一、神经一氧化氮合酶与胎儿缺血缺氧性脑损伤的关系及其抑制剂的治疗作用（论文文献综述）
尹向云[1]（2018）在《氙气调节脑组织中microRNA-210和HIF-1α对新生大鼠脑白质损伤的保护作用研究》文中研究指明第一部分3日龄新生大鼠脑白质损伤模型建立的研究目的:通过给3日龄新生大鼠腹腔内注射脂多糖及联合缺氧缺血途径制造新生鼠脑白质损伤（white matter damage,WMD）模型,探讨早产儿脑白质损伤动物模型的建模方法。方法:将3日龄Sprague-Dawley（SD）新生大鼠96只随机分为4组,分别为NS组（n=24）、LPS组（n=24）、NS+HI组（n=24）、LPS+HI组（n=24）。NS组腹腔内注射生理盐水（0.05mg/kg）后不做任何处理;LPS组腹腔内注射脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）（0.05mg/kg）后不进行缺氧缺血（Hypoxia-Ischemia,HI）处理;NS+HI组腹腔内注射等量生理盐水3小时候后,结扎其右侧劲总动脉后置于低氧箱中（8%氧气+92%氮气混合气体）1小时;LPS+HI组腹腔注射LPS（0.05mg/kg）3小时后结扎其右侧劲总动脉后置于低氧箱中（8%氧气+92%氮气混合气体）1小时。上述四组分别于处理后0h、24h、48h、72h各取6只新生鼠行多聚甲醛灌注,取右侧脑室周围脑白质组织,进行脑组织HE染色、TUNEL检测细胞凋亡,明确新生大鼠脑白质损伤情况。结果:（1）HE染色脑组织病理变化:NS组脑组织结构未见细胞坏死;LPS组和NS+HI组大鼠脑组织未见明显的细胞坏死;LPS+HI组新生鼠脑室周围脑白质组织结构疏松化,细胞结构排列紊乱,可见细胞发生核固缩,可见核碎裂。（2）TUNEL染色细胞凋亡变化:NS组几乎无细胞凋亡,LPS组和NS+HI组无明显细胞凋亡;LPS+HI组48h细胞凋亡明显,72h细胞凋亡达高峰。结论:（1）单独腹腔注射小剂量脂多糖或短时间缺氧缺血不能造成新生大鼠脑白质损伤。（2）脂多糖联合缺氧缺血可成功建立新生大鼠脑白质损伤模型。第二部分氙气对新生大鼠脑白质损伤脑组织microRNA-210和HIF-1α表达的影响目的:对3日龄脑白质损伤新生大鼠给予氙气（Xenon,Xe）干预,通过检测脑组织内microRNA-210（mi R-210）及缺氧诱导因子1α（hypoxia induced factor 1α,HIF-1α）表达水平,探讨氙气治疗新生大鼠脑白质损伤的分子基础及神经保护作用机制。方法:将3日龄Sprague-Dawley（SD）新生大鼠120只随机分为3组,分别为NS组（n=24）、LPS+HI组（n=24）、LPS+HI+Xe组（n=72）。NS组腹腔内注射等量生理盐水后不做任何处理;LPS+HI组给予腹腔注射LPS（0.05mg/kg）3小时后结扎其右侧劲总动脉后置于低氧箱中（8%氧气+92%氮气混合气体）1小时,不进行氙气干预。LPS+HI+Xe组给予腹腔注射LPS（0.05mg/kg）3小时后结扎其右侧颈总动脉,置于低氧环境中（8%氧气+92%氮气混合气体）1小时后,随机分成LPS+HI+Xe1组LPS+HI+Xe2组和LPS+HI+Xe3组（每组n=24）。分别于建模后0h、2h和5h开始给予氙气吸入（50%氙气+30%氧气+20%氮气）3h。各组大鼠分别于上述处理后0h、24h、48h、72h各取6只新生鼠给予4%多聚甲醛灌注取脑,右侧脑室周围白质组织行HE染色、TUNEL检测细胞凋亡、实时荧光定量RT-PCR法检测microRNA-210的表达及Western blot检测HIF-1a蛋白含量。结果:（1）HE染色脑组织病理变化:NS组脑组织结构未见细胞坏死;LPS+HI组新生鼠脑室周围脑白质组织疏松化,细胞结构排列紊乱,可见细胞发生核固缩,可见核碎裂;氙气干预各亚组,可见脑白质染色淡染,结构相对较完整,较少细胞变性坏死,病理变化较脑损伤组明显减轻,各亚组之间HE染色脑组织病理变化无明显差异。（2）TUNEL染色细胞凋亡变化:NS组几乎无细胞凋亡;LPS+HI组48h细胞凋亡明显,72h细胞凋亡达高峰;LPS+HI+Xe1组细胞凋亡数目明显减少,差异有统计学意义（p<0.05）。LPS+HI+Xe1组、LPS+HI+Xe2组和LPS+HI+Xe3组细胞凋亡数目无明显差异。（3）RT-PCR检测mi R-210含量:与NS组相比较,LPS+HI组在各时间点,新生大鼠脑室周围组织mi R-210的表达水平均明显增加,差异有统计学意义（p<0.05）;与LPS+HI组相比,LPS+HI+Xe1组脑组织中mi R-210的表达在48h和72h显着升高,差异有统计学意义（p<0.05）,而LPS+HI+Xe2组和LPS+HI+Xe3组脑组织中的mi R-210表达在各时间点差异无统计学意义（p>0.05）;与LPS+HI+Xe1组相比,LPS+HI+Xe2组脑组织中的mi R-210表达在24h及72h显着下降,差异有统计学意义（p<0.05）,LPS+HI+Xe3组脑组织中的mi R-210表达在0h、24h、48h及72h均显着下降,差异有统计学意义（p<0.05）。并且各组中的mi R-210在各时间点的表达水平是先升高后降低,在48小时达高峰。（4）Western blot检测HIF-1α蛋白含量:LPS+HI组新生大鼠在0h、24h、48h及72h脑组织中HIF-1α表达均较NS组显着升高,差异有统计学意义（p<0.05）;与LPS+HI组相比,LPS+HI+Xe1组、LPS+HI+Xe2组和LPS+HI+Xe3组脑组织中HIF-1α水平在0h、24小时和72h均明显升高,差异有统计学意义（p<0.05）。与LPS+HI+Xe1组和LPS+HI+Xe2组相比,LPS+HI+Xe3组脑组织中的HIF-1a表达在24h明显下降,差异有统计学意义（p<0.05）,并且各组中的HIF-1α在各时间点的表达水平是先升高后降低,在24小时达高峰。结论:（1）新生大鼠脑白质损伤后,脑室周围组织HIF-1α的表达增加,mi R-210的表达水平增加。（2）脑白质损伤新生大鼠给予吸入氙气干预后,mi R-210的表达上调,增加并稳定HIF-1α蛋白表达水平,减轻脑白质损伤,与脑损伤时间相关。（3）氙气治疗新生大鼠脑白质损伤时间窗至少为5小时,且越早干预效果越好。
房明东[2]（2016）在《基于“肾—脑”相关理论探讨六味地黄汤对新生大鼠HIBD的作用机制研究》文中进行了进一步梳理研究背景新生儿缺氧缺血性脑病（hypoxiac-ischemic encephalopathy,HIE）是指由于围生期窒息引起的缺氧缺血性脑损伤（hypoxiac-ischemic brain damage,HIBD）,临床上表现为一系列中枢神经异常症状[1],如意识障碍、惊厥、肌张力改变等,并且在治疗后常遗留不同程度的神经系统后遗症。目前国内外对HIE的发病机制仍然不完全清楚,能量代谢障碍、氧自由基损伤、钙离子超载、兴奋性氨基酸的毒性作用、炎症反应、细胞凋亡等机制是目前研究较多的方面。治疗方面,在基本的“三支持”、“三对症”之上,除了传统的高压氧、亚低温、脑细胞代谢激活剂等疗法和药物治疗之外,神经营养因子、自由基清除剂、促红细胞生成素、干细胞移植疗法等新兴药物和疗法的研究正受到大家的青睐,但并未在临床广泛使用。中医药治疗HIE的报道日渐增多,也取得了一些疗效,比如丹参注射液、川芎嗪等有大量报道,证明其临床疗效。然而却日渐陷入“中药西用”的境地：多数的报道都是运用活血化瘀药治疗HIE或者单纯依据中药药理指导临床,缺少了中医辨证论治的理念；此外,将HIE病位限定于脑,也缺少了中医的整体观念。而中医“肾-脑”相关既有丰富理论支持,又有广泛临床实践,所以,本研究尝试用补肾代表方六味地黄汤以治疗西医学脑病HIE。研究目的跳出以往中医药研究HIE的思路和模式,基于中医学藏象学说中“肾与脑”的密切联系,运用六味地黄汤治疗新生大鼠HIBD,观察其治疗效果并探讨其作用机制,不仅为中医“肾-脑”相关、上病下取等理论提供了科学依据,也为中医学治疗现代脑病提供新的思路和治疗模式。文献研究文献研究列举了与HIE相似的中医儿科病名,如胎弱、梦生,等等,对其病因病机、治疗原则进行阐述。进而认为这些胎病的发生主要有两个原因：胎内因素和外感因素。而内因是本,外因是标,所以补肾固本、填精益髓、调理内因,是治疗胎病的最佳手段。在此基础上,从历史源流、物质基础、经络联属、临床研究、实验研究五个方面充分论证了“肾-脑”相关的合理性。最后对于六味地黄汤的现代药理研究以及其治疗现代脑病的进展也进行了论述。实验研究实验一：健康SPF级7日龄SD大鼠88只,雌雄不限,体重15±2克。实验动物随机分为2组,第一组56只,运用经典Rice-Vannucci模型方法进行常规造模处理；第二组32只,为实验对照组。第一组造模成功后再随机分为两组,即HIBD模型组（A组,n=32）、六味地黄汤组（C组,n=24）,实验对照组设为假手术组（B组,n=32）。A组和B组再随机分成4个亚组,每组分别在造模完成2h、Id、3d、7d进行动物处死。C组则随机分为3个亚组,分别在造模完成给药后1d、3d、7d进行动物处死。中药组灌胃量为0.3ml/10g体积,每天1次,连续灌胃7d。模型组和假手术组则予同等剂量生理盐水灌胃。密切观察各组大鼠行为能力变化情况。各组分别在预先设定时间点断头取脑,石蜡切片行HE染色观察脑组织的病理变化。实验二、实验三在分组、造模灌胃方法、处死时间上均同实验一。实验二在断头取脑之前采用股动脉采血,分离血清。采用酶联免疫吸附法（Elisa）测定不同时间点样品中丙二醛,超氧化物歧化酶,神经元特异性烯醇化酶（MDA, SOD, NSE）的水平。实验三则采用逆转录聚合酶链式反应法（RT-PCR）测定脑组织中HIF-1α的基因表达情况。实验结果1.行为能力改变：造模过程中以及造模后都会出现很多行为能力的改变,尤其是对侧肢体运动障碍,夹尾右旋,后期眼睑下垂、睁眼困难等改变具有特征性。假手术组无类似情况。药物组初期也有行为能力的改变,而后期逐渐消失2.HE染色：模型组病侧海马锥体细胞数量减少,排列紊乱,细胞核溶解、消失,细胞体变小,海马区域部分细胞可见水肿、空泡样变；假手术组也存在很轻微的病理改变,后期逐渐修复。药物组在初期的病理改变同模型组,后期逐渐恢复,与假手术组接近。3.NSE：模型组血清NSE水平2h即明显升高,且随时间逐渐升高,假手术组变化不明显,中药组则逐渐下降,与模型组相比,第3d、7d差异有统计学意义（p<0.05,p<0.01）4.MDA：模型组与假手术组MDA水平在2h无明显变化,1d时中药组与模型组相比有显着差异（p<0.01）,而与假手术组接近,但在此后各时间点中药组与模型组差异不明显。5. SOD:SOD水平在2h无明显变化,而在1d、3d、7d时,模型组与中药组相比,具有显着差异（p<0.01）,中药组SOD水平与假手术组接近。6. HIF-1 α:模型组HIF-1α的基因表达在2h即增强,1d时下降,随后又逐渐上升。与中药组相比,在3d、7d时具有显着差异（p<0.05）。中药组HIF-1α基因表达水平与假手术组接近。研究结论1. “肾-脑”相关,补肾治脑,具有丰富的理论支持和广泛的临床实践,这为六味地黄汤治疗治疗HIBD提供了理论支持。2.六味地黄汤能促进病变脑组织的修复,降低血清NSE浓度,提高脑组织SOD活性,并能下调HIF-1α的基因表达,对MDA含量也有一定的下调作用。3.六味地黄汤对新生大鼠HIBD损伤确有治疗作用。其作用机制与HIF-1α有关：通过提高SOD活性,降低MDA水平,然后通过二者对HIF-1α的调节机制从而下调HIF-1α的表达,保护缺氧缺血脑组织,促进受损神经元修复,降低血清NSE浓度。
张华,吴虹霆,张建华,姚珍薇[3]（2006）在《一氧化氮合酶抑制剂对宫内窘迫胎鼠脑神经细胞凋亡和幼年学习记忆能力的影响》文中研究说明目的:研究一氧化氮合酶抑制剂对宫内窘迫胎鼠脑神经细胞凋亡和幼年学习记忆能力的影响及其抑制剂的保护作用。方法:①建立胎鼠宫内窘迫模型。②分为对照组、缺血再灌注组、治疗组[缺血前1.5h先注射左旋硝基精氨酸（L-NNA）,然后于术前即刻腹腔内注射氨基胍（AG）500m g/kg]、远期观察Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组（将对照组、缺血再灌注组和治疗组中的部分胎鼠继续妊娠至孕19天,以剖宫产娩出,饲养至40天）。③检测脑组织中细胞色素C的胞浆释放量,以M orris水迷宫检测幼鼠学习能力。结果:①缺血再灌注组和治疗组胞浆细胞色素C含量均高于对照组,治疗组各时间点的胞浆细胞色素C含量低于缺血再灌注组（P<0.05）。②各组幼鼠历时5天训练,共8个时间段。远期观察Ⅱ组8次平均潜伏期与Ⅰ、Ⅲ组比较,明显延长（P<0.05）。远期观察Ⅲ组与Ⅰ组比较,潜伏期虽然延长,但无统计学意义（P>0.05）。③幼鼠在第5天进行的跨平台次数,远期观察Ⅱ组较Ⅰ组、Ⅲ组明显减少（P<0.05）。而远期观察Ⅲ组与Ⅰ组比较,无显着性差异（P>0.05）。结论:NOS抑制剂通过减轻缺血缺氧脑损伤时胎鼠脑神经细胞凋亡对其出生后的远期智能起保护作用。NOS抑制剂可能作为一种有价值的治疗方法应用于宫内窘迫的治疗中。
张华,姚珍薇[4]（2006）在《胎鼠缺血缺氧性脑损伤时一氧化氮合酶与线粒体介导的神经细胞凋亡的关系及其抑制剂的保护作用》文中研究表明目的探讨一氧化氮合酶（nitricoxidesynthase,NOS）与线粒体介导凋亡过程中能量代谢、细胞色素C和天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶-3（caspase-3）的相互关系及其抑制剂的保护作用。方法1建立胎鼠宫内窘迫模型。2分为5组对照组、急性缺血组、治疗1组、缺血再灌注组、治疗2组。3检测脑组织中caspase-3的表达、细胞色素C的胞浆释放量;检测胎鼠脑组织神经型一氧化氮合酶（nNOS）mRNA表达量[以吸光度（A）值表示],诱生型一氧化氮合酶（iNOS）、线粒体细胞色素氧化酶活性。分析不同时段细胞色素氧化酶活性、细胞色素C胞浆释放量及caspase-3阳性细胞数的变化趋势。结果1急性缺血组在5min,15min两个时间点nNOSA值明显高于治疗1组,差异有显着意义（P<0.05）,且两组nNOSA值均明显高于对照组。2缺血再灌注组各时间点iNOS活性明显高于治疗2组（P<0.05）,且两组iNOS活性明显高于对照组（P<0.05）。3急性缺血组缺血5min,15min线粒体细胞色素氧化酶活性均高于对照组（P<0.05）。治疗1组缺血30min线粒体细胞色素氧化酶活性虽高于急性缺血组,但仍低于对照组（P<0.05）。缺血再灌注组和治疗2组各时间点的细胞色素氧化酶活性均低于对照组,而治疗2组的均高于缺血再灌注组（P<0.05）。4在5min,15min两个时间点,急性缺血组及治疗1组的细胞色素C胞浆释放量和caspase-3免疫阳性细胞计数与对照组比较,差异无显着性。缺血30min时,治疗1组胞浆中细胞色素C含量及caspase-3免疫阳性细胞计数较急性缺血组虽明显降低,但仍高于对照组（P<0.05）。缺血再灌注组和治疗2组胞浆细胞色素C含量及caspase-3免疫阳性细胞计数均高于对照组。治疗2组各时间点的胞浆细胞色素C含量与caspase-3免疫阳性细胞计数低于缺血再灌注组（P<0.05）。结论1nNOS和iNOS介导了宫内窘迫不同阶段的胎鼠脑神经细胞细胞色素氧化酶活性的损害、细胞色素C的胞浆释放及caspase-3表达的增加。2左旋硝基精氨酸（L-NNA）在一定时间内对胎鼠脑急性缺血期线粒体能量代谢障碍和神经细胞凋亡有预防作用。而氨基胍（AG）对胎鼠脑缺血再灌注期的线粒体能量代谢障碍和神经细胞凋亡有良好的保护作用。
徐发林[5]（2006）在《缺氧缺血性脑损伤的发生机制及影响因素》文中提出围生期窒息所致的缺氧缺血性脑损伤（HIBD）是新生儿死亡和导致神经系统后遗症的常见原因，其发病机制复杂，目前尚缺乏有效干预措施。HIBD的发生除与造成损伤因素的强度和持续时间有关外，其它因素如脑发育程度、性别、环境温度等对脑损伤可能有一定的影响。本研究利用小鼠HIBD模型探讨：①不同年龄小鼠对缺氧缺血的耐受性及不同年龄小鼠缺氧缺血后神经细胞死亡的机制；②性别对不同年龄小鼠脑损伤程度的影响及未成熟脑神经细胞死亡的性别差异；③环境温度改变对未成熟脑损伤程度的影响；④脑发育程度与谷氨酸脱羧酶（GAD）-67的关系；⑤X-染色体连锁的凋亡抑制剂（XIAP）过度表达对凋亡相关蛋白、氧化应激损伤的影响。 材料和方法 生后5、7、9、21、60日龄（P5、P7、P9、P21、P60）C57BL／6小鼠或生后9日龄转基因XIAP过度表达小鼠，结扎左颈总动脉并吸入10％浓度的氧气（缺氧时间因动物年龄和实验目的而异），分别在缺氧缺血（HI）后不同时间点处死，分离脑组织进行免疫组化染色、免疫荧光染色、Western蛋白印迹、酶活性测定及脑损伤的评定。未成熟小鼠（P5，P9）的性别鉴定采用PCR方法。 结果 1．年龄、性别、温度对HI后脑损伤程度的影响 生后5、9、21、60天小鼠分别缺氧65、60、50、40 min后脑损伤程度相似，
张华[6]（2005）在《NOS对宫内窘迫所致胎鼠脑损伤作用机制的研究》文中认为目的:探讨 NOS 与胎鼠缺血缺氧性脑损伤时形态学改变的关系及NOS 抑制剂的保护作用。 方法:（1）建立胎鼠宫内窘迫模型。（2）分为对照组、急性缺血组、治疗 1 组（于缺血前 1.5h 给孕鼠腹腔内注射 L-NNA 4mg/kg）、缺血再灌注组、治疗 2 组（缺血前 1.5h 先注射 L-NNA,然后于术前即刻腹腔内注射AG 500mg/kg）。（3）电镜观察脑线粒体的改变;检测nNOS mRNA的表达量;检测脑组织 iNOS 活性;计算脑组织的缺血面积;显微镜下观察宫内窘迫后胎鼠脑组织缺血缺氧性病理改变。 结果:（1）急性缺血组和治疗 1 组各时间点脑组织 nNOS 的 OD 值均明显高于对照组（P﹤0.05）。治疗 1 组缺血 5、15min 脑组织 nNOS 的OD 值低于急性缺血组（P﹤0.05）;而 30 min 时两组无差异（P﹥0.05）。缺血再灌注组和治疗2组各时间点的胎鼠脑组织iNOS活性均明显高于对照组（P﹤0.05）,且缺血再灌注组均高于治疗 2 组（P﹤0.05）。（2）急性缺血组和治疗 1 组各时间点脑组织缺血面积均明显高于对照组（P﹤0.05）。治疗 1 组胎鼠于缺血缺氧 5min、15min 时的缺血面积明显小于急性缺血组（P﹤0.05）,而缺血 30min 时与急性缺血组无差异（P﹥0.05）。缺血再灌注组各时间点的胎鼠脑组织相对缺血面积与急性缺血组相比有所缩小,且随再灌注时间延长,缺血面积有缩小趋势。治疗 2组各时间点脑缺血面积均小于缺血再灌注组（P﹤0.05）。（3）急性缺血组和治疗1组各时间点的线粒体Rsv均明显小于对照组;但治疗1组5、
卢岩[7]（2005）在《L-精氨酸对大鼠被动吸烟致宫内发育迟缓的防治作用及其机理研究》文中进行了进一步梳理目的 胎儿宫内发育迟缓（IUGR）,也称胎儿生长受限,是围产期主要并发症之一,其围产儿的死亡率较正常儿高6-9倍,存活者生后可出现智力、体格发育迟缓,成年后代谢综合征的易感性也明显增加,严重影响人口素质,但IUGR目前尚无公认有效的治疗方法,因此其防治已成为围产医学的重要课题。IUGR的病因复杂,分类不一,其中外因性、不均称性IUGR占绝大多数,多为孕中晚期受各种有害因素的影响导致子宫胎盘血流障碍,胎盘功能不足,胎儿供养/氧不足,发育受限。IUGR的病因通常难以确定,因此研究其发病机制,寻求有效的干预措施,阻断IUGR发生的病理生理过程,改善胎儿发育就成为IUGR防治研究的切入点。目前关于IUGR的发病机制国内外研究已取得一定进展,证实胎盘功能不足是不均称性IUGR发生的关键,但多为病理形态研究和血流动力学检测,至于与胎盘循环相关的因子的相互作用及其变化,围产期IUGR对胎儿脑发育的影响,外源性药物干预能否改善IUGR胎盘病理生理改变,纠正胎儿脑组织损伤,目前国内外研究还很少,为本研究探讨的重点。一氧化氮（NO）是调节胎儿胎盘循环的关键因子之一。已经证实NO的合成释放减少在IUGR的病理生理变化中起重要作用,但直接补充外源性NO并未达到预期的治疗目的。NO的前体物质是L-精氨酸（L-Arg）,L-Arg能扩张血管、改善微循环,已用于临床多种疾病的治疗,能否通过补充L-Arg来改善病理条件下NO的不足?L-Arg的使用剂量与机体或组织局部NO水平及其它与NO相关的指标的关系如何?L-Arg又是通过什么途径发挥作用?这些均是L-Arg临床应用前应该解决的问题。NO作为一种不稳定的小分子,在某些条件下作为自由基,可具有负向的生物学作用,被称为双刃剑,因此选择L-Arg作为孕期给予的干预药物,研究L-Arg的作用机理、剂量效应及对胎儿的影响是本研究的目的。
张华,姚珍薇[8]（2004）在《神经一氧化氮合酶与胎儿缺血缺氧性脑损伤的关系及其抑制剂的治疗作用》文中研究表明目的:探讨神经一氧化氮合酶（nNOS）与胎鼠缺血缺氧性脑损伤的关系及左旋硝基精氨酸（L-NNA）的保护作用。方法:建立胎鼠宫内窘迫模型。分为对照组、急性缺血组、治疗组（于缺血前1.5h孕鼠腹腔内注射L-NNA4mg/kg）。以比色法测定脑组织匀浆的NO值;RT-PCR检测nNOSmRNA的表达量;以TTC染色计算脑组织的相对缺血面积,并行定量分析。结果:①治疗组缺血5、15min的脑组织匀浆NO值明显低于急性缺血组（P<0.05）,但仍高于对照组。缺血30min时,急性缺血组与治疗组差异无显着性意义,但均高于对照组（P<0.05）。②缺血5min、15min、30min的胎鼠脑组织中nNOS的OD值均明显高于对照组（P<0.01）。孕鼠在术前1.5h腹腔注射L-NNA后,缺血5min、15min的胎鼠脑组织中nNOS的OD值明显低于急性缺血组相应时间点的表达水平（P<0.05）;而缺血30min时虽经治疗,nNOS的OD值与急性缺血组该时间点相比差异无显着性意义（P>0.05）,但均明显高于正常组（P<0.05）。③胎鼠急性缺血5min、15min、30min的脑组织缺血面积均明显高于对照组（P<0.05）。孕鼠经治疗后,胎鼠于缺血5min、15min时的缺血面积明显小于急性缺血组（P<0.05）;而缺血30min时的缺血面积与急性缺血组相比P>0.05。但各时间点的缺血面积仍大于正常组（P<0.05）。④胎鼠急性缺血缺氧性脑损伤各时间点的n
张华,姚珍薇,吴味辛[9]（2004）在《一氧化氮合酶抑制剂对宫内窘迫胎鼠脑组织线粒体结构及功能的影响》文中研究说明目的探讨不同类型一氧化氮合酶（NOS）抑制剂对宫内窘迫不同时段胎鼠脑组织线粒体结构及功能的影响。方法（1）建立胎鼠宫内窘迫模型。分为急性缺血组（30只）、治疗1组[30只,于缺血前1.5 h孕鼠腹腔内注射左旋硝基精氨酸（L—NNA）4 mg/kg体重]、缺血再灌注组（30只）、治疗2组（30只,缺血前1.5 h孕鼠腹腔内注射L—NNA 4 mg/kg体重,然后于术前即刻腹腔内注射氨基胍500 mg/kg体重）。另选10只孕17d的正常胎鼠作为对照组。（2）电镜观察各组胎鼠脑组织线粒体的比表面积;RT-PCR测定急性缺血组、治疗1组和对照组胎鼠缺血5 min、15 min、30 min的神经型一氧化氮合酶（nNOS）mRNA的表达量[以吸光度（A）值表示];测定缺血再灌注组、治疗2组和对照组胎鼠脑组织诱生型一氧化氮合酶（iNOS）活性和线粒体Na+K+-ATP酶及细胞色素氧化酶的活性。结果（1）急性缺血组缺血5 min、15 min、30 min nNOS A值分别为0.51±0.02、0.76±0.01、0.98±0.02,治疗1组分别为0.29±0.01、0.45±0.03、0.96±0.01。在5 min,15 min两个时间点上,急性缺血组nNOS A值明显高于治疗1组（P<0.05）。且两组nNOS A值均明显高于对照组的0.19±0.02。（2）缺血再灌注组再灌注6 h、12 h、24 h iNOS活性分别为（5.24±0.09）、（7.05±0.22）、（9.33±0.09）U/毫克蛋白（mg·prot）,
李明,蔡华琦[10]（2002）在《《中国危重病急救医学》杂志2002年第14卷关键词索引》文中研究说明
二、神经一氧化氮合酶与胎儿缺血缺氧性脑损伤的关系及其抑制剂的治疗作用（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、神经一氧化氮合酶与胎儿缺血缺氧性脑损伤的关系及其抑制剂的治疗作用（论文提纲范文）
（1）氙气调节脑组织中microRNA-210和HIF-1α对新生大鼠脑白质损伤的保护作用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 第一部分 3日龄新生大鼠脑白质损伤模型建立的研究 |
| 材料与方法 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药品和试剂 |
| 1.3 主要实验仪器及设备 |
| 2 方法 |
| 2.1 实验动物的分组与处理 |
| 2.2 HE染色及TUNEL检测评价脑白质损伤 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第二部分 氙气对新生大鼠脑白质损伤脑组织microRNA-210和HIF-1α表达的影响 |
| 材料与方法 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药品和试剂 |
| 1.3 主要实验仪器及设备 |
| 2 方法 |
| 2.1 实验动物的分组与处理 |
| 2.2 HE染色及TUNEL检测评价脑白质损伤 |
| 2.3 RT-PCR检测miR-210 的表达 |
| 2.4 WB检测HIF-1α蛋白的表达水平 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 综述 参考文献 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 缩略词表 |
| 致谢 |
（2）基于“肾—脑”相关理论探讨六味地黄汤对新生大鼠HIBD的作用机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩写一览表 |
| 引言 |
| 第一部分 文献研究 |
| 1. 现代医学对HIE的认识及治疗现状 |
| 1.1 定义 |
| 1.2 流行病学研究 |
| 1.3 HIE的诊断标准及临床分度 |
| 1.3.1 国际诊断标准 |
| 1.3.2 国内诊断标准 |
| 1.3.3 临床分度 |
| 1.4 HIE的发病机制 |
| 1.4.1 能量代谢障碍 |
| 1.4.2 氧自由基损伤 |
| 1.4.3 钙离子超载 |
| 1.4.4 兴奋性氨基酸的毒性作用 |
| 1.4.5 细胞凋亡 |
| 1.4.6 炎症反应及细胞因子的作用 |
| 1.4.7 一氧化氮(NO)的作用 |
| 1.5 HIE的治疗现状 |
| 1.5.1 基础治疗：三支持和三对症 |
| 1.5.2 其他疗法 |
| 1.5.3 小结 |
| 2. 中医药对HIE的认识及治疗 |
| 2.1 与HIE相似的中医病名 |
| 2.1.1 胎怯、胎弱 |
| 2.1.2 不啼、梦生、草迷、闷脐生 |
| 2.1.3 胎惊、胎搐 |
| 2.1.4 五软五迟 |
| 2.1.5 小结 |
| 2.2 中医药治疗HIE的现状 |
| 2.2.1 单味中药提取物 |
| 2.2.2 中药复方制剂 |
| 2.2.3 推拿 |
| 2.2.4 针刺 |
| 2.2.5 小结 |
| 2.2.6 中医药治疗HIE的研究展望 |
| 3. 中医“肾-脑”相关性研究 |
| 3.1 “肾-脑”相关的历史源流 |
| 3.2 “肾-脑”相关的物质基础 |
| 3.3 “肾-脑”相关的经络联属 |
| 3.4 “肾-脑”相关的临床研究 |
| 3.5 “肾-脑”相关的实验研究 |
| 3.6 小结 |
| 4. 六味地黄汤与现代脑病的研究 |
| 4.1 六味地黄汤简介 |
| 4.2 六味地黄汤治疗脑病的现代药理学基础 |
| 4.3 六味地黄汤治疗现代脑病的研究 |
| 4.4 小结 |
| 第二部分 动物实验研究 |
| 实验一 SD新生大鼠HIBD模型的制备、鉴定以及药物对其的影响 |
| 1. 前言 |
| 2. 实验材料及仪器 |
| 3. 实验方法 |
| 3.1 HIBD动物实验模型制作 |
| 3.2 造模后处理 |
| 3.3 灌胃 |
| 3.4 标本提取 |
| 3.5 HE染色方法 |
| 4. 实验结果 |
| 4.1 动物行为学观察 |
| 4.2 脑组织病理学观察 |
| 5. 讨论 |
| 实验二 六味地黄汤对新生大鼠HIBD后NSE、MDA、SOD的影响 |
| 1. 前言 |
| 1.1 氧自由基损伤与新生大鼠HIBD |
| 1.2 MDA、SOD与新生大鼠HIBD |
| 1.3 NSE与新生大鼠HIBD |
| 2. 实验材料及仪器 |
| 3. 实验方法 |
| 3.1 实验动物造模、灌胃及标本采取 |
| 3.2 Elisa法检测MDA、SOD、NSE实验步骤 |
| 4. 实验结果 |
| 4.1 血清NSE值 |
| 4.2 脑组织匀浆MDA、SOD值 |
| 5. 讨论 |
| 5.1 NSE实验结果讨论 |
| 5.2 MDA、SOD实验结果讨论 |
| 实验三 六味地黄汤对新生大鼠HIBD后HIF-1α的影响 |
| 1. 前言 |
| 1.1 HIF-1α对HIF-1的作用 |
| 1.2 常氧和缺氧对HIF-1α稳定性的影响 |
| 1.3 HIF-1α对新生大鼠HIBD的双重作用 |
| 1.4 抗氧化剂对HIF-1α表达的影响 |
| 2. 实验材料及仪器 |
| 3. 实验方法 |
| 3.1 实验动物造模、灌胃及标本采取 |
| 3.2 RT-PCR法检测HIF-1α实验步骤 |
| 4. 实验结果 |
| 5. 讨论 |
| 6. 综合分析讨论 |
| 6.1 思考：HIF-1α对HIBD是保护作用还是损伤作用? |
| 6.2 发现：HIF-1α在HIBD中的双相表达及作用 |
| 6.3 推测：六味地黄汤调节HIF-1α表达的机制 |
| 结论 |
| 创新点 |
| 存在问题与研究展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附件一 综述 HIF-1a在HIE中的作用 |
| 综述参考文献 |
| 附件二 在读期间公开发表的学术论文、专着及科研成果 |
（3）一氧化氮合酶抑制剂对宫内窘迫胎鼠脑神经细胞凋亡和幼年学习记忆能力的影响（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1对象与分组 |
| 1.2 Western-blot法检测细胞色素C胞浆释放 |
| 1.3幼鼠学习能力检测 |
| 1.4统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 细胞色素C的胞浆释放 |
| 2.2 子代幼鼠寻找站台潜伏期 |
| 2.3 子代幼鼠末次跨平台次数 |
| 3 讨论 |
| 3.1 细胞色素C的胞浆释放与胎鼠脑神经细胞凋亡的关系 |
| 3.2 胎鼠缺血缺氧性脑损伤对幼鼠学习记忆能力的影响 |
| 3.3 NOS在胎鼠缺血缺氧性脑损伤中的作用及其抑制剂的保护作用 |
（4）胎鼠缺血缺氧性脑损伤时一氧化氮合酶与线粒体介导的神经细胞凋亡的关系及其抑制剂的保护作用（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 对象与分组 |
| 1.1.1 胎鼠宫内窘迫模型的建立 |
| 1.1.2 分组与处理措施 |
| 1.2 胎鼠脑组织中神经型NOS mRNA表达量的检测 |
| 1.3 脑组织诱生型NOS活性 |
| 1.4 脑细胞线粒体的制备 |
| 1.5 Western-blot法检测细胞色素C胞浆释放 |
| 1.6 caspase-3免疫阳性细胞检测 |
| 1.7 统计学处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 宫内窘迫不同时间段胎鼠脑组织NOS的变化 |
| 2.1.1 急性缺血缺氧性脑损伤的胎鼠脑组织中nNOS mRNA的表达 |
| 2.1.2 缺血再灌注时胎鼠脑组织iNOS的活性 |
| 2.2 神经元线粒体细胞色素氧化酶的活性 |
| 2.3 细胞色素C的胞浆释放 |
| 2.4 caspase-3在胎鼠脑组织中的表达 |
| 3 讨论 |
| 3.1 细胞色素C的胞浆释放、caspase的激活与胎鼠脑神经细胞凋亡的关系 |
| 3.2 线粒体能量代谢障碍与胎鼠脑神经细胞凋亡的关系 |
| 3.3 NOS在胎鼠缺血缺氧性脑损伤致神经细胞凋亡中的作用 |
| 3.4 NOS抑制剂对胎鼠脑神经细胞凋亡的作用 |
（5）缺氧缺血性脑损伤的发生机制及影响因素（论文提纲范文）
| 论文部分 |
| 缺氧缺血性脑损伤的发生机制及影响因素 |
| 引言 |
| 临床背景 |
| 同生期室息的动物模型 |
| 新生儿HIBD的发病机制 |
| HI后神经细胞的死亡方式 |
| 细胞凋亡的分子调控 |
| 半胱天冬酶(caspase)及其依赖的凋亡途径 |
| AIF及非caspase依赖的凋亡途径 |
| Bcl-2家族及p53蛋白 |
| 凋亡抑制蛋白 |
| 钙依赖蛋白酶 |
| 氧化应激与脑损伤 |
| HIBD的干预 |
| 研究目的 |
| 材料与方法 |
| 实验动物 |
| HIBD模型的制备 |
| 药物干预 |
| 标本的准备 |
| 蛋白质浓度测定 |
| caspase活性测定 |
| Western蛋白印迹 |
| 免疫组化染色 |
| 免疫荧光染色 |
| 聚合酶链反应(PCR)方法 |
| 脑损伤的评定 |
| 细胞计数 |
| 统计学处理 |
| 结果 |
| 年龄、性别、温度对HI后脑损伤程度的影响 |
| 脑发育程度对HI后神经细胞死亡方式的影响 |
| 性别对未成熟脑HI后神经细胞死亡方式的影响 |
| 脑发育程度以及HI对GAD67表达的影响 |
| HI后p53的表达以及p53抑制剂对脑损伤的影响 |
| XIAP过度表达对HI性脑损伤后细胞色素C释放及氧化应激的影响 |
| 讨论 |
| 脑损伤的影响因素 |
| 脑发育程度对HI后神经细胞死亡机制的影响 |
| 与性别相关的神经细胞死亡 |
| 脑损伤与抑制性氨基酸 |
| 围生期HIBD的抗凋亡治疗 |
| 围生期脑损伤后XIAP的作用 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述部分 |
| 脑发育程度与缺氧缺血性脑损伤的关系 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 附录部分 |
| 附录文章 |
| 文章Ⅰ—Ⅵ |
| 缩写词 |
| 发表文章情况 |
| 致谢 |
（6）NOS对宫内窘迫所致胎鼠脑损伤作用机制的研究（论文提纲范文）
| 符号说明 |
| 中文前言 |
| 英文前言 |
| 第一部分 宫内窘迫不同时段NOS 与胎鼠脑组织形态学改变的关系及NOS 抑制剂的保护作用 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 胎鼠缺血缺氧性脑损伤不同时段NOS 与线粒体DNA 缺失和酶活性变化的关系及其抑制剂的治疗作用 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 胎鼠缺血缺氧性脑损伤时NOS 与线粒体介导的神经细胞凋亡的关系及其抑制剂的保护作用 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 致谢 |
（7）L-精氨酸对大鼠被动吸烟致宫内发育迟缓的防治作用及其机理研究（论文提纲范文）
| 一、摘要 |
| 1.中文论着摘要 |
| 2.英文论着摘要 |
| 二、英文缩略语 |
| 三、前言 |
| 四、论文 |
| 论文一 大鼠宫内发育迟缓模型的建立及L-Arg的防治作用 |
| 1.前言 |
| 2.实验材料与方法 |
| 3.实验结果(附论文图片) |
| 4.讨论 |
| 5.结论 |
| 6.本研究创新性的自我评价 |
| 论文二 L-Arg对宫内发育迟缓大鼠nNOS，iNOS，eNOS表达的影响 |
| 1.前言 |
| 2.实验材料与方法 |
| 3.实验结果(附论文图片) |
| 4.讨论 |
| 5.结论 |
| 6.本研究创新性的自我评价 |
| 论文三 L-Arg对宫内发育迟缓大鼠VEGF，IGFⅠ，IGFⅡ，IGFⅠR，IG-FBP3表达的影响 |
| 1.前言 |
| 2.实验材料与方法 |
| 3.实验结果(附论文图片) |
| 4.讨论 |
| 5.结论 |
| 6.本研究创新性的自我评价 |
| 五、参考文献 |
| 六、附录 |
| 1.综述 |
| 2.在学期间科研成绩 |
| 3.致谢 |
| 4.个人简介 |
（8）神经一氧化氮合酶与胎儿缺血缺氧性脑损伤的关系及其抑制剂的治疗作用（论文提纲范文）
| 1 资料与方法 |
| 1.1 对象与分组 |
| 1.1.1 胎儿宫内窘迫动物模型的建立： |
| 1.1.2 分组： |
| 1.2 NO及nNOSmRNA表达量的检测 |
| 1.3 TTC染色计算脑组织的相对缺血面积 |
| 1.4 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 胎鼠脑组织中NO含量 |
| 2.2 急性缺血缺氧性脑损伤的胎鼠脑组织中nNOSmRNA的表达 |
| 2.3 胎鼠脑组织缺血面积 |
| 2.4 nNOSmRNA的表达水平与胎鼠脑缺血面积的相关性 |
| 3 讨论 |
| 3.1 急性胎儿窘迫模型的建立 |
| 3.2 胎鼠急性缺血缺氧性脑损伤时nNOS的表达 |
| 3.3 nNOS抑制剂对胎鼠急性缺血缺氧性脑损伤的宫内治疗作用 |
（9）一氧化氮合酶抑制剂对宫内窘迫胎鼠脑组织线粒体结构及功能的影响（论文提纲范文）
| 材料与方法 |
| 一、对象与分组 |
| 1. 胎鼠宫内窘迫模型的建立: |
| 2. 分组与处理措施: |
| 二、方法 |
| 1. 脑神经细胞线粒体比表面积的测定: |
| 2. 脑组织中神经一氧化氮合酶(nNOS) mRNA表达量的检测: |
| 3. 诱生型一氧化氮合酶(iNOS)、Na+K+-ATP酶、细胞色素氧化酶的测定: |
| 三、统计学方法 |
| 结果 |
| 一、各组胎鼠不同时间段脑组织NOS的测定结果 |
| 1. 急性缺血组和治疗1组胎鼠脑组织中nNOS mRNA的表达: |
| 2. 缺血再灌注组及治疗2组胎鼠脑组织iNOS活性测定结果: |
| 二、各组胎鼠脑组织线粒体结构改变及线粒体比表面积的比较 |
| 三、各组胎鼠脑组织线粒体Na+K+-ATP酶和细胞色素氧化酶活性测定结果 |
| 讨论 |
| 一、宫内窘迫胎鼠脑缺血缺氧时NOS的变化 |
| 二、胎鼠脑组织缺血缺氧时线粒体的改变及其与NOS的关系 |
| 三、不同类型NOS抑制剂的治疗作用及其与线粒体的关系 |
（10）《中国危重病急救医学》杂志2002年第14卷关键词索引（论文提纲范文）
| [A] |
| [B] |
| [C] |
| [D] |
| [F] |
| [G] |
| [H] |
| [J] |
| [K] |
| [L] |
| [M] |
| [N] |
| [P] |
| [Q] |
| [R] |
| [S] |
| [T] |
| [V] |
| [W] |
| [X] |
| [Y] |
| [Z] |
四、神经一氧化氮合酶与胎儿缺血缺氧性脑损伤的关系及其抑制剂的治疗作用（论文参考文献）
- [1]氙气调节脑组织中microRNA-210和HIF-1α对新生大鼠脑白质损伤的保护作用研究[D]. 尹向云. 青岛大学, 2018(07)
- [2]基于“肾—脑”相关理论探讨六味地黄汤对新生大鼠HIBD的作用机制研究[D]. 房明东. 成都中医药大学, 2016(05)
- [3]一氧化氮合酶抑制剂对宫内窘迫胎鼠脑神经细胞凋亡和幼年学习记忆能力的影响[J]. 张华,吴虹霆,张建华,姚珍薇. 重庆医科大学学报, 2006(06)
- [4]胎鼠缺血缺氧性脑损伤时一氧化氮合酶与线粒体介导的神经细胞凋亡的关系及其抑制剂的保护作用[J]. 张华,姚珍薇. 中华妇幼临床医学杂志(电子版), 2006(04)
- [5]缺氧缺血性脑损伤的发生机制及影响因素[D]. 徐发林. 郑州大学, 2006(12)
- [6]NOS对宫内窘迫所致胎鼠脑损伤作用机制的研究[D]. 张华. 重庆医科大学, 2005(05)
- [7]L-精氨酸对大鼠被动吸烟致宫内发育迟缓的防治作用及其机理研究[D]. 卢岩. 中国医科大学, 2005(06)
- [8]神经一氧化氮合酶与胎儿缺血缺氧性脑损伤的关系及其抑制剂的治疗作用[J]. 张华,姚珍薇. 中国康复医学杂志, 2004(12)
- [9]一氧化氮合酶抑制剂对宫内窘迫胎鼠脑组织线粒体结构及功能的影响[J]. 张华,姚珍薇,吴味辛. 中华妇产科杂志, 2004(08)
- [10]《中国危重病急救医学》杂志2002年第14卷关键词索引[J]. 李明,蔡华琦. 中国危重病急救医学, 2002(12)