可目视化论文-石霖

可目视化论文-石霖

导读:本文包含了可目视化论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:蛋白芯片,禽病,抗体,诊断

可目视化论文文献综述

石霖[1](2009)在《四种禽病毒抗体可目视化诊断蛋白芯片的制备和初步应用》一文中研究指出生物芯片技术是随着人类基因组计划(HGP)的实施而产生的一种用于生命科学研究的新技术、新方法。随着基因芯片技术的不断成熟以及多次取得令人瞩目的成果,对蛋白芯片技术的研究应运而生。此项技术是一种高通量、高灵敏度、自动化的蛋白质分析技术,在蛋白质组的功能研究、疾病诊断以及药物开发中显示出巨大的潜力。本研究旨在研制可同时鉴别检测AI、ND、IB、IBD四种禽病血清抗体的可视化蛋白芯片。本技术平台的构建内容包括蛋白样品的制备、点样的固定条件、与抗体的杂交条件及点样缓冲液的摸索和显色最佳条件的探索等过程。用超速离心法和蔗糖密度梯度法分别纯化了四种禽病毒蛋白抗原,调整到合适浓度后点于醛基修饰的片基上,制备蛋白芯片;分别与四种禽病阳性血清杂交,再与金标二抗杂交,银染显色后读取结果,建立四种禽病的可视化蛋白芯片工作平台;进一步对此芯片的特异性以及灰度值与抗体浓度的相关性进行了研究;最后对18个现地血清样品进行了初步应用检测。结果显示经过条件优化后,芯片检测探针可特异性的相应的抗体进行杂交,呈现较强的杂交信号,且无交叉杂交。信号灰度值在抗体浓度为50μg/mL~300μg/mL范围内成线性关系。用芯片和其它传统抗体检测方法同时检测18份现地样品,结果发现可视化蛋白芯片具有很好的特异性,并且灵敏性明显高于传统检测手段。经过一系列条件的优化,构建了可同时鉴别检测AI、ND、IB、IBD四种禽病血清抗体的可视化蛋白芯片;该芯片具有快速、简便、灵敏、特异性的特点,无需特殊仪器,成本低。血清样品检测可信度高,且灵敏度高于琼脂扩散试验,可推广到基层使用。该方法同时结合免疫胶体金技术,银显影技术以及蛋白芯片技术,并且首次以纯化的全病毒蛋白作为捕获抗原,是血清学检测技术的创新和突破。可视化蛋白芯片为芯片技术的推广起到重要的推动作用,该技术为未来开发可检测多种抗体的高密度、集成化芯片的问世与推广打下良好的基础。(本文来源于《中国农业科学院》期刊2009-07-01)

石霖,王秀荣,杨忠苹,陶启蒙,王煜[2](2009)在《禽流感、新城疫可目视化诊断蛋白芯片的制备及初步应用》一文中研究指出本研究制备了可以同时鉴别诊断禽流感(AI)、新城疫(ND)2种禽病血清抗体的可视化蛋白芯片。以超速离心法和蔗糖密度梯度法分别纯化了2种病毒蛋白抗原,用点样缓冲液稀释后点于醛基修饰的片基上,制备蛋白芯片;将芯片与待检血清杂交后,再与胶体金标记的二抗杂交,银染显色后根据灰度值判定结果,从而建立了2种禽病的可视化蛋白芯片鉴别诊断方法。采用该方法对18份现地血清样品进行初步检测,结果显示该芯片可特异性的与相应的抗体杂交,无交叉反应,而且呈现较强的杂交信号,其信号灰度值在阳性血清浓度为50μg/mL~300μg/mL范围内成线性关系(Y=0.426X+4.225)。用该芯片方法和琼扩(AGP)抗体检测方法对18份现地样品进行符合率检测,结果表明该可视化蛋白芯片具有很好的特异性,并且检测灵敏度为是AGP方法的400倍以上。研究表明该方法可用于同步鉴别2种禽病,是一种有效的抗体检测新方法。(本文来源于《中国预防兽医学报》期刊2009年01期)

唐金凡,简强,崔亚丽,陈超,李铮[3](2007)在《基于金磁微粒标记技术的可目视化蛋白质芯片检测方法的建立》一文中研究指出目的应用金磁微粒标记蛋白质技术,建立可目视化蛋白质芯片检测体系,比较金磁微粒和胶体金标记蛋白质技术应用于蛋白质芯片检测效果的优劣。方法将人IgG点制于环氧基修饰的玻片上,分别与金磁微粒和胶体金标记的羊抗人IgG温育,银染显色,肉眼观察并用普通扫描仪记录结果。结果基于金磁微粒的蛋白质芯片人IgG最佳点样浓度为0.2mg/ml,37℃温育2h,银染10~15min,检测结果信噪比高;基于胶体金的蛋白质芯片人IgG最佳点样浓度为0.1mg/ml,37℃温育1h,银染15~20min,检测结果信噪比高。结论金磁微粒标记蛋白质技术应用于蛋白质芯片的检测,具有和胶体金一致的可目视化检测效果,且其标记技术简单,标记的蛋白质可定量。(本文来源于《临床检验杂志》期刊2007年04期)

唐金凡[4](2007)在《基于金磁微粒标记技术的可目视化蛋白质芯片检测方法的建立及应用》一文中研究指出蛋白质芯片也叫蛋白质微阵列,是将大量蛋白质分子按预先设置的排列固定于特定的载体表面,根据蛋白质分子间的特异性结合原理,对靶分子实现高通量、高灵敏度、微型化检测,在蛋白质组的功能研究、疾病诊断以及药物开发中显示了巨大的潜力。目前,蛋白质芯片的检测方法主要有荧光标记和免疫金-银染色法,其中以胶体金作为蛋白标记物结合银增强染色法应用于蛋白质芯片检测,灵敏度高,并可目视化判读结果。但是胶体金标记蛋白质的过程复杂、繁琐,标记的蛋白质不能定量。本研究用金磁微粒(GoldMag particles)作为一种新的蛋白标记技术,结合银增强染色方法建立可目视化蛋白质芯片的检测体系。金磁微粒是Fe_3O_4包被金颗粒后形成的纳米级磁性复合微粒,除具有超顺磁性、磁响应性、悬浮稳定性等特点外,还具有胶体金的特性。金磁微粒标记技术方法简便,操作简单,标记效率高,标记的蛋白质可定量。本文首先以人IgG和羊抗人IgG为模式蛋白,将人IgG固定于环氧基修饰的玻片上制备蛋白质芯片,通过封闭、与金标羊抗人IgG孵育,结果经银染显色进行信号放大,产生可目视化的黑色点阵。通过优化条件,建立了可目视化蛋白质芯片检测体系,确定了以下最佳实验条件:(1)选择GPTS玻片作为本实验的载体。(2)最佳点样浓度为0.1-0.2mg/mL。(3)点样后玻片固定蛋白的条件为37℃,1-2h。(4)抗原抗体的反应时间为30min。(5)以1%BSA作为封闭剂。(6)银染显色时间为10-15min。按照优化后的条件,将该方法应用于HCV抗体的检测,分析了该体系的检测限和特异性,检测了经ELISA验证的10例健康人血清和6例HCV阳性血清。结果表明:该体系简便、快捷、特异性强,阴性和阳性检测结果与ELISA相符。通过比较金磁微粒和胶体金标记技术在可目视化蛋白质芯片检测方法中的优劣,结果表明,胶体金检测方法灵敏度高,但是非特异性强,容易产生假阳性结果;金磁微粒的粒径较大,金密度小,银染作用不强。但是金磁微粒非特异性吸附弱,假阳性率低,而且金磁微粒标记蛋白质的过程简单,标记的蛋白可以定量,随着金磁微粒制备技术的发展,其在可目视化蛋白质芯片检测中具有巨大的应用潜力,并可推动蛋白质芯片技术尽快应用于临床检验。(本文来源于《西北大学》期刊2007-05-01)

可目视化论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

本研究制备了可以同时鉴别诊断禽流感(AI)、新城疫(ND)2种禽病血清抗体的可视化蛋白芯片。以超速离心法和蔗糖密度梯度法分别纯化了2种病毒蛋白抗原,用点样缓冲液稀释后点于醛基修饰的片基上,制备蛋白芯片;将芯片与待检血清杂交后,再与胶体金标记的二抗杂交,银染显色后根据灰度值判定结果,从而建立了2种禽病的可视化蛋白芯片鉴别诊断方法。采用该方法对18份现地血清样品进行初步检测,结果显示该芯片可特异性的与相应的抗体杂交,无交叉反应,而且呈现较强的杂交信号,其信号灰度值在阳性血清浓度为50μg/mL~300μg/mL范围内成线性关系(Y=0.426X+4.225)。用该芯片方法和琼扩(AGP)抗体检测方法对18份现地样品进行符合率检测,结果表明该可视化蛋白芯片具有很好的特异性,并且检测灵敏度为是AGP方法的400倍以上。研究表明该方法可用于同步鉴别2种禽病,是一种有效的抗体检测新方法。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

可目视化论文参考文献

[1].石霖.四种禽病毒抗体可目视化诊断蛋白芯片的制备和初步应用[D].中国农业科学院.2009

[2].石霖,王秀荣,杨忠苹,陶启蒙,王煜.禽流感、新城疫可目视化诊断蛋白芯片的制备及初步应用[J].中国预防兽医学报.2009

[3].唐金凡,简强,崔亚丽,陈超,李铮.基于金磁微粒标记技术的可目视化蛋白质芯片检测方法的建立[J].临床检验杂志.2007

[4].唐金凡.基于金磁微粒标记技术的可目视化蛋白质芯片检测方法的建立及应用[D].西北大学.2007

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