导读:本文包含了交叉对话论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:喹乙醇,p53,肝损伤,氧化应激
交叉对话论文文献综述
李道稳,肖希龙,汤树生[1]（2019）在《p53通路与氧化应激交叉对话在喹乙醇诱导肝损伤中的作用》一文中研究指出[目的]喹乙醇因具有良好的抗菌促生长的作用,被广泛用于饲料添加剂。但其具有明显的蓄积毒性和DNA损伤等副作用,对大多数动物有明显的致畸作用,对人也有潜在的致畸、致突变和致癌危害,因此喹乙醇已被许多国家禁用。本研究旨在探讨喹乙醇诱导的肝损伤中p53与氧化应激的相互作用及在体内体外的毒性分子机制。[方法]本研究选用p53基因敲除小鼠(C57BL/6),p53基因缺失细胞系(HCT116)。将小鼠分为4组(n=10)设对照组、p53缺失组,喹乙醇400mg/kg组,p53缺失组+喹乙醇400 mg/kg组,所有小鼠连续灌胃28天,麻醉处死后收集小鼠血液及肝脏组织。试剂盒检测氧化应激标志物(MDA、CAT和SOD),Western blot检测信号通路标志性蛋白变化。噻唑蓝(MTT)法检测细胞成活率;AnnexinV-PI和Hoechst 33342染色检测细胞凋亡;荧光探针2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)染色检测活性氧(ROS)的产生,罗丹明(Rhodamin 123)染色检测线粒体膜电位,荧光显微镜观察分析。[结果]研究结果表明,喹乙醇通过引起氧化应激和激活p53通路诱导肝损伤。同时,N-乙酰半胱氨酸(NAC)在体内和体外显着降低了喹乙醇诱导的氧化应激、ROS的产生和p53蛋白的表达。p53敲除可明显降低喹乙醇诱导的肝损伤和氧化应激,同时抑制HCT116和HepG2细胞凋亡。此外,p53敲除缓解线粒体膜电位(MMP)降低和抑制线粒体凋亡通路。喹乙醇诱导MAPK、Nrf2/HO-1和AKT信号通路显着激活,而在p53缺失小鼠和p53缺失细胞中MAPK、Nrf2/HO-1和AKT信号通路明显抑制,而LC3和Beclin1的表达进一步增加。[结论]我们的研究结果提供了一个结论,p53在喹乙醇诱导的肝损伤与氧化应激主要发挥了促凋亡的作用,这在很大程度上依赖于抑制ROS的产生和Nrf2/HO-1通路,并通过激活LC3和Beclin1上调自噬途径的,从而抑制喹乙醇诱导MAPK和AKT信号通路。(本文来源于《中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十五次学术讨论会论文集》期刊2019-10-13）
李道稳,肖希龙,汤树生[2]（2019）在《p53通路与氧化应激交叉对话在喹乙醇诱导肝损伤中的作用》一文中研究指出目的喹乙醇因具有良好的抗菌促生长的作用,被广泛用于饲料添加剂。但其具有明显的蓄积毒性和DNA损伤等副作用,对大多数动物有明显的致畸作用,对人也有潜在的致畸、致突变和致癌危害,因此喹乙醇已被许多国家禁用。本研究旨在探讨喹乙醇诱导的肝损伤中p53与氧化应激的相互作用及在体内体外的毒性分子机制。方法本研究选用p53基因敲除小鼠(C57BL/6),p53基因缺失细胞系(HCT116)。将小鼠分为4组(n=10)设对照组、p53缺失组,喹乙醇400 mg·kg~(-1)组,p53缺失组+喹乙醇400 mg·kg~(-1)组,所有小鼠连续灌胃28天,麻醉处死后收集小鼠血液及肝脏组织。试剂盒检测氧化应激标志物(MDA、CAT和SOD),Western blot检测信号通路标志性蛋白变化。噻唑蓝(MTT)法检测细胞成活率;AnnexinV-PI和Hoechst 33342染色检测细胞凋亡;荧光探针2‘,7’-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)染色检测活性氧(ROS)的产生,罗丹明(Rhodamin 123)染色检测线粒体膜电位,荧光显微镜观察分析。结果研究结果表明,喹乙醇通过引起氧化应激和激活p53通路诱导肝损伤。同时,N-乙酰半胱氨酸(NAC)在体内和体外显着降低了喹乙醇诱导的氧化应激、ROS的产生和p53蛋白的表达。p53敲除可明显降低喹乙醇诱导的肝损伤和氧化应激,同时抑制HCT116和HepG2细胞凋亡。此外,p53敲除缓解线粒体膜电位(MMP)降低和抑制线粒体凋亡通路。喹乙醇诱导MAPK、Nrf2/HO-1和AKT信号通路显着激活,而在p53缺失小鼠和p53缺失细胞中MAPK、Nrf2/HO-1和AKT信号通路明显抑制,而LC3和Beclin1的表达进一步增加。结论我们的研究结果提供了一个结论,p53在喹乙醇诱导的肝损伤与氧化应激主要发挥了促凋亡的作用,这在很大程度上依赖于抑制ROS的产生和Nrf2/HO-1通路,并通过激活LC3和Beclin1上调自噬途径的,从而抑制喹乙醇诱导MAPK和AKT信号通路。(本文来源于《中国毒理学会第九次全国毒理学大会论文集》期刊2019-09-17）
李道稳,肖希龙,汤树生[3]（2019）在《p53通路与氧化应激交叉对话在喹乙醇诱导肝损伤中的作用》一文中研究指出【研究目的】喹乙醇因具有良好的抗菌促生长的作用,而被广泛用于饲料添加剂。但其具有明显的蓄积毒性和DNA损伤等副作用,对大多数动物有明显的致畸作用,对人也有潜在的致畸、致突变和致癌危害,因此喹乙醇已被许多国家禁用。本研究旨在探讨喹乙醇诱导的肝损伤中p53与氧化应激的相互作用及在体内体外的毒性分子机制。(本文来源于《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十五次学术交流会、中国病理生理学会动物病理学专业委员会第二十四次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第四次学术研讨会、中国兽医病理学家第四次研讨会论文集》期刊2019-07-27）
金明姬[4]（2019）在《P2X7R调控肝星状细胞—巨噬细胞交叉对话的机制研究》一文中研究指出目的:研究通过嘌呤能离子通道型7受体(purinergic receptor P2X,ligand-gated ion channel 7,P2X7R)通路改善肝星状细胞活化导致的肝纤维化的作用及重要性;探究P2X7R、Toll样受体-4(toll like receptor-4,TLR4)、核苷酸结合寡聚化结构式受体 3(NLR family,pyrin domain containing 3,NLRP3)叁者轴线的在肝纤维化中的作用,为肝纤维化治疗靶点提供有效的实验依据。方法:体外实验选用人肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)系LX-2细胞,在给与P2X7R选择性抑制剂A438079、TLR4抑制剂CLI-095、caspase-1特异性抑制剂Ac-YVAD-cmk预处理一个小时后,用转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)刺激24 h,提取相应细胞总蛋白和RNA,通过蛋白免疫印迹实验、PCR技术以及免疫荧光染色实验来测定人肝星状细胞LX-2细胞活化过程中纤维化指标α-平滑肌细胞肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)以及Ⅰ型胶原蛋白(collagen type Ⅰ,collagen Ⅰ)的表达;为进一步证明P2X7R在肝纤维化中发挥的作用,用 CMV(Cytomegalovirus,pronounced sy-toe-MEG-a-low-vy-rus)质粒或CMV-P2X7R质粒对LX-2细胞进行转染,使P2X7R表达增加后给与TGF-β刺激24 h,检测细胞中相应肝纤维化指标标志蛋白collagen Ⅰ和α-SMA的mRNA和蛋白表达情况,并用免疫荧光染色实验进行验证;用佛波脂(phorbol-12-myristate-13-acetate,PMA)诱导分化人急性白血病单核细胞(human acute monocytic leukemia cell line,THP-1)作为巨噬细胞,将脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)或脂多糖联合腺嘌呤核苷叁磷酸(adenosine triphosphate,ATP)刺激巨噬细胞所得的上清液作为条件培养基间接刺激人肝星状细胞的组别与LPS或LPS联合ATP直接刺激人肝星状细胞的组别进行比较,采用蛋白免疫印迹实验、PCR技术和免疫荧光染色实验检测肝纤维化相关标志collagen Ⅰ和α-SMA的表达;PMA诱导分化THP-1细胞成为巨噬细胞后用P2X7R选择性抑制剂A438079、TLR4抑制剂CLI-095、caspase-1特异性抑制剂Ac-YVAD-cmk预处理一小时,再用LPS刺激4 h,收细胞前30 min给与ATP刺激,收集到的上清液通过Elisa检测细胞外炎症相关因子白细胞介素-1β(interleukin-lβ,IL-1β)的表达情况;人肝星状细胞用上述收集的上清液作为条件培养基刺激24 h,通过蛋白免疫印迹、PCR技术和免疫荧光染色实验检测肝纤维化相关指标collagen Ⅰ和α-SMA的表达;结果:P2X7R选择性抑制剂-A438079、TLR4抑制剂-CLI-095、caspase-1特异性抑制剂-Ac-YVAD-cmk能够降低TGF-β激活的人肝星状细胞中纤维化指标α-S1MA、collagen Ⅰ的表达;P2X7R过表达与TGF-β共同刺激的LX-2细胞α-SMA、collagen Ⅰ的表达增加;条件培养基间接刺激LX-2细胞的组别与直接用LPS或LPS联合ATP刺激LX-2细胞的组别相比,条件培养基间接刺激LX-2细胞的组别肝纤维化相关指标collagen Ⅰ、α-SMA的表达升高;经LPS与ATP联合作用于巨噬细胞所得的上清液中IL-1β的表达升高,A438079、CLI-095、Ac-YVAD-cmk预处理的组别表达降低;LX-2细胞经LPS与ATP联合刺激巨噬细胞所得的上清液处理,肝纤维化相关各项指标collagen Ⅰ、α-SMA表达升高,而巨噬细胞预处理A438079、CLI-095、Ac-YVAD-cmk所得上清液刺激LX-2细胞可以有效的降低上述相关因子的表达;结论:P2X7R的激活促进TGF-β诱导的肝星状细胞的活化,P2X7R/TLR4/NLRP3轴线可调控TGF-β所激活肝星状细胞的活化,LPS活化的巨噬细胞释放的细胞外炎症因子IL-1β对肝星状细胞向纤维化发展有促进作用,而P2X7R/TLR4/NLRP3轴线可调控肝纤维化中巨噬细胞与肝星状细胞的交叉对话。(本文来源于《延边大学》期刊2019-05-31）
叶晶[5]（2019）在《TGF-β1与TWEAK信号通路交叉对话在哮喘气道重塑中的作用及隐丹参酮干预机制的研究》一文中研究指出研究背景:支气管哮喘是由多种细胞(如嗜酸性粒细胞、肥大细胞、T淋巴细胞、中性粒细胞、气道上皮细胞等)和细胞组分参与的气道慢性炎症为特征的异质性疾病,以气道炎症和气道重塑(airway remodeling)为重要病理特征[1]。支气管哮喘如诊治不及时,随病程的延长可产生气道不可逆性缩窄和气道重塑。气道重塑的原因包括气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cells,ASMCs)增生肥大、粘液腺增生、基底膜增厚、粘膜化生和新生血管的增加等,其中ASMCs增殖在气道重塑中占有十分重要的地位,并与气道高反应性密切相关。并通过上皮间质转化(epithelial-mesenchymaltransition,EMT)参与了气道的重塑。据报道,现如今发现很多种细胞因子及转录因子与EMT相关,如转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达的减少或缺失、转录因子(Snail+Slug)等。其中TGF-β1是诱导EMT的分散因子,TGF-β1已被证实在体内、外培养的大多数上皮细胞中,可诱导EMT的发生。随着社会的进步及化工业产业不断的发展,环境污染的日益加重,哮喘的发病率逐年增加,并得到了医疗界高度的关注,目前,治疗哮喘的方法主要以抗炎、平喘为主要手段,激素的利用率逐渐升高,鉴于激素对人体的副作用非常大,一部分学者把研究重心转移至中国传统药物的抗炎作用研究上,大力发展我国传统中药,本研究选用隐丹参酮(Cryptotanshinone,CTS)是活血化瘀类中药丹参的有效成分之一,具有清除氧自由基、改善微循环、抗炎、抗感染、抗肿瘤、提高机体免疫力等多种生物活性[2]。研究目的:为明确TGF-β1-TWEAK信号交叉对话来调控哮喘气道重塑炎症及EMT进程的相关分子机制。1、建立小鼠哮喘气道重塑模型,观察及检测哮喘小鼠气道炎症、气道重塑及气道反应性指标,探讨哮喘小鼠EMT进程的相关分子机制。2、检测TGF-β1-TWEAK交叉对话对哮喘小鼠气道炎症、气道重塑及EMT的影响,为治疗哮喘气道重塑提供有效的分子靶点,并初步阐明其可能的分子机制。3、检测经CTS给药治疗后,哮喘小鼠气道炎症及气道重塑的影响,为更好的预防与治疗哮喘气道重塑提供可靠地理论依据。材料与方法:1.小鼠建立小鼠哮喘气道重塑模型。观察指标:(1)小鼠进行雾化激发时的状态及行为观察;(2)利用动物肺功能仪测定肺阻力(Lung resistance,RL)的变化;(3)统计肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)细胞总数与嗜酸性粒细胞数;(4)将肺组织切片进行苏木精-伊红(haematoxylinandeosin,HE)染色、过碘酸雪夫(periodic acid-schiff,PAS)染色及Masson染色法观察小鼠肺组织形态学改变;(5)实时荧光定量酶链聚合反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测哮喘小鼠 EMT 相关标志基因 mRNA的表达水平;(6)免疫蛋白印记法(western blot,WB)检测E-Cadherin及Snail+Slug蛋白表达水平。2.WB检测人气道上皮16HBE细胞和鼠气道平滑肌RASMCs细胞中,E-Cadherin、Snail+Slug、TGF-β1、TWEAK、Fn14、TAK-1、NF-κB、α-SM)A及Collagen I蛋白表达水平;3.在成功建立的小鼠哮喘气道重塑模型的基础上,分别给药地塞米松(Dexamethasone,DXMS)治疗(OVA+DXMS 组)及 CTS 治疗(OVA+CTS组),观察指标:体外实验:(1)经不同浓度CTS(0、2.5、5、10、15、25)治疗后,MMT法检测大鼠平滑肌RASMCs细胞存活率,筛选出CTS的有效浓度;(2)WB 检测 RASMCs 细胞中,α-SMA、MMP-9、Collagen I、TIMP-1、TWEAK、Fn14、TGF-β1、TAK-1、NF-κB 蛋白表达水平;(3)流式细胞术检测RASMCs细胞周期。体内实验:(1)小鼠进行雾化激发时的状态及行为观察;(2)HE、PAS染色及Masson染色观察肺组织形态学改变;(3)免疫组织化学染色观察小鼠肺组织中Ki67的表达情况;(4)统计BALF中细胞总数与嗜酸性粒细胞数;(5)ELISA检测细胞因子IL-4、IL-5、IL-8、IL-13表达水平;(6)免疫组化染色观察,哮喘小鼠肺组织中α-SMA、TWEAK、TGF-β1蛋白的表达情况;(7)免疫荧光染色(IF)观察,哮喘小鼠支气管周围α-SMA蛋白的表达情况;(8)WB检测小鼠肺组织中α-SMA、MMP-9、Collagen I、TIMP-1、TWEAK、Fn14、TGF-β1、TAK-1、NF-κB 蛋白表达水平。结果1.第一部分实验结果(1)行为表现:OVA致敏的哮喘小鼠出现哮喘发作表现。(2)OVA组小鼠RL值随雾化吸入的乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)浓度的增加而升高(P<0.01)。(3)肺组织病理染色形态学改变:OVA组小鼠肺内可见大量炎性细胞浸润,气道壁增厚,杯状细胞增生,粘液腺分泌增加,胶原纤维增生。(4)OVA组小鼠BALF中细胞总数及嗜酸性粒细胞数明显增多(P<0.01)。(5)OVA组E-Cadherin基因表达降低,而Snail+Slug基因表达升高(P<0.01)。RT-qPCR、WB及IF各基因表达结果一致。2.第二部分实验结果(1)16HBE 细胞中 PDGF 组 E-cadherin 蛋白表达减少;Snail+Slug、TWEAK及TGF-β1蛋白表达均增加(P<0.01)。(2)经 si-TWEAK 及 SB-431542 处理后,PDGF 组 16HBE 细胞和 RASMCs细胞中TWEAK、Fn14、TGF-β1、TAK-1及NF-κB蛋白表达均明显增加(P<0.01);si-TWEAK 组 TWEAK、Fn14、TAK-1 及 NF-κB 蛋白的表达显着减少(P<0.01),TGF-β1蛋白表达无明显变化;SB431542组,TGF-β1、TAK-1及NF-κB蛋白表达显着减少(P<0.01),TWEAK、Fn14蛋白表达无明显变化。(3)16HBE细胞和RASMCs细胞经si-TAK-1处理后,与PDGF组比较,si-TAK-1组TWEAK、Fn14及TGF-β1蛋白表达无明显变化,而TAK-1及NF-κB蛋白表达显着减少(P<0.01)。(4)16HBE细胞经5Z-7处理后,与 PDGF组比较,5Z-7组α-SMA、Collagen I、Snail+Slug 蛋白表达均明显下调(P<0.01),E-Cadherin 蛋白表达上调(P<0.01)。(5)RASMCs细胞经5Z-7处理后,与PDGF组比较,5Z-7组α-SMA及Collagen I蛋白表达均下调。(6)RASMCs细胞经5Z-7处理后,与PDGF组比较,5Z-7组S期显着增加(P<0.05)。(7)经5Z-7处理后哮喘小鼠肺组织中,与OVA组比较,Ki67及Snail+Slug蛋白的表达均减少,E-Cadherin蛋白的表达增加。3.第叁部分实验结果(1)RASMCs细胞经不同浓度CTS处理后,与PDGF组比较,从CTS 10μmol/L开始,RASMCs细胞增殖显着被抑制(P<0.01)。(2)RASMCs 细胞中,与 PDGF 组比较,CTS 组 α-SMA、MMP-9、CollagenI、TIMP-1、TWEAK、Fn14、TGF-β1、TAK-1、NF-κB 蛋白的水平显着下调(P<0.01)(3)RASMCs细胞经CTS 10 μmol/L处理后,与PDGF组比较CTS组S期显着增加(P<0.05)。(4)与OVA组比较,DXMS及CTS组小鼠肺组织中Ki67的表达较之明显减少。(5)经DXMS和CTS的治疗后,OVA组小鼠肺内气道壁增厚等病理变化均有所缓解。(6)DXMS和CTS组小鼠肺组织中α-SMA、TWEAK及TGF-β1蛋白的表达较OVA组明显减少。(7)DXMS和CTS组与OVA组比较,小鼠BALF中细胞总数及嗜酸性粒细胞数显着减少(P<0.01)。(8)DXMS 和 CTS 组较 OVA 组小鼠 BALF 中 IL-4、IL-5、IL-8、IL-13 的含量明显减少(P<0.01)。(9)CTS 组与 OVA 组比较,小鼠肺组织中 TWEAK、Fn14、TGF-β1、TAK-1、NF-κB、α-SMA、Collagen I、MMP-9 及 TIMP-1 蛋白表达显着减少(P<0.01)。结论1.EMT参与哮喘小鼠的气道重塑。2.抑制TGF-β1与TWEAK在TAK-1位点交叉对话,可明显降低哮喘小鼠气道炎症,抑制EMT的发生,减轻气道重塑。3.隐丹参酮可通过调控TGF-β1与TWEAK的交叉对话,从而抑制气道炎症及气道重塑,为哮喘未来的治疗提供新的靶向。(本文来源于《延边大学》期刊2019-05-22）
王小萌,王晓,史册,孙宏晨,黄洋[6]（2019）在《骨形态发生蛋白信号通路及其交叉对话对下颌骨发育的影响》一文中研究指出下颌骨是颅面部唯一能自主活动的骨,可发挥咀嚼、发音和吞咽等多种重要功能。骨形态发生蛋白(BMP)信号通路在骨和软骨的形成及稳态维持中起到重要作用,对下颌骨的发育是不可或缺的。已知BMP信号通路的配体、受体及其下游多种细胞因子与其他信号通路相关联,组成一个复杂且庞大的信号网络,共同调节下颌骨的发育。本文主要介绍BMP信号通路以及与BMP信号通路交叉对话的信号通路在下颌骨发育中的作用。(本文来源于《国际口腔医学杂志》期刊2019年03期）
张晶[7]（2018）在《小白菊内酯介导TLR4-STAT3交叉对话调控肝纤维化进程的研究》一文中研究指出目的:研究小白菊内酯(Parthenolide,PNL)通过介导TLR4-STAT3交叉对话改善肝星状细胞(Hepatic stellate cells,HSCs)活化导致肝纤维化的作用机制。方法:转化生长因子-β(TransformingGrowth Factor-β,TGF-β)10ng/ml刺激HSCs或者脂多糖(Lippolysaccharide,LPS)1μg/ml刺激小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7,1h 后给予 PNL(1.56μM、3.125μM、6.25μM、12.5μM、25μM);或给予 PNL(12.5μM、25μM),TLR4 抑制剂 CLI-095(1Oμg/ml),STAT3 抑制剂Guggulsterone(25μM),4h后提取细胞总蛋白和RNA,通过蛋白印迹和RT-PCR方法测定细胞中纤维化指标α-平滑肌细胞肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和Ⅰ型胶原蛋白(Collagen type Ⅰ,Collagen-Ⅰ)等,炎症因子P2X7受体(P2X7r),半胱氨酸天冬氨酸酶-1(Cysteine aspartic enzyme-1,Caspase-1)和白细胞介素-6(lnterleukin-6,IL-6)等,凋亡基因B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)等,还有 TLR4/JAK2/STAT3 和 PI3K/Akt/mTOR 信号通路中各项指标的蛋白或mRNA表达,并且通过细胞免疫荧光实验作进一步验证。结果:PNL能够显着降低TGF-β刺激后HSCs中纤维化指标α-SMA、Collagen-Ⅰ的表达,并且降低金属蛋白酶组织抑制剂1(Tissue inhibitors of metalloproteinase,TIMP1)与基质金属蛋白酶 13(Metal matrix proteinase,MMP13)的比值;PNL还能够降低P2X7r、NLRP3、Caspase-1、IL-6等多种炎症相关因子的表达;PNL抑制Bcl-2等抗凋亡基因,并且增加Caspase-3等促凋亡基因的表达;PNL抑制或下调TLR4/JAK2/STAT3和PI3K/Akt/mTOR信号通路中的多种信号因子。结论:PNL能够促进活化HSCs的凋亡,抑制多种促炎因子的释放,并且通过调节TLR4-STAT3信号通路交叉对话,从而改善肝纤维化。(本文来源于《延边大学》期刊2018-05-22）
夏凯丽[8]（2018）在《2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷调控酒精性脂肪肝中巨噬细胞与肝细胞的交叉对话的机制研究》一文中研究指出目的:酒精性肝病(Alcoholic liver disease,ALD)是全世界广泛关注的影响人类健康的的重大疾病,有着极高的发病率和死亡率。2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(2,3,5,4'-tetrahydroxy-stilbene-2-O-β-D-glucoside,2354glu)是一种二苯乙烯苷类,研究发现其具有一定的脂质调节作用。本实验通过体内急性酒精性脂肪肝动物模型和体外巨噬细胞与肝细胞共培养体系探究了 2354glu对酒精性肝病的潜在的治疗作用。方法:体内实验使用了急性酒精性脂肪肝动物模型:酒精组小鼠每隔12h用酒精(5g/kg)灌胃,共3次;高低剂量给药组同时给予酒精和2354glu(100mg/kg、50mg/kg)共3次;2354glu给药组仅腹腔注射2354glu 100mg/kg。最后一次灌胃4h后处死小鼠,收集肝脏和血清。通过H&E染色、油红O染色和免疫组织化学染色方法观察2354glu对小鼠肝脏组织形态学变化的影响;通过蛋白印迹、ELISA、QPCR、免疫荧光等试验方法观察了小鼠肝脏中脂肪合成与氧化相关因子及炎症相关因子表达变化;体外实验使用了体外炎症及脂质沉积模型:腹腔巨噬细胞给予不同浓度2354glu 1h 后用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)联合叁磷酸腺苷(adenosine tiphosphate,ATP)刺激处理,并通过Western Blot检测细胞胞内和胞外炎症相关因子的表达情况;HepG2细胞用LPS联合ATP刺激后的THP-1细胞上清液处理,用油红O染色、蛋白免疫印迹、免疫荧光等实验研究了肝细胞脂质沉积情况;为了进一步研究P2x7R在炎症及脂质沉积中发挥的作用,分别用SIRNA和过表达质粒对THP-1细胞进行转染,使P2x7R表达减少或增加;结果:体内实验中,HE染色、油红O染色和免疫组化结果表明2354glu能显着降低酒精引起的肝脏脂肪变性;免疫荧光实验表明2354glu能降低P2x7R和NLRP3炎性小体的阳性表达,显着减少巨噬细胞募集导致的炎性浸润。同时2354glu能够增加肝激酶 B1(Liver kinase B1,LKB1)、AMP 依赖的蛋白激酶 α(AMP-activated Kinase α,AMPKα)总蛋白及其磷酸化水平,抑制胆固醇调节元件结合蛋白-1(Sterol Regulatory Element-binding Protein-1，SREBP-1)及其靶基因的表达。体外实验中,2354glu明显抑制了腹腔巨噬细胞中LPS联合ATP刺激导致的炎症反应;2354glu显着改善了 HepG2细胞经LPS联合ATP刺激后的THP-1细胞上清液处理后导致的脂质沉积;结论:2354glu可以通过调节活化的巨噬细胞和肝细胞之间的交叉对话改善P2x7R-NLRP3介导的酒精性脂肪肝(本文来源于《延边大学》期刊2018-05-10）
杨雅芝,张小燕,房丽君,万倩,李剑[9]（2017）在《外泌小体在白血病细胞和骨髓间充质干细胞交叉对话中的作用》一文中研究指出越来越多的证据提示,骨髓微环境在白血病的发生、发展和耐药等过程中发挥着重要的作用,其不仅是造血干细胞增殖、分化和成熟的土壤,也是白血病微小残留病灶潜在的天然庇护所以及复发和产生多药耐药的根源。间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)是骨髓微环境中重要的基质细胞,在近年来被证明是影响白血病细胞生物学特性的主要因素之一。MSC和白血病细胞不仅可以通过直接接触相互影响,还可以通过分泌外泌小体(exosome)进行交叉对话。外泌小体由多种活细胞分泌的纳米级囊泡小体,其中含有蛋白质、RNA和mRNA等多种组分,参与细胞间的物质交换和信息交流,在多种生理和病理过程中发挥着重要作用。外泌体的研究是白血病与微环境的一个新兴领域,将极大地推动有关白血病的研究进展,为白血病治疗带来新的契机。(本文来源于《中国实验血液学杂志》期刊2017年04期）
陶丽,金凤,王海波,钱亚云,孙云[10]（2017）在《交叉对话信号的分子绝缘——对创新药物设计的思考》一文中研究指出生物信号通路的交叉对话(cross-talk)是指众多信号通路共享同一关键组分,形成一种蝴蝶领结(bow-tie)样的网络拓扑结构。交叉对话对终末基因的调节表现出功能冗余、协同及拮抗,同时又要避免通路之间互相串扰带来的信号噪音或信号溢出,进化出一套维持细胞对不同外界应激产生特异性应答的绝缘(insulation)机制,对维持细胞内稳态有着非常重要的生物学意义。交叉对话及其分子绝缘机制提示:对话分子对细胞命运调控的两重性,要求实现靶向对治疗有利的对话分子而避开对治疗不利的对话分子;对话分子以大分子复合物为功能载体,在信号绝缘中对话分子互作界面构象的高度可塑性,设计开展药物结合与药理活性关联性研究。因此,以信号通路的交叉对话及其分子绝缘机制指导创新药物设计,对解决当前药物研发的瓶颈和临床困境具有重大的指导意义。(本文来源于《中国药理学通报》期刊2017年07期）
交叉对话论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的喹乙醇因具有良好的抗菌促生长的作用,被广泛用于饲料添加剂。但其具有明显的蓄积毒性和DNA损伤等副作用,对大多数动物有明显的致畸作用,对人也有潜在的致畸、致突变和致癌危害,因此喹乙醇已被许多国家禁用。本研究旨在探讨喹乙醇诱导的肝损伤中p53与氧化应激的相互作用及在体内体外的毒性分子机制。方法本研究选用p53基因敲除小鼠(C57BL/6),p53基因缺失细胞系(HCT116)。将小鼠分为4组(n=10)设对照组、p53缺失组,喹乙醇400 mg·kg~(-1)组,p53缺失组+喹乙醇400 mg·kg~(-1)组,所有小鼠连续灌胃28天,麻醉处死后收集小鼠血液及肝脏组织。试剂盒检测氧化应激标志物(MDA、CAT和SOD),Western blot检测信号通路标志性蛋白变化。噻唑蓝(MTT)法检测细胞成活率;AnnexinV-PI和Hoechst 33342染色检测细胞凋亡;荧光探针2‘,7’-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)染色检测活性氧(ROS)的产生,罗丹明(Rhodamin 123)染色检测线粒体膜电位,荧光显微镜观察分析。结果研究结果表明,喹乙醇通过引起氧化应激和激活p53通路诱导肝损伤。同时,N-乙酰半胱氨酸(NAC)在体内和体外显着降低了喹乙醇诱导的氧化应激、ROS的产生和p53蛋白的表达。p53敲除可明显降低喹乙醇诱导的肝损伤和氧化应激,同时抑制HCT116和HepG2细胞凋亡。此外,p53敲除缓解线粒体膜电位(MMP)降低和抑制线粒体凋亡通路。喹乙醇诱导MAPK、Nrf2/HO-1和AKT信号通路显着激活,而在p53缺失小鼠和p53缺失细胞中MAPK、Nrf2/HO-1和AKT信号通路明显抑制,而LC3和Beclin1的表达进一步增加。结论我们的研究结果提供了一个结论,p53在喹乙醇诱导的肝损伤与氧化应激主要发挥了促凋亡的作用,这在很大程度上依赖于抑制ROS的产生和Nrf2/HO-1通路,并通过激活LC3和Beclin1上调自噬途径的,从而抑制喹乙醇诱导MAPK和AKT信号通路。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
交叉对话论文参考文献
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