韩兴发:SD雄鼠3种不同新蛋白构型GnRH去势抗原免疫学及生物学效果对比研究论文

韩兴发:SD雄鼠3种不同新蛋白构型GnRH去势抗原免疫学及生物学效果对比研究论文

本文主要研究内容

作者韩兴发,李俊丽,曹晓涵,储明星,曾宪垠(2019)在《SD雄鼠3种不同新蛋白构型GnRH去势抗原免疫学及生物学效果对比研究》一文中研究指出:旨在对比研究SD雄鼠3种不同新蛋白构型GnRH抗原的免疫学及生物学效果。本研究新蛋白构型GnRH抗原设计采用增加GnRH拷贝数和增大抗原分子量方法。以化学合成法合成G6K-GnRH并列体(G6K-GnRH-tandem,G6KT)作为新蛋白GnRH抗原制备的基本单元。将G6KT二聚化,形成抗原Ⅰ(G6KTD),将G6KT和G6KTD分别与卵清蛋白(OVA)偶联,分别形成抗原П(G6KT-OVA)及抗原Ⅲ(G6KTD-OVA)。试验分5组:完整对照组(不做任何处理,intact control)、外科阉割去势组(surgical castrates)及3种新蛋白构型GnRH免疫组(G6KTD、G6KT-OVA及G6KTD-OVA免疫组)。将(G6KTD、G6KT-OVA、G6KTD-OVA)3种不同新蛋白构型GnRH抗原配于Specol佐剂,分别免疫SD雄鼠,6周龄时初免,腿部肌肉注射1 mL乳化抗原(含相应新构型GnRH蛋白100μg),8周后加免,注射剂量与方法同初次免疫,每试验组12只雄鼠。放免法及酶联免疫法测定血清抗体及生殖激素浓度变化,qPCR检测垂体-睾丸生殖相关基因mRNA表达变化。结果显示:1)SD雄鼠主动免疫3种不同新蛋白构型GnRH抗原后均能产生良好的抗体反应。2)G6KT-OVA及G6KTD-OVA免疫组仅初免就能诱发较高水平的抗体产生,并显著降低雄鼠血清LH、FSH、睾酮(T)及抑制素B (INHB)浓度(P<0.05);试验结束时,该两种抗原免疫组雄鼠睾丸重量及体积均降低,精子发生完全被终止,垂体GnRHR、LHβ、FSHβ及睾丸LHR、FSHR、INHα、INβA及INHβB mRNA表达显著下调(P<0.05)。3)G6KTD免疫组12只雄鼠中,9只(75%)在加免后血清LH、FSH、T及INHB浓度显著降低(P<0.05),试验结束时睾丸重量及体积均显著降低(P<0.05),精子发生受到明显抑制(P<0.05)。综上表明:新蛋白构型G6KT-OVA和G6KTD-OVA具有极强的免疫原性,初次免疫就能达到抑制生殖激素分泌的目的,在作为单剂量GnRH疫苗方面具良好的开发前景;同时G6KTD也具有较强的免疫原性,可不与载体蛋白偶联单独作为GnRH去势抗原,继而避开GnRH分子与载体蛋白偶联所面临的GnRH抗原损失严重及与载体蛋白偶联的后续纯化等问题。本研究结果为研发高效GnRH去势疫苗及其大规模应用提供了理论参考。

Abstract

zhi zai dui bi yan jiu SDxiong shu 3chong bu tong xin dan bai gou xing GnRHkang yuan de mian yi xue ji sheng wu xue xiao guo 。ben yan jiu xin dan bai gou xing GnRHkang yuan she ji cai yong zeng jia GnRHkao bei shu he zeng da kang yuan fen zi liang fang fa 。yi hua xue ge cheng fa ge cheng G6K-GnRHbing lie ti (G6K-GnRH-tandem,G6KT)zuo wei xin dan bai GnRHkang yuan zhi bei de ji ben chan yuan 。jiang G6KTer ju hua ,xing cheng kang yuan Ⅰ(G6KTD),jiang G6KThe G6KTDfen bie yu luan qing dan bai (OVA)ou lian ,fen bie xing cheng kang yuan П(G6KT-OVA)ji kang yuan Ⅲ(G6KTD-OVA)。shi yan fen 5zu :wan zheng dui zhao zu (bu zuo ren he chu li ,intact control)、wai ke yan ge qu shi zu (surgical castrates)ji 3chong xin dan bai gou xing GnRHmian yi zu (G6KTD、G6KT-OVAji G6KTD-OVAmian yi zu )。jiang (G6KTD、G6KT-OVA、G6KTD-OVA)3chong bu tong xin dan bai gou xing GnRHkang yuan pei yu Specolzuo ji ,fen bie mian yi SDxiong shu ,6zhou ling shi chu mian ,tui bu ji rou zhu she 1 mLru hua kang yuan (han xiang ying xin gou xing GnRHdan bai 100μg),8zhou hou jia mian ,zhu she ji liang yu fang fa tong chu ci mian yi ,mei shi yan zu 12zhi xiong shu 。fang mian fa ji mei lian mian yi fa ce ding xie qing kang ti ji sheng shi ji su nong du bian hua ,qPCRjian ce chui ti -gao wan sheng shi xiang guan ji yin mRNAbiao da bian hua 。jie guo xian shi :1)SDxiong shu zhu dong mian yi 3chong bu tong xin dan bai gou xing GnRHkang yuan hou jun neng chan sheng liang hao de kang ti fan ying 。2)G6KT-OVAji G6KTD-OVAmian yi zu jin chu mian jiu neng you fa jiao gao shui ping de kang ti chan sheng ,bing xian zhe jiang di xiong shu xie qing LH、FSH、gao tong (T)ji yi zhi su B (INHB)nong du (P<0.05);shi yan jie shu shi ,gai liang chong kang yuan mian yi zu xiong shu gao wan chong liang ji ti ji jun jiang di ,jing zi fa sheng wan quan bei zhong zhi ,chui ti GnRHR、LHβ、FSHβji gao wan LHR、FSHR、INHα、INβAji INHβB mRNAbiao da xian zhe xia diao (P<0.05)。3)G6KTDmian yi zu 12zhi xiong shu zhong ,9zhi (75%)zai jia mian hou xie qing LH、FSH、Tji INHBnong du xian zhe jiang di (P<0.05),shi yan jie shu shi gao wan chong liang ji ti ji jun xian zhe jiang di (P<0.05),jing zi fa sheng shou dao ming xian yi zhi (P<0.05)。zeng shang biao ming :xin dan bai gou xing G6KT-OVAhe G6KTD-OVAju you ji jiang de mian yi yuan xing ,chu ci mian yi jiu neng da dao yi zhi sheng shi ji su fen bi de mu de ,zai zuo wei chan ji liang GnRHyi miao fang mian ju liang hao de kai fa qian jing ;tong shi G6KTDye ju you jiao jiang de mian yi yuan xing ,ke bu yu zai ti dan bai ou lian chan du zuo wei GnRHqu shi kang yuan ,ji er bi kai GnRHfen zi yu zai ti dan bai ou lian suo mian lin de GnRHkang yuan sun shi yan chong ji yu zai ti dan bai ou lian de hou xu chun hua deng wen ti 。ben yan jiu jie guo wei yan fa gao xiao GnRHqu shi yi miao ji ji da gui mo ying yong di gong le li lun can kao 。

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自畜牧兽医学报的韩兴发,李俊丽,曹晓涵,储明星,曾宪垠,发表于刊物畜牧兽医学报2019年04期论文,是一篇关于新蛋白构型论文,免疫去势论文,大鼠论文,畜牧兽医学报2019年04期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自畜牧兽医学报2019年04期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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