本文主要研究内容
作者路梦飞（2019）在《比例电化学生物传感器的设计和应用》一文中研究指出：传统电化学传感器具备灵敏度高、测试快速、易于构建、成本低等优点,但是也存在重现性差、易受复杂环境干扰等问题。基于一对双信号转换模式的比例电化学生物传感器可以有效解决上述问题。在传感器的设计过程中引入两种或两种以上电化学活性分子,然后将输出信号换算为两个电活性物质电信号的比值。由于相同测试体系中的两种或多种电活性物质的电信号所受的干扰是相似的,所以用电信号比值作为输出信号能够部分消除来自背景及体系自身的信号干扰,提供内部自我参比,提高分析的灵敏度和选择性。首先,基于DNA四通结构（DNA-4WJ）及酶辅助循环放大策略,我们发展了一种超灵敏比例电化学生物传感器用于检测HCV DNA,该传感器主要由一个组装到金电极表面的三链分子信标（THMB）和两条未经修饰的辅助DNA序列（α序列和β序列）组成。THMB由亚甲基蓝（MB）标记的发夹探针（HP）和二茂铁（Fc）标记的核苷酸序列（UT）组成,并经UT固定于电极表面。HP的发夹结构使MB靠近电极表面并产生强的电化学信号,而UT构型的展开则导致Fc远离电极表面产生弱的电化学信号。由于在两条辅助DNA（α序列和β序列）中各含有一段HP的互补序列和一段目标DNA的互补序列,目标DNA和两条辅助DNA可与HP杂交形成DNA-4WJ结构,破坏THMB结构,并导致MB远离电极表面和MB电化学信号降低、Fc靠近电极表面和Fc电化学信号增大,从而引起MB与Fc的比例电化学信号变化。通过RNase HII对DNA-4WJ结构进行酶切,可使HP和辅助DNA序列释放,诱导下一轮循环,实现酶联辅助信号循环放大。该传感器线性范围从0.1 pM到100 nM,检出限可达0.063 pM,灵敏度高,选择性好,并且制备简单。其次,基于亚甲基蓝与DNA交替碱基序列（AT）结合原理,我们设计了适配体比例电化学生物传感器,并成功用于生物小分子腺苷的检测。实验设计了DNA链1作为捕获探针固定于金电极表面,在该链的近3’端胸腺嘧啶（T）碱基处修饰MB。同时设计另一条3’端标记有Fc的适配体链用于识别腺苷。在没有腺苷存在时,这两条DNA链部分互补配对,导致MB远离电极表面、Fc接近电极表面,产生较小的峰值电流比(IMB/IFc)。值得注意的是,造成较小IMB/IFc值的原因不仅是MB与电极表面间距离增大,更重要的是MB与聚（T-A）双链结构的相互作用导致其电子转移速率下降。当腺苷存在时,其与Fc标记的适配体链形成G-四连体结构,导致适配体链远离电极表面从而使Fc远离电极表面及MB靠近电极表面,产生较大的IMB/IFc值。此传感器通过对IMB/IFc值的分析,检出限可达90.8 pM,检测范围从0.1 nM到100μM,表现出良好的选择性及灵敏度。
Abstract
chuan tong dian hua xue chuan gan qi ju bei ling min du gao 、ce shi kuai su 、yi yu gou jian 、cheng ben di deng you dian ,dan shi ye cun zai chong xian xing cha 、yi shou fu za huan jing gan rao deng wen ti 。ji yu yi dui shuang xin hao zhuai huan mo shi de bi li dian hua xue sheng wu chuan gan qi ke yi you xiao jie jue shang shu wen ti 。zai chuan gan qi de she ji guo cheng zhong yin ru liang chong huo liang chong yi shang dian hua xue huo xing fen zi ,ran hou jiang shu chu xin hao huan suan wei liang ge dian huo xing wu zhi dian xin hao de bi zhi 。you yu xiang tong ce shi ti ji zhong de liang chong huo duo chong dian huo xing wu zhi de dian xin hao suo shou de gan rao shi xiang shi de ,suo yi yong dian xin hao bi zhi zuo wei shu chu xin hao neng gou bu fen xiao chu lai zi bei jing ji ti ji zi shen de xin hao gan rao ,di gong nei bu zi wo can bi ,di gao fen xi de ling min du he shua ze xing 。shou xian ,ji yu DNAsi tong jie gou （DNA-4WJ）ji mei fu zhu xun huan fang da ce lve ,wo men fa zhan le yi chong chao ling min bi li dian hua xue sheng wu chuan gan qi yong yu jian ce HCV DNA,gai chuan gan qi zhu yao you yi ge zu zhuang dao jin dian ji biao mian de san lian fen zi xin biao （THMB）he liang tiao wei jing xiu shi de fu zhu DNAxu lie （αxu lie he βxu lie ）zu cheng 。THMByou ya jia ji lan （MB）biao ji de fa ga tan zhen （HP）he er mao tie （Fc）biao ji de he gan suan xu lie （UT）zu cheng ,bing jing UTgu ding yu dian ji biao mian 。HPde fa ga jie gou shi MBkao jin dian ji biao mian bing chan sheng jiang de dian hua xue xin hao ,er UTgou xing de zhan kai ze dao zhi Fcyuan li dian ji biao mian chan sheng ruo de dian hua xue xin hao 。you yu zai liang tiao fu zhu DNA（αxu lie he βxu lie ）zhong ge han you yi duan HPde hu bu xu lie he yi duan mu biao DNAde hu bu xu lie ,mu biao DNAhe liang tiao fu zhu DNAke yu HPza jiao xing cheng DNA-4WJjie gou ,po huai THMBjie gou ,bing dao zhi MByuan li dian ji biao mian he MBdian hua xue xin hao jiang di 、Fckao jin dian ji biao mian he Fcdian hua xue xin hao zeng da ,cong er yin qi MByu Fcde bi li dian hua xue xin hao bian hua 。tong guo RNase HIIdui DNA-4WJjie gou jin hang mei qie ,ke shi HPhe fu zhu DNAxu lie shi fang ,you dao xia yi lun xun huan ,shi xian mei lian fu zhu xin hao xun huan fang da 。gai chuan gan qi xian xing fan wei cong 0.1 pMdao 100 nM,jian chu xian ke da 0.063 pM,ling min du gao ,shua ze xing hao ,bing ju zhi bei jian chan 。ji ci ,ji yu ya jia ji lan yu DNAjiao ti jian ji xu lie （AT）jie ge yuan li ,wo men she ji le kuo pei ti bi li dian hua xue sheng wu chuan gan qi ,bing cheng gong yong yu sheng wu xiao fen zi xian gan de jian ce 。shi yan she ji le DNAlian 1zuo wei bu huo tan zhen gu ding yu jin dian ji biao mian ,zai gai lian de jin 3’duan xiong xian mi ding （T）jian ji chu xiu shi MB。tong shi she ji ling yi tiao 3’duan biao ji you Fcde kuo pei ti lian yong yu shi bie xian gan 。zai mei you xian gan cun zai shi ,zhe liang tiao DNAlian bu fen hu bu pei dui ,dao zhi MByuan li dian ji biao mian 、Fcjie jin dian ji biao mian ,chan sheng jiao xiao de feng zhi dian liu bi (IMB/IFc)。zhi de zhu yi de shi ,zao cheng jiao xiao IMB/IFczhi de yuan yin bu jin shi MByu dian ji biao mian jian ju li zeng da ,geng chong yao de shi MByu ju （T-A）shuang lian jie gou de xiang hu zuo yong dao zhi ji dian zi zhuai yi su lv xia jiang 。dang xian gan cun zai shi ,ji yu Fcbiao ji de kuo pei ti lian xing cheng G-si lian ti jie gou ,dao zhi kuo pei ti lian yuan li dian ji biao mian cong er shi Fcyuan li dian ji biao mian ji MBkao jin dian ji biao mian ,chan sheng jiao da de IMB/IFczhi 。ci chuan gan qi tong guo dui IMB/IFczhi de fen xi ,jian chu xian ke da 90.8 pM,jian ce fan wei cong 0.1 nMdao 100μM,biao xian chu liang hao de shua ze xing ji ling min du 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自山东师范大学的路梦飞，发表于刊物山东师范大学2019-07-06论文，是一篇关于比例电化学生物传感器论文,腺苷论文,超灵敏分析论文,山东师范大学2019-07-06论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自山东师范大学2019-07-06论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。