孙莉:中华蜜蜂幼虫膜蛋白酵母双杂交文库的构建论文

孙莉:中华蜜蜂幼虫膜蛋白酵母双杂交文库的构建论文

本文主要研究内容

作者孙莉,岳金金,费东亮,李明,马鸣潇,宋铭忻(2019)在《中华蜜蜂幼虫膜蛋白酵母双杂交文库的构建》一文中研究指出:【目的】本研究旨在利用位点特异性重组技术(FullCoV)将中华蜜蜂Apis cerana cerana幼虫膜蛋白cDNA连接到pPR3-N载体上,构建中华蜜蜂幼虫膜蛋白酵母双杂交cDNA文库。【方法】提取2-3日龄中华蜜蜂工蜂幼虫总RNA;分离mRNA后,在反转录酶的作用下合成幼虫膜蛋白cDNA第1链,并合成双链cDNA。在双链cDNA的5′端加上带有重组序列的接头后,通过FullCoV技术与载体pPR3-N进行连接,然后将连接产物电转化到DH10B感受态细胞,构建中华蜜蜂幼虫膜蛋白酵母双杂交cDNA文库,并对该文库插入片段大小和文库滴度进行检测。【结果】通过FullCoV技术成功构建了中华蜜蜂幼虫膜蛋白酵母双杂交cDNA文库,经检测,中华蜜蜂幼虫膜蛋白酵母cDNA文库的总库容量为1.5×10~7 cfu,文库滴度为3×10~6 cfu/mL,重组率达到100%。【结论】本研究利用FullCoV技术成功构建了中华蜜蜂幼虫膜蛋白酵母cDNA文库,为进一步探究感染中华蜜蜂的病原微生物与宿主蛋白互作研究奠定了基础。

Abstract

【mu de 】ben yan jiu zhi zai li yong wei dian te yi xing chong zu ji shu (FullCoV)jiang zhong hua mi feng Apis cerana ceranayou chong mo dan bai cDNAlian jie dao pPR3-Nzai ti shang ,gou jian zhong hua mi feng you chong mo dan bai jiao mu shuang za jiao cDNAwen ku 。【fang fa 】di qu 2-3ri ling zhong hua mi feng gong feng you chong zong RNA;fen li mRNAhou ,zai fan zhuai lu mei de zuo yong xia ge cheng you chong mo dan bai cDNAdi 1lian ,bing ge cheng shuang lian cDNA。zai shuang lian cDNAde 5′duan jia shang dai you chong zu xu lie de jie tou hou ,tong guo FullCoVji shu yu zai ti pPR3-Njin hang lian jie ,ran hou jiang lian jie chan wu dian zhuai hua dao DH10Bgan shou tai xi bao ,gou jian zhong hua mi feng you chong mo dan bai jiao mu shuang za jiao cDNAwen ku ,bing dui gai wen ku cha ru pian duan da xiao he wen ku di du jin hang jian ce 。【jie guo 】tong guo FullCoVji shu cheng gong gou jian le zhong hua mi feng you chong mo dan bai jiao mu shuang za jiao cDNAwen ku ,jing jian ce ,zhong hua mi feng you chong mo dan bai jiao mu cDNAwen ku de zong ku rong liang wei 1.5×10~7 cfu,wen ku di du wei 3×10~6 cfu/mL,chong zu lv da dao 100%。【jie lun 】ben yan jiu li yong FullCoVji shu cheng gong gou jian le zhong hua mi feng you chong mo dan bai jiao mu cDNAwen ku ,wei jin yi bu tan jiu gan ran zhong hua mi feng de bing yuan wei sheng wu yu su zhu dan bai hu zuo yan jiu dian ding le ji chu 。

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自昆虫学报的孙莉,岳金金,费东亮,李明,马鸣潇,宋铭忻,发表于刊物昆虫学报2019年05期论文,是一篇关于中华蜜蜂论文,文库论文,滴度论文,酵母双杂交论文,技术论文,蛋白质相互作用论文,昆虫学报2019年05期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自昆虫学报2019年05期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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