导读:本文包含了体内外培养论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:肝癌细胞,肝星状细胞,共培养,α-SMA
体内外培养论文文献综述
谢群,林丽彬,张金添,杨学明,林扬元[1]（2019）在《体内外共培养体系中肝癌细胞对肝星状细胞活化的影响》一文中研究指出目的探讨共培养体系中肝癌细胞(MHCC97H)对肝星状细胞(hepatic stellate cell, HSC)活化的影响。方法建立MHCC97H细胞与HSC直接接触式共培养、纤维蛋白原-凝血酶法共培养、条件培养液共培养、Transwell小室法共培养体系及两种细胞联合荷裸鼠动物模型,免疫细胞化学染色法与Western blot法检测α-SMA表达,CCK-8法检测HSC增殖能力,划痕法及小室法检测HSC迁移运动能力。结果各种共培养体系中HSC均呈现活化型状态,直接接触式共培养、条件培养液共培养、Transwell小室法共培养体系及细胞联合荷裸鼠动物模型中HSC的α-SMA蛋白表达明显增强;直接接触式共培养、纤维蛋白原-凝血酶法共培养体系及荷裸鼠动物模型中细胞之间的趋化性增强;肝癌细胞条件培养液与Transwell小室共培养体系中HSC的增殖与迁移运动能力均明显增强。结论在成功构建的多种体内外共培养体系中,肝癌细胞能够促进HSC活化、细胞增殖及迁移运动能力。(本文来源于《西安交通大学学报(医学版)》期刊2019年02期）
吴淑仪,刘孝威,杨会芳,李彦[2]（2018）在《双向诱导分化的ADSCs共培养体系联合水凝胶对大鼠骨缺损修复影响的体内外实验研究》一文中研究指出目的:将大鼠脂肪间充质干细胞(ADSCs)向成骨和成血管方向分化,体外探讨合适的共培养比例及两种细胞的相互作用机制,体内探究双向诱导分化的ADSCs共培养体系联合RADA16-Ⅰ水凝胶对大鼠骨缺损修复的影响。材料与方法:(1)诱导f344大鼠的ADSCs向成骨和成血管方向分化,使用高通量测序(RNA-seq)对不同比例ADSCs(2:1、1:1、1:2)共培养前后的细胞进行差异基因检(本文来源于《2018全国口腔生物医学学术年会论文汇编》期刊2018-10-12）
杨涛[3]（2017）在《不同层软骨细胞与骨髓间充质干细胞在体内外叁维共培养时细胞外基质特点的实验研究》一文中研究指出研究背景:正常的关节软骨是一种不均一的分层组织,这种分层结构对维持关节软骨的结构和功能至关重要。自体软骨移植被认为是治疗软骨缺损最常用而且最有效的手段。但是,自体软骨细胞移植并未将关节软骨不同层之间的天然差异加入考虑。最近越来越多的研究着重于再生分层软骨,而不只是再生均一一致的软骨组织。使用不同层的软骨细胞再生相应的分层是其中一种手段之一。不同层的软骨细胞能够通过组织学水平分离,并且能够在体外维持一定的分层特性。在体外研究中发现使用不同层软骨细胞分别再生相应层的软骨组织能够维持不同层相应的特性。但是不同层的软骨细胞在体外短暂单层培养扩增就失去其原有的分层特性,而且很难再次重新获得这种分层特性。那些使用不同层软骨细胞修复软骨损伤的研究,均采用低代扩增或者未扩增的不同层软骨细胞。然而,临床上原代软骨细胞必须通过几代扩增后才能获得足够的数量。因此,需要一种方法能够使用较少的短暂扩增或者未扩增的不同层软骨细胞来再生分层软骨。软骨细胞和间充质干细胞共培养修复软骨损伤,被证明是一种有望代替单纯软骨细胞修复软骨损伤的手段。从关节非负重区获得的低代扩增或者未扩增的软骨细胞与骨髓间充质干细胞共培养被证明能够产生与单独软骨细胞成软骨相似的效果。因此,这种方法可以减少软骨细胞的需求数量,这样就可以使用短暂扩增甚至不扩增的软骨细胞用来修复软骨损伤,而这些细胞由于没有去分化过程,所以仍维持分层特性。此外,使用共培养技术时,由于可能不需要软骨细胞扩增,所以软骨损伤修复甚至可以变成一步操作。但是,不同层的软骨细胞与骨髓间充质干细胞共培养后,两者是否能够一起维持不同层的特性仍然不明确。在这篇研究中,我们使用一种常用的体外叁维培养体系,海藻酸钠水凝胶体外培养体系,用来研究不同层的软骨细胞和骨髓间充质干细胞共培养后,在体内外是否仍能够维持其不同层的特性。第一部分不同层软骨细胞的分离和体外单层培养环境下分层特性的维持目的:1.提取表层和中深层软骨细胞;2.验证原代表层和中深层软骨细胞之间的基因表达、蛋白合成和增殖速度的差异;3.检测传代后的表层和中深层软骨细胞之间基因表达、蛋白合成和增殖速度的差异;4.分离并验证骨髓间充质干细胞。方法:使用显微取皮刀提取1月龄新西兰兔膝关节股骨面表层约100um厚的软骨组织作为表层软骨细胞来源,剩下的软骨组织作为中深层软骨细胞来源。通过二型胶原酶消化获得原代的表层和中深层软骨细胞。抽取1月龄新西兰兔股骨及胫骨内骨髓,利用骨髓间充质干细胞贴壁的特性分离获得骨髓间充质干细胞。贴壁的骨髓间充质干细胞通过多向诱导证明其多项分化能力。对原代表层和中深层软骨细胞(p0代)进行col2a、acan和prg4基因检测,以gapdh作为内参,使用2-ΔΔct方法进行相对比较。并且将原代表层和中深层软骨细胞加到96孔板中进行单层培养细胞增殖实验。第3、5、7、10天,使用cck-8(cellcountingkit-8)检测增殖率。原代表层和中深层软骨细胞长至90%融合时定义为p1代,以此类推,对p1和p2代同样进行基因和蛋白质水平的检测,并进行增殖速度的检测。结果:发现原代表层和中深层软骨细胞之间存在明显差异,即表层软骨细胞表达更高的prg4基因和col2a基因,中深层软骨细胞表达更高的acan基因。体外单层培养增殖实验发现,中深层软骨细胞增殖速度更快。然而体外扩增一代后,增殖速度差异消失,而基因表达和蛋白水平的差异逐渐缩小,p2代时差异消失。抽取的骨髓贴壁的细胞呈现成纤维细胞样。而扩增后到第叁代的骨髓间充质干细胞能够被诱导向脂肪细胞、成骨细胞和软骨细胞方向。结论:1.通过组织学分离的p0代表层软骨细胞和中深层软骨细胞呈现不同的特性;2.随着传代,不同层软骨细胞的基因表达、蛋白水平和增殖速度差异逐渐消失。第二部分不同层软骨细胞与骨髓间充质干细胞体外叁维共培养环境下细胞外基质成分的变化目的:1.体外使用海藻酸钠水凝胶叁维培养体系将表层和中深层软骨细胞分别与骨髓间充质干细胞共培养;2.检测不同时间点(第1、7、21天)时软骨细胞外基质成分的基因表达情况;3.检测不同时间点(第1、7、21天)时软骨细胞外基质主要成分(gag)含量、dna含量变化以及lubricin分泌情况。方法:将p0代表层或中深层软骨细胞单独或与骨髓间充质干细胞以1:2比例混合后,按6×106/ml细胞浓度和2%海藻酸钠混合,使用注射器一滴一滴将海藻酸钠水凝胶滴入到凝固液(102mm氯化钙)中形成凝固的小珠,加入到成软骨诱导培养基中培养。于第1、7、21天时收获小珠。分别检测基因表达情况和gag、dna含量。取培养第1、7、21天的培养24小时的上清用elisa法测量lubricin浓度。结果:基因表达方面第1天和第7天时,中深层软骨细胞共培养组相比于表层软骨细胞共培养组表达更高的acan基因,更低的prg4基因,而col2a水平无明显差异。不同层软骨细胞组之间也有同样的趋势。培养第7天时中深层软骨细胞共培养组和中深层软骨细胞组分别比表层软骨细胞共培养组和表层软骨细胞组沉积更多的gag含量。但是到体外培养的后期(21天),我们所检测的基因表达和gag含量等都无明显差异。尽管单纯分层软骨细胞组相比于相应的共培养组沉积更多的gag含量(以dna标准化),但是当以初始加入的软骨细胞数量标准化后,第7天时,共培养组相比于相应单纯软骨细胞组沉积相似的gag含量。而第21天时,以初始加入的软骨细胞数量标准化后,共培养组相比于相应单纯软骨细胞组反而沉积更多的gag含量。类似的是,早期(第1、7天)表层软骨细胞组和表层软骨细胞共培养组分别相比于中深层软骨细胞组和中深层软骨细胞共培养组分泌更多的lubricin。但是体外培养第21天时,软骨细胞组和软骨细胞共培养组之间的lubricn浓度无明显差异。结论:1.表层和中深层软骨细胞分别与骨髓间充质干细胞共培养后能够在体外叁维培养早期(第1、7天)维持不同层软骨细胞的分泌细胞外基质的能力;2.但是随着体外培养时间的延长(21天),这种分泌细胞外基质能力的差异逐渐消失。第叁部分不同层软骨细胞与骨髓间充质干细胞叁维共培养小珠裸鼠皮下植入后细胞外基质成分的变化目的:1.将海藻酸钠水凝胶叁维共培养小珠植入裸鼠皮下异位成软骨;2.分别在第2、8周时,处死裸鼠,进行组织学和生物化学检测(DNA和GAG定量)。方法:将海藻酸钠凝胶小珠分别植入到14只4-6周龄裸鼠皮下。分别于第2周和第8周处死裸鼠,取出海藻酸钠小珠,进行DNA和GAG定量以及免疫荧光等检测。结果:与体外培养相似,体内第2周时,中深层软骨细胞共培养组相比于表层软骨细胞共培养组沉积更多的GAG。以初始加入的软骨细胞数量标准化后,第2周时共培养组相比于相应单纯软骨细胞组反而沉积更多的GAG成分。免疫荧光结果显示,体内第2周时表层软骨细胞组和表层软骨细胞共培养组分别相比于中深层软骨细胞组和中深层软骨细胞共培养组表达更高水平的Lubricin。但是二型胶原免疫荧光染色的荧光信号强度却没有明显差异,这也与体外实验结果相符合。与体外培养不完全一样的是,体内培养后期(第8周),共培养组和单纯软骨细胞组都沉积了相似的GAG成分(以DNA标准化)。而以初始加入的软骨细胞数量标准化后发现,共培养组沉积的GAG含量明显高于单纯软骨细胞组。此外,体内培养第8周时免疫荧光染色结果发现在共培养组之间Lubricin和二型胶原荧光信号无明显差异。同时通过荧光观察发现,体内培养相比于体外培养呈现出更为明显的细胞与细胞之间的直接接触。结论:1.表层软骨细胞共培养组和中深层软骨细胞共培养组在体内成软骨早期(第2周),能够维持细胞外基质分泌能力的差异;2.在体内成软骨后期(第8周),共培养组之间细胞外基质成分分泌能力的差异消失。(本文来源于《大连医科大学》期刊2017-03-01）
王晴,李和权,周建英[4]（2016）在《小鼠平滑肌祖细胞培养及其体内外迁移功能的研究》一文中研究指出目的建立一种有效的小鼠平滑肌祖细胞的培养方法,并对其迁移功能进行研究。方法使用C57BL/6小鼠制备密质骨来源间充干细胞,PDGF-BB诱导其分化并采用形态学观察、免疫细胞化学染色及流式分析的方法进行鉴定。使用Transwell小室及流式分析方法检测其迁移能力。结果 PDGF-BB诱导7 d后,镜下可见细胞呈长梭型,免疫细胞化学染色显示开始表达α-SMA。诱导21 d后,流式分析证实70%以上的细胞表达CD34+/α-SMA+双阳性,58.5%细胞开始表达SM-MHC。迁移实验表明,培养得到的平滑肌祖细胞在体内外均具有良好的迁移能力。结论通过使用密质骨来源间充干细胞制备平滑肌祖细胞具有操作简便、获取率高及培养周期短等优点,培养得到的平滑肌祖细胞在体内外均具有迁移能力,适于进行后续功能及机制研究。(本文来源于《中国药理学通报》期刊2016年07期）
方鹤,金雄,王冬冬,刘洪,马霖杰[5]（2015）在《树鼩原代肝细胞培养及体内外感染HBV的研究进展》一文中研究指出HBV感染是人类面临的重要健康问题,研究HBV的感染机制一直是这个领域的关键点,为开展HBV的相关研究,建立简单易得的HBV体内外感染模型是大势所趋。树鼩因与人和灵长类亲缘关系较近,使得HBV感染树鼩模型受到越来越多的关注。综述了国内外近年来树鼩体内外感染HBV的研究进展,特别是树鼩原代肝细胞体外培养的研究进展及取得的成绩,对未来的一些研究方向进行了展望。(本文来源于《临床肝胆病杂志》期刊2015年10期）
彭正军,刘路,韦曦,凌均棨[6]（2014）在《Oct-4、Sox2和c-Myc在牙乳头和牙囊细胞体内/外共培养过程中的表达和意义》一文中研究指出目的:通过建立牙乳头细胞(dental papilla cells,DPCs)与牙囊细胞(dental follicle cells,DFCs)体内/外共培养模型,研究重编程相关因子Oct-4、Sox2和c-Myc的时空表达变化。方法:通过免疫组织化学染色观察出生后1~11天SD鼠牙齿发育过程中Oct-4、Sox2和c-Myc的时空表达。建立牙乳头细胞与牙囊细胞体外共培养模型。采用CCK-8、流式细胞术检测细胞增殖、周期和凋亡变化;以RT-PCR、免疫组织化学染色检测共培养条件下重编程相关因子Oct-4、Sox2和c-Myc的表达变化。结果:在牙胚发育过程中,Oct-4和Sox2在出生后第7和9天强表达,而c-Myc仅表达于第9天。在体外共培养条件下,DPCs和DFCs细胞增殖和凋亡受抑制,细胞周期停留在G0/G1期。Oct-4和Sox2在共培养3天后表达明显上调,而cMyc在共培养5天表达上调。结论:DPCs和DFCs通过体内/外相互作用,增强重编程相关因子的表达,优化细胞培养微环境。Oct-4和Sox2呈现相似的表达模式,为提高牙源性细胞干性提供新思路。(本文来源于《2014年第九次全国牙体牙髓病学学术会议论文汇编》期刊2014-09-18）
吴美[7]（2014）在《无血清培养在体内外对间充质干细胞的免疫调节活性的影响》一文中研究指出背景：间充质干细胞（mesenchymal stem cells, MSCs）是一种具有高度自我更新和多向分化潜能的干细胞。虽然MSCs可从骨髓、脐带、脂肪、胎盘、脐血及羊膜等多种组织中分离得到，但脐带组织中的MSCs细胞数的含量最为丰富。目的：对分离培养的人脐带来源的间充质干细胞（hUC-MSCs）进行鉴定。方法：（1）我们采用双酶消化的方法分离hUC-MSCs；（2）应用流式细胞仪检测hUC-MSCs的免疫表型；（3）采用油红O染色液、茜素红S染色液进行hUC-MSCs的染色以鉴定hUC-MSCs的成脂成骨等多向分化的潜能。结果：（1）hUC-MSCs呈典型的，长梭形的贴壁细胞；（2）hUC-MSCs均高表达CD29、CD44、CD54、CD73、CD90、CD105、CD106及HLA-ABC等间充质干细胞免疫表型而不表达CD11b、CD14、CD34、CD45及HLA-DR等造血干细胞的免疫表型，也不表达CD80和CD86等协同刺激分子的免疫标记；（3）hUC-MSCs具有向脂肪细胞、成骨细胞等细胞分化的潜能。结论：我们成功分离及培养了人脐带来源的间充质干细胞。背景：MSCs具有强大的免疫调节活性，对T淋巴细胞、B淋巴细胞、自然杀伤细胞、树突细胞、抗原递呈细胞、中性粒细胞及巨噬细胞等多种免疫细胞均有免疫调节作用。虽然目前无血清培养在体外可支持MSCs的扩增，保持原有的细胞大小、免疫表型及多向分化的潜能，但对UC-MSCs免疫调节活性的影响还不是很清楚。目的：无血清培养在体外对hUC-MSCs免疫调节活性的影响。方法：（1）采用流式细胞术检测hUC-MSCs的免疫表型及细胞凋亡；（2）应用油红O及茜素红S染色鉴定hUC-MSCs的成脂成骨等分化潜能；（3）采用MTS方法检测细胞增殖；（4）采用酶联免疫吸咐试验检测细胞上清的IFN-γ和PGE2等蛋白水平；实时定量PCR方法检测IFN-γ、TNF-α、IL-21、IL-22、IL-26、IDO1、COX2、HGF、IL-1β及IL-6等mRNA的表达水平。结果：（1）hUC-MSCs在无血清培养基中培养时呈典型的长梭状贴壁细胞；高表达CD29、CD44、CD73、CD90、CD105及CD106等间充质干细胞的表面标记，不表达CD34等造血干细胞的表面标记；无血清培养基培养的hUC-MSCs仍具有成脂成骨等分化潜能；（2）无血清培养基培养的hUC-MSCs抑制CD4+T细胞的增殖及凋亡；（3）无血清培养基培养的hUC-MSCs抑制CD4+T细胞分泌IFN-γ及IFN-γ、TNF-α、IL-21、IL-22和IL-26等促炎因子mRNA的表达；（4）无血清培养基培养的hUC-MSCs分泌高水平的PGE2及高表达IDO1、COX2、 IL-1β及IL-6等基因水平，但不表达HGF。结论：（1）hUC-MSCs在无血清培养基中培养仍保持原有的细胞形态、免疫表型、成脂成骨分化等生物学特性；（2）与含10%胎牛血清培养的hUC-MSCs相比，无血清培养基培养的hUC-MSCs也能明显抑制CD4+T淋巴细胞的增殖及凋亡；（3）无血清培养基培养的hUC-MSCs较含胎牛血清培养的hUC-MSCs同样具有较强的免疫抑制功能及分泌较高水平的免疫调节因子。背景：肺动脉高压（PHA）是一种进展性疾病，以肺血管结构的改变引起肺动脉压进行性升高最终导致右心衰竭为主要特征的一组疾病。PHA是临床上常见的一种疾病，其发病机制尚不清楚。然而，研究发现免疫因素在PHA的发病机制中起着非常重要的作用。目的：进一步评价无血清培养基培养的hUC-MSCs在体内的免疫调节功能。方法：（1）用野百合碱建立肺动脉高压模型大鼠：采用乙醇生理盐水溶解野百合碱，再按50mg/kg的剂量注入到大鼠背部的皮下组织；（2）聚苯乙烯软管测定肺动脉平均压；（3）采用HE染色进行肺组织结构的观察；（4）采用CM-DiI标记人脐带来源间充质干细胞；（5）采用酶联免疫吸咐试验和实时定量PCR方法比较各组肺组织和外周血中的TNF-α和肺组织的TNF-α、IFN-γ、IL-1β、IL-6及IL-18等促炎因子的蛋白及基因水平。结果：（1）无血清血清培养基培养的hUC-MSCs组无毛发、呼吸及活动等异常，而且体重增长较快；（2）无血清培养基培养的hUC-MSCs能明显降低肺动脉高压模型组的肺动脉平均压；（3）无血清培养基培养的hUC-MSCs明显改善肺动脉高压引起的肺血管重构；（4）在无血清培养基培养的hUC-MSCs组的肺组织内有较多CM-DiI标记的hUC-MSCs；（5）无血清培养基培养的hUC-MSCs同样能降低肺组织和外周血中的TNF-α、IFN-γ、IL-1β、IL-6及IL-18等促炎因子的蛋白及基因水平。结论：（1）无血清培养基培养的hUC-MSCs与含10%胎牛血清培养基培养的hUC-MSCs均能明显的改善肺血管重构；（2）无血清培养基培养的hUC-MSCs在体内较含10%胎牛血清培养基培养的hUC-MSCs同样具有较强的免疫抑制功能。(本文来源于《福建医科大学》期刊2014-03-01）
龚飞翔[8]（2013）在《人尿源性干细胞的分离培养及向神经细胞定向分化的体内外实验研究》一文中研究指出研究背景及研究目的：中枢神经系统损伤的治疗一直是世界性难题，通过移植干细胞替代受损神经细胞继而重建神经功能的治疗方法越来越受到重视。研究表明移植神经干细胞（Neural Stem Cells，NSCs）治疗中枢神经系统损伤均具有一定疗效，但是NSCs来源有限、分离和培养均相当困难，移植NSCs又存在医学伦理限制、免疫排斥和存活率低等问题。而间充质干细胞（Mesenchymal Stem Cells，MSCs)来源广泛、分离培养技术成熟、无伦理限制和低免疫原性，但MSCs的获取手段多为有创的。人尿源性干细胞(human urine-derived stem cells，hUSCs)是从尿液中分离出的多能干细胞，来源不受局限且安全无创，具有广阔的临床应用前景。现阶段国内外对其研究甚少，目前研究证实hUSCs具有MSCs的类似特性：表达类似的膜表面标志物及具有分化为成骨细胞、软骨细胞、平滑肌细胞和脂肪细胞的潜能。然而目前尚未见hUSCs向神经细胞定向分化的相关报道，本实验旨在体外分离培养hUSCs，观察其生物学特性，并于体外和体内鉴定其向神经细胞分化的能力，为将来利用干细胞移植治疗中枢神经系统损伤疾病寻找新的“种子细胞”来源。方法：1、建立体外分离培养hUSCs的技术并观察其生物学特性1.1利用LMM101培养基贴壁筛选法分离培养hUSCs；1.2MTT法观察细胞增殖能力；1.3流式细胞术检测表面抗原CD29、CD90、CD44、CD45、CD34、CD73和CD133等的表达情况；1.4采用成脂和成骨诱导培养基分别对hUSCs进行体外诱导，并采用油红O和茜素红染色进行鉴定；2、体外诱导hUSCs向神经细胞定向分化采用成神经诱导培养基对hUSCs进行神经定向诱导，实时定量荧光PCR（q-PCR）检测Nestin、Sox2、GFAP、β-tubulin III、NSE和MAP2mRNA的表达变化，细胞免疫荧光染色检测Nestin、Sox2的表达情况。3、体内移植GFP-hUSCs，观察hUSCs在大鼠脑内增殖分化情况利用水凝胶负载GFP-hUSCs移植到大鼠模型的脑损伤区，荧光显微镜下观察脑内GFP表达阳性细胞的分布情况，细胞免疫荧光染色检测Nestin、GFAP和β-tubulin III的表达情况。结果：1、成功建立了从人新鲜尿液中分离培养hUSCs的技术hUSCs细胞于接种后3-7d开始贴壁，7-10d细胞呈集落生长，10-15d不同细胞克隆呈现4种不同形态：“铺路石”上皮细胞样、长梭形肌细胞样、扁圆形内皮细胞样和短梭形成纤维细胞样，经过2-3周的传代培养后P4代细胞形态呈较为均一的成纤维细胞样，细胞传至P10余代，仍然保持旺盛的增殖能力。2、hUSCs的生物学特性2.1MTT法检测细胞增殖能力的结果显示hUSCs生长曲线呈S形。2.2流式细胞术检测结果显示分离得到的hUSCs CD44、CD29、CD90和CD73表达阳性，CD34、CD133和CD45表达阴性，表明其与间充质干细胞表达类似的细胞表面标志物。2.3体外采用成脂和成骨诱导培养基分别对hUSCs诱导14d和21d后，油红O和茜素红染色均为阳性，表明hUSCs体外具有成脂和成骨的分化潜能。3、体外诱导hUSCs向神经细胞定向分化q-PCR结果显示hUSCs经神经定向诱导培养7d后Nestin、Sox2、MAP2、NSE、GFAP表达分别上调8.08±0.95倍、3.75±0.88倍、5.12±0.46倍、2.08±0.11倍和5.60±1.86倍，诱导12d后分别上调4.47±0.62倍、5.69±0.92倍、2.52±0.61倍、1.63±0.13倍和5.97±0.89倍(P＜0.05)；细胞免疫荧光染色检测结果显示经神经诱导7d后Nestin、Sox2阳性细胞率分别为17.2±0.58%和15.3±1.32%，诱导12d时阳性细胞率分别为62.5±4.48%和33.7±2.76%（P＜0.05），结果表明hUSCs体外具有分化为神经细胞的潜能。4、GFP-hUSCs脑内增殖分化状况GFP-hUSCs于移植1W和3W后，发现宿主脑内存在GFP阳性细胞，同时部分GFP阳性细胞从脑损伤区迁移至海马区，并且表达GFAP和β-tubulin III，说明移植细胞能够于宿主脑内成功存活、迁移并分化为神经细胞。结论：1、本研究成功建立了从人新鲜尿液中分离培养并大量扩增hUSCs的技术体系，且所分离培养的hUSCs具有间充质干细胞的类似特性；2、体外经神经定向诱导后hUSCs可分化为神经细胞；3、移植到脑损伤区，hUSCs能够存活、迁移，并向神经细胞分化；4、本研究成功寻找到了一种新的可供移植的“种子细胞”来源---hUSCS，为利用组织工程和再生医学技术治疗中枢神经系统疾病奠定了基础。(本文来源于《南昌大学》期刊2013-05-01）
郭翔,管欣,赵珩[9]（2012）在《脂肪干细胞与叁维支架体内外培养构建的组织工程化气管》一文中研究指出背景:气管替代物包括自体组织皮瓣、气管同种异体移植、人工材料支架和无活力组织移植等,但均因为相关严重并发症和获取困难等因素使临床应用遇到很大困难。目的:利用脂肪干细胞与聚乳酸-乙醇酸共聚物(poly-D,L-lactio-co-glycolicacid,PLGA)、聚叁亚甲基碳酸酯(poly(trimethylenecarbonate),PTMC)共聚物支架构建组织工程化气管支架模型。方法:组织块法原代分离培养SD大鼠脂肪干细胞,脂肪干细胞行流式细胞术及多向分化能力鉴定,分别种植于PLGA-PTMC支架,经体内体外培养后行免疫组织化学及扫描电镜观察。结果与结论:大鼠脂肪干细胞接种于支架后,呈球形,伸展出伪足,均匀贴附PLGA-PTMC支架,细胞间相互融合成团;经体内培养后,新生毛细血管丰富。PLGA-PTMC支架具有良好的生物相容性,无细胞毒性,其多孔的叁维立体状结构适合脂肪干细胞黏附生长。经体内、体外培养得到组织工程化气管模型,新生血管丰富,可以作为有效的气管替代物。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2012年41期）
张红叶,王飞[10]（2012）在《HPV体内外培养模型研究进展》一文中研究指出人乳头瘤病毒复制增殖与上皮细胞分化有关,尚不能在常规细胞培养条件下复制其感染过程。体内模型主要是裸鼠异种移植模型,Kreider等首次提出的裸鼠肾囊异种移植模型是将人包皮组织,与HPV病毒液共同培养,再将其植入裸鼠的肾囊中,获得乳头瘤样增殖。该模型可以用于繁殖大量有感染性的HPV病毒体,目前只运用此模型将少数几型HPV培养成功。相对于肾囊异种移植模型,(本文来源于《中华医学会第十八次全国皮肤性病学术年会论文汇编》期刊2012-06-12）
体内外培养论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:将大鼠脂肪间充质干细胞(ADSCs)向成骨和成血管方向分化,体外探讨合适的共培养比例及两种细胞的相互作用机制,体内探究双向诱导分化的ADSCs共培养体系联合RADA16-Ⅰ水凝胶对大鼠骨缺损修复的影响。材料与方法:(1)诱导f344大鼠的ADSCs向成骨和成血管方向分化,使用高通量测序(RNA-seq)对不同比例ADSCs(2:1、1:1、1:2)共培养前后的细胞进行差异基因检
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
体内外培养论文参考文献
[1].谢群,林丽彬,张金添,杨学明,林扬元.体内外共培养体系中肝癌细胞对肝星状细胞活化的影响[J].西安交通大学学报(医学版).2019
[2].吴淑仪,刘孝威,杨会芳,李彦.双向诱导分化的ADSCs共培养体系联合水凝胶对大鼠骨缺损修复影响的体内外实验研究[C].2018全国口腔生物医学学术年会论文汇编.2018
[3].杨涛.不同层软骨细胞与骨髓间充质干细胞在体内外叁维共培养时细胞外基质特点的实验研究[D].大连医科大学.2017
[4].王晴,李和权,周建英.小鼠平滑肌祖细胞培养及其体内外迁移功能的研究[J].中国药理学通报.2016
[5].方鹤,金雄,王冬冬,刘洪,马霖杰.树鼩原代肝细胞培养及体内外感染HBV的研究进展[J].临床肝胆病杂志.2015
[6].彭正军,刘路,韦曦,凌均棨.Oct-4、Sox2和c-Myc在牙乳头和牙囊细胞体内/外共培养过程中的表达和意义[C].2014年第九次全国牙体牙髓病学学术会议论文汇编.2014
[7].吴美.无血清培养在体内外对间充质干细胞的免疫调节活性的影响[D].福建医科大学.2014
[8].龚飞翔.人尿源性干细胞的分离培养及向神经细胞定向分化的体内外实验研究[D].南昌大学.2013
[9].郭翔,管欣,赵珩.脂肪干细胞与叁维支架体内外培养构建的组织工程化气管[J].中国组织工程研究.2012
[10].张红叶,王飞.HPV体内外培养模型研究进展[C].中华医学会第十八次全国皮肤性病学术年会论文汇编.2012