹腔注射维持。观测指标:移植心脏的存活时间、病理改变,移植后受体外周血TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-10、TGF-β1变化,以及供心NF-κB的变化。结果:(1)供心平均存活时间(MST):A组:5.6±0.89天,B组:25.2±3.40天。B组平均存活时间较A组明显延长(P<0.05)。(2)外周血TNF-α(pg/ml):A组在移植后一天、叁天、五天分别为112.90±21.23、213.75±21.85、469.53±47.35, B组在移植后一天、叁天、五天分别为27.73±6.82、37.04±5.97、96.08±13.59;B组TNF-α含量明显低于A组,P<0.05。(3)外周血IFN-γ(pg/ml):A组在移植后一天、叁天、五天分别为147.01±13.80、340.58±13. 624、516.21±40.34,B组在移植后一天、叁天、五天分别为62.78±10.14、97.85±17.52、144.40±28.91;B组IFN-γ含量明显低于A组,P<0.05(。4)外周血IL-2(pg/ml): A组术后一天、叁天、五天分别为1.96±0.03、2.78±0.02、4.84±0.03, B组在移植后一天、叁天、五天分别为1.12±0.03、1.55±0.04、1.84±0.04;B组IL-2含量明显低于A组,P<0.05。(5)外周血IL-10(pg/ml): A组术后一天、叁天、五天分别为49.17±3.70、51.40±3.79、46.09±2.54, B组在移植后一天、叁天、五天分别为26.01±1.40、27.53±2.02、26.42±1.15;B组IL-10含量明显低于A组,P<0.05。(6)外周血TGF-β1:A组术后TGF-β1含量较术前略有降低,术后一天、叁天、五天变化无明显统计学差异,P>0.05,术后呈下降趋势。B组术前与术后之间无明显统计学差异,P>0.05;术前、术后一天略低于A组,无统计学意义,P>0.05(7)供心NF-κB的表达(western-blot),测得灰度值分别为:A组:172.50±9.55,B组:73.61±6.31。B组较A组表达弱,P< 0.05。结论:(1)应用TLR4mab可以通过影响TLR4-MD2-LPS路径,影响下调Th1、Th2路径相关因子如IL-2、IL-10、IFN-γ等因子,影响供心在受体内的存活时间。(2)应用TLR4mab可以影响下调NF-κB水平,影响TNF-α、TGF-β1等因子减轻急性排斥反应,延长供心在受体体内的存活时间。(3)在大鼠同种异体异位腹腔心脏移植模型中我们可以观察到,应用TLR4mab可以明显减轻急性血管性排斥反应(AVR)的发生,但不能完全克服其发生。(本文来源于《苏州大学》期刊2010-04-01)

王利,唐懿挺[7](2009)在《牦牛同种移植炎症因子AIF-1基因的克隆与表达》一文中研究指出采用RT-PCR方法从成年麦洼牦牛脾中克隆到同种移植炎症因子AIF-1的编码基因,并研究了其在各组织中的表达模式。结果表明,AIF-1基因包含一个444 bp的完整阅读框,编码一由147个氨基酸组成的蛋白,推测其分子质量约为16.6 ku,与其他多种动物的AIF-1的氨基酸序列有89%~95%的同源性。RT-PCR半定量分析结果显示,AIF-1基因在麦洼牦牛的脾、肾中都有转录,在脾中表达水平相对较高,而在肝、乳腺、心、肌肉中未见明显表达。(本文来源于《中国兽医科学》期刊2009年10期)

王利,唐懿挺[8](2009)在《牦牛同种移植炎症因子AIF-1的克隆和表达分析》一文中研究指出同种移植炎症因子(Allograft inflammatory facto-1,AIF-1)是一种由干扰素γ诱导的钙离子结合蛋白。它的功能主要涉及参与免疫炎症反应、自身炎性和非炎性的损伤等。本研究采用RT-PCR方法,从成年的麦洼牦牛脾脏中克隆到AIF-1并研究其在各组织中的表达模式。结果表明:AIF-1基因包含一个444bp的完整阅读框,编码一个由147个氨基酸组成的蛋白。RT-PCR半定量分析显示AIF-1在牦牛的脾、肾中都有转录,在脾中表达水平相对较高,而在肝、乳腺、心、肌肉中未见明显表达。(本文来源于《第四届中国畜牧科技论坛论文集》期刊2009-10-01)

韦精卫,孟凡丽,韦英明,杨素芳,陆凤花[9](2008)在《利用体细胞核移植技术生产黄牛和水牛同种、异种转基因克隆囊胚》一文中研究指出以含neo和GFP基因双标记的水牛、黄牛胎儿成纤维细胞进行牛转基因体细胞核移植,结果发现:阿菲迪霉素可有效将胎儿成纤维细胞同步于G0/G1期;以GFP阳性细胞进行核移植,其卵裂率、囊胚率与对照组间无显着差异(P>0.05),所构建的重组胚,2-细胞阶段观察不到GFP的表达,4-细胞以后GFP的表达逐渐增强,在囊胚的内细胞团和滋养层细胞均可检测到GFP的表达,将黄牛同种转基因克隆囊胚进行移植,获得1例妊娠;黄牛卵母细胞一水牛供核细胞构建异种重组胚囊胚率显着高于黄牛供核细胞一水牛卵母细胞构建的异种重组胚(P<0.05),并且异种核移植重组胚中可检测到GFP表达,GFP可作为异种核移植胚胎来源的一种新标记.(本文来源于《自然科学进展》期刊2008年08期)

付康,程首超,刘收,陈孝平,陆婕[10](2007)在《人同种异体移植炎症因子-1的基因克隆及其在小鼠成纤维细胞中的表达》一文中研究指出目的构建人同种异体移植炎症因子-1(allograft inflammatory factor-1,AIF-1)基因的真核表达载体并在小鼠成纤维细胞系(NIH3T3)中表达,为进一步研究AIF-1蛋白的功能奠定基础。方法利用基因重组技术,构建带有AIF-1基因的2种重组真核表达载体:pcDNA3.1(-)/AIF-1与pEGFP-C1/AIF-1。利用脂质体法将2种重组质粒分别转染NIH3T3细胞,用荧光倒置显微镜及Western blot方法观察及鉴定AIF-1在细胞中的稳定表达及瞬时表达。结果酶切分析及DNA序列测定证实,AIF-1基因片段被分别克隆入真核表达载体pcDNA3.1(-)与pEGFP-C1。荧光显微镜观察到NIH3T3细胞中有绿色荧光分布。Western blot结果表明,转染重组质粒的NIH3T3细胞中,AIF-1表达量明显增高。结论成功构建了2种重组真核表达载体:pcDNA3.1(-)/AIF-1与pEGFP-C1/AIF-1,经转染NIH3T3细胞株获得了AIF-1蛋白的瞬时表达及稳定表达。(本文来源于《华中科技大学学报(医学版)》期刊2007年05期)

同种克隆论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

同种移植炎症因子AIF-1是一种细胞质的钙离子结合蛋白。本研究采用RT-PCR方法从齐口裂腹鱼脾脏中克隆到AIF-1,并运用生物信息学方法预测其蛋白质结构。结果表明:齐口裂腹鱼AIF-1基因包含一个444 bp的完整阅读框,编码一个由147个氨基酸组成的蛋白。AIF-1蛋白预测分子量为16.5 KDa,理论pI为4.43,无信号肽,有一个跨膜区,二级结构以α-螺旋为主,未见β-折迭区。同源建模显示齐口裂腹鱼AIF-1蛋白与已测定的小神经胶质细胞特定蛋白具有非常相似的叁级结构。这为深入研究AIF-1分子结构和功能积累了参考资料。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

同种克隆论文参考文献

[1].黄贻涛,蔡秀红,张子平,王国栋,邹志华.杂色鲍同种移植炎症因子1的克隆及其在应激下的表达[J].水产学报.2013

[2].王利,魏勇,龙钟明,刘港彪,苟小兰.齐口裂腹鱼同种移植炎症因子AIF-1的克隆及蛋白质结构预测[J].西南农业学报.2012

[3].李军,陈金辉,张扬,喻子牛.马氏珠母贝同种移植炎症因子-1的克隆和表达分析[C].中国动物学会·中国海洋湖沼学会贝类学分会第九次会员代表大会暨第十五次学术讨论会会议摘要集.2011

[4].王晶.人牛异种克隆与牛同种克隆的研究[D].内蒙古农业大学.2010

[5].雷钧,何凡,吴敏,郑翔,李舒媛.抗白细胞介素6单克隆抗体治疗延长小鼠同种心脏移植物存活时间的实验研究[J].华中科技大学学报(医学版).2010

[6].李彬.TLR4单克隆抗体诱导同种心脏移植免疫耐受的研究[D].苏州大学.2010

[7].王利,唐懿挺.牦牛同种移植炎症因子AIF-1基因的克隆与表达[J].中国兽医科学.2009

[8].王利,唐懿挺.牦牛同种移植炎症因子AIF-1的克隆和表达分析[C].第四届中国畜牧科技论坛论文集.2009

[9].韦精卫,孟凡丽,韦英明,杨素芳,陆凤花.利用体细胞核移植技术生产黄牛和水牛同种、异种转基因克隆囊胚[J].自然科学进展.2008

[10].付康,程首超,刘收,陈孝平,陆婕.人同种异体移植炎症因子-1的基因克隆及其在小鼠成纤维细胞中的表达[J].华中科技大学学报(医学版).2007

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