磷酸化酶论文-路春峰,迟晓明,李浩,张培荣,张勇

磷酸化酶论文-路春峰,迟晓明,李浩,张培荣,张勇

导读:本文包含了磷酸化酶论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:脓毒症,脓毒性休克,心肌损伤,糖原磷酸化酶同工酶脑型

磷酸化酶论文文献综述

路春峰,迟晓明,李浩,张培荣,张勇[1](2019)在《糖原磷酸化酶同工酶脑型在脓毒症心肌损伤早期的诊断价值》一文中研究指出目的:探讨糖原磷酸化酶同工酶脑型(GPBB)在脓毒症心肌损伤早期的诊断价值。方法:收集2018-02—2019-02期间在潍坊医学院附属医院重症医学科诊断为脓毒症及脓毒性休克的患者54例(其中脓毒症组32例,脓毒性休克组22例),并收集同期本院体检人员20例为对照组。在诊断为脓毒症后1、6 h监测cTnI、NT-proBNP、CK、CK-MB、GPBB水平的变化,对照组于体检时检测上述指标。根据脓毒症与脓毒性休克患者入院24 h内超声心动图结果有无左室射血分数<50%,分为心肌损伤组与非心肌损伤组。结果:诊断脓毒症1 h,脓毒症组NT-proBNP、GPBB水平高于对照组(P<0.05),脓毒性休克组NT-proBNP、GPBB水平高于脓毒症组(P<0.05);诊断脓毒症6 h,脓毒性休克组cTnI、NT-proBNP、CK、CK-MB和GPBB水平高于脓毒症组(P<0.05);脓毒症组与脓毒性休克组cTnI、NT-proBNP、CK、CK-MB、GPBB水平在诊断脓毒症6 h与诊断脓毒症1 h比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。诊断脓毒症1 h心肌损伤组NT-proBNP、GPBB水平较非心肌损伤组升高,差异均有统计学意义(P<0.05);诊断脓毒症6 h心肌损伤组cTnI、NT-proBNP、CK、CK-MB、GPBB水平较非心肌损伤组升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。在诊断脓毒症1 h,GPBB诊断心肌损伤的ROC曲线下面积为0.842±0.065。在诊断脓毒症6 h,GPBB和cTnI诊断心肌损伤的ROC曲线下面积分别为0.820±0.069、0.838±0.074。结论:GPBB对脓毒症心肌损伤的早期诊断价值优于传统心肌标志物。(本文来源于《临床急诊杂志》期刊2019年12期)

贺望兴,杨普香,李延升,石旭平,黎小萍[2](2019)在《灵芝尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶基因的电子克隆与生物信息学分析》一文中研究指出尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(UGPase)是灵芝多糖合成途径的关键酶,用电子克隆方法得到灵芝UGPase基因,并利用生物信息学软件对UGPase基因编码蛋白的理化性质、亚细胞定位、亲/疏水性、信号肽、蛋白结构域、蛋白高级结构以及系统进化树的构建等方面进行了预测和分析。结果表明:UGPase基因全长1691 bp,包含一个1515 bp的完整开放阅读框,编码504个氨基酸;该蛋白不存在信号肽和跨膜结构域,它是定位于细胞质内的一种亲水性稳定蛋白酶;它的高级结构主要是由α螺旋结构和无规则卷曲结构所组成;同源比对分析显示,该酶基因编码的氨基酸序列和其他动植物的UGPase酶相比在序列组成、高级结构方面具有一定的相似性。(本文来源于《江西农业学报》期刊2019年09期)

董栋,罗育其,廖述文[3](2019)在《干扰素α对小鼠结肠癌肝转移模型及胸苷磷酸化酶表达影响研究》一文中研究指出目的分析干扰素α对小鼠结肠癌肝转移模型及胸苷磷酸化酶(TP)表达影响。方法 4~6周雄性BALB/C小鼠20只,随机分为两组,对照组与实验组,每组10只。其中对照组每日灌胃等剂量生理盐水,每日1次;实验组灌胃颈部皮下注射2 mg干扰素α,每日1次。采用Rt-PCR法检测TP表达,采用Western blot检测TP蛋白表达。结果实验组肝表面肿瘤结节数多于对照组,肝质量低于对照组(P<0.05)。实验组TP mRNA表达高于对照组(P<0.05)。实验组TP蛋白表达灰度值高于对照组(P<0.05)。结论干扰素α可上调小鼠结肠癌肝转移TP表达,抑制结肠癌细胞的肝转移,达到治疗目的。(本文来源于《临床医药文献电子杂志》期刊2019年57期)

毛国涛,王园园,李斌,刘茜,张宏森[4](2019)在《非洲栖热腔菌(Thermosipho africanus)纤维寡糖磷酸化酶的结晶及衍射分析》一文中研究指出为探究非洲栖热腔菌(Thermosipho africanus)纤维寡糖磷酸化酶TaCDP底物宽泛性的结构基础,通过Ni离子亲和层析-阴离子交换层析-凝胶过滤层析3步法纯化TaCDP,采用气相扩散法筛选TaCDP晶体,利用X-射线晶体学方法对TaCDP的晶体结构进行了研究。结果表明,纯化后TaCDP蛋白的纯度高,聚集状态均一,在2. 2 mol·L~(-1)(NH4)2HPO4,0. 1 mol·L~(-1)CHES-NaOH,p H值9. 2,10. 0 g·L~(-1)polyvinylpyrrolidone K15条件下筛选到TaCDP与纤维叁糖底物的复合物晶体。该晶体经同步辐射收集衍射数据后分辨率可达0. 28 nm,晶体空间群属于P4122,晶胞参数为a=b=9. 928 nm,c=56. 251 nm,表明1个不对称单位有2个TaCDP分子。(本文来源于《河南农业大学学报》期刊2019年03期)

杜宇阳[5](2019)在《蛋白酪氨酸去磷酸化酶4a3(PTP4a3)对肝细胞癌增殖与转移的调控作用》一文中研究指出蛋白酪氨酸去磷酸化酶4a3(PTP4a3)是一种去磷酸化酶,属于双特异性去磷酸化酶PTP4a家族中的一员。其作用底物广泛,能对酪氨酸、丝氨酸/苏氨酸的磷酸基团产生去磷酸化作用。已有研究表明PTP4a3可能参与结肠癌、乳腺癌、肺癌、多发性骨髓瘤等多种恶性肿瘤的增殖和转移过程。目前,关于PTP4a3在肝癌中的相关功能的研究较少,其具体的作用机制尚不明确。TCGA公共数据库中相关数据分析结果显示,肝癌患者癌组织中PTP4a3的表达量明显高于其癌旁组织(P<0.0001),Kaplan-Meier生存曲线分析结果也表明,PTP4a3高表达的患者其生存情况更差(P=0.036)。与此同时,对81例肝癌患者的癌组织和癌旁组织的q-PCR检测结果发现,PTP4a3高表达的患者占比高达79.0%,且PTP4a3高表达的患者其甲胎蛋白的含量明显偏高,而甲胎蛋白含量也是肝癌临床检查的重要指标之一。细胞实验方面,通过在肝癌细胞系SNU449和CRL-8024中过表达PTP4a3,发现细胞的增殖和转移能力显着增强。而在CRL-8024中敲低PTP4a3,细胞的增殖能力则会受到抑制。此外,通过对PTP4a3基因肝脏特异性敲除的小鼠给予特定的肝癌环境刺激,构建诱发性肝癌模型,协助我们进一步从体内探究PTP4a3基因对肝癌发展的影响。在后续实验中,还将利用多种动物模型如对免疫缺陷鼠皮下、原位、尾静脉注射肿瘤细胞的方式构建移植型肝癌模型来佐证PTP4a3对肝癌发展和转移能力的影响。分别从体外、体内两个方面论证PTP4a3在肝癌发展过程中所扮演的角色。(本文来源于《哈尔滨工业大学》期刊2019-06-01)

王淼淼[6](2019)在《Bifidobacterium adolescentis蔗糖磷酸化酶的重组表达、应用及固定化研究》一文中研究指出蔗糖磷酸化酶(Sucrose phosphorylase,简称SPase)作为一种葡萄糖基转移酶,能够以蔗糖为供体、葡萄糖为受体,通过转苷反应制备曲二糖。曲二糖具有促进肠道益生菌生长、抑制α-葡萄糖苷酶活性及延缓碳水化合物消化吸收等功能,在食品和医药领域具有广泛应用潜力,通常采取SPase等合成曲二糖。然而,目前报道的SPase仅在大肠杆菌中异源表达,并不适用于食品工业应用,而枯草芽孢杆菌(B.subtilis)作为食品安全宿主则是表达SPase的更佳选择。本研究首次将青春双歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis)来源的蔗糖磷酸化酶在B.subtilis WS11中异源表达,研究了SPase作为一种天然胞内酶却被分泌至胞外的原因,并对其酶学性质进行研究。在此基础上,优化重组酶制备曲二糖的工艺。此外,采用多种固定化载体对SPase进行固定化,获得了较好的固定化效果。主要研究结果如下:(1)构建重组菌B.subtilis/pBSMuL3-SPase和B.subtilis/pHY300PLK-SPase,其中重组菌B.subtilis/pBSMuL3-SPase摇瓶发酵酶活更高,胞内酶活为0.56 U·mL~(-1)。此外,还意外发现其胞外酶活高达1.58 U·mL~(-1),此胞外表达现象简化了酶液获取过程。进一步分析SPase高效分泌至胞外的原因,推测SPase是通过非典型分泌途径被分泌到胞外。(2)将酶液进行纯化,考察其酶学性质。结果表明重组酶的最适反应pH为7.5,最适温度为60℃,在60℃和55℃的半衰期分别为20 h和80 h,且有广泛的pH耐受性。(3)利用重组SPase催化合成曲二糖,在单因素优化的基础上,进行L9(3~3)正交试验。最终得到最佳工艺条件:加酶量为20 U·g_(底物)~(-1),蔗糖/葡萄糖为0.5 M/0.5 M,pH 7.0,反应温度50℃,反应时间36 h,在此条件下生成曲二糖的转化率为40.01%,产量为104.45g·L~(-1),纯度为44.16%。为得到更高纯度的曲二糖,采用酿酒酵母处理产物除去可消化糖,最终得到纯度为95.14%的曲二糖。(4)采用壳聚糖-聚乙二醇、LX-1000EA、LX-1000HA叁种载体对重组SPase进行固定化,其中LX-1000HA固定化SPase操作方便,固定化和应用效果好、成本低。在加酶量9 U·g_(载体)~(-1)、固定化时间为16 h时,LX-1000HA固定化SPase酶活回收率达到101.82%。酶学性质表明,其最适温度为55℃,最适pH为7.0。利用LX-1000HA固定化SPase连续反应8批次后,残留酶活为97.03%,且转化率仍保持在45.24%。上述实验结果表明,该固定化酶可有效促进曲二糖的合成,且具有良好的操作稳定性,从而为固化酶工业化连续生产曲二糖提供参考价值。(本文来源于《江南大学》期刊2019-06-01)

何聪芬,黄爱清,王巧娥,张贵友,余磊[7](2019)在《两种耐热磷酸化酶的构建及高效催化合成红景天苷》一文中研究指出目的:使用表达耐热蔗糖磷酸化酶的大肠杆菌重组工程菌E. coli BL21/pET-Spase和耐热纤维二糖磷酸化酶的大肠杆菌重组工程菌E. coli BL21/pET-Cpase,发酵培养后粗酶液作为催化剂,以价格低廉的蔗糖为原料合成红景天苷。方法:分别构建耐热蔗糖磷酸化酶和耐热纤维二糖磷酸化酶大肠杆菌重组菌,然后将重组菌、蔗糖、酪醇和磷酸混合,得到反应混合物,使反应混合物在45℃下转化,而产生红景天苷。结果:在耐热蔗糖磷酸化酶酶液1200 U/L、耐热纤维二糖磷酸化酶酶液500 U/L、蔗糖110 g/L、酪醇30 g/L和磷酸50 m M的浓度下,反应条件为pH 7.0、温度45℃、转速50转/分、反应时间32小时后,红景天苷浓度达到23.7 g/L。结论:本研究使用蔗糖磷酸化酶和纤维二糖磷酸化酶联合催化的工艺,成功地高收率合成了红景天苷。同时,本研究构建的耐热磷酸化酶酶活高,处理简单,为拓展糖苷类似物的合成提供了一种新的方法。(本文来源于《现代生物医学进展》期刊2019年10期)

郭鑫[8](2019)在《兴安落叶松尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶促进转基因植物营养生长的分子机理》一文中研究指出兴安落叶松(Larix gmelinii)属于松科落叶松属,是大兴安岭地区的主要造林树种。由于其材质具有较强的机械性能,可广泛用于制造胶合木材和木质复合材料,因此具有较高的应用价值。尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(UGPase)催化葡萄糖-1-磷酸(Glc-1-P)产生尿苷二磷酸葡萄糖(UDPG),UDPG是植物细胞壁的主要组成物质纤维素和胼胝质合成的前体物质,因此UGPase对植物的生长发育、特别是林木材质形成起决定性作用。前期研究结果证实,兴安落叶松UGPase(LgUGPase)可通过调控植物体内的多糖代谢促进纤维素沉积及细胞壁形成,进而增强转基因植物的营养生长。因此,深入研究该基因的功能,作用机制和表达调控机理具有重要意义。前期研究结果证实,LgUGPase为双拷贝基因,其中pLgUGPase1::GUS在拟南芥幼苗中高效表达,且它的表达受到GA及MeJA的诱导。为了比较分析LgUGPase1/2的表达特性,本研究利用基因组步移的方法克隆了1588 bp LgUGPase2基因的启动子序列,PLANTCARE分析发现,pLgUGPase1/2均含有光、干旱、机械损伤、真菌诱导等顺式作用元件以及生长素、茉莉酸甲酯、乙烯和赤霉素等激素响应元件。转基因拟南芥的GUS组织化学染色表明,pLgUGPase1/2::GUS有不同的表达模式,pLgUGPase1::GUS在拟南芥幼苗的各个组织器官中高效表达,成熟叶片中的表达量略有下降;pLgUGPase2::GUS主要在胚根、胚轴和子叶中表达;pLgUGPase1/2::GUS在花及果荚中均有表达,且它们的表达受GA及MeJA的诱导。为了研究LgUGPase的亚细胞定位,利用农杆菌介导LgUGPase-GFP融合蛋白在烟草下表皮细胞瞬时表达结果显示,LgUGPase-GFP融合蛋白定位于叶绿体中。为了进一步分析LgUGPase的功能,利用atugp1突变体、转化LgUGPase基因的atugp1功能互补株系和超表达LgUGPase转基因拟南芥进行分析结果显示,LgUGPase能够弥补由于AtUGP1突变所导致的生长抑制,其过量表达提高了转基因拟南芥可溶性糖、纤维素和木质素含量,促进了转基因拟南芥的营养生长。为了进一步探究LgUGPase基因促进转基因拟南芥营养生长的作用机制,利用转录组学的方法分析野生型、atugp1突变体及超表达LgUGPase转基因拟南芥的转录组发现,atugp1突变体相比野生型共有3214个基因表达发生改变,超表达LgUGPase基因拟南芥相比野生型共有2970个基因发生改变,差异基因被注释到苯丙烷类生物合成、淀粉和蔗糖代谢、光合作用、碳代谢、植物激素信号转导和植物-病原体相互作用途径。使用酵母双杂交的方法验证根据转录组数据预测的与LgUGPase互作蛋白结果显示,LgUGPase不直接与这些蛋白发生相互作用,因此推测UGPase的催化产物UDPG可能作为一种信号分子,通过调控糖代谢、碳代谢、苯丙烷代谢、植物激素信号转导和植物-病原体相互作用途径,进而参与植物生长发育和逆境适应的调控。本研究结果为解明植物糖代谢调控机理,深入分析LgUGPase的作用机制和分子调控机理奠定了基础,同时为利用LgUGPase进行作物及林木遗传改良提供了理论和实验依据。(本文来源于《内蒙古大学》期刊2019-05-29)

任建林,祝明洁,陈峰,姚晓虹[9](2019)在《胸苷磷酸化酶和血管内皮生长因子在大肠癌原发灶和淋巴结转移灶中的表达及意义》一文中研究指出目的研究大肠癌原发灶和相应淋巴结转移灶中胸苷磷酸化酶(thymidine phosphorylase,TP)及血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达及与5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil, 5-FU)化疗敏感性的关系。方法收集2010年1月至2012年3月间上海交通大学医学院附属新华医院崇明分院诊治的有淋巴结转移的大肠腺癌患者;通过免疫组织化学方法,检测VEGF和TP在大肠癌原发灶和相应淋巴结转移灶中的表达,共观察33例。结果大肠癌原发灶中癌细胞TP及VEGF的阳性表达率与相应淋巴结转移灶中的表达无显着差异;7例预后较好的病例中,原发灶中间质细胞TP表达明显,淋巴结转移灶中癌细胞VEGF不表达。结论大肠癌原发灶和相应淋巴结转移灶之间癌细胞的TP、VEGF表达水平无显着差异;对于有淋巴结转移的大肠癌,癌细胞TP表达水平不能预测而间质细胞及炎症细胞的TP表达水平可能预测癌对以5-FU为基础的化疗反应。(本文来源于《中国组织化学与细胞化学杂志》期刊2019年01期)

何贺贺,尹钰,屈潇毅,赵英丽,林厚民[10](2019)在《蔗糖富集环境中蔗糖磷酸化酶的酶学性质研究与改造》一文中研究指出【背景】蔗糖富集土壤是蔗糖磷酸化酶的重要来源之一。此酶能以较廉价的蔗糖为底物进行转葡萄糖基反应,改善受体底物的理化性质,因而具有重要的应用价值。【目的】研究蔗糖富集土壤中蔗糖磷酸化酶的酶学性质和转糖苷活性,为其更优质的改造提供材料和理论基础。【方法】将宏基因组中获得的蔗糖磷酸化酶基因克隆到表达载体上构建重组大肠杆菌,诱导表达并进行镍亲和层析纯化蛋白。以蔗糖为底物测量重组酶的基本酶学性质,研究其对糖类底物的转糖苷活性。通过底物通道分析,利用反向PCR技术对其第155位点进行饱和突变,并测定突变体基本酶学性质和转糖苷活性。【结果】纯化的酶蛋白分子量大小约为56 kD,活性状态时以叁聚体形式存在。在以蔗糖为底物时,最适温度和最适pH值分别为55°C和6.5;Km和Vmax值分别为23.1±2.4 mmol/L和407.9±8.5μmol/(mg·min),对第155位点进行了定点饱和突变,获得了部分酶学性质或转糖苷活性改善的突变体。【结论】宏基因组中蔗糖磷酸化酶的研究丰富了酶学数据,并通过分子改造获得了部分性质更优的突变体,为转糖苷活性关键氨基酸的研究和该酶的工业应用奠定了基础。(本文来源于《微生物学通报》期刊2019年10期)

磷酸化酶论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(UGPase)是灵芝多糖合成途径的关键酶,用电子克隆方法得到灵芝UGPase基因,并利用生物信息学软件对UGPase基因编码蛋白的理化性质、亚细胞定位、亲/疏水性、信号肽、蛋白结构域、蛋白高级结构以及系统进化树的构建等方面进行了预测和分析。结果表明:UGPase基因全长1691 bp,包含一个1515 bp的完整开放阅读框,编码504个氨基酸;该蛋白不存在信号肽和跨膜结构域,它是定位于细胞质内的一种亲水性稳定蛋白酶;它的高级结构主要是由α螺旋结构和无规则卷曲结构所组成;同源比对分析显示,该酶基因编码的氨基酸序列和其他动植物的UGPase酶相比在序列组成、高级结构方面具有一定的相似性。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

磷酸化酶论文参考文献

[1].路春峰,迟晓明,李浩,张培荣,张勇.糖原磷酸化酶同工酶脑型在脓毒症心肌损伤早期的诊断价值[J].临床急诊杂志.2019

[2].贺望兴,杨普香,李延升,石旭平,黎小萍.灵芝尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶基因的电子克隆与生物信息学分析[J].江西农业学报.2019

[3].董栋,罗育其,廖述文.干扰素α对小鼠结肠癌肝转移模型及胸苷磷酸化酶表达影响研究[J].临床医药文献电子杂志.2019

[4].毛国涛,王园园,李斌,刘茜,张宏森.非洲栖热腔菌(Thermosiphoafricanus)纤维寡糖磷酸化酶的结晶及衍射分析[J].河南农业大学学报.2019

[5].杜宇阳.蛋白酪氨酸去磷酸化酶4a3(PTP4a3)对肝细胞癌增殖与转移的调控作用[D].哈尔滨工业大学.2019

[6].王淼淼.Bifidobacteriumadolescentis蔗糖磷酸化酶的重组表达、应用及固定化研究[D].江南大学.2019

[7].何聪芬,黄爱清,王巧娥,张贵友,余磊.两种耐热磷酸化酶的构建及高效催化合成红景天苷[J].现代生物医学进展.2019

[8].郭鑫.兴安落叶松尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶促进转基因植物营养生长的分子机理[D].内蒙古大学.2019

[9].任建林,祝明洁,陈峰,姚晓虹.胸苷磷酸化酶和血管内皮生长因子在大肠癌原发灶和淋巴结转移灶中的表达及意义[J].中国组织化学与细胞化学杂志.2019

[10].何贺贺,尹钰,屈潇毅,赵英丽,林厚民.蔗糖富集环境中蔗糖磷酸化酶的酶学性质研究与改造[J].微生物学通报.2019

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