本文主要研究内容
作者张志鸿（2019）在《植物乳杆菌ZDY2013拮抗食源性致病蜡样芽孢杆菌的研究》一文中研究指出：乳酸菌被广泛应用于乳制品、传统发酵食品以及益生菌产品中,其与肠道菌群的相互作用是国内外研究的热点。在高效选育过程中乳酸菌与病原微生物竞争成为优势菌是应用的前提。本论文在构建产毒素蜡样芽孢杆菌识别方法的基础上,以植物乳杆菌ZDY2013为研究对象,从多角度探究其拮抗食源性致病蜡样芽孢杆菌的作用。全文分为六个章节。第一章绪论对食源致病菌的危害、蜡样芽孢杆菌的毒性、乳酸菌的功能及乳酸菌与食源致病菌的相互作用机制进行了分述,并对植物乳杆菌及其胞外多糖的功能进行了概述。第二章建立了识别复杂食品基质中产毒素蜡样芽孢杆菌的特异性方法。针对蜡样芽孢杆菌特异性序列设计了引物,并构建了选择性识别产呕吐毒素和产肠毒素蜡样芽孢杆菌的复合扩增体系;采用叠氮溴化丙锭(PMA)对样品中细胞膜热破损细胞进行交联处理,再提取基因组DNA用于后续分析;采用多种食品基质、杂菌和死菌作为干扰因素考察复合扩增方法的准确性。结果表明,优化后的复合扩增体系能特异性识别产呕吐毒素和产肠毒素的蜡样芽孢杆菌,适用于淀粉类和乳制品等复杂食品基质的分析;食品基质中复杂菌群不影响该方法对目标DNA的信号获取,且无细胞活力的蜡样芽孢杆菌的DNA信号能够被有效消除;复杂食品基质中的产呕吐毒素菌株的最低检测限是10~3 cfu/g,而低浓度的产肠毒素蜡样芽孢杆菌(10~1 cfu/g)经过短暂增菌也能被特异性识别。第三章探究了植物乳杆菌ZDY2013拮抗产肠毒素蜡样芽孢杆菌的作用方式。利用体外试验确定产肠毒素蜡样芽孢杆菌ATCC14579和HN001受抑制与植物乳杆菌培养液pH的相关性;利用植物乳杆菌与产肠毒素蜡样芽孢杆菌在牛奶中共同培养,探索酸奶发酵中优势菌如何形成;利用小肠上皮细胞模型,研究植物乳杆菌通过不同的粘附定植方式,阻止产肠毒素蜡样芽孢杆菌粘附效果;利用细胞外乳酸脱氢酶活性指示产毒素蜡样芽孢杆菌毒素对细胞的毒害,以及从细胞相关基因应激过表达方面,研究植物乳杆菌对上皮细胞的保护作用。结果表明,产肠毒素蜡样芽孢杆菌在体外生长被抑制是植物乳杆菌产酸所致;在牛奶中共同发酵pH值不断降低,蜡样芽孢杆菌的数量在24 h后也随之下降,而植物乳杆菌不受pH降低的影响;植物乳杆菌能够通过排斥、竞争和替换的方式在小肠上皮细胞上抑制产毒素蜡样芽孢杆菌的粘附定植,且以竞争粘附位点为主;产毒素蜡样芽孢杆菌的培养上清具有破坏上皮细胞结构并诱导乳酸脱氢酶释放的毒性,植物乳杆菌能保护上皮细胞,应对产毒素蜡样芽孢杆菌培养上清导致的相关基因应激过表达。第四章探究了植物乳杆菌发酵奶干预产毒素蜡样芽孢杆菌对小鼠造成的毒副作用。第一组小鼠先灌胃产毒素蜡样芽孢杆菌再灌胃PBS缓冲液;第二组先灌胃植物乳杆菌发酵牛奶再灌胃产毒素蜡样芽孢杆菌;第三组先灌胃产毒素蜡样芽孢杆菌再灌胃植物乳杆菌发酵牛奶;第四组为对照组只灌胃PBS缓冲液。通过监测小鼠体重指数变化,确定产毒素蜡样芽孢杆菌和植物乳杆菌发酵牛奶对小鼠的直接影响;通过测定小鼠血清中炎症因子的水平以及生理生化指标变化,探究产毒素蜡样芽孢杆菌对小鼠健康的干扰作用,以及灌胃植物乳杆菌发酵牛奶是否对其有改善作用;通过16S rDNA高通量测序,分析产毒素蜡样芽孢杆菌是否扰乱肠道菌群平衡,以及植物乳杆菌发酵牛奶是否有利于其恢复。结果表明,产毒素蜡样芽孢杆菌会导致小鼠体重增长放缓甚至降低,也会造成相关炎症因子水平异常;植物乳杆菌发酵牛奶能阻止产毒素蜡样芽孢杆菌导致全血中血小板数和血清中尿酸的升高,同时能够减轻盲肠病理组织的损伤程度;产毒素蜡样芽孢杆菌在不显著性改变小鼠肠道菌群整体结构的基础上,能导致部分菌群的丰度发生改变,而植物乳杆菌发酵牛奶能够缓和这种改变。第五章探究了植物乳杆菌胞外多糖拮抗产毒素蜡样芽孢杆菌的特点。对胞外多糖进行提取、纯化,研究与其生物活性相关的分子量和单糖组分特征;采用磺化处理的方式对其进行性能改良,并表征其功能基团;比较胞外多糖及其衍生物对多种自由基的清除能力,研究磺化处理对胞外多糖生物学活性的改变;利用小肠上皮细胞为模型,探索产不同肠毒素类型(一种、两种或三种)蜡样芽孢杆菌对细胞活性的破坏,以及胞外多糖或者其衍生物的存在对细胞活性的保护作用。结果表明,植物乳杆菌胞外多糖的产量达429.4±30.0 mg/L、纯度为96.06%;空间排阻色谱洗脱曲线证明胞外多糖只有一个峰,分子量为5.17×10~4 Da;气相色谱图表明胞外多糖只由木糖和半乳糖组成,且半乳糖占总含量的98.3%;胞外多糖经过衍生化处理后,抗氧化活性明显提高,随之也增强抵抗产毒蜡样芽孢杆菌培养上清对小肠上皮细胞活性损伤的能力。第六章对植物乳杆菌拮抗食源性致病蜡样芽孢杆菌的生物学功能及其初步机制进行了总结,并对未来研究工作进行了展望。综上所述,本文探究了益生植物乳杆菌与食源性致病蜡样芽孢杆菌的相互作用,从体外、食品、细胞、小鼠以及代谢产物等层面解释了植物乳杆菌拮抗产毒素蜡样芽孢杆菌的现象,加深了乳酸菌与病原微生物互相作用研究的认识,也为植物乳杆菌及其代谢产物在食品工业的开发应用提供了实验依据。
Abstract
ru suan jun bei an fan ying yong yu ru zhi pin 、chuan tong fa jiao shi pin yi ji yi sheng jun chan pin zhong ,ji yu chang dao jun qun de xiang hu zuo yong shi guo nei wai yan jiu de re dian 。zai gao xiao shua yo guo cheng zhong ru suan jun yu bing yuan wei sheng wu jing zheng cheng wei you shi jun shi ying yong de qian di 。ben lun wen zai gou jian chan du su la yang ya bao gan jun shi bie fang fa de ji chu shang ,yi zhi wu ru gan jun ZDY2013wei yan jiu dui xiang ,cong duo jiao du tan jiu ji jie kang shi yuan xing zhi bing la yang ya bao gan jun de zuo yong 。quan wen fen wei liu ge zhang jie 。di yi zhang xu lun dui shi yuan zhi bing jun de wei hai 、la yang ya bao gan jun de du xing 、ru suan jun de gong neng ji ru suan jun yu shi yuan zhi bing jun de xiang hu zuo yong ji zhi jin hang le fen shu ,bing dui zhi wu ru gan jun ji ji bao wai duo tang de gong neng jin hang le gai shu 。di er zhang jian li le shi bie fu za shi pin ji zhi zhong chan du su la yang ya bao gan jun de te yi xing fang fa 。zhen dui la yang ya bao gan jun te yi xing xu lie she ji le yin wu ,bing gou jian le shua ze xing shi bie chan ou tu du su he chan chang du su la yang ya bao gan jun de fu ge kuo zeng ti ji ;cai yong die dan xiu hua bing ding (PMA)dui yang pin zhong xi bao mo re po sun xi bao jin hang jiao lian chu li ,zai di qu ji yin zu DNAyong yu hou xu fen xi ;cai yong duo chong shi pin ji zhi 、za jun he si jun zuo wei gan rao yin su kao cha fu ge kuo zeng fang fa de zhun que xing 。jie guo biao ming ,you hua hou de fu ge kuo zeng ti ji neng te yi xing shi bie chan ou tu du su he chan chang du su de la yang ya bao gan jun ,kuo yong yu dian fen lei he ru zhi pin deng fu za shi pin ji zhi de fen xi ;shi pin ji zhi zhong fu za jun qun bu ying xiang gai fang fa dui mu biao DNAde xin hao huo qu ,ju mo xi bao huo li de la yang ya bao gan jun de DNAxin hao neng gou bei you xiao xiao chu ;fu za shi pin ji zhi zhong de chan ou tu du su jun zhu de zui di jian ce xian shi 10~3 cfu/g,er di nong du de chan chang du su la yang ya bao gan jun (10~1 cfu/g)jing guo duan zan zeng jun ye neng bei te yi xing shi bie 。di san zhang tan jiu le zhi wu ru gan jun ZDY2013jie kang chan chang du su la yang ya bao gan jun de zuo yong fang shi 。li yong ti wai shi yan que ding chan chang du su la yang ya bao gan jun ATCC14579he HN001shou yi zhi yu zhi wu ru gan jun pei yang ye pHde xiang guan xing ;li yong zhi wu ru gan jun yu chan chang du su la yang ya bao gan jun zai niu nai zhong gong tong pei yang ,tan suo suan nai fa jiao zhong you shi jun ru he xing cheng ;li yong xiao chang shang pi xi bao mo xing ,yan jiu zhi wu ru gan jun tong guo bu tong de nian fu ding zhi fang shi ,zu zhi chan chang du su la yang ya bao gan jun nian fu xiao guo ;li yong xi bao wai ru suan tuo qing mei huo xing zhi shi chan du su la yang ya bao gan jun du su dui xi bao de du hai ,yi ji cong xi bao xiang guan ji yin ying ji guo biao da fang mian ,yan jiu zhi wu ru gan jun dui shang pi xi bao de bao hu zuo yong 。jie guo biao ming ,chan chang du su la yang ya bao gan jun zai ti wai sheng chang bei yi zhi shi zhi wu ru gan jun chan suan suo zhi ;zai niu nai zhong gong tong fa jiao pHzhi bu duan jiang di ,la yang ya bao gan jun de shu liang zai 24 hhou ye sui zhi xia jiang ,er zhi wu ru gan jun bu shou pHjiang di de ying xiang ;zhi wu ru gan jun neng gou tong guo pai chi 、jing zheng he ti huan de fang shi zai xiao chang shang pi xi bao shang yi zhi chan du su la yang ya bao gan jun de nian fu ding zhi ,ju yi jing zheng nian fu wei dian wei zhu ;chan du su la yang ya bao gan jun de pei yang shang qing ju you po huai shang pi xi bao jie gou bing you dao ru suan tuo qing mei shi fang de du xing ,zhi wu ru gan jun neng bao hu shang pi xi bao ,ying dui chan du su la yang ya bao gan jun pei yang shang qing dao zhi de xiang guan ji yin ying ji guo biao da 。di si zhang tan jiu le zhi wu ru gan jun fa jiao nai gan yu chan du su la yang ya bao gan jun dui xiao shu zao cheng de du fu zuo yong 。di yi zu xiao shu xian guan wei chan du su la yang ya bao gan jun zai guan wei PBShuan chong ye ;di er zu xian guan wei zhi wu ru gan jun fa jiao niu nai zai guan wei chan du su la yang ya bao gan jun ;di san zu xian guan wei chan du su la yang ya bao gan jun zai guan wei zhi wu ru gan jun fa jiao niu nai ;di si zu wei dui zhao zu zhi guan wei PBShuan chong ye 。tong guo jian ce xiao shu ti chong zhi shu bian hua ,que ding chan du su la yang ya bao gan jun he zhi wu ru gan jun fa jiao niu nai dui xiao shu de zhi jie ying xiang ;tong guo ce ding xiao shu xie qing zhong yan zheng yin zi de shui ping yi ji sheng li sheng hua zhi biao bian hua ,tan jiu chan du su la yang ya bao gan jun dui xiao shu jian kang de gan rao zuo yong ,yi ji guan wei zhi wu ru gan jun fa jiao niu nai shi fou dui ji you gai shan zuo yong ;tong guo 16S rDNAgao tong liang ce xu ,fen xi chan du su la yang ya bao gan jun shi fou rao luan chang dao jun qun ping heng ,yi ji zhi wu ru gan jun fa jiao niu nai shi fou you li yu ji hui fu 。jie guo biao ming ,chan du su la yang ya bao gan jun hui dao zhi xiao shu ti chong zeng chang fang huan shen zhi jiang di ,ye hui zao cheng xiang guan yan zheng yin zi shui ping yi chang ;zhi wu ru gan jun fa jiao niu nai neng zu zhi chan du su la yang ya bao gan jun dao zhi quan xie zhong xie xiao ban shu he xie qing zhong niao suan de sheng gao ,tong shi neng gou jian qing mang chang bing li zu zhi de sun shang cheng du ;chan du su la yang ya bao gan jun zai bu xian zhe xing gai bian xiao shu chang dao jun qun zheng ti jie gou de ji chu shang ,neng dao zhi bu fen jun qun de feng du fa sheng gai bian ,er zhi wu ru gan jun fa jiao niu nai neng gou huan he zhe chong gai bian 。di wu zhang tan jiu le zhi wu ru gan jun bao wai duo tang jie kang chan du su la yang ya bao gan jun de te dian 。dui bao wai duo tang jin hang di qu 、chun hua ,yan jiu yu ji sheng wu huo xing xiang guan de fen zi liang he chan tang zu fen te zheng ;cai yong huang hua chu li de fang shi dui ji jin hang xing neng gai liang ,bing biao zheng ji gong neng ji tuan ;bi jiao bao wai duo tang ji ji yan sheng wu dui duo chong zi you ji de qing chu neng li ,yan jiu huang hua chu li dui bao wai duo tang sheng wu xue huo xing de gai bian ;li yong xiao chang shang pi xi bao wei mo xing ,tan suo chan bu tong chang du su lei xing (yi chong 、liang chong huo san chong )la yang ya bao gan jun dui xi bao huo xing de po huai ,yi ji bao wai duo tang huo zhe ji yan sheng wu de cun zai dui xi bao huo xing de bao hu zuo yong 。jie guo biao ming ,zhi wu ru gan jun bao wai duo tang de chan liang da 429.4±30.0 mg/L、chun du wei 96.06%;kong jian pai zu se pu xi tuo qu xian zheng ming bao wai duo tang zhi you yi ge feng ,fen zi liang wei 5.17×10~4 Da;qi xiang se pu tu biao ming bao wai duo tang zhi you mu tang he ban ru tang zu cheng ,ju ban ru tang zhan zong han liang de 98.3%;bao wai duo tang jing guo yan sheng hua chu li hou ,kang yang hua huo xing ming xian di gao ,sui zhi ye zeng jiang di kang chan du la yang ya bao gan jun pei yang shang qing dui xiao chang shang pi xi bao huo xing sun shang de neng li 。di liu zhang dui zhi wu ru gan jun jie kang shi yuan xing zhi bing la yang ya bao gan jun de sheng wu xue gong neng ji ji chu bu ji zhi jin hang le zong jie ,bing dui wei lai yan jiu gong zuo jin hang le zhan wang 。zeng shang suo shu ,ben wen tan jiu le yi sheng zhi wu ru gan jun yu shi yuan xing zhi bing la yang ya bao gan jun de xiang hu zuo yong ,cong ti wai 、shi pin 、xi bao 、xiao shu yi ji dai xie chan wu deng ceng mian jie shi le zhi wu ru gan jun jie kang chan du su la yang ya bao gan jun de xian xiang ,jia shen le ru suan jun yu bing yuan wei sheng wu hu xiang zuo yong yan jiu de ren shi ,ye wei zhi wu ru gan jun ji ji dai xie chan wu zai shi pin gong ye de kai fa ying yong di gong le shi yan yi ju 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自南昌大学的张志鸿，发表于刊物南昌大学2019-04-04论文，是一篇关于植物乳杆菌论文,蜡样芽孢杆菌论文,肠毒素论文,共同发酵论文,粘附论文,肠道微生物论文,胞外多糖论文,生物活性论文,南昌大学2019-04-04论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自南昌大学2019-04-04论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
标签：植物乳杆菌论文; 蜡样芽孢杆菌论文; 肠毒素论文; 共同发酵论文; 粘附论文; 肠道微生物论文; 胞外多糖论文; 生物活性论文; 南昌大学2019-04-04论文;