导读:本文包含了植物金属硫蛋白论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:金属硫蛋白突变体,植物高效表达载体,烟草,转基因
植物金属硫蛋白论文文献综述
刘晨[1]（2016）在《金属硫蛋白突变体的烟草植物高效表达载体探讨》一文中研究指出金属硫蛋白通常由α和β两个结构域组成,其中α的结构域构成包括Cd~(2+)和Hg~(2+),小鼠突变体则在大肠杆菌中进行搭建,并获得了转基因植株。为了更好地增强外源基因在烟草中的表达效果,可以在基因起始密码子ATG附近融入适合植物需要的碱基组合AACAATG,这种组合有利于将突变体基因插入具有35S强启动子的植物双元表达载体p GPTVd35S-BAR中,并获得αα突变体的植物双元表达载体。在该次研究中,将采用PCR-Southern和蛋白Dot-blotting检测方法,证明αα突变体可以在烟草中良好地表达。同时,在抗重金属的实验中证明转基因烟草能够在Cd400中良好的生长。(本文来源于《科技资讯》期刊2016年12期）
何娇,何玉,黄楚乔,韩娜,陶宗娅[2]（2016）在《铯对印度芥菜和菊苣植物螯合肽和金属硫蛋白含量的影响》一文中研究指出以133Cs作为污染源,溶液培养印度芥菜和菊苣幼苗,研究植物螯合肽(phytochelatins,PCs)、金属硫蛋白(metallothionein,MT)等含巯基肽类物质与Cs+胁迫毒理的内在联系。采用改良水培法培养印度芥菜和菊苣长至两片真叶,置于含铯[ρ(Cs~+)0~200 mg·L~(-1)]的营养液中培养一段时间后取样,测定幼苗地上部和根系生物量,采用火焰原子吸收分光光度法测定Cs~+富集量,5,5’-二六硝基苯甲酸(DTNB)比色法测定PCs和MT含量。结果显示:随着Cs~+浓度[ρ(Cs+)25~200 mg·L~(-1)]增加,印度芥菜和菊苣地上部和根系生物量显着降低(P<0.05),印度芥菜的生物量降低幅度小于菊苣;Cs~+的富集量均显着增加,印度芥菜对Cs~+富集量大于菊苣,印度芥菜地上部、菊苣根系分别是Cs~+的主要蓄积部位;非蛋白巯基肽类(non-protein thiol,NPT)、植物螯合肽(PCs)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)和金属硫蛋白(MT)含量变化均呈现先升后降的趋势,均表现为根系>地上部,印度芥菜>菊苣。当ρ(Cs~+)100 mg·L~(-1)时NPT、PCs、GSH和MT达最大值。结果表明,菊苣对Cs~+处理敏感,印度芥菜具有较强的吸收和转运Cs~+的能力,Cs~+处理诱导合成PCs、GSH和MT含量显着增加,这是印度芥菜对Cs~+耐性较强的主要原因。(本文来源于《生态毒理学报》期刊2016年03期）
郭慧慧[3]（2016）在《植物金属硫蛋白的研究进展》一文中研究指出植物金属硫蛋白在解除金属离子的毒害、维持内环境的稳定和消除活性氧等方面有重要的作用。本文将对植物金属硫蛋白的特性和功能等方面进行综述。(本文来源于《闽东农业科技》期刊2016年02期）
孟红恩[4]（2016）在《盐穗木金属硫蛋白HcMT的功能活性分析及转基因植物的研究》一文中研究指出在植物界广泛存在的金属硫蛋白(Metallothioneins,MTs)是一类可与金属离子结合的、富含半胱氨酸残基(10-30%)的小分子蛋白,可以被众多非生物因素诱导产生,其所具有的强烈的清除自由基和结合重金属离子的能力使其成为植物研究的热点。盐穗木(Halostachys caspica)金属硫蛋白HcMT含有78个氨基酸,其中半胱氨酸数量为14个,理论分子量为7.70 k D,理论等电点为5.05。生物信息学分析结果显示,HcMT符合典型的植物Type 2型MT序列特征,通过MEGA 4.0系统进化树分析与其它一些Type 2型MT进化起源表明,其和海蓬子(Salicornia brachiata)的亲缘关系较近,氨基酸相似性达93%。为研究HcMT的功能活性,将HcMT基因亚克隆至p GEX-6p-2原核表达载体上,在大肠杆菌BL21中表达,分离纯化融白蛋白GST-HcMT,通过原子吸收分光光度法测定GST-HcMT结合金属离子的量以判断其与金属离子的结合能力。结果显示,诱导表达的GST-HcMT分子量在34 k D左右,与预期一致,且通过Western blot进一步得到验证;诱导的同时添加金属离子,分离纯化GST-HcMT与金属离子复合物后,原子吸收结果表明其具有结合Cu~(2+)、Zn~(2+)、Pb~(2+)、Cd~(2+)的能力,结合量分别是对照的25倍、10倍、4倍和2倍,结合能力大小依次是:Cu~(2+)>Cd~(2+)>Zn~(2+)>Pb~(2+)。同时发现,工程菌pGEX-6p-2-HcMT/BL21具有耐受H_2O_2、NaHCO_3、Na_2CO_3的能力。将其亚克隆至pET32a原核表达载体,E.coli BL21表达后分离纯化融合蛋白Trx A-HcMT,Western blot鉴定其活性。采取与GST-HcMT相同的研究策略,发现Trx A-HcMT与GST-HcMT相比可以特异性的结合更多的金属离子,如Cd~(2+)、Co~(2+)、Cu~(2+)、Fe~(3+)、Mg~(2+)、Pb~(2+)、Zn~(2+)、Hg~(2+)。在Cd~(2+)、Cu~(2+)、Zn~(2+)胁迫下,含pET32a-HcMT/BL21的工程菌繁殖速度明显优于含pET32a/BL21的工程菌。GST-HcMT与Trx A-HcMT的这种差异,可能与标签蛋白中半胱氨酸残基含量相关。为初步探索HcMT工业化生产的可行性,通过单因素实验及20 L发酵罐放大培养优化了影响转盐穗木金属硫蛋白大肠杆菌发酵培养基的成分及其它因素。优化培养基为:每900 m L培养基含蔗糖4 g,酵母浸粉24 g,蛋白胨8 g;每100 m L磷酸缓冲液含KH_2PO_4 2.31g、K_2HPO_4?3H_2O 12.54 g,两部分分别灭菌后混合。蛋白表达条件为:乳糖6 mmol/L,诱导4 h。通过20 L发酵罐发酵培养,可使菌体量达到2.68 g/L,比摇瓶培养提高了31%,每克干重菌体结合的铜离子达到315.3 mg,比摇瓶培养提高了69%,适宜放大培养。为进一步研究HcMT基因的功能活性及其应用于植物修复的可行性,将HcMT构建至p CAMBIA1301植物表达载体,通过EHA105农杆菌介导浸染烟草。基因组PCR鉴定筛选到转p CAMBIA1301-HcMT烟草阳性植株,转HcMT基因烟草的各种非生物胁迫耐受性以及对不同金属离子的富集情况有待于进一步的研究。(本文来源于《新疆大学》期刊2016-05-01）
陈涛涛,高洁,张兴翠,黄爱缨[5]（2014）在《铬胁迫下扁穗牛鞭草根和叶中植物络合素和类金属硫蛋白的变化》一文中研究指出采用盆栽实验法,研究不同浓度铬胁迫下扁穗牛鞭草(Hemarthria compressa)对Cr6+的吸收积累特征以及根和叶中植物络合素(PCs)和类金属硫蛋白(MTL)的诱导合成量。结果表明,在梯度实验中,植物体内的富集系数大于1.0,转移系数除对照组外都小于1.0;当铬处理浓度达80mg/L时,根、茎和叶中铬的含量分别为1565.83 mg/kg、57.38 mg/kg和763.68mg/kg。随着铬浓度的升高,植物的株高和根长先高于对照,而后逐渐下降。铬胁迫诱导植物产生的PCs和谷胱甘肽(GSH)有先上升后下降的趋势,但含量较少,PCs的含量又有个别出现再上升的波浪式变化;而非蛋白质巯基(NPT)和MTL的诱导量较高,且随着铬浓度增加呈现先上升后下降的规律;根和叶中MTL的含量分别在10和20 mg/L处理达最大。实验表明,扁穗牛鞭草有较强的累积Cr能力,这对修复Cr污染土壤具有一定应用潜力和价值;同时,PCs和MTL对不同铬处理浓度的响应都较敏感,故可作为植物耐铬胁迫及鉴定土壤铬污染的参考指标。(本文来源于《“第四届重金属污染防治及风险评价研讨会”暨重金属污染防治专业委员会2014年学术年会论文集》期刊2014-12-13）
孟红恩,刘忠渊[6]（2014）在《植物金属硫蛋白研究进展》一文中研究指出植物金属硫蛋白是一类可与金属离子结合的、富含半胱氨酸残基的小分子蛋白,在植物界广泛存在,可以被众多非生物因素诱导产生,其所具有的强烈的清除自由基和结合重金属离子的能力使其成为植物研究的热点。对植物金属硫蛋白的分类、基因结构与调控、结构、性质与应用、分离纯化与检测等方面的近期研究进展作简单介绍,同时提出一些研究中存在的问题,并对其研究前景进行展望。(本文来源于《广东农业科学》期刊2014年15期）
陈昱,官丽莉,杨晶,王德仲,李校堃[7]（2014）在《植物金属硫蛋白的研究进展》一文中研究指出金属硫蛋白(Metallothionein,MT)是从动物体中提纯出来的具有生物活性及性能独特的低分子量蛋白,自从MT被发现以来,它就成为了基础科学研究的热点之一。该文在简要介绍植物金属硫蛋白结构和分类的基础上,概述了金属硫蛋白的分离提取方法;总结了作为现代新型化妆品原料所具有的清除自由基与抗氧化、对金属离子的解毒、防辐射作用、调控基因的表达等特殊功效;并展望了金属硫蛋白的应用前景及存在的问题。(本文来源于《北方园艺》期刊2014年07期）
万小琼,邵婷,周文兵,朱端卫[8]（2013）在《植物金属硫蛋白在水体重金属污染修复中的作用机制》一文中研究指出金属硫蛋白中半胱氨酸含量可达30%,因半胱氨酸的巯基对重金属离子尤其是具有d10电子结构的金属离子具有很强的结合能力,所以该蛋白一直被认为是生物体内重金属的有效解毒剂。哺乳动物体内金属硫蛋白的大量研究已证实其作用不仅涉及重金属的解毒,还与活性氧的清除、神经信号传递、能量代谢等相关联,其具体作用取决于其结构与分布位置。近几年对植物金属硫蛋白越来越多的研究主要限于对离体蛋白的探讨,关于该蛋白在重金属超积累植物中的作用还不明确。不同类型的金属硫蛋白对植物同时超积累多种重金属的贡献不可忽略。凤眼莲因其去污能力强、水陆皆能生长、生态适应性相对较宽、生长速度快且生物量大等特征被广泛应用于污染水体的生物修复。研究已证实,凤眼莲能同时蓄积多种重金属,为少数可以富集多种重金属植物之一。根据离体金属硫蛋白结构特征,目前我们正在对金属硫蛋白在凤眼莲富集重金属中的作用进行研究,研究结果将可阐明植物金属硫蛋白在水体重金属修复中的作用机制,这对如何提高重金属污染环境的植物修复效率和降低水体污染的治理成本具有重要意义。(本文来源于《2013年水资源生态保护与水污染控制研讨会论文集》期刊2013-12-26）
王黎,于立博,刘继文[9]（2012）在《新疆部分植物金属硫蛋白含量测定》一文中研究指出目的筛选出新疆天然植物中金属硫蛋白(metallothionein,MT)含量高的部分植物,为进一步综合开发利用新疆地产植物资源提供理论依据。方法采用镉-血红蛋白饱和法及火焰原子吸收(AAS)法对20种植物中MT含量和微量元素含量进行测定。结果 20种植物中均含有MT,其中巴楚蘑菇、油桃、黑种草及平菇4种植物提取液中含量较高。10种植物中微量元素铜、锌离子的含量与MT的含量有一定的相关性(P<0.05)。结论本次实验中测定的20种新疆地产植物均含有MT,其中巴楚蘑菇、黑种草、平菇、油桃的提取液中植物类MT含量较高。(本文来源于《新疆医科大学学报》期刊2012年11期）
吕艳艳[10]（2012）在《转外源金属硫蛋白（EhMT1、BcMTs)基因植物对Cd和Cu的耐性与积累研究》一文中研究指出重金属对土壤和水体的污染已经成为全球性的环境问题之一,长期生长在重金属污染环境中的植物会在生长、发育以及生理方面受到重金属的毒害,而植物在生长过程中会产生一些适应性机制来对抗重金属的毒害作用,其中耐性机理之一是合成一些配位基团如有机酸、植物螯合肽(PCs)、金属硫蛋白(MTs)等,与重金属离子螯合,形成无毒害的复合物,降低细胞内自由重金属离子的浓度,从而减轻重金属的毒害作用。本研究优化了芸薹属植物不结球白菜的再生体系,将从“铜草”海州香薷中克隆的EhMT1基因转入到不结球白菜中,研究过表达EhMT1基因对不结球白菜重金属的耐性及积累的影响；同时获得了不结球白菜的BcMT1和BcMT2基因,将两个基因转入到拟南芥和烟草中,成功获得转基因植株,对不同来源的MTs基因在重金属耐性方面的功能进行了分析。结果表明,在未进行Cd和Cu处理时,野生型不结球白菜和转EhMT0不结球白菜的生长状态基本一致。在200μM CdCl2处理下,野生型不结球白菜幼苗的根长受到严重抑制,而过表达EhMT1基因的两个不结球白菜株系EhMT1-1和EhMT1-4受到的抑制程度明显低于野生型,且在根基处生长出大量的不定根。在100μM CuSO4处理下,野生型植株主根停止发育,根基部颜色发黑,幼苗弱小,而EhMT1-1和EhMT1-4两个转基因株系的生长也受到严重的影响,主根伸长变短,但是在根基部生长出大量的不定根,可能是转EhMT1不结球白菜对重金属具有较强耐性的表现之一。在200μMCdC12处理下,野生型植株和转基因植株在处理第1天和第3天时,地上部和根系的Cd含量没有差异,在处理第5天时,转基因植株EhMT1-4株系地上部和根系的Cd含量明显高于野生型,处理第7天时,EhMT1-4株系根系的Cd含量比野生型高,而地上部与野生型没有明显的差异,EhMT1-1在处理7天时,根系和地上部的Cd含量比野生型高。在100 μM CuSO4处理下,转基因植株EhMT1-1和EhMT1-4的根系在各个时间段内的Cu含量与野生型相比均没有差异,而地上部Cu含量在处理第3天时开始明显高于野生型植株。利用RT-PCR技术从不结球白菜中克隆获得2个金属硫蛋白基因BcMT1和BcMT2,开放阅读框分别为139bp和245bp,不同外源因素对两个基因的表达具有不同程度的诱导。在10μM ABA处理下,BcMT1和BcMT2在叶中的表达呈增加的趋势,在根中表达呈下降的趋势。在200 μM CdCl2处理下,BcMT1和BcMT2在根中和叶中的表达均呈现先上升后下降的趋势,其中BcMT1在根和叶中的表达高峰在处理后1小时,BcMT2的表达高峰在叶中出现在处理后6小时,根中出现在处理后3小时。在100mM NaCl处理下,叶中BcMT1和BcMT2两个基因的表达都有上调趋势,在根中,BcMT1的表达也在处理后3小时增加,但是随后下调,而BcMT2在根中几乎不表达。100 μM CuSO4对BcMT1的表达在处理后24小时有明显的诱导作用,但是对BcMT2的表达没有明显的诱导。另外,用不同浓度的ZnSO4, K2CrO4, CuSO4处理不结球白菜24小时后,BcMT1和BcMT2基因的表达均有不同程度的上调趋势。对转BcMT1和BcMT2的酵母耐性分析结果表明,与野生型相比,过量表达BcMT1和BcMT2提高了酵母菌对过量Cd、Cu和Cr的耐性。在Cd、Cu处理下,与野生型相比,转BcMT1和BcMT2拟南芥在生长上表现出一定的优势,尤其是在对Cu的耐性上表现的更加明显。转BcMTs拟南芥地上部的Cu含量较野生型高,而根系的Cu含量与野生型相比没有显着性差异。转BcMTs拟南芥的Cd含量与野生型相比没有显着性差异。在对Cu转运相关蛋白基因的表达分析中得出,在Cu的诱导下,转基因株系BcMT1-1在Cu处理24小时后,COP1和ZIP4的表达均有明显增加,且与野生型有显着差异,BcMT2-1株系在Cu处理6小时后,COP1和COP5的表达上调,而ZIP4的表达处理前后没有明显变化。通过DAB和NBT染色,转BcMT1和BcMT2拟南芥在Cd、Cu处理下,植株叶片中积累的过氧化氢和超氧阴离子比野生型少,而野生型叶片中染色较深,积累的过氧化氢和超氧阴离子较多,受到的氧化伤害程度比转基因型植株高。ROS相关基因的表达(GPX3、CAT2、Cu/Zn-SOD3、POD)与转入的MTs基因的表达一致,且与野生型相比,CAT2、POD等的表达量有显着的增强,说明MTs基因的转入还可能促进ROS相关基因的表达,进而缓解重金属带来的活性氧的伤害,提高转基因植株对重金属胁迫的耐性。转BcMT2烟草的重金属耐性分析中,无论是200 μM CdCl2处理还是100μMCuSO4处理,转基因株系TBcMT2-6和TBcMT2-8的根长受到的抑制较小,与野生型相比两者之间有明显的差异；水培试验中,在100μM CdCl2,20 μM CuSO4和70μMK2Cr04处理一周后,转基因型烟草的Cd含量高于野生型,而Cu和Cr的含量转基因株系稍高于野生型,但是两者之间没有明显的差异。(本文来源于《南京农业大学》期刊2012-06-01）
植物金属硫蛋白论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
以133Cs作为污染源,溶液培养印度芥菜和菊苣幼苗,研究植物螯合肽(phytochelatins,PCs)、金属硫蛋白(metallothionein,MT)等含巯基肽类物质与Cs+胁迫毒理的内在联系。采用改良水培法培养印度芥菜和菊苣长至两片真叶,置于含铯[ρ(Cs~+)0~200 mg·L~(-1)]的营养液中培养一段时间后取样,测定幼苗地上部和根系生物量,采用火焰原子吸收分光光度法测定Cs~+富集量,5,5’-二六硝基苯甲酸(DTNB)比色法测定PCs和MT含量。结果显示:随着Cs~+浓度[ρ(Cs+)25~200 mg·L~(-1)]增加,印度芥菜和菊苣地上部和根系生物量显着降低(P<0.05),印度芥菜的生物量降低幅度小于菊苣;Cs~+的富集量均显着增加,印度芥菜对Cs~+富集量大于菊苣,印度芥菜地上部、菊苣根系分别是Cs~+的主要蓄积部位;非蛋白巯基肽类(non-protein thiol,NPT)、植物螯合肽(PCs)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)和金属硫蛋白(MT)含量变化均呈现先升后降的趋势,均表现为根系>地上部,印度芥菜>菊苣。当ρ(Cs~+)100 mg·L~(-1)时NPT、PCs、GSH和MT达最大值。结果表明,菊苣对Cs~+处理敏感,印度芥菜具有较强的吸收和转运Cs~+的能力,Cs~+处理诱导合成PCs、GSH和MT含量显着增加,这是印度芥菜对Cs~+耐性较强的主要原因。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
植物金属硫蛋白论文参考文献
[1].刘晨.金属硫蛋白突变体的烟草植物高效表达载体探讨[J].科技资讯.2016
[2].何娇,何玉,黄楚乔,韩娜,陶宗娅.铯对印度芥菜和菊苣植物螯合肽和金属硫蛋白含量的影响[J].生态毒理学报.2016
[3].郭慧慧.植物金属硫蛋白的研究进展[J].闽东农业科技.2016
[4].孟红恩.盐穗木金属硫蛋白HcMT的功能活性分析及转基因植物的研究[D].新疆大学.2016
[5].陈涛涛,高洁,张兴翠,黄爱缨.铬胁迫下扁穗牛鞭草根和叶中植物络合素和类金属硫蛋白的变化[C].“第四届重金属污染防治及风险评价研讨会”暨重金属污染防治专业委员会2014年学术年会论文集.2014
[6].孟红恩,刘忠渊.植物金属硫蛋白研究进展[J].广东农业科学.2014
[7].陈昱,官丽莉,杨晶,王德仲,李校堃.植物金属硫蛋白的研究进展[J].北方园艺.2014
[8].万小琼,邵婷,周文兵,朱端卫.植物金属硫蛋白在水体重金属污染修复中的作用机制[C].2013年水资源生态保护与水污染控制研讨会论文集.2013
[9].王黎,于立博,刘继文.新疆部分植物金属硫蛋白含量测定[J].新疆医科大学学报.2012
[10].吕艳艳.转外源金属硫蛋白（EhMT1、BcMTs)基因植物对Cd和Cu的耐性与积累研究[D].南京农业大学.2012