许小洁:甘蔗花叶病毒辅助成分-蛋白酶基因原核表达及抗血清制备论文

许小洁:甘蔗花叶病毒辅助成分-蛋白酶基因原核表达及抗血清制备论文

本文主要研究内容

作者许小洁,于伟鹏,杨广玲,韩士玲,何梦君,杨旭,李向东(2019)在《甘蔗花叶病毒辅助成分-蛋白酶基因原核表达及抗血清制备》一文中研究指出:利用RT-PCR克隆甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus, SCMV) DWK1分离物辅助成分-蛋白酶(helper component-proteinase,HC-Pro)基因,酶切后连接原核表达载体pEHISTEV,得到重组质粒pEHISTEV-SCMV-HC-Pro。将重组质粒转化大肠杆菌菌株Rosetta,经IPTG诱导后,表达出57 kD的融合蛋白。切胶回收融合蛋白,多点注射法免疫新西兰长耳兔,制备SCMV HC-Pro抗血清。间接ELISA结果表明,该血清效价为1∶8 192。感染DWK1的玉米叶片病汁液稀释128倍时,该血清仍然能够有效检测出HC-Pro。Western-blot检测结果表明,该血清可特异性检测SCMV第Ⅰ组分离物DWK1和第Ⅳ组分离物DWK2,与同属的烟草脉带花叶病毒(TVBMV)和马铃薯Y病毒(PVY)均无反应。本研究为准确、快速检测SCMV HC-Pro并进一步研究其功能和作用机制奠定了基础。

Abstract

li yong RT-PCRke long gan zhe hua xie bing du (Sugarcane mosaic virus, SCMV) DWK1fen li wu fu zhu cheng fen -dan bai mei (helper component-proteinase,HC-Pro)ji yin ,mei qie hou lian jie yuan he biao da zai ti pEHISTEV,de dao chong zu zhi li pEHISTEV-SCMV-HC-Pro。jiang chong zu zhi li zhuai hua da chang gan jun jun zhu Rosetta,jing IPTGyou dao hou ,biao da chu 57 kDde rong ge dan bai 。qie jiao hui shou rong ge dan bai ,duo dian zhu she fa mian yi xin xi lan chang er tu ,zhi bei SCMV HC-Prokang xie qing 。jian jie ELISAjie guo biao ming ,gai xie qing xiao jia wei 1∶8 192。gan ran DWK1de yu mi xie pian bing zhi ye xi shi 128bei shi ,gai xie qing reng ran neng gou you xiao jian ce chu HC-Pro。Western-blotjian ce jie guo biao ming ,gai xie qing ke te yi xing jian ce SCMVdi Ⅰzu fen li wu DWK1he di Ⅳzu fen li wu DWK2,yu tong shu de yan cao mai dai hua xie bing du (TVBMV)he ma ling shu Ybing du (PVY)jun mo fan ying 。ben yan jiu wei zhun que 、kuai su jian ce SCMV HC-Probing jin yi bu yan jiu ji gong neng he zuo yong ji zhi dian ding le ji chu 。

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自山东农业科学的许小洁,于伟鹏,杨广玲,韩士玲,何梦君,杨旭,李向东,发表于刊物山东农业科学2019年03期论文,是一篇关于甘蔗花叶病毒论文,辅助成分蛋白酶论文,原核表达论文,抗血清论文,检测论文,山东农业科学2019年03期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自山东农业科学2019年03期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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