毛细管酶微反应器论文-刘佳,董旭,郭华,王嫚,申刚义

毛细管酶微反应器论文-刘佳,董旭,郭华,王嫚,申刚义

导读:本文包含了毛细管酶微反应器论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:酶微反应器,氧化石墨烯,毛细管电色谱,胰蛋白酶

毛细管酶微反应器论文文献综述

刘佳,董旭,郭华,王嫚,申刚义[1](2019)在《氧化石墨烯基质毛细管电色谱胰蛋白酶微反应器的性能研究》一文中研究指出基于石墨烯优良的物化性能,利用层层组装法将氧化石墨烯修饰于石英毛细管内壁,制备了氧化石墨烯基质的毛细管电色谱,通过电渗流、拉曼光谱等对其进行表征。在此基础上,基于离子键合法将胰蛋白酶固定于毛细管电色谱柱头,制备胰蛋白酶微反应器。两者结合构成毛细管电色谱胰蛋白酶微反应器。实验结果显示,氧化石墨烯作为基质既可提高样品的分离效率,还能促进胰蛋白酶的催化性能。氧化石墨烯修饰的毛细管电色谱对N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐(BAEE)和N-苯甲酰-L-精氨酸(BA)混合物的分离度从裸毛细管的3.70提升至4.71,而其固定化酶活性(米氏常数K_m=1.10 mmol/L,最大反应速率V_(max)=0.32 mmol·L~(-1)·s~(-1))也明显优于裸毛细管(K_m=109.77 mmol/L,V_(max)=0.000 46 mmol·L~(-1)·s~(-1))。利用所制备的微反应器从10种中药材中筛选胰蛋白酶抑制剂活性成分的药材,结果发现叁七和大黄中均存在胰蛋白酶抑制剂活性成分。(本文来源于《分析测试学报》期刊2019年06期)

刘心[2](2019)在《基于多孔层开管毛细管柱的固定化酶微反应器和毛细管电色谱的研究与应用》一文中研究指出固定化酶微反应器(IMERs)是将生物酶分子的固定化技术与微通道内生物酶反应相结合而制备的一类酶反应系统。基于开管毛细管柱的固定化酶微反应器不仅兼具酶的高选择性催化、可重复使用及微通道分析的低试剂消耗、易分离等优点,而且微反应器制备简单,操作方便,易于与其它分析设备相连接,使其在生命科学如酶反应动力学、抑制剂的筛选、蛋白质组学以及生物催化等领域得到广泛的应用。对于如何提高固定化酶微反应器的性能,包括催化效率和稳定性等,毛细管柱内的酶固定化技术至关重要,也是目前相关研究领域备受关注的研究方向。与毛细管固定化酶微反应器相对应,毛细管色谱柱的制备是毛细管电色谱高效分离分析的核心部分,也是电色谱理论和应用研究的重点,对毛细管电色谱技术的发展起着举足轻重的作用,目前已经成为一种迅速发展起来的新兴技术。本论文围绕新型开管毛细管柱在固定化酶微反应器和毛细管电色谱的研究与应用,展开了以下研究工作:1、提出了基于叁维多孔层开管毛细管柱(3D-PLOT)的开管毛细管固定化酶微反应器,并成功应用于标准蛋白在线水解以及HeLa细胞的蛋白组学研究。我们通过简单易控的原位一步两相合成法,实现了石英毛细管内表面的多孔层修饰。获得的多孔层形貌高度均匀、孔隙分布窄,同时极大增大了微通道内表面积,增加了酶负载量。和未经修饰的毛细管微反应器相比,3D-PLOT修饰提高了酶反应效率、缩短了分析时间,获得了更优异的稳定性和重现性。以胰蛋白酶为例,我们系统分析了制备的3D-PLOT-IMER的性能。通过将3D-PLOT-IMER与nano-LC-MS/MS系统在线联用,成功用于标准蛋白在线水解、HeLa细胞提取液以及活细胞的在线分析,证明了利用所提出的叁维多孔层进行表面修饰是一种简单有效的酶固定方法,可广泛应用于不同类型的IMERs。2、建立一种基于多孔层表面改性毛细管的新型毛细管电泳-固定化酶微反应器在线联用技术(CE-IMER),应用于乙酰胆碱酯酶(AChE)在线酶分析及蔬菜中有机磷检测。我们借助原位一步两相反应,在毛细管端头内表面修饰了高度均匀的多孔层,并在所制备的多孔层修饰的开管毛细管柱上通过层层自组装(LBL)固定AChE。毛细管的其余部分用作CE分离分析通道。酶反应底物流经酶反应器时,在线酶催化反应生成产物,底物随后在电泳的作用下与固定化酶分离而终止反应,产物和剩余底物在后续电泳中实现分离和在线检测。实验结果证明,提出的CE-IMER具有良好的稳定性和重现性,保证了在线酶分析的可靠性和准确性。同时,多孔层修饰大大增大了毛细管内比表面积,有效提高了酶的负载量,从而提高酶反应效率、缩短了分析时间。CE-IMER成功应用于小白菜汁样品中有机磷农药的检测,显示出在实际样品分析中潜在的应用价值。本研究工作为使用CE在线酶分析提供了一种简单高效的方法,显示了其在生物分析中的重要价值。3、发展了一种基于高度均匀多孔层表面修饰的毛细管色谱柱的新型毛细管电色谱(CEC)方法。我们基于以上工作所提出的毛细管内壁多孔层修饰方法,在50μm内径的石英毛细管中修饰厚度约为240 nm的均匀的多孔层表面。以萘和联苯的混合物为试验样品,系统研究了制备的PLOT柱作为毛细管电色谱柱的色谱性能,证明该PLOT色谱柱具有良好的分离效率,稳定性及重现性。无需进行任何进一步修饰,该PLOT色谱柱成功应用于叁种不同类型样品的高效分离分析:胰蛋白酶水解蛋白(溶菌酶和牛血清蛋白)的多肽产物、β-阻断剂(碱性样品)和多环芳烃(中性样品)。研究结果表明,该PLOT色谱柱制备简单,柱效高,多孔层修饰提高了相比和柱容量,增加了电色谱分析中固定相和样品之间的相互作用,因此显着提高了CEC的分离效率。我们所发展的PLOT色谱柱对于分析各种不同类型样品显示了潜在的应用价值。4、建立了基于毛细管电泳技术-离子液体分散液相微萃取的尿液中毒品的检测方法。我们利用离子液体分散液相微萃取技术,以1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐离子液体为萃取剂,结合毛细管电泳技术,实现尿液中痕量毒品(麻黄碱和氯胺酮)的高效富集及分离检测。在优化条件下,麻黄碱和氯胺酮在0.10-10 mg/L范围内具有良好的线性关系,尿液中的检出限分别为0.21和0.39 mg/mL,加标回收率为79%-90%。该方法具有低消耗、操作简单、富集效率高、检测灵敏、干扰小等特点,适用于生物检材中痕量毒品的分析检测。(本文来源于《东北师范大学》期刊2019-05-01)

张艳梅,李凤,赵晓燕,赵志勇,周昌艳[3](2019)在《基于共价键合法的毛细管固定化酶微反应器的制备》一文中研究指出制备了一款开管式乙酰胆碱酯酶(ACHE)毛细管酶微反应器。该制备方法中,首先在毛细管内壁修饰上末端带有双键的硅烷化试剂,再采用N-丙烯酰氧琥珀酰亚胺作为功能单体,通过自由基聚合将其修饰在毛细管内壁上,最后通过共价键合的固定化方式,十分简便地实现了毛细管内壁的ACHE固定化。测试连续制备的6个ACHE酶微反应器,其产率的相对标准偏差(RSD)在3%以下;制备的ACHE酶微反应器在1 min孵育时间里的产率高达45%左右,可以较快进行酶活测试,每次分离仅需2. 5 min,10 h内重复使用40次后仍然能够保持酶活性,表明制备的ACHE酶微反应器具有较好的重复利用性和较高的酶活性。(本文来源于《分析试验室》期刊2019年04期)

毋楠[4](2018)在《基于DNA杂交技术的毛细管酶微反应器的研究》一文中研究指出毛细管电泳法由于具有样品消耗量少、分析速度快、操作简便、容易分离和定量以及可以与多种检测手段联用等优点,已经发展成酶分析的重要工具之一,因此,制备一种具有高柱容量和可再生使用的毛细管酶微反应器一直是该领域研究的热点。本论文结合DNA分子杂交技术和树枝状分子的优势,将胰蛋白酶固定到氨基化的毛细管壁上,建立新型的毛细管酶微反应器。首先探索建立离线模式毛细管酶微反应器;在离线基础上,证明了基于DNA杂交技术在线毛细管酶微反应器的可行性。(1)在硅烷化的石英毛细管壁上键合了聚酰胺胺树枝状大分子,在此基础上采用DNA杂交技术固定胰蛋白酶,制备出基于DNA杂交技术的离线模式毛细管酶微反应器。激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)表征结果证明了酶通过DNA杂交技术成功固定在功能化毛细管管壁。将制备的离线模式毛细管酶微反应器用于N-苯甲酰基-L-精氨酸乙酯盐酸盐(BAEE)的水解,以此评价酶微反应器的特性。通过DNA杂交和去杂交实验表明了该酶微反应器的可再生性。此外,与传统制备方式相比,树枝状大分子的引入提高了酶固载量,从而改善了酶解效率。在此基础上,将制备的毛细管酶微反应器成功应用于细胞色素C的消解,展现出较好的酶切效果,得到酶切肽端数为8,序列覆盖率为59%。这种可再生且高效的新型毛细管酶微反应器结合了 DNA杂交技术和树枝状大分子的优点,并为后续建立基于DNA杂交技术在线模式毛细管酶微反应器提供基础。(2)在离线模式的基础上,利用DNA杂交技术将胰蛋白酶固定在毛细管柱前端,建立在线模式毛细管酶微反应器。以BAEE为底物,优化在线毛细管酶微反应器酶解分离条件,实现在同一毛细管内连续完成酶催化反应、分离和检测分析全过程,缩短酶分析时间,提高自动化程度。结果表明制备的在线毛细管酶微反应器酶学性质稳定,性能良好,为以后开展在线目标蛋白质的酶解提供基础。(本文来源于《北京化工大学》期刊2018-05-21)

李静,吴飞超,林露,刘海鸥,张雄福[5](2017)在《毛细管内流动法UiO-66-NH_2膜固载钯构建高效催化膜微反应器》一文中研究指出微反应器的通道内集成金属纳米催化剂用于催化反应,能显着提高催化效率、增加产物产率、缩短反应时间,因此,微反应器在催化反应领域具有重要的应用前景。而微反应器的微通道内壁固定纳米金属催化剂,以形成高效催化微反应器是难点和关键。毛细石英管是一种简单的长径比很大的管式微通道反应器,而锆基金属有机骨架化合物(Zr-MOFs)作为一种新型的高度有序的多孔晶体材料,具有丰富的孔结构、特殊的官能团、良好的热稳定性和水(本文来源于《第19届全国分子筛学术大会论文集——B会场:等级孔材料多孔膜材料多孔材料理论研究》期刊2017-10-24)

王雨佳[6](2017)在《基于壳核介孔材料的酶固定微反应器用于尺寸筛选蛋白水解分析及新型毛细管微萃取—毛细管电泳技术对β-阻滞剂的富集检测》一文中研究指出随着科技医疗的发展,对生物样品的快速、灵敏检测需求日趋扩大,相应的分析检测仪器也飞速发展。然而生物样品因其基质复杂、易受干扰、浓度低、高温易变性等特点,往往需要在检测前进行纯化和富集等预处理过程。发展简单、快捷、低成本、高效的样品前处理方法,是当下大量科学工作者的努力方向,本论文主要围绕低分子量蛋白质的尺寸筛选水解分析和人体尿液中β-阻滞剂的富集纯化开展了以下两个工作:(一)利用简单便捷的两相法合成了一种新颖的壳核结构二氧化硅微球介孔材料,并将其作为胰蛋白酶的固定载体制备固定酶微反应器应用于低分子量蛋白质的尺寸筛选分离分析。由于介孔微球独特均匀的纤维孔隙结构,在排阻高分子量蛋白质进入孔隙的同时,可允许低分子量蛋白质分子进入其中并与固定化酶作用,水解产物再通过毛细管电泳(CE)和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术检测鉴定。本工作用多种检测手段表征合成的CSMS颗粒及固定化酶后的CSMS颗粒,系统研究并评价了叁种酶固定方法,即物理吸附、巯基键合法和醛基键合法。结果显示,胰蛋白酶(trypsin)可以很容易地通过物理吸附固载于介孔通道中,具有高上酶量、低泄漏率、以及操作简单等特点。基于制备的酶微反应器研究了四种不同分子量蛋白质的尺寸筛选水解,相比于游离酶,有效提高了低质量蛋白质的水解,表明该该介孔酶微反应器可用于尺寸筛选蛋白质水解,在低分子量蛋白质的分析检测中具有潜在应用价值。(二)提出并建立了一种新型的填充式毛细管微萃取柱(tCap-μEx),结合场放大富集进样-毛细管电泳技术(FASI-CE),应用于人体尿液中两种b-阻滞剂阿替洛尔(atenolol)和美托洛尔(metoprolol)的快速灵敏检测。系统研究并优化了影响微萃取和场放大进样的实验条件。结果显示此方法具有环境友好微萃取优势,样品需求量少(200μL)、吸附剂填充量少(2μL)、萃取时间短的(6 min)等优点。此方法被成功应用于人尿实际样品中的样品检测,回收率为93.7-105.5%,相对标准偏差小于8.5%(n=3),对阿替洛尔和美托洛尔的平均富集倍数分别为21倍和19倍。本方法对环境友好且在进行人尿样品检测时可以重复使用8次,分析性能无明显下降。表明该方法可能在临床医学、毒品检测、食品分析和环境检测等领域得到广泛运用。(本文来源于《东北师范大学》期刊2017-05-01)

刘佳[7](2017)在《氧化石墨烯功能化的毛细管电色谱酶微反应器的制备及性能研究》一文中研究指出毛细管电泳酶微反应器是生物分子固定方法、微酶反应以及高效分离技术相结合的一种微生化反应装置。作为一种低耗高效且易于自动化的酶催化反应工具,它在蛋白质酶解、生物转化及酶抑制剂药物筛选等方面具有独特的优势。毛细管电泳酶微反应器主要由固定化酶微反应器部分和毛细管电泳分离部分构成。其中固定化酶的活性与固酶的载体基质密切相关,而其毛细管电泳分离性能与分离模式有关。本论文选择纳米材料氧化石墨烯作为固载基质,制备了一种新型的氧化石墨烯功能化毛细管电色谱酶微反应器。氧化石墨烯特有的物化和生化性能,将其引入毛细管电泳酶微反应器中,既可使毛细管电泳从常规的毛细管区带电泳分离模式转变为分离效率更高的毛细管电色谱分离模式,同时还能增强固定化酶的活性,实现毛细管电泳酶微反应器整体性能的提升。该研究既为毛细管电泳酶微反应器新方法的发展拓展了思路,也为其在酶抑制剂药物筛选等相关领域的应用提供了新的工具。论文研究内容主要包括:1.对近年来以石墨烯及其衍生物氧化石墨烯等为载体的固定化酶技术进行了评述。重点介绍了基于物理吸附、化学键合和包埋原理的石墨烯相关材料为载体基质的固定化酶的制作方法及其在生物催化等领域的最新应用。2.基于物理吸附法和化学共价法,发展了氧化石墨烯功能化毛细管电色谱的制备方法。对所制备的毛细管电色谱进行了扫描电镜、热失重、拉曼光谱等表征。对该色谱柱的稳定性和分离度进行了考察。实验结果显示氧化石墨烯修饰的毛细管电色谱可使N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯HCl盐(BAEE)和N-苯甲酰-L-精氨酸(BA)混合物的分离度从裸管(毛细管区带电泳分离模式)的3.7提高到4.7。这表明氧化石墨烯修饰的毛细管电色谱能显着提高毛细管电泳分离性能,为复杂化合物的分离奠定了基础。3.在上述基础上,采用物理吸附和化学共价两种酶固载化技术,成功制得氧化石墨烯功能化毛细管电色谱酶微反应器。以胰蛋白酶为固定模型酶,进行了酶活及酶促动力学等研究。实验结果显示,物理吸附法制备的固定化酶的水解活性优于化学共价法。酶促动力学结果显示,基于物理吸附法制备的氧化石墨烯功能化毛细管电色谱酶微反应器的米氏常数Km为1.10mM,最大反应速率Vmax为0.32mM-1。其Vmax是自由酶溶液的3000多倍,而Km约为自由酶溶液的1/20。与未修饰氧化石墨烯的毛细管固定化酶的活性(Km 109.77 mM,Vmax 0.00046 mM·s-1)相比,氧化石墨烯为载体的固定化酶的亲和力与催化速率都有显着提高。这表明氧化石墨烯作为固酶基质能显着增强和提高酶的催化活性。4.利用所制备的微反应器从10种中药材中快速筛选有胰蛋白酶抑制剂活性成分的药材。结果显示叁七和大黄中存在胰蛋白酶抑制剂活性成分,对胰蛋白酶的抑制率分别为26%和26.12%。这表明所制备的微反应器是一种潜在药物活性成分的快速筛选工具。(本文来源于《中央民族大学》期刊2017-03-27)

CAMARA,MOHAMED,AMARA[8](2016)在《基于毛细管电泳—酶微反应器的酶分析及其抑制动力学研究》一文中研究指出酶反应是所有生命组织代谢的基础。人身体内的酶发生突变,生产过剩,生产不足或者缺失,都会导致严重的疾病发生。此外,许多药物都是酶的抑制剂,所以,酶反应的研究在酶抑制类药物的研发和疾病的临床诊断中具有非常重要的意义。因此,发展快速、准确、有效的测定酶活性酶、动力学和酶抑制动力学方法对于了解酶催化反应机制以及新药研发和疾病诊断方法都具有重要的作用。毛细管电泳由于其分离效率高,检测灵敏度高,分析速度快,样品和试剂消耗少以及可以和多种检测器连接等优势,已经成为酶促反应研究的一个强有力工具。基于毛细管的固定化酶微反应器是一种在线酶分析方法,被广泛应用于酶分析研究的各个方面,如酶活性测定,酶反应动力学研究,酶抑制剂筛选,酶介导的代谢途径分析和蛋白质组学分析等。本论文围绕着基于毛细管的固定化酶微反应器开展了以下研究工作:一.提出了一种在线CE酶分析方法测定了葡萄磷酸脱氢酶(G6PDH)的酶活性和酶抑制动力学参数。该方法操作简单,方便,通过层层自主装的方式将G6PDH固定在毛细管的内壁上,形成开管式固定化酶微反应器(OT-IMER)。该酶微反应器具有良好的稳定性和重现性。所制备的毛细管G6PDH酶微反应器,在线研究了葡萄糖磷酸脱氢酶的酶活性和酶抑制动力学,测定结果与线外结果一致,证明该毛细管G6PDH酶微反应器在酶分析测定方面的准确性。二.很多天然草药是酶抑制剂的重要来源,在研究开发新药中起着重要的作用。天然提取物如绿茶由于具有其成本低,毒性小,效果明显等优点,已经被广泛应用于预防和治疗疾病方面。我们在以前开管毛细管G6PDH酶微反应器的基础上,通过增加涂敷的层数制备了多层毛细管G6PDH酶微反应器,在线测定了绿茶提取物对C6PDH酶的抑制作用。多层毛细管G6PDH酶微反应器不仅增加了酶的负载量,也提高了其稳定性。该酶反应器成功在线测定了G6PDH酶的酶活性和绿茶提取物对G6PDH酶的抑制作用。叁.我们制备了一种以二氧化硅刷子为载体的新型开管毛细管酶微反应器,制作过程快速简单,且二氧化硅刷子由于其独特的结构大大的增加了酶反应器的比表面积,进而提高了酶负载量。我们以胰蛋白酶介导的蛋白水解反应为例,研究了该酶反应器的分析性能和可行性。以N-苯甲酰基-L-精氨酸乙酯盐酸盐(BAEE)为底物,通过毛细管电泳法BAEE的酶解产物(N-苯甲酰-L-精氨酸(BA))进行定量检测。连续测定50次,产物BA浓度的相对标准偏差(RSD)小于3.45%;经过连续20天的测定,酶活性依然可以保持最初活性的79.05%,以上结果均表明,该新型开管毛细管酶微反应器具有很好的重现性和稳定性。该酶反应器成功应用于细胞色素C和溶菌酶的快速在线水解分析。四.提出了一种基于薄层色谱法的在线酶分析实验方法。该方法是依据酶、底物和产物在薄层板上的展开速度不同,实现底物和酶的反应与分离过程。酶被固定于薄层色谱板上,展开过程中,底物与酶相遇发生酶反应,随着溶剂的展开,底物与酶、产物分离。通过测定产物的峰面积对酶反应进行定量研究。我们用该方法成功测定了葡萄糖磷酸脱氢酶的酶活性常数K_m和叁种金属离子的抑制动力学常数K_i,与线外结果吻合,表明该方法在酶分析测定方面的准确性。(本文来源于《东北师范大学》期刊2016-05-01)

刘冬梅,陈娟,师彦平[9](2016)在《毛细管电泳α-葡萄糖苷酶微反应器构建及其反应动力学研究》一文中研究指出固定化酶是指将游离酶与某些不溶于反应体系的固体材料相结合,限制其在特定的区域内进行酶促反应,并使酶能够回收及重复使用的技术。毛细管酶微反应器(capillary immobilized enzyme microreactor,CIMER)[1]是固定化酶的一种形式,以毛细管为载体,将酶固定于毛细管内壁进行酶促反应、抑制反应、酶抑制剂筛选等的研究。CIMER具有样品用量少、成本低、稳定性高、可连续使用、易于实现酶分析的自动化和微型化等优势。近年来毛细管酶微反应器已经引起了越来越广泛的关注,展现出显着的优越性,成为分析化学、药物筛选、临床医学等相关学科的重要研究方法和手(本文来源于《中国化学会第十一届全国生物医药色谱及相关技术学术交流会(大会特邀报告及墙报)论文摘要集》期刊2016-04-26)

刘冬梅,陈娟,师彦平[10](2016)在《毛细管固定化酶微反应器用以α-葡萄糖苷酶的酶促反应动力学和抑制反应动力学研究》一文中研究指出固定化酶是指将游离酶与某些不溶于反应体系的固体材料相结合,限制其在特定的区域内进行酶促反应,并使酶能够回收及重复使用的技术。毛细管酶微反应器(capillary immobilized enzyme microreactor,CIMER)[1]是固定化酶的一种形式,以毛细管为载体,将酶固定于毛细管内壁进行酶(本文来源于《中国中西部地区第五届色谱学术交流会暨仪器展览会论文集》期刊2016-04-22)

毛细管酶微反应器论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

固定化酶微反应器(IMERs)是将生物酶分子的固定化技术与微通道内生物酶反应相结合而制备的一类酶反应系统。基于开管毛细管柱的固定化酶微反应器不仅兼具酶的高选择性催化、可重复使用及微通道分析的低试剂消耗、易分离等优点,而且微反应器制备简单,操作方便,易于与其它分析设备相连接,使其在生命科学如酶反应动力学、抑制剂的筛选、蛋白质组学以及生物催化等领域得到广泛的应用。对于如何提高固定化酶微反应器的性能,包括催化效率和稳定性等,毛细管柱内的酶固定化技术至关重要,也是目前相关研究领域备受关注的研究方向。与毛细管固定化酶微反应器相对应,毛细管色谱柱的制备是毛细管电色谱高效分离分析的核心部分,也是电色谱理论和应用研究的重点,对毛细管电色谱技术的发展起着举足轻重的作用,目前已经成为一种迅速发展起来的新兴技术。本论文围绕新型开管毛细管柱在固定化酶微反应器和毛细管电色谱的研究与应用,展开了以下研究工作:1、提出了基于叁维多孔层开管毛细管柱(3D-PLOT)的开管毛细管固定化酶微反应器,并成功应用于标准蛋白在线水解以及HeLa细胞的蛋白组学研究。我们通过简单易控的原位一步两相合成法,实现了石英毛细管内表面的多孔层修饰。获得的多孔层形貌高度均匀、孔隙分布窄,同时极大增大了微通道内表面积,增加了酶负载量。和未经修饰的毛细管微反应器相比,3D-PLOT修饰提高了酶反应效率、缩短了分析时间,获得了更优异的稳定性和重现性。以胰蛋白酶为例,我们系统分析了制备的3D-PLOT-IMER的性能。通过将3D-PLOT-IMER与nano-LC-MS/MS系统在线联用,成功用于标准蛋白在线水解、HeLa细胞提取液以及活细胞的在线分析,证明了利用所提出的叁维多孔层进行表面修饰是一种简单有效的酶固定方法,可广泛应用于不同类型的IMERs。2、建立一种基于多孔层表面改性毛细管的新型毛细管电泳-固定化酶微反应器在线联用技术(CE-IMER),应用于乙酰胆碱酯酶(AChE)在线酶分析及蔬菜中有机磷检测。我们借助原位一步两相反应,在毛细管端头内表面修饰了高度均匀的多孔层,并在所制备的多孔层修饰的开管毛细管柱上通过层层自组装(LBL)固定AChE。毛细管的其余部分用作CE分离分析通道。酶反应底物流经酶反应器时,在线酶催化反应生成产物,底物随后在电泳的作用下与固定化酶分离而终止反应,产物和剩余底物在后续电泳中实现分离和在线检测。实验结果证明,提出的CE-IMER具有良好的稳定性和重现性,保证了在线酶分析的可靠性和准确性。同时,多孔层修饰大大增大了毛细管内比表面积,有效提高了酶的负载量,从而提高酶反应效率、缩短了分析时间。CE-IMER成功应用于小白菜汁样品中有机磷农药的检测,显示出在实际样品分析中潜在的应用价值。本研究工作为使用CE在线酶分析提供了一种简单高效的方法,显示了其在生物分析中的重要价值。3、发展了一种基于高度均匀多孔层表面修饰的毛细管色谱柱的新型毛细管电色谱(CEC)方法。我们基于以上工作所提出的毛细管内壁多孔层修饰方法,在50μm内径的石英毛细管中修饰厚度约为240 nm的均匀的多孔层表面。以萘和联苯的混合物为试验样品,系统研究了制备的PLOT柱作为毛细管电色谱柱的色谱性能,证明该PLOT色谱柱具有良好的分离效率,稳定性及重现性。无需进行任何进一步修饰,该PLOT色谱柱成功应用于叁种不同类型样品的高效分离分析:胰蛋白酶水解蛋白(溶菌酶和牛血清蛋白)的多肽产物、β-阻断剂(碱性样品)和多环芳烃(中性样品)。研究结果表明,该PLOT色谱柱制备简单,柱效高,多孔层修饰提高了相比和柱容量,增加了电色谱分析中固定相和样品之间的相互作用,因此显着提高了CEC的分离效率。我们所发展的PLOT色谱柱对于分析各种不同类型样品显示了潜在的应用价值。4、建立了基于毛细管电泳技术-离子液体分散液相微萃取的尿液中毒品的检测方法。我们利用离子液体分散液相微萃取技术,以1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐离子液体为萃取剂,结合毛细管电泳技术,实现尿液中痕量毒品(麻黄碱和氯胺酮)的高效富集及分离检测。在优化条件下,麻黄碱和氯胺酮在0.10-10 mg/L范围内具有良好的线性关系,尿液中的检出限分别为0.21和0.39 mg/mL,加标回收率为79%-90%。该方法具有低消耗、操作简单、富集效率高、检测灵敏、干扰小等特点,适用于生物检材中痕量毒品的分析检测。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

毛细管酶微反应器论文参考文献

[1].刘佳,董旭,郭华,王嫚,申刚义.氧化石墨烯基质毛细管电色谱胰蛋白酶微反应器的性能研究[J].分析测试学报.2019

[2].刘心.基于多孔层开管毛细管柱的固定化酶微反应器和毛细管电色谱的研究与应用[D].东北师范大学.2019

[3].张艳梅,李凤,赵晓燕,赵志勇,周昌艳.基于共价键合法的毛细管固定化酶微反应器的制备[J].分析试验室.2019

[4].毋楠.基于DNA杂交技术的毛细管酶微反应器的研究[D].北京化工大学.2018

[5].李静,吴飞超,林露,刘海鸥,张雄福.毛细管内流动法UiO-66-NH_2膜固载钯构建高效催化膜微反应器[C].第19届全国分子筛学术大会论文集——B会场:等级孔材料多孔膜材料多孔材料理论研究.2017

[6].王雨佳.基于壳核介孔材料的酶固定微反应器用于尺寸筛选蛋白水解分析及新型毛细管微萃取—毛细管电泳技术对β-阻滞剂的富集检测[D].东北师范大学.2017

[7].刘佳.氧化石墨烯功能化的毛细管电色谱酶微反应器的制备及性能研究[D].中央民族大学.2017

[8].CAMARA,MOHAMED,AMARA.基于毛细管电泳—酶微反应器的酶分析及其抑制动力学研究[D].东北师范大学.2016

[9].刘冬梅,陈娟,师彦平.毛细管电泳α-葡萄糖苷酶微反应器构建及其反应动力学研究[C].中国化学会第十一届全国生物医药色谱及相关技术学术交流会(大会特邀报告及墙报)论文摘要集.2016

[10].刘冬梅,陈娟,师彦平.毛细管固定化酶微反应器用以α-葡萄糖苷酶的酶促反应动力学和抑制反应动力学研究[C].中国中西部地区第五届色谱学术交流会暨仪器展览会论文集.2016

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毛细管酶微反应器论文-刘佳,董旭,郭华,王嫚,申刚义
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