植物可诱导的启动子论文-孙芳芳

植物可诱导的启动子论文-孙芳芳

导读:本文包含了植物可诱导的启动子论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:IN2-2启动子,乙酰苯胺,2-氯苯磺酰胺,番茄

植物可诱导的启动子论文文献综述

孙芳芳[1](2014)在《乙酰苯胺和2-氯苯磺酰胺诱导启动子IN2-2在植物中的表达研究》一文中研究指出常见的植物化学诱导基因表达系统包括乙醇诱导系统、四环素诱导系统、铜诱导系统、地塞米松诱导系统等。受环境条件、诱导物稳定性以及成本等众多因素的影响,这些化学诱导系统大多停留在实验室研究范围,几乎未见在生产上广泛应用。除草剂安全剂诱导系统与上述系统相比有明显的优点。首先,该系统诱导表达不需要特定转录因子参与,可以直接作用于启动子,诱导系统简单易控;其次,诱导系统所用诱导物是除草剂安全剂,已在农业生产上广泛应用。因此该诱导系统有望在大田中得到应用。来源玉米的IN2-2、IN2-1和IN5-2启动子能被乙酰苯胺类似物以及除草剂安全剂诱导表达。目前,主要在禾谷类作物和拟南芥上开展了相应的研究工作。本研究将IN2-2启动子和GUS报告基因融合构建载体,分别转化烟草、芥菜和番茄。分别用乙酰苯胺和2-氯苯磺酰胺两种化学物质进行诱导处理,验证该启动子在上述植物中的诱导表达情况。并对转基因番茄植株进行42℃高温处理,观察启动子在环境胁迫下的表达稳定性。实验获得以下结果:(1)转基因芥菜植株的获得将载体PCABarIN2-2/GUS和PCABar35S/GUS对照载体用农杆菌介导法转入芥菜植株,获得6株PCABarIN2-2/GUS转基因芥菜植株和4株PCABar35S/GUS转基因芥菜植株。(2)转基因烟草植株的获得将载体PCAKanIN2-2/GUS和PCAKan35S/GUS对照载体用农杆菌介导法转入烟草,获得6株PCAKanIN2-2/GUS转基因烟草植株和3株PCAKan35S/GUS转基因烟草植株。(3)转基因番茄植株的获得将载体PCAKanIN2-2/GUS用农杆菌介导法转入番茄,获得12株PCAKanIN2-2/GUS转基因番茄植株,并获得T1代转基因植株。(4)乙酰苯胺诱导转基因植株的GUS表达乙酰苯胺能诱导转基因烟草叶片中IN2-2启动子控制的GUS表达,50mg/L和100mg/L诱导表达程度相当,均比200mg/L诱导表达强。但叁种浓度诱导表达强度都比35S启动子弱。乙酰苯胺能诱导GUS基因在PCABarIN2-2/GUS转基因芥菜种子发芽后的子叶和胚轴中表达。100mg/L诱导表达程度和35S启动子表达相当。50mg/L和200mg/L诱导表达强度不如100mg/L。但乙酰苯胺处理后发芽时间较未处理对照野生型晚1-2天,显示乙酰苯胺有一定的抑制种子发芽的作用。乙酰苯胺能诱导IN2-2控制的GUS基因在番茄根、茎、叶和花中表达。GUS组织化学染色显示,在诱导第3天开始有表达,第5天诱导表达最强。但根和花中表达比茎和叶中强。50mg/L和100mg/L处理诱导效果好,200mg/L效果较差。GUS酶活性测定显示,转基因番茄叶片中100mg/L在处理第5天时,表达量最高92.7nmol/min/mg。(5)2-氯苯磺酰胺诱导转基因植株的GUS表达2-氯苯磺酰胺对转基因芥菜种子发芽有强烈抑制,种子胚轴不能伸长。但它能诱导芥菜萌发后种子子叶和胚轴中IN2-2启动子控制的GUS表达,表达程度和35S启动子相当。但在种皮中未能诱导GUS表达。2-氯苯磺酰胺能诱导转基因番茄根、茎、叶和花中IN2-2控制的GUS基因表达。在诱导后第4或5天表达最强。GUS酶活性测定显示,100mg/L浓度处理后3天,叶片中GUS活性达到最高表达量75.17nmol/min/mg。另外,200mg/L处理浓度对植株有药害作用。(6) PCAKanIN2-2/GUS转基因番茄高温胁迫处理模仿田间高温胁迫,PCAKanIN2-2/GUS转基因番茄在42℃高温处理条件下胁迫24小时,未在叶片中观察到GUS表达,仅在处理12小时后在根中有痕量的表达。(本文来源于《西南大学》期刊2014-05-30)

孔维文,程嘉,李斌,骆中正,吴飞[2](2014)在《植物受病原物诱导启动子概述》一文中研究指出植物受病原物诱导启动子是一类能对病原物的侵染作出响应的启动子,其活性主要局限于被侵染之时及被侵染的位点。植物受病原物诱导启动子的这一特性赋予其在抗病基因工程中潜在的应用价值。相比植物庞大的启动子组,已发现的植物受病原物诱导启动子仍是少数,关于其作用机制的研究仍有待加强和深入,而其调控的基因与植物抗病性关系还需要引起足够的重视。作者在对植物受病原物诱导启动子进行归类的基础上,重点关注了病原物诱导启动子调控基因的编码产物与植物抗病性的关系,对植物受病原物诱导启动子的顺式调控元件作了简要分析,并对该领域的发展动向进行了讨论。(本文来源于《植物保护学报》期刊2014年02期)

郭晋艳,郑晓瑜,邹翠霞,李秋莉[3](2011)在《植物非生物胁迫诱导启动子顺式元件及转录因子研究进展》一文中研究指出顺式作用元件(cis-acting element)是与结构基因串联的特定DNA序列,是转录因子的结合位点,它们通过与转录因子结合调控基因转录的精确起始和转录效率,在植物基因表达调控过程中起着重要的作用。非生物胁迫诱导基因的表达受其上游启动子顺式作用元件及转录因子的调控,目前已发现了多种与非生物胁迫相关的顺势作用元件及转录因子,如DRE元件及DREB类转录因子、MYB元件及MYB类转录因子、GT-1元件及GT-1类转录因子等。顺式作用元件及转录因子的研究对研究植物非生物胁迫相关基因的表达调控具有重要意义,综述植物非生物胁迫诱导启动子功能元件及转录因子的研究进展。(本文来源于《生物技术通报》期刊2011年04期)

郑晓瑜,郭晋艳,张毅,李秋莉[4](2011)在《植物非生物胁迫诱导启动子顺式作用元件的研究方法》一文中研究指出非生物胁迫严重影响植物生长发育,降低作物产量。植物通过各种途径忍受或抵抗非生物胁迫,主要表现是各种抗非生物胁迫基因的表达。基因表达受其上游启动子及转录因子的调控,目前对抗非生物胁迫诱导启动子顺式作用元件及转录因子的研究成为热点。本文综述了植物非生物胁迫诱导启动子顺式作用元件及转录因子的研究方法,并展望了顺式作用元件及转录因子研究的方向及前景。(本文来源于《植物生理学报》期刊2011年02期)

刘石娟,李秀兰[5](2009)在《ocs/mas,一个受损伤和植物激素诱导的嵌合启动子的构建与功能分析》一文中研究指出选择适宜的转录调控序列以提高启动子的转录效率,增强外源基因在转基因植株中的表达,对改良作物的抗病虫性具有重要意义。将甘露碱合成酶基因(mas)启动子和章鱼碱合成酶基因(ocs)增强子杂合而成的嵌合启动子ocs/mas与GUS报告基因连接,构建了植物表达载体pOMS-GUS。对照载体pMAS-GUS仅携带mas启动子驱动的GUS基因。利用根癌农杆菌介导法,将以上植物表达载体分别转化烟草。应用半定量RT-PCR和GUS荧光定量分析法分别检测不同胁迫条件下启动子驱动的GUS基因表达量的变化。结果显示,未诱导处理的转基因植株GUS基因仅有微弱表达。伤害处理1h后,mas启动子驱动的GUS活性是未诱导处理的1.8倍,而嵌合启动子ocs/mas的诱导表达活性是未处理的5.7倍。植物激素水杨酸(SA)和茉莉酸甲酯(MJ)处理也诱导了较高水平的ocs/mas嵌合启动子活性;而且SA和MJ联合作用时呈现迭加效应,转基因烟草的GUS活性明显高于伤害处理后的GUS表达水平。以上结果表明,ocs/mas嵌合启动子是一种强诱导型启动子,可以接受多种刺激因子的诱导,从而为更有效地改良作物抗病虫的能力提供新的候选高效启动子元件。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2009年07期)

王丹丹,王荣,唐丽丽,刘爱新,孔维文[6](2009)在《含双病原物诱导启动子植物安全表达载体的构建》一文中研究指出本研究用来自烟草的具有高度病原物特异性的两个诱导启动子EAS4和hsr203J,串联驱动GUS基因的表达,同时考虑到转基因植物的安全性,引入双边界序列,构建了含双病原物诱导启动子的植物安全表达载体。将表达载体转化烟草获得转基因植株。分析显示,在正常生长情况下转基因烟草检测不到GUS活性,或活性极低;而受疫霉激发子parasiticein、Phytophthora nicotianea[0]的孢子悬浮液和Ralstonia solanacarum的菌悬液诱导后,转基因烟草叶片中可检测到明显的GUS活性。结果表明,构建的植物表达载体所含双病原物诱导启动子均具有良好的诱导活性,可用于植物遗传转化。(本文来源于《植物病理学报》期刊2009年02期)

黄真池,卢向阳,曾富华,叶耀华,刘媛[7](2008)在《受病原物诱导的植物启动子PPPs在转基因辣椒中的活性》一文中研究指出按GenBank中受病原物诱导的植物启动子(PPPs)的碱基序列设计3对引物,从烟草基因组中扩增到3个启动子PPP1,PPP2和PPP3.用PPPs替换pBI121中与uidA基因(编码β-葡萄糖醛酸酶GUS)相连的35S启动子,再将重组质粒导入农杆菌GV3101,构建了PPPs和uidA相连的转化单元.通过农杆菌介导法将受PPPs控制的uidA基因导入辣椒.对转基因辣椒叶片接种青枯菌无致病性菌株(AVRS1),24 h后检测GUS活性.结果表明,接种AVRS1后,PPPs启动了uidA的表达,GUS活性显着增强.(本文来源于《湖南农业大学学报(自然科学版)》期刊2008年03期)

王丹丹[8](2008)在《含双病原物诱导启动子植物安全表达载体的遗传转化及表达活性分析》一文中研究指出植物抗病基因工程是植物抗病育种常用的工具之一,利用病原物诱导启动子驱动功能基因以提高植物的抗病性比组成型启动子有明显的优势。植物在环境中经常同时遭受不同病原物的为害,因而植物需要广谱的抗病性。由于单个启动子受诱导因子谱的限制,利用单一病原物诱导启动子驱动功能基因的表达,对入侵病原物的打击范围是有限的。本研究把两个具有高度病原物诱导特异性的启动子EAS4和hsr203J构建到同一个植物表达载体上,通过对烟草的遗传转化,分析转基因植株中启动子的诱导表达活性,说明串联两个启动子,可以增加诱导因子的范围,扩大转基因植物的抗病谱,这对于抵抗几种病原物的侵染尤其有重要意义。同时,出于对转基因安全性的考虑,利用两个T-DNA边界将目的基因与抗生素抗性基因分开,通过转基因植株的后代自交分离,获得了只含目标基因而不含抗生素标记的转基因植株。所得结果如下:1、构建了含双病原物诱导启动子的植物表达载体,并对烟草进行了遗传转化以pCAMBIA2301为基本构架,选用两个来自烟草的、具有高度病原物诱导特异性的启动子EAS4和hsr203J,替换驱动uidA(报告基因GUS)基因表达的CaMV 35S启动子。为了分析串联的两个启动子活性是否有位置效应,同时构建启动子串联次序不同的两种植物表达载体HP1+EP2(hsr203J+EAS4+uidA)和EP1+HP2(EAS4+hsr203J +uidA),并分别以单启动子hsr203J和EAS4驱动uidA为对照,构建了四个表达载体。通过农杆菌介导的叶盘转化法将表达载体转化烟草。对200株抗生素抗性植株进行PCR筛选,共获得152株PCR阳性植株。2、转基因植株中启动子表现明显的诱导表达活性,双启动子比单一启动子表现更强的诱导表达活性为检测转基因植株中启动子的诱导表达活性,从RNA水平、GUS的定性、定量检测等方面,对不同病原物诱导的启动子活性进行了研究。2.1随机选取30株PCR检测呈阳性的植株,用激发子parasiticein处理后提取诱导部位组织的总RNA,经RT-PCR检测,发现24株(80%)获得了与GUS基因预期大小一致的特异性片段,表明这些转基因烟草中GUS基因经诱导后可在转录水平上表达。2.2选取14株RT-PCR呈现阳性的植株,分别用烟草黑胫病菌( Phytophthora nicotianea [0] )、烟草青枯病菌( Ralstonia solanacearum)、灰霉病菌(Botrytis cinerea)和激发子parasiticein等诱导处理,经组织化学染色发现,在检测的植株中,除单一启动子ESA4不受灰霉菌诱导外,经其它病原物处理的植株都不同程度地被染成蓝色,而清水处理的叶片几乎没有颜色变化或仅有很轻微的背景色,表明,本研究所构建4个表达载体中,启动子都具有病原物诱导表达的活性,并且,双启动子较单启动子表现出更为广泛的诱导谱。2.3为明确单、双启动子是否存在诱导表达量的差异,用荧光法对GUS基因的诱导表达活性进行了定量检测。结果发现,转基因植株经P. nicotianea[0]、R. solanacearum和激发子parasiticein诱导后6h,双启动子HP1+EP2的诱导表达活性比单启动子hsr203J高5.9-8.0倍,比EAS4高6.7-7.9倍;双启动子EP1+HP2比单启动子hsr203J的诱导表达活性高5.0-5.7倍,比EAS4高4.7-6.5倍,双启动子与单启动子的活性差异均达极显着水平。双启动子HP1+EP2和EP1+HP2的诱导表达活性也存在极显着差异,而两个单启动子HP1和EP1之间没有明显差别。2.4同时,用荧光法对GUS的诱导表达活性进行了动态检测,发现双启动子HP1+EP2的诱导表达高峰一般出现在诱导后6-10h,而双启动子EP1+HP2的活性高峰一般在诱导后8-14h。在检测的时间范围内,双启动子的诱导活性始终高于单一启动子。这些结果说明,本研究所构建的4个载体中,启动子都具有病原物诱导表达活性,都可被多种病原物诱导表达。双启动子不仅有更广泛的诱导表达谱,而且诱导表达活性显着高于单启动子。3、转基因株系在T1代可以实现NPTII基因与功能基因uidA的自由分离,获得不含抗生素标记的、安全的转基因后代抗生素标记是转基因植物安全性所关注的重要内容之一,出于对转基因植物安全性的考虑,在载体设计时引入了双边界序列,把卡那霉素抗性基因NPTII表达盒和uidA基因表达盒分开在不同的T-DNA区,通过转基因植株后代的自交分离,筛选获得只含目的基因而不含NPTII的转基因植株。首先对14个转基因株系的T1代幼苗用含卡那霉素的平板进行了表型检测,结果发现,13个株系的NPTII基因的分离比平均为2.89:1,接近3:1,表明这13个株系中NPTII基因可能为单拷贝插入。为检测NPTII基因与uidA在T1代中是否发生自由分离,从13个NPTII单拷贝株系的T1代植株中随机选取130株,提取基因组DNA,PCR法对其NPTII基因和uidA基因同时进行扩增,结果是:只含uidA基因的植株占被扩增整体的20.77%,只含NPTII基因的占22.31%,同时含有NPTII基因和uidA基因的为53.85%,其分离比经X2检测符合两个相互独立的基因自由分离的比例9:3:3:1。说明转基因植株中NPTII基因与目标基因分别插入植物总DNA的不同部位,并在自交后代中发生自由分离。(本文来源于《山东农业大学》期刊2008-05-13)

吴文华,李新舟[9](2007)在《水稻中受硝酸盐诱导的基因启动子的克隆与植物双元表达载体的构建》一文中研究指出为克隆水稻中受硝酸盐诱导的基因启动子,从GeneBank中找到了6组水稻中受硝酸盐诱导的特异cDNA片段,结合已发表的硝酸盐诱导的相关基因,经过序列比对确定特异片段所在的基因.电子克隆出对应基因的5′侧翼约1 500 bp的序列.以总DNA为模板利用PCR技术克隆出了对应的5′侧翼序列.经过测序分析,该序列具有许多启动子特征的顺式作用元件,加TA-box,CpG岛等.将这些启动子序列连接到pCAMBIA1391Z双元载体中,构建植物双元表达载体以进行启动子活性检测.(本文来源于《湖北大学学报(自然科学版)》期刊2007年03期)

萧凤回,段承俐,翟虎渠,薛刚平,张红生[10](2006)在《快速检测干旱和脱水可诱导植物启动子瞬间表达特性的方法》一文中研究指出选择合适的诱导表达启动子是开展植物耐干旱和脱水等非生物逆境转基因研究的重要环节。我们通过几年的研究,已建立了一套以大麦幼苗完整活体和植物离体叶片为主要材料通过瞬间表达鉴定来快速检测干旱和脱水可诱导基因启动子表达特性的方法。来自大麦和水稻的启动子Dhn4 s、Dhn8 s、HVA1 s、Rab16B j、wsi18 j在大麦、小麦、水稻、高粱和蕨类植物的离体叶片中经干燥诱导可以瞬间表达GFP,在绿豆、番茄叶片中不表达。鉴定了HVA1 s和wsi18 j在大麦不同器官或组织中启动子的定性表达情况。进一步建立了GFP荧光点/GUS染色点计数分析和GUS活性/XYN活性测定分析的启动子表达的定量分析方法,并讨论该方法在环境可诱导植物启动子功能分析中的应用价值和前景。(本文来源于《遗传》期刊2006年01期)

植物可诱导的启动子论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

植物受病原物诱导启动子是一类能对病原物的侵染作出响应的启动子,其活性主要局限于被侵染之时及被侵染的位点。植物受病原物诱导启动子的这一特性赋予其在抗病基因工程中潜在的应用价值。相比植物庞大的启动子组,已发现的植物受病原物诱导启动子仍是少数,关于其作用机制的研究仍有待加强和深入,而其调控的基因与植物抗病性关系还需要引起足够的重视。作者在对植物受病原物诱导启动子进行归类的基础上,重点关注了病原物诱导启动子调控基因的编码产物与植物抗病性的关系,对植物受病原物诱导启动子的顺式调控元件作了简要分析,并对该领域的发展动向进行了讨论。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

植物可诱导的启动子论文参考文献

[1].孙芳芳.乙酰苯胺和2-氯苯磺酰胺诱导启动子IN2-2在植物中的表达研究[D].西南大学.2014

[2].孔维文,程嘉,李斌,骆中正,吴飞.植物受病原物诱导启动子概述[J].植物保护学报.2014

[3].郭晋艳,郑晓瑜,邹翠霞,李秋莉.植物非生物胁迫诱导启动子顺式元件及转录因子研究进展[J].生物技术通报.2011

[4].郑晓瑜,郭晋艳,张毅,李秋莉.植物非生物胁迫诱导启动子顺式作用元件的研究方法[J].植物生理学报.2011

[5].刘石娟,李秀兰.ocs/mas,一个受损伤和植物激素诱导的嵌合启动子的构建与功能分析[J].中国生物工程杂志.2009

[6].王丹丹,王荣,唐丽丽,刘爱新,孔维文.含双病原物诱导启动子植物安全表达载体的构建[J].植物病理学报.2009

[7].黄真池,卢向阳,曾富华,叶耀华,刘媛.受病原物诱导的植物启动子PPPs在转基因辣椒中的活性[J].湖南农业大学学报(自然科学版).2008

[8].王丹丹.含双病原物诱导启动子植物安全表达载体的遗传转化及表达活性分析[D].山东农业大学.2008

[9].吴文华,李新舟.水稻中受硝酸盐诱导的基因启动子的克隆与植物双元表达载体的构建[J].湖北大学学报(自然科学版).2007

[10].萧凤回,段承俐,翟虎渠,薛刚平,张红生.快速检测干旱和脱水可诱导植物启动子瞬间表达特性的方法[J].遗传.2006

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