泰妙菌素论文-宗婧婧,严忠雍,张小军,李停停,高学慧

泰妙菌素论文-宗婧婧,严忠雍,张小军,李停停,高学慧

导读:本文包含了泰妙菌素论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:固相萃取,超高效液相色谱-串联质谱,水产品,泰妙菌素

泰妙菌素论文文献综述

宗婧婧,严忠雍,张小军,李停停,高学慧[1](2019)在《离子交换固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中泰妙菌素和沃尼妙林残留量》一文中研究指出建立了一种强阳离子固相萃取结合超高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中泰妙菌素和沃尼妙林残留量的分析方法。样品经乙腈提取和Oasis MCX固相萃取柱净化后,以乙腈-0.05%甲酸5 mmoL·L~(-1)乙酸铵水溶液为流动相,经Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱梯度洗脱分离,在电喷雾正离子多反应监测模式下,用内标法分析泰妙菌素,用外标法分析沃尼妙林。结果显示,泰妙菌素和沃尼妙林在0.1~10.0 ng·mL~(-1)内具有良好的线性关系,相关系数r均大于0.999 9,检出限和定量限分别为0.03和0.1μg·kg~(-1)。在0.1,1.0,5.0和10.0μg·kg~(-1)4种添加水平下,加标回收率在87%~114%,相对标准偏差在0.87%~6.50%。对50条鲫鱼进行实际样品验证,发现在鲫鱼的各个组织中均有泰妙菌素和沃尼妙林残留,其中肾脏残留总量最高,为453.81μg·kg~(-1),肝脏次之,为236.97μg·kg~(-1)。结果表明,所建方法能够满足对水产品中泰妙菌素和沃尼妙林残留量的分析要求。(本文来源于《浙江大学学报(理学版)》期刊2019年04期)

孙国苹[2](2019)在《泰妙菌素单克隆抗体的制备与鉴定》一文中研究指出泰妙菌素(Tiamulin,TML)是一种半合成的双萜烯类兽用抗生素,主要用于治疗鸡慢性呼吸道疾病。TML的规范使用会很好的发挥其抗菌效果,但若滥用TML就会在动物源性食品中残留,进而对人们的健康造成潜在的危害,引发食品安全与公共卫生问题。检测TML常用的的方法有色谱法、免疫学技术等。其中,免疫学检测中的试纸检测方法因其具有敏感、特异、快速、简便、且可实现现场实时检测的优点被广泛应用。高特异性、高亲和力的单克隆抗体的制备,是建立TML免疫学检测方法的基础。本研究根据TML的结构特点对TML五元环上的酮羰基进行改造并合成人工完全抗原;免疫小鼠;通过细胞融合技术与有限稀释亚克隆技术研制出高特异性、高敏感性和高亲和力的抗TML单克隆抗体,建立能稳定分泌抗TML单克隆抗体的细胞株,为建立快速检测TML的免疫学方法奠定基础。用肟化法与活性酯法,将泰妙菌素(TML)与载体蛋白(BSA)偶联,制备免疫原TML-BSA。同法制备包被原TML-OVA。对制备的人工完全抗原进行紫外线扫描(UV)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定。免疫Balb/c小鼠的结果表明:2号小鼠的免疫效果最好,其免疫血清的效价为1:1×10~5,半数抑制浓度(IC_(50))为4.07ng/mL。利用细胞融合技术和有限稀释法亚克隆,筛选出1株阳性杂交瘤细胞株,命名为4A7。用体内诱生法制备腹水,并用辛酸-硫酸铵法纯化,获得单克隆抗体,SDS-PAGE结果表明纯化后抗体有两条带,一条为IgG的重链,大小为50kDa,一条为IgG的轻链,大小为25kDa,纯度约为90%,间接ELISA结果显示纯化后效价可达1:5.12×10~5,IC_(50)为0.049ng/mL,亲和力常数Kaff为1.47×10~9L/mol。且该抗体与沃尼妙林、氟罗沙星等其他抗生素均无交叉反应,与瑞他帕林有2.7%的交叉反应率。本研究制备了抗TML的单克隆抗体,为TML免疫学检测试剂盒以及相关快速检测产品的开发和研制打下基础。(本文来源于《郑州大学》期刊2019-04-01)

祁艳华,孙国苹,张改平,陈玉梅,刘燕凯[3](2019)在《泰妙菌素人工完全抗原的制备及其单克隆抗体的研制》一文中研究指出目的研制灵敏度高、特异性好的抗泰妙菌素(TML)单克隆抗体。方法用肟化法和碳二亚胺法将TML分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联,制备免疫原TML-BSA和包被原TML-OVA,用TML-BSA免疫BALB/c小鼠,经细胞融合并采用间接ELISA筛选抗TML杂交瘤细胞株,用体内诱生法制备腹水和辛酸-硫酸铵法纯化获得单克隆抗体,并用SDS-PAGE鉴定。结果成功筛选出2株杂交瘤细胞株3B3和4A7,其细胞上清效价分别为1∶1600和1∶6400。纯化后单克隆抗体4A7的效价为5.12×10~5,半数抑制剂量(IC_(50))为0.049 ng/mL,亲和力常数Kaff为1.47×10~9 L/mol,与类似物瑞他帕林有2.7%的交叉反应率,与沃尼妙林、氟罗沙星等其他抗生素均无交叉反应。结论成功研制了抗TML单克隆抗体。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2019年02期)

孙国苹,王雅洁,钱文静,张改平[4](2018)在《抗泰妙菌素单克隆抗体的制备》一文中研究指出背景:泰妙菌素(Tiamulin,TML)是一种截短侧耳素类动物专用抗生素,是一种较新型的兽药抗生素。泰妙菌素的分子量小,属于半抗原物质,不能刺激机体产生相应抗体,只有与大分子载体蛋白偶联制备泰妙菌素完全抗原后才能刺激动物产生免疫应答,因此合成具有强免疫原性的泰妙菌素人工抗原是获得抗TML单克隆抗体的关键。目的 :旨在合成泰妙菌素的人工抗原,并在此基础上利用细胞融合技术经筛选、克隆获得敏感性好、特异性强且能稳定分泌抗泰妙菌素的单克隆抗体的杂交瘤细胞株。方法 :本研究用肟化法与碳二亚胺法将泰妙菌素与载体蛋白(BSA)偶联,制备免疫原TML-BSA。同法制备包被原TML-OVA。对制备的抗原用UV和SDS-PAGE法鉴定。用合成的TML-BSA免疫2只6-8周龄的Balb/c雌性小鼠,经四次免疫后,用间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠,选择高效价、敏感的小鼠进行抗原超强免疫;取其脾细胞应用细胞融合技术与骨髓瘤细胞建立分泌抗TML单克隆抗体的杂交瘤细胞株。结果 :通过UV图谱可观察到波峰有偏移,电泳图谱显示目的蛋白条带(TML-BSA、TML-OVA)较对照条带(BSA、OVA)有明显扩散现象,间接ELISA的检测结果表明用该抗原免疫的2号小鼠血清效价较高,最高可达1×10~5,且敏感性好IC_(50)约为4.07ng/mL,由此得出人工抗原合成成功。融合后筛选出2株特异性强、灵敏度高且可以稳定分泌抗泰妙菌素单克隆抗体的杂交瘤细胞株。结论 :本实验成功制备了泰妙菌素完全抗原,并在此基础上成功筛选出2株特异性强、灵敏度高且可以稳定分泌抗泰妙菌素单克隆抗体的杂交瘤细胞株,为TML残留检测奠定了坚实的基础。(本文来源于《第十叁届全国免疫学学术大会摘要汇编》期刊2018-11-07)

赵才兵,刘正光,邹小军,马传亮,赵学朋[5](2018)在《延胡索酸泰妙菌素口服固体制剂体外溶出度的探究》一文中研究指出本试验旨在评价延胡索酸泰妙菌素口服固体受试制剂和参比制剂的体外溶出度。试验采用桨法测定溶出度,50rpm/min,溶出介质分别为pH1.2盐酸溶液、pH3.8醋酸盐缓冲液、pH4.8磷酸盐缓冲液、pH6.8磷酸盐缓冲液和水,温度37±0.5℃,参比制剂和受试制剂0.34g/杯,取样时间为第1、2、5、10、15、30、45和60min,高效液相色谱法检测药物成分含量。结果表明延胡索酸泰妙菌素在溶出介质中比较稳定,受试制剂和参比制剂在15min内的溶出率大于85%,在五个溶出介质中的差异因子(f1)小于15%。因此,受试制剂和参比制剂的溶出行为相似,生物利用度不受溶出行为的限制。(本文来源于《中国动物保健》期刊2018年07期)

杨佳颖[6](2018)在《猪支原体肺炎,泰妙菌素能帮忙》一文中研究指出猪支原体肺炎是养猪业中严重影响生产力的一种疾病,它是由猪肺炎支原体引起的一种慢性、接触性、呼吸道传染病,俗称猪气喘病,据调查显示,我国猪支原体肺炎在猪群中的感染率为70%~90%,每年因为这种疾病造成的经济损失达百亿元。肺炎支原体经由直接接触或飞沫间接向群内传播,而且不分年龄段。所以针对猪支原体肺炎的免疫还是以疫苗免疫为主。按照抗原存在状态,可将猪支原体肺炎疫苗分为弱毒疫苗(活疫苗)、灭活疫苗和(本文来源于《中国动物保健》期刊2018年07期)

王凤芹,杨媛媛,陈楚昊,胡喻涵,路则庆[7](2018)在《固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法测定饲料中沃尼妙林和泰妙菌素》一文中研究指出本试验旨在建立一种高效快速测定饲料中沃尼妙林和泰妙菌素的固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱方法。用甲醇提取饲料中的沃尼妙林和泰妙菌素,经过Oasis MCX固相萃取柱净化后,由C18色谱柱分离,流动相为水(含0.1%甲酸)-乙腈(含0.1%甲酸),梯度洗脱,以电喷雾离子源(ESI)正离子扫描方式,在多反应监测(MRM)模式下进行测定,外标法定量。结果表明:本试验建立的固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法对饲料中沃尼妙林和泰妙菌素的检测限分别为25.0和5.0 ng/g。沃尼妙林和泰妙菌素浓度在0.01~5.00μg/m L范围内线性关系良好,相关系数(R2)均大于0.99。在3个添加水平(2.5、25.0、125.0 mg/kg)下,沃尼妙林的回收率为85.17%~94.55%,相对标准偏差(RSD)为2.56%~7.65%,泰妙菌素的回收率为84.69%~99.36%,RSD为1.57%~4.95%。结果表明,本试验建立的固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法操作简单、准确度高,可应用于饲料中沃尼妙林和泰妙菌素的快速定量测定。(本文来源于《动物营养学报》期刊2018年06期)

范宏[8](2017)在《LC-MS/MS法测定猪肉中泰妙菌素及8-α-羟基泰妙菌素》一文中研究指出采用磷酸缓冲液-乙酸乙酯混合提取、正己烷除脂、MCX柱净化,采用液相色谱-质谱法(LC-MS/MS)建立了同时测定猪肉中泰妙菌素及8-α-羟基泰妙菌素残留量的分析方法。结果表明:在泰妙菌素和8-α-羟基泰妙菌素加标浓度5.0μg/kg~500.0μg/kg范围内,相关系数分别为0.999 8和0.999 7,线性关系良好;检测限(LOD)分别为1.5μg/kg和3.0μg/kg,定量限(LOQ)分别为5.0μg/kg和10.0μg/kg;平均回收率为83.4%~97.6%,相对标准偏差(RSD)为2.4%~5.3%。(本文来源于《食品研究与开发》期刊2017年16期)

杨旭[9](2017)在《泰妙菌素抑制乳腺癌的机制研究和δ-生育酚预防前列腺癌的体内研究》一文中研究指出背景:乳腺肿瘤是女性第一大癌症,也是母犬身上最常见的肿瘤病。而肿瘤转移是导致乳腺癌患者死亡的最主要原因。胞外核苷酸酶CD73在癌症转移等发展过程发挥重要的作用。研究表明,CD73能够促进乳腺癌的生长以及转移等过程。因此,CD73靶向抑制剂能够为乳腺癌提供一种有效的治疗方案。研究发现泰妙菌素在体外能够抑制CD73的活性。因此,本课题研究了泰妙菌素能否对乳腺癌产生抑制作用,并分析了可能存在的相关机制。此外,前列腺癌是威胁男性生命和健康的重大癌症之一。生育酚对包括前列腺癌在内的多种类型的癌症都有预防作用,而δ-生育酚在前列腺癌细胞中会抑制AKT的活化。因此,我们利用PTEN-/-小鼠研究了 δ-生育酚在体内对前列腺癌的预防作用。方法:(1)通过检测MDA-MB-231和4T1乳腺癌细胞系的细胞活性、细胞克隆形成试验、细胞迁移和侵袭试验、酶活试验以及Western-blot等技术研究了泰妙菌素对CD37蛋白表达和活性的影响,以及对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。(2)通过乳腺肿瘤小鼠模型的建立,测量乳腺肿瘤的生长体积和重量以及免疫组化检测等试验研究了泰妙菌素对乳腺肿瘤生长和转移的影响,并分析了可能存在的相关机制。(3)通过建立PTEN-/-小鼠前列腺癌模型,前列腺组织病理学诊断以及免疫组化检测等试验研究了δ 生育酚对pAKT蛋白水平的影响以及对前列腺癌发生发展的影响,并分析了可能存在的相关机制。结果:(1)泰妙菌素抑制CD73的活性但并不影响其表达,泰妙菌素通过CD73抑制乳腺癌细胞的生长、迁移和侵袭。(2)泰妙菌素抑制小鼠体内乳腺肿瘤的生长和肺转移,并且抑制肿瘤组织中新生血管的形成。(3)δ-生育酚降低了前列腺组织中pAKT、Ki67的水平,并且降低了前列腺中发生癌变的腺体的数量。结论:(1)泰妙菌素通过降低CD73的活性来抑制乳腺癌的生长以及肿瘤的肺部转移。(2)δ-生育酚对前列腺癌的预防作用与降低pAKT的活化水平有关。(本文来源于《中国农业大学》期刊2017-05-01)

郭紫峰,胡晶晶[10](2017)在《液相色谱法测定饲料中泰妙菌素含量》一文中研究指出泰妙菌素是一种双萜烯类畜禽专用抗生素,主要用于慢性呼吸道疾病、猪支原体肺炎、嗜血杆菌胸膜性肺炎,也可用于猪密螺旋体引起的痢疾~([1]),但使用剂量和时段都有相应的要求。目前,检测饲料中泰妙菌素含量的方法主要有气相色谱法、液相色谱-质谱法、高效液相色谱法。气相色谱法需要衍生化,操作复杂,耗时耗力;液相色谱-质谱法设备成本高,方法(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2017年07期)

泰妙菌素论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

泰妙菌素(Tiamulin,TML)是一种半合成的双萜烯类兽用抗生素,主要用于治疗鸡慢性呼吸道疾病。TML的规范使用会很好的发挥其抗菌效果,但若滥用TML就会在动物源性食品中残留,进而对人们的健康造成潜在的危害,引发食品安全与公共卫生问题。检测TML常用的的方法有色谱法、免疫学技术等。其中,免疫学检测中的试纸检测方法因其具有敏感、特异、快速、简便、且可实现现场实时检测的优点被广泛应用。高特异性、高亲和力的单克隆抗体的制备,是建立TML免疫学检测方法的基础。本研究根据TML的结构特点对TML五元环上的酮羰基进行改造并合成人工完全抗原;免疫小鼠;通过细胞融合技术与有限稀释亚克隆技术研制出高特异性、高敏感性和高亲和力的抗TML单克隆抗体,建立能稳定分泌抗TML单克隆抗体的细胞株,为建立快速检测TML的免疫学方法奠定基础。用肟化法与活性酯法,将泰妙菌素(TML)与载体蛋白(BSA)偶联,制备免疫原TML-BSA。同法制备包被原TML-OVA。对制备的人工完全抗原进行紫外线扫描(UV)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定。免疫Balb/c小鼠的结果表明:2号小鼠的免疫效果最好,其免疫血清的效价为1:1×10~5,半数抑制浓度(IC_(50))为4.07ng/mL。利用细胞融合技术和有限稀释法亚克隆,筛选出1株阳性杂交瘤细胞株,命名为4A7。用体内诱生法制备腹水,并用辛酸-硫酸铵法纯化,获得单克隆抗体,SDS-PAGE结果表明纯化后抗体有两条带,一条为IgG的重链,大小为50kDa,一条为IgG的轻链,大小为25kDa,纯度约为90%,间接ELISA结果显示纯化后效价可达1:5.12×10~5,IC_(50)为0.049ng/mL,亲和力常数Kaff为1.47×10~9L/mol。且该抗体与沃尼妙林、氟罗沙星等其他抗生素均无交叉反应,与瑞他帕林有2.7%的交叉反应率。本研究制备了抗TML的单克隆抗体,为TML免疫学检测试剂盒以及相关快速检测产品的开发和研制打下基础。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

泰妙菌素论文参考文献

[1].宗婧婧,严忠雍,张小军,李停停,高学慧.离子交换固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中泰妙菌素和沃尼妙林残留量[J].浙江大学学报(理学版).2019

[2].孙国苹.泰妙菌素单克隆抗体的制备与鉴定[D].郑州大学.2019

[3].祁艳华,孙国苹,张改平,陈玉梅,刘燕凯.泰妙菌素人工完全抗原的制备及其单克隆抗体的研制[J].细胞与分子免疫学杂志.2019

[4].孙国苹,王雅洁,钱文静,张改平.抗泰妙菌素单克隆抗体的制备[C].第十叁届全国免疫学学术大会摘要汇编.2018

[5].赵才兵,刘正光,邹小军,马传亮,赵学朋.延胡索酸泰妙菌素口服固体制剂体外溶出度的探究[J].中国动物保健.2018

[6].杨佳颖.猪支原体肺炎,泰妙菌素能帮忙[J].中国动物保健.2018

[7].王凤芹,杨媛媛,陈楚昊,胡喻涵,路则庆.固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法测定饲料中沃尼妙林和泰妙菌素[J].动物营养学报.2018

[8].范宏.LC-MS/MS法测定猪肉中泰妙菌素及8-α-羟基泰妙菌素[J].食品研究与开发.2017

[9].杨旭.泰妙菌素抑制乳腺癌的机制研究和δ-生育酚预防前列腺癌的体内研究[D].中国农业大学.2017

[10].郭紫峰,胡晶晶.液相色谱法测定饲料中泰妙菌素含量[J].黑龙江畜牧兽医.2017

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