导读:本文包含了永生化细胞株论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:永生化细胞系,分子生物学,外周血,综合征
永生化细胞株论文文献综述
高飞,胡泽斌,孙楠,段然慧,游延军[1]（2019）在《脆性X综合征外周血淋巴细胞永生化细胞系的建立与验证》一文中研究指出脆性X综合征(fragile X syndrome,FXS)是一种X连锁不完全外显性遗传病,是引起遗传性智力低下和孤独症谱系障碍最常见的单基因病[1],因细胞中X染色体末端在特殊培养基中经诱变剂作用后可显示如同断裂的脆性部位而得名。男性患者多见且症状较重,表现为智力低下、巨睾、(本文来源于《中国医药生物技术》期刊2019年05期）
计宏达[2]（2019）在《冰球运动员永生化细胞系建立及其耐力相关基因表达研究》一文中研究指出我国一直是令世人瞩目的体育大国,特别是北京奥运会的成功举办和2022年北京冬奥会的申办成功,都在说明体育事业已在我国的地位得到了显着的提升。因此,高水平运动员的运动基因成为了极其珍贵的遗传资源。如果对优秀的运动员不采取保护性的基因保存,任其退役后运动能力逐渐消退直至死亡,无疑是我国体育事业的巨大损失。本文以昆仑鸿星俱乐部的优秀冰球运动员为研究对象,建立永生化细胞系,对优秀冰球运动员的遗传资源进行保存,进行生物学特性检测来确定永生化细胞是否突变。并使用转化后的永生化细胞进行耐力相关基因表达的研究。本文通过EBV转化B淋巴细胞的方式建立永生化细胞系,通过PCR、阳性率检测、核型检测、细胞凋亡检测和细胞周期检测等多种实验方法,检测转化后的永生化细胞是否具有B淋巴细胞的特性。再以永生化细胞为实验样本,对耐力相关基因的表达情况进行研究。转化后的永生化细胞传代速度有明显提升,在表面标志物检测和阳性率检测中表达了B淋巴细胞的特异性标志物CD19和CD20。染色体数量和形态未发生变异。细胞周期和细胞凋亡检测的结果表明永生化细胞仍然具有充足的活力,能够继续进行传代操作。将转化后的永生化细胞耐力基因表达情况与未经过系统训练的普通人作对比,发现其耐力相关基因表达明显高于对照组。本研究成功建立了EBV转化外周血B淋巴细胞永生化细胞系,转化后的永生化细胞仍然具有B淋巴细胞的特性,且具有良好的活性以继续传代。并使用永生化细胞进行了耐力相关基因表达的检测,表明系统训练与耐力基因表达相关。(本文来源于《哈尔滨体育学院》期刊2019-05-13）
郭文文[3]（2019）在《奶牛子宫内膜永生化细胞系的建立》一文中研究指出奶牛子宫内膜作为子宫的壁层具有促进发情周期循环、孕育胎儿、内分泌等作用,在病原微生物侵入子宫时,奶牛子宫内膜不仅作为物理性屏障抵御微生物入侵,还可通过激活子宫局部先天免疫反应恢复自身稳态。奶牛子宫内膜结构复杂、功能交错,导致在体情况下很难对妊娠、子宫内膜炎等生理、病理过程的分子机制作出系统的阐明。虽然以原代细胞为模型进行研究能够最真实的接近在体情况,但是原代细胞仍存在耗时、费力、个体差异大等缺点。因此,建立稳定传代的奶牛子宫内膜细胞体外培养模型,为深入揭示奶牛子宫内膜在发情周期、妊娠、子宫内膜炎过程中的分子机制建立基础,对于奶牛子宫内膜炎症的防控、治疗、提高奶牛的妊娠率具有重要意义。本试验通过将人端粒酶基因(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)转入奶牛子宫内膜基质细胞(endometrial stromal cells,ESCs)和上皮细胞(endometrial epithelium cells,EECs)中,成功筛选构建了永生化奶牛子宫内膜基质细胞系和上皮细胞系,并通过检测角蛋白(Keratin)、波形蛋白(Vimentin)、细胞生长曲线分析、端粒长度分析、核型分析、雌激素和孕酮刺激等方法对构建的细胞系的功能进行了检测,试验结果如下:(1)通过0.25%的胰酶消化法、组织块培养法获得了ESCs和EECs。通过显微镜形态观察和细胞免疫荧光的方法对分离得到的两种细胞纯度进行了形态和细胞类型鉴定,鉴定结果显示:ESCs形态呈梭形,贴壁生长。EECs呈典型的铺路石样、聚团贴壁生长;奶牛ESCs波形蛋白表达为阳性、EECs角蛋白表达为阳性。证明成功获得纯度较高的ESCs和EECs。(2)将pCI-neo-hTERT质粒转ESCs中,经过浓度为400μg/mL的新霉素(G418)筛选14 d后获得ESCs阳性克隆株,扩大培养后命名为TERT-ESCs,TERT-ESCs目前已传至50代。经细胞免疫荧光鉴定,TERT-ESCs中hTERT表达为阳性;通过显微镜观察,TERT-ESCs在传代过程中形态仍为梭形,贴壁生长;CCK 8分析结果显示TERT-ESCs的增殖活力良好;凋亡分析结果表明,和原代ESCs相比TERT-ESCs在传至50代时凋亡率差异不显着;血清依赖性分析结果显示血清促进TERT-ESCs增值呈浓度依赖性;核型分析结果显示转染了hTERT基因的奶牛ESCs在传至50代时,染色体数目保持正常;RT-PCR检测结果显示与原代ESCs相比50代TERT-ESCs正常表达类固醇激素受体;雌激素对TERT-ESCs促增殖作用呈浓度依赖性,低浓度的孕酮对TERT-ESCs具有促增殖作用,高浓度的孕酮具有抑制增殖作用;RT-qPCR分析结果显示,TERT-ESCs在传至30代、50代时端粒长度保持稳定;以上结果表明hTERT基因可以促使TERT-ESCs的永生化。(3)将pCI-neo-hTERT质粒转入EECs,经过浓度为300μg/mL的新霉素(G418)筛选14 d后获得EECs阳性克隆株,扩大培养后命名为TERT-EECs,TERT-EECs目前已传至20代。经细胞免疫荧光鉴定,TERT-EECs中hTERT表达为阳性;传代过程中,TERT-EECs波形蛋白仍呈阳性表达;CCK 8分析结果显示TERT-EECs仍保持良好的增殖活力;通过RT-PCR鉴定分析,TERT-EECs与原代EECs相比可正常表达类固醇激素受体;雌激素对TERT-EECs促增殖作用呈浓度依赖性,低浓度的孕酮对TERT-EECs具有促增殖作用,高浓度的孕酮具有抑制TERT-EECs增殖作用;血清依赖性分析结果显示血清促进TERT-EECs增值呈浓度依赖性;核型分析结果显示转染了hTERT的EECs在传代过程中,染色体数目保持正常。综上所述,本试验将pCI-neo-hTERT质粒转入奶牛ESCs和EECs成功筛选获得了永生化奶牛子宫内膜基质细胞系和上皮细胞系。并通过一系列检测方法鉴定表明两种细胞系可以在体外无限传代且具有正常的生物学功能,证明所得细胞系可以用于后期的试验。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2019-05-01）
葛运炫,马增春,杨颖,王佳,王宇光[4]（2019）在《3种肝源永生化细胞药物代谢酶表达差异比较研究（英文）》一文中研究指出目的比较3种人源肝永生化细胞LX-2,L02和HepG2药物代谢酶的表达差异,确定适合于特定细胞色素P450(CYP)亚型研究的细胞类型。方法体外培养人源传代肝细胞L02,LX-2和HepG2,以奥美拉唑(Ome)、地塞米松(Dex)、苯巴比妥钠(Phe)、异烟肼(Iso)和利福平(Rif)0,5,10,20和40μmol·L~(-1)进行诱导。CCK-8法检测细胞存活,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测LX-2细胞中CYP1A2,CYP2B6,CYP2C9,CYP2C19,CYP2D6,CYP2E1和CYP3A4基因表达水平;Western印迹法检测LX-2,L02和HepG2细胞中以上7种CYP亚型蛋白表达水平;LX-2,L02和HepG2经Rif 5,10,20和40μmol·L~(-1)诱导后,Luciferin-PFBE法检测细胞中CYP3A4酶活性变化。结果 CCK-8结果显示,与相应细胞对照组相比,Ome,Dex,Phe,Iso和Rif(≤40μmol·L~(-1))作用于LX-2,L02和HepG2细胞24 h,细胞存活率均>80%;RT-qPCR法检测结果显示,与LX-2细胞对照组相比,Phe诱导CYP2B6(P<0.05)和CYP2D6(P<0.01)表达上升;Western蛋白印迹结果显示,L02,LX-2和HepG2细胞经Ome,Dex,Phe,Iso和Rif 40μmol·L~(-1)处理后,CYP1A2,CYP2B6,CYP2C9,CYP2C19,CYP2D6,CYP2E1和CYP3A4蛋白表达存在差异。L02细胞中CYP2C9(IA=1.58±0.07),CYP2C19(IA=0.96±0.02)和CYP3A4(IA=1.30±0.01),LX-2细胞中CYP2B6(IA=1.48±0.01)和CYP2D6(IA=1.46±0.02),HepG2细胞中的CYP1A2(IA=1.62±0.19)和CYP2E1(IA=1.49±0.10)分别具有最高的表达丰度。CYP3A4酶活性检测显示,Rif处理L02,LX-2和HepG2细胞24 h后,CYP3A4活性变化无统计学差异。结论 L02,LX-2和HepG2细胞中CYP亚型蛋白表达丰度差异提示,L02细胞适用于CYP2C9,CYP2C19和CYP3A4实验;LX-2细胞适用于CYP2B6和CYP2D6实验;HepG2细胞适用于CYP1A2和CYP2E1实验。(本文来源于《中国药理学与毒理学杂志》期刊2019年03期）
程明,刘开东,张宝旬,孙友德,李培培[5]（2019）在《崂山奶山羊骨髓间充质干细胞永生化细胞系的建立》一文中研究指出为建立崂山奶山羊骨髓间充质干细胞(BMSCs)永生化细胞系,将已构建的pcDNA3.1-EGFPTERT转入崂山奶山羊BMSCs中,利用含G418的培养基筛选获得稳定转染的TERT-BMSCs;通过多次传代,测定其生长曲线;选取高代次TERT-BMSCs的分裂中期相的细胞,检测其染色体及核型的稳定性。结果表明,转入TERT基因的崂山奶山羊BMSCs能够稳定表达该基因,其生长曲线呈"S"形;在多次传代后,P40代细胞的核型正常率仍能达到88.24%。综上提示,转染得到的TERT-BMSCs具有良好的生长状态,其细胞生长稳定,符合永生化细胞特征,为间充质干细胞应用于组织修复及基因工程种子细胞的制备提供了理论基础。(本文来源于《畜牧与饲料科学》期刊2019年01期）
郑东敏[6]（2018）在《人外周血单个核细胞建立诱导性多能干细胞（iPSCs）及永生化细胞的方法探究》一文中研究指出诱导性多能干细胞于2006年在日本首次成功建立,是一种将高度分化的成熟体细胞通过诱导使其基因重编程的技术。最终细胞回归到类似于胚胎干细胞拥有能够自我更新复制以及强大分化潜能的多能干性的细胞状态。诱导性多能干细胞的应用前景十分广泛,可应用于疾病模型、再生医学及药物研发等领域。伴随着发展,诱导性多能干细胞在技术上也正在不断进步和突破,从最初的整合基因法到相对安全可靠的非整合基因法,从依赖滋养层细胞的培养方法到完全排除外源细胞干扰的无滋养层细胞培养方法,诱导性多能干细胞技术逐渐趋向简单化、程序化。海弗利克极限理论指出了细胞的分裂次数是有限的,但在一些特殊条件的刺激下,细胞能够逃脱此极限,从而达到永生化的状态。永生化的细胞是一种处于正常细胞与癌细胞之间的形态,细胞能够无限增殖,并且没有恶化的表征。对永生化细胞的深入研究可帮助我们了解正常细胞与肿瘤细胞之间生理及功能的变化,以及有助于探究细胞衰老的生理机制。永生化细胞也可作为一种人类遗传资源进行收集,尤其是某些疾病特性基因,以活细胞的形式储存起来,建立永生化细胞库。本研究采用人外周血单个核细胞作为细胞来源,采样便捷、安全,对人体的损伤小。以仙台病毒作为载体,将承载着的4种胚胎干细胞特异表达的关键细胞因子,导入来源细胞中使其重编程,以此构建诱导性多能干细胞系。在原代及传代的培养中摒弃传统的含外源细胞的滋养层培养方法,以无滋养层细胞培养的方法取代。同时,在来源细胞中提取微量的细胞,建永生化B淋巴细胞系。技术优化后所建立的细胞系在经过了培养、传代及鉴定,最终实验结果显示:1、培养至第12天出现明显的细胞克隆团,第18天成为典型的诱导性多能干细胞,诱导性多能干细胞间细胞间紧密接触、无明显间距,克隆团的边缘清晰,形态与胚胎干细胞相似;2、细胞AP染色结果呈阳性,表明细胞重编程并回归未分化的干细胞状态;3、免疫荧光检测诱导性多能干细胞表面抗原Oct4与SSEA4呈阳性;4、诱导性多能干细胞叁胚层分化鉴定成功,证明了细胞的分化潜能;5、永生化B淋巴细胞以聚团的形态生长,流式检测CD19阳性细胞占总细胞的89.92%。诱导性多能干细胞与永生化B淋巴细胞建系方法的结合,充分利用了来源的细胞资源。永生化B淋巴细胞的收集,尤其是一些罕见的基因疾病细胞,可为日后细胞生理机制等科研探索提供遗传资源的储备。诱导性多能干细胞存在未来存在医学应用可能性,可填补永生化B淋巴细胞因细胞非正常而无法应用于临床的缺点。本文对技术细节的优化提高了效率,节省了时间成本,操作步骤的简化使未来细胞培养全自动化的可能性更进一步。(本文来源于《华南理工大学》期刊2018-12-19）
周晓雅[7]（2018）在《一株羊口疮病毒的分离鉴定及绵羊睾丸细胞永生化细胞系的建立》一文中研究指出羊口疮病毒(orf virus,ORFV)又称接触传染性脓疱性口炎(contagious secthyma)病毒,属于痘病毒科副痘病毒属,主要可感染绵羊和山羊,可引起羔羊的口唇黏膜和肛门部位形成水疱、脓疱和痂皮等,发病率高死亡率高。2016年12月,安徽肥西某羊场暴发疑似羊口疮(Orf)疫情,采集羊病料后,利用原代绵羊睾丸细胞(Ovis aries testis cell)对其进行病毒的分离增殖培养,并对病毒的增殖特性进行初步鉴定。此外,对2013~2017年间流行于安徽省的10株羊口疮病毒的部分功能基因进行了序列分析。为了建立可稳定增殖羊口疮病毒的传代细胞系,利用慢病毒包装系统将人端粒酶逆转录酶亚基(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)整合入绵羊睾丸原代细胞的染色体中,借助于嘌呤霉素的压力,成功筛选出永生化的绵羊睾丸细胞系,为后续羊口疮病毒的研究奠定了基础。具体内容如下所示。1、羊口疮病毒AH-FX16株的分离鉴定及生物学特性研究:首先,分离和鉴定了一株羊口疮病毒,该发病羔羊出现口腔黏膜、舌头、嘴和唇的周围皮肤出现红疹、水疱、脓疱及结痂等典型的Orf发病特征。采集发病羊的水疱皮,提取组织总DNA,用PCR方法特异性地扩增出ORFV的VIR基因。将过滤除菌后的病料接种于绵羊原代睾丸细胞,48h后可观察到明显细胞病变,如出现细胞脱落,细胞间距拉大等现象。培养至第5代的ORFV的滴度TCID_(50)为10~(-4.625)/0.1mL。间接免疫荧光检测结果显示,ORFV主要分布在细胞核,少量病毒在细胞质中出现。Western-Blot检测结果进一步证实,细胞培养物中存在ORFV的特异性蛋白(B2L蛋白)。将纯化后的病毒在电镜下观察,可看到到典型的羊口疮病毒粒子,呈椭圆形,毛线球样,有囊膜,直径为200~300nm。最后,将分离到的ORFV经皮肤划痕接种一月龄羔羊,结果羔羊出现典型的羊口疮发临床症状。上述结果证明,我们成功分离到了具有感染性的羊口疮病毒,将其命名为AH-FX16株。2、2013年~2017年安徽地区羊口疮病毒的部分功能基因序列分析:本论文对本实验室保存的2013年~2017年间,流行于安徽省的羊口疮病毒的11个基因(ORF007、ORF008、ORF011、ORF020、ORF059、ORF112、ORF117、ORF125、ORF129、ORF132)进行了扩增和序列比对分析。结果发现这些流行毒株的基因间存在着“普遍”的碱基插入或缺失现象,提示ORFV是在不断的进化过程中,但进化相对稳定。遗传进化树结果显示,安徽流行的ORFV毒株形成一个大的进化群,与流行于福建的毒株具有很近的亲缘关系。3、利用慢病毒包装系统构建永生化绵羊睾丸细胞系Ov-ST:首先构建了重组质粒pLOV-CMV-hTERT,然后将重组慢病毒载体叁质粒系统共转染293T细胞包装重组病毒颗粒,慢病毒颗粒感染原代绵羊睾丸原代细胞,经嘌呤霉素抗性筛选获得阳性克隆,分别应用RT-PCR和Western blot方法检测传代细胞系中hTERT基因的转录和表达水平。筛选获得的阳性克隆,命名为Ov-ST。将阳性细胞克隆连续传代20次以后,细胞形态稳定,分裂和生长能力良好。最后分别取10代和20代永生化细胞,用RT-PCR,IFA及Western blot检测其中端粒酶的表达,结果表明hTERT在所有细胞中都能稳定表达。用ORFV AH-FX16分离株接种OV-ST细胞,ORFV可以稳定增殖。永生化绵羊睾丸细胞系Ov-ST的成功构建,为羊口疮疫苗的研制和羊口疮病毒感染机制的研究奠定了基础。(本文来源于《安徽农业大学》期刊2018-06-01）
刘俊,吴佳源,张佩佩[8]（2017）在《大鼠椭圆囊感觉上皮细胞永生化细胞系的建立研究》一文中研究指出目的通过SV40 T抗原在大鼠椭圆囊感觉上皮细胞(utricular sensory epithelial cell,USEC)表达,建立无限增殖细胞系(USEC-1),为毛细胞再生、基因表达及信号转导的研究提供丰富细胞来源。方法取出生1d(postnatal day 1,P1)大鼠的椭圆囊感觉上皮,嗜热菌蛋白酶(thermolysin)消化处理,胰酶+胶原酶消化,获得具活性的纯椭圆囊感觉上皮细胞。然后加入猿猴肉瘤病毒SV40(Simian Virus,SV40)转染培养,通过行态学及增殖能力的变化粗筛出USEC细胞,传代培养。并通过显微镜及透射电镜对细胞的行态、生长特征观察;细胞角蛋白18、波形蛋白的表达;RT-PCR检测SV40 T抗原;细胞计数分析USEC-1细胞的增殖能力;软琼脂糖培养、裸鼠致瘤试验来鉴定永生化细胞系USEC-1的特征。结果 USEC-1细胞系保持了原代细胞的表形特征,呈扁平、多角形、核大而圆的上皮细胞形态,细胞之间连接紧密,形成单层时呈"铺路石样"外观。可见由成百个USEC-1细胞包绕液体而成的dome。细胞角蛋白表达阳性,波形蛋白表达阴性。不同世代USEC-1均表达SV40 T抗原。该系已培养6个月,已传25代,传代时间为5-6天,传代比为1:2-3。USEC-1细胞在无血清培养基中能正常生长。软琼脂糖培养、裸鼠致瘤试验阴性。结论本实验成功建立了大鼠椭圆囊上皮细胞永生化细胞系USEC-1,并进行了初步的鉴定。本细胞系基本上保留了原代USEC细胞的表形特征,又不具有瘤细胞特征,可用于毛细胞分裂、分化、再生及内耳分子遗传机制研究。(本文来源于《中华中医药学会耳鼻喉科分会第二十叁次学术年会、世界中联耳鼻喉口腔科专业委员会第九次学术年会论文集》期刊2017-11-03）
黎海燕,刘学军,卢芳,蒋丽红[9]（2016）在《CD36缺失献血者永生化细胞株的建立及应用》一文中研究指出目的建立血小板CD36抗原缺失献血员永生化细胞株,永久保存这些稀有遗传资源,对血液免疫学和输血医学以及人类学等领域的研究和应用有重要意义。方法采用EB病毒(Epstein-Barr virus)转化技术,将血小板CD36缺失献血员的外周血淋巴细胞转化成永生化淋巴母细胞株。结果成功地建立血小板CD36缺失献血员永久细胞株131株,所有的细胞株传代、冻存和复苏的成功率为100%,支原体PCR检测没有发现有支原体污染,细胞株传至30代经测序没有发现基因突变。结论由我们转化的血小板CD36缺失献血员永生化细胞淋巴母细胞株,该细胞株稳定传代,可作为血小板实验室参比试剂。(本文来源于《中国输血协会第八届输血大会论文专辑》期刊2016-11-08）
刘俊,黄海林,吴佳源[10]（2016）在《大鼠椭圆囊感觉上皮细胞永生化细胞系的建立》一文中研究指出目的通过SV40 T抗原在大鼠椭圆囊感觉上皮细胞(utricular sensory epithelial cell,USEC)表达,建立无限增殖细胞系(USEC-1),为毛细胞再生、基因表达及信号转导的研究提供丰富细胞来源。方法取出生1d(postnatal day 1,P1)大鼠的椭圆囊感觉上皮,嗜热菌蛋白酶(thermolysin)消化处理,胰酶+胶原酶消化,获得具活性的纯椭圆囊感觉上皮细胞。然后加入猿猴肉瘤病毒SV40(Simian Virus,SV40)转染培养,通过行态学及增殖能力的变化粗筛出USEC细胞,传代培养。并通过显微镜及透射电镜对细胞的行态、生长特征观察;细胞角蛋白18、波形蛋白的表达;RT-PCR检测SV40 T抗原;细胞计数分析USEC-1细胞的增殖能力;软琼脂糖培养、裸鼠致瘤试验来鉴定永生化细胞系USEC-1的特征。结果 USEC-1细胞系保持了原代细胞的表形特征,呈扁平、多角形、核大而圆的上皮细胞形态,细胞之间连接紧密,形成单层时呈"铺路石样"外观。可见由成百个SEC-1细胞包绕液体而成的dome。细胞角蛋白表达阳性,波形蛋白表达阴性。不同世代USEC-1均表达SV40 T抗原。该系已培养6个月,已传25代,传代时间为5-6天,传代比为1:2-3。USEC-1细胞在无血清培养基中能正常生长。软琼脂糖培养、裸鼠致瘤试验阴性。结论本实验成功建立了大鼠椭圆囊上皮细胞永生化细胞系USEC-1,并进行了初步的鉴定。本细胞系基本上保留了原代USEC细胞的表形特征,又不具有瘤细胞特征,可用于毛细胞分裂、分化、再生及内耳分子遗传机制研究。(本文来源于《2016年浙江省医学会耳鼻咽喉头颈外科学学术年会论文汇编》期刊2016-09-16）
永生化细胞株论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
我国一直是令世人瞩目的体育大国,特别是北京奥运会的成功举办和2022年北京冬奥会的申办成功,都在说明体育事业已在我国的地位得到了显着的提升。因此,高水平运动员的运动基因成为了极其珍贵的遗传资源。如果对优秀的运动员不采取保护性的基因保存,任其退役后运动能力逐渐消退直至死亡,无疑是我国体育事业的巨大损失。本文以昆仑鸿星俱乐部的优秀冰球运动员为研究对象,建立永生化细胞系,对优秀冰球运动员的遗传资源进行保存,进行生物学特性检测来确定永生化细胞是否突变。并使用转化后的永生化细胞进行耐力相关基因表达的研究。本文通过EBV转化B淋巴细胞的方式建立永生化细胞系,通过PCR、阳性率检测、核型检测、细胞凋亡检测和细胞周期检测等多种实验方法,检测转化后的永生化细胞是否具有B淋巴细胞的特性。再以永生化细胞为实验样本,对耐力相关基因的表达情况进行研究。转化后的永生化细胞传代速度有明显提升,在表面标志物检测和阳性率检测中表达了B淋巴细胞的特异性标志物CD19和CD20。染色体数量和形态未发生变异。细胞周期和细胞凋亡检测的结果表明永生化细胞仍然具有充足的活力,能够继续进行传代操作。将转化后的永生化细胞耐力基因表达情况与未经过系统训练的普通人作对比,发现其耐力相关基因表达明显高于对照组。本研究成功建立了EBV转化外周血B淋巴细胞永生化细胞系,转化后的永生化细胞仍然具有B淋巴细胞的特性,且具有良好的活性以继续传代。并使用永生化细胞进行了耐力相关基因表达的检测,表明系统训练与耐力基因表达相关。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
永生化细胞株论文参考文献
[1].高飞,胡泽斌,孙楠,段然慧,游延军.脆性X综合征外周血淋巴细胞永生化细胞系的建立与验证[J].中国医药生物技术.2019
[2].计宏达.冰球运动员永生化细胞系建立及其耐力相关基因表达研究[D].哈尔滨体育学院.2019
[3].郭文文.奶牛子宫内膜永生化细胞系的建立[D].西北农林科技大学.2019
[4].葛运炫,马增春,杨颖,王佳,王宇光.3种肝源永生化细胞药物代谢酶表达差异比较研究（英文）[J].中国药理学与毒理学杂志.2019
[5].程明,刘开东,张宝旬,孙友德,李培培.崂山奶山羊骨髓间充质干细胞永生化细胞系的建立[J].畜牧与饲料科学.2019
[6].郑东敏.人外周血单个核细胞建立诱导性多能干细胞（iPSCs）及永生化细胞的方法探究[D].华南理工大学.2018
[7].周晓雅.一株羊口疮病毒的分离鉴定及绵羊睾丸细胞永生化细胞系的建立[D].安徽农业大学.2018
[8].刘俊,吴佳源,张佩佩.大鼠椭圆囊感觉上皮细胞永生化细胞系的建立研究[C].中华中医药学会耳鼻喉科分会第二十叁次学术年会、世界中联耳鼻喉口腔科专业委员会第九次学术年会论文集.2017
[9].黎海燕,刘学军,卢芳,蒋丽红.CD36缺失献血者永生化细胞株的建立及应用[C].中国输血协会第八届输血大会论文专辑.2016
[10].刘俊,黄海林,吴佳源.大鼠椭圆囊感觉上皮细胞永生化细胞系的建立[C].2016年浙江省医学会耳鼻咽喉头颈外科学学术年会论文汇编.2016