高建鹏:塔河马鹿源副结核分枝杆菌的分离鉴定及部分生物学特性研究论文

高建鹏:塔河马鹿源副结核分枝杆菌的分离鉴定及部分生物学特性研究论文

本文主要研究内容

作者高建鹏(2019)在《塔河马鹿源副结核分枝杆菌的分离鉴定及部分生物学特性研究》一文中研究指出:目的:副结核病又称约翰病,是由副结核分枝杆菌引起牛、羊、马鹿等反刍动物的一种渐进性消瘦和肉芽肿肠炎为主要特征的传染病。目前,我国马鹿的存栏约13万头,主要有3个品种,分布在塔里木河流域的塔河马鹿是其中之一,养鹿业已成为当地畜牧业发展的重要组成。但由于管理环节的缺失和防疫意识的淡薄,导致以腹泻、消瘦为主要特征的各种疫病高发,发病原因与副结核感染有关,但尚未进行相关的深入研究。为此,本研究以塔河马鹿为对象,进行以下方面研究:方法:采用现场流行病学调查的方法,收集塔河流域某马鹿养殖场的环境、气候、病史等现场资料,查找可能的传染源及传播途径;采集塔河流域5个鹿场共214份公鹿血清,采用ELISA方法调查副结核病的感染现状;分别无菌采集疑似副结核病感染的2头马鹿肠内容物和肠系膜淋巴结,去污处理后接种于卵黄培养基中进行病原的分离纯化;采用生理生化、培养特性结合16S rRNA、IS900的PCR扩增进行种的鉴定,同时扩增DMC、IS1311基因进行亚型鉴定;选择最适的培养基并优化细菌培养方法;以BALB/c小鼠为试验模型进行动物回归试验。结果:试验一塔河马鹿副结核病的现场和血清流行病学调查现场调查发现,鹿场内奶牛是可能的传染源,粪口途径为主要的传播途径;鹿场间为公鹿的引种更换;血清流行病学调查结果表明,5个试验鹿场均有副结核病的感染,其总阳性率为7.01%(15/214),最高为11.32%(6/53),最低为2.70%(1/37)。试验二副结核分枝杆菌的分离鉴定及培养条件优化从肠内容物中分离到一株副结核分枝杆菌,将该菌命名为MAPxj-RD。通过细菌培养查明了MAPxj-RD的生物学特性,16S rRNA、IS900、DMC、IS1311与保护性抗原基因检测均为阳性,两种亚型鉴定方法均显示分离株为C型副结核分枝杆菌;最适培养基为卵黄培养基;HPC去污比HPC和抗生素共同去污更容易分离到副结核分枝杆菌;初代接种物二次盲传后具可分离到副结核分枝杆菌;当液深<4 mm时细菌生长速度更快。试验三副结核分枝杆菌MAPxj-RD的动物试验动物试验表明,小鼠体重在试验周期中呈上升趋势,而检测粪便后未发现副结核分枝杆菌;使用优化的培养方法从小鼠的肝脏中成功分离到MAPxj-RD;病理切片经抗酸染色与HE染色后均发现MAPxj-RD的存在,且引起了与副结核病相似的病理变化;经PCR检测发现每只小鼠脏器中均有MAPxj-RD,肠组织中检出率最高,为100%(6/6),肾脏最低,为16.67%(1/6)。结论:综上,副结核病在塔河流域的鹿场已普遍存在,自然环境与鹿场环境极利于副结核病的传播,该病已成为鹿场的重要传染病;分离到一株C型副结核分枝杆菌并命名为MAPxj-RD,查明了MAPxj-RD的生物学特性与分子特性;对细菌培养方法进行了优化,并证明该方法可提高分离成功率,缩短培养时间;动物试验证明MAPxj-RD具有较强的致病性,确为塔河马鹿发病的致病菌。

Abstract

mu de :fu jie he bing you chen yao han bing ,shi you fu jie he fen zhi gan jun yin qi niu 、yang 、ma lu deng fan chu dong wu de yi chong jian jin xing xiao shou he rou ya zhong chang yan wei zhu yao te zheng de chuan ran bing 。mu qian ,wo guo ma lu de cun lan yao 13mo tou ,zhu yao you 3ge pin chong ,fen bu zai da li mu he liu yu de da he ma lu shi ji zhong zhi yi ,yang lu ye yi cheng wei dang de chu mu ye fa zhan de chong yao zu cheng 。dan you yu guan li huan jie de que shi he fang yi yi shi de dan bao ,dao zhi yi fu xie 、xiao shou wei zhu yao te zheng de ge chong yi bing gao fa ,fa bing yuan yin yu fu jie he gan ran you guan ,dan shang wei jin hang xiang guan de shen ru yan jiu 。wei ci ,ben yan jiu yi da he ma lu wei dui xiang ,jin hang yi xia fang mian yan jiu :fang fa :cai yong xian chang liu hang bing xue diao cha de fang fa ,shou ji da he liu yu mou ma lu yang shi chang de huan jing 、qi hou 、bing shi deng xian chang zi liao ,cha zhao ke neng de chuan ran yuan ji chuan bo tu jing ;cai ji da he liu yu 5ge lu chang gong 214fen gong lu xie qing ,cai yong ELISAfang fa diao cha fu jie he bing de gan ran xian zhuang ;fen bie mo jun cai ji yi shi fu jie he bing gan ran de 2tou ma lu chang nei rong wu he chang ji mo lin ba jie ,qu wu chu li hou jie chong yu luan huang pei yang ji zhong jin hang bing yuan de fen li chun hua ;cai yong sheng li sheng hua 、pei yang te xing jie ge 16S rRNA、IS900de PCRkuo zeng jin hang chong de jian ding ,tong shi kuo zeng DMC、IS1311ji yin jin hang ya xing jian ding ;shua ze zui kuo de pei yang ji bing you hua xi jun pei yang fang fa ;yi BALB/cxiao shu wei shi yan mo xing jin hang dong wu hui gui shi yan 。jie guo :shi yan yi da he ma lu fu jie he bing de xian chang he xie qing liu hang bing xue diao cha xian chang diao cha fa xian ,lu chang nei nai niu shi ke neng de chuan ran yuan ,fen kou tu jing wei zhu yao de chuan bo tu jing ;lu chang jian wei gong lu de yin chong geng huan ;xie qing liu hang bing xue diao cha jie guo biao ming ,5ge shi yan lu chang jun you fu jie he bing de gan ran ,ji zong yang xing lv wei 7.01%(15/214),zui gao wei 11.32%(6/53),zui di wei 2.70%(1/37)。shi yan er fu jie he fen zhi gan jun de fen li jian ding ji pei yang tiao jian you hua cong chang nei rong wu zhong fen li dao yi zhu fu jie he fen zhi gan jun ,jiang gai jun ming ming wei MAPxj-RD。tong guo xi jun pei yang cha ming le MAPxj-RDde sheng wu xue te xing ,16S rRNA、IS900、DMC、IS1311yu bao hu xing kang yuan ji yin jian ce jun wei yang xing ,liang chong ya xing jian ding fang fa jun xian shi fen li zhu wei Cxing fu jie he fen zhi gan jun ;zui kuo pei yang ji wei luan huang pei yang ji ;HPCqu wu bi HPChe kang sheng su gong tong qu wu geng rong yi fen li dao fu jie he fen zhi gan jun ;chu dai jie chong wu er ci mang chuan hou ju ke fen li dao fu jie he fen zhi gan jun ;dang ye shen <4 mmshi xi jun sheng chang su du geng kuai 。shi yan san fu jie he fen zhi gan jun MAPxj-RDde dong wu shi yan dong wu shi yan biao ming ,xiao shu ti chong zai shi yan zhou ji zhong cheng shang sheng qu shi ,er jian ce fen bian hou wei fa xian fu jie he fen zhi gan jun ;shi yong you hua de pei yang fang fa cong xiao shu de gan zang zhong cheng gong fen li dao MAPxj-RD;bing li qie pian jing kang suan ran se yu HEran se hou jun fa xian MAPxj-RDde cun zai ,ju yin qi le yu fu jie he bing xiang shi de bing li bian hua ;jing PCRjian ce fa xian mei zhi xiao shu zang qi zhong jun you MAPxj-RD,chang zu zhi zhong jian chu lv zui gao ,wei 100%(6/6),shen zang zui di ,wei 16.67%(1/6)。jie lun :zeng shang ,fu jie he bing zai da he liu yu de lu chang yi pu bian cun zai ,zi ran huan jing yu lu chang huan jing ji li yu fu jie he bing de chuan bo ,gai bing yi cheng wei lu chang de chong yao chuan ran bing ;fen li dao yi zhu Cxing fu jie he fen zhi gan jun bing ming ming wei MAPxj-RD,cha ming le MAPxj-RDde sheng wu xue te xing yu fen zi te xing ;dui xi jun pei yang fang fa jin hang le you hua ,bing zheng ming gai fang fa ke di gao fen li cheng gong lv ,su duan pei yang shi jian ;dong wu shi yan zheng ming MAPxj-RDju you jiao jiang de zhi bing xing ,que wei da he ma lu fa bing de zhi bing jun 。

论文参考文献

  • [1].副结核分枝杆菌MAP1068蛋白酶活性及致病性研究[D]. 王忠星.吉林农业大学2019
  • [2].副结核分枝杆菌MAP3292c丝氨酸蛋白酶的功能研究[D]. 刘虹秀.中国农业科学院2019
  • [3].副结核分枝杆菌分离及小鼠感染模型的建立[D]. 彭永.中国兽医药品监察所2018
  • [4].牛和羊驼副结核病间接ELISA检测方法的研究[D]. 刘倩.南京农业大学2009
  • [5].鹿副结核病酶标诊断方法的研究[D]. 白宇.吉林农业大学2005
  • [6].奶及奶制品中副结核分枝杆菌存活状态快速鉴定方法的建立[D]. 梁慧霞.山西农业大学2015
  • [7].副结核分枝杆菌34kD蛋白在牛副结核ELISA检测中的应用研究[D]. 艾兵.吉林农业大学2015
  • [8].副结核分枝杆菌MAP3061c蛋白表面展示疫苗载体的构建及其免疫效力研究[D]. 周薇.黑龙江八一农垦大学2016
  • [9].副结核分枝杆菌Taqman PCR检测方法建立及吉林省梅花鹿副结核病血清学调查[D]. 付志金.吉林农业大学2013
  • [10].山东省部分地区规模化牛场五种主要疫病的流行情况调查[D]. 蔺晓月.山东农业大学2015
  • 读者推荐
  • [1].副猪嗜血杆菌的分离鉴定及菌体灭活苗的研制[D]. 章莲.石河子大学2019
  • [2].副结核分枝杆菌MAP1068蛋白酶活性及致病性研究[D]. 王忠星.吉林农业大学2019
  • [3].基于数字图像的钢筋工程快速检查方法研究[D]. 孙昊.江苏大学2019
  • [4].副结核分枝杆菌MAP3292c丝氨酸蛋白酶的功能研究[D]. 刘虹秀.中国农业科学院2019
  • [5].搅拌桩加固地连墙作用下深基坑变形性状研究[D]. 黄毅.东北电力大学2019
  • [6].塔里木马鹿毛色差异表达基因筛选及功能的研究[D]. 苏比奴尔·艾力.新疆大学2019
  • [7].副结核分枝杆菌分离及小鼠感染模型的建立[D]. 彭永.中国兽医药品监察所2018
  • [8].牛结核分枝杆菌cfp10-esat6融合基因的表达及其表达产物在诊断中的初步应用[D]. 牟巍.中国兽医药品监察所2009
  • [9].副结核分枝杆菌SOD基因对实验动物免疫研究[D]. 胡玉庆.吉林农业大学2008
  • [10].牛副结核病多重组抗原间接ELISA方法的建立及应用[D]. 迟磊.吉林农业大学2007
  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自石河子大学的高建鹏,发表于刊物石河子大学2019-09-26论文,是一篇关于副结核分枝杆菌论文,流行病学调查论文,分离鉴定论文,生物学特性论文,石河子大学2019-09-26论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自石河子大学2019-09-26论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

    标签:;  ;  ;  ;  ;  

    高建鹏:塔河马鹿源副结核分枝杆菌的分离鉴定及部分生物学特性研究论文
    下载Doc文档

    猜你喜欢