逆转录的环介导等温论文-樊荣辉,罗远华,钟淮钦,叶秀仙,黄敏玲

逆转录的环介导等温论文-樊荣辉,罗远华,钟淮钦,叶秀仙,黄敏玲

导读:本文包含了逆转录的环介导等温论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:齿兰环斑病毒,RT-LAMP,检测

逆转录的环介导等温论文文献综述

樊荣辉,罗远华,钟淮钦,叶秀仙,黄敏玲[1](2019)在《逆转录环介导等温扩增技术检测齿兰环斑病毒》一文中研究指出【目的】齿兰环斑病毒Odontoglossum ringspot virus(ORSV)是侵染兰花的主要病毒,严重影响其观赏价值,建立快速、灵敏的检测方法显得尤为重要。【方法】本研究根据ORSV的外壳蛋白基因序列设计了一组特异性引物,经过一系列条件优化,建立了该病毒的RT-LAMP(Reverse Transcription-Loop-mediated Iisothermal Amplification)检测方法。【结果】结果显示该方法能特异扩增ORSV,与其他4种侵染兰花的病毒(建兰花叶病毒、菜豆黄花叶病毒、黄瓜花叶病毒和小苍兰花叶病毒)不发生反应;灵敏度为RT-PCR的10倍。田间检测20份样品中,RT-LAMP和RT-PCR检测结果一致。在产物中加入荧光染料SYBR GreenⅠ直接用肉眼观察即可判断样品是否感染ORSV,省去电泳分析的时间,并且增加了在田间的应用价值。【结论】该方法具有特异性强、灵敏度高、操作简单、快速等特点。(本文来源于《福建农业学报》期刊2019年07期)

吴丹丹[2](2019)在《应用逆转录-环介导等温扩增技术检测结核分枝杆菌16S rRNA的研究》一文中研究指出结核分枝杆菌(Mycobacterium Tuberculosis,MTB)是引起结核病的病原菌,结核病的早期诊断对合理治疗和终止传染具有重要作用。目前应用的PCR、荧光定量PCR(Fluorescence Quantitive PCR,FQ-PCR)、环介导等温扩增法(Loop-mediated Isothermal Amplification,LAMP)等分子生物学检测法是以MTB-DNA为靶序列设计引物并进行扩增的,以DNA为基础的引物检测法对死菌或活菌都呈现阳性结果,在临床上无法评估抗结核治疗效果,并且检测灵敏度和特异性有限,不能满足临床诊断的需要。MTB-DNA通常为单一或少数拷贝,而16S rRNA在一个活的MTB中最高可达10~4拷贝,因此检测16S rRNA可提高检测的灵敏度;同时,结核杆菌16S rRNA仅存在于代谢增殖的活菌中,因而检测16S rRNA不但可提高诊断灵敏性,还可以用来评估抗结核疗效;此外,LAMP技术设备廉价、操作简便,产物无需任何仪器观察,经钙黄绿素或羟基萘酚蓝等染色后,肉眼可见,扩增快速高效,适合各种条件下检测,尤其适用于基层及现场使用。本研究针对16S rRNA区段设计MTB引物,建立逆转录-环介导等温扩增技术(Reverse Transcription Loop-mediated Isothermal Amplification,RT-LAMP)用以检测MTB,为结核病的临床诊断提供技术支持。第一部分应用逆转录-环介导等温扩增技术检测痰液中结核分枝杆菌16S rRNA目的:通过在结核分枝杆菌16S rRNA区段设计引物,建立RT-LAMP检测技术,为结核病的快速检测提供一个灵敏度高、特异性强、可检测活菌的简便的方法。方法:将MTB的16S rRNA完整序列与非结核分枝杆菌(nontuberculosis mycobacteria,NTM)进行比较,用Primer Explorer V5软件设计引物。通过对MTB细菌溶液进行连续性10倍的稀释后,比较RT-LAMP和LAMP的灵敏度,并观察NTM和其他已知的呼吸道病原菌(金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯杆菌)的检测结果,以确定引物特异性。用RT-LAMP、LAMP和罗氏培养法(Lowenstein-Jensen,L-J)检测131例结核病患者痰标本和24例阴性对照痰标本比较其临床检测效果。结果:通过灵敏度试验比较了RT-LAMP、LAMP方法的灵敏度,结果显示RT-LAMP方法比LAMP法高约10倍。RT-LAMP可检测出单个MTB菌。特异性试验利用RT-LAMP方法对已知的1株MTB、8株NTM和3株常见呼吸道细菌检测,结果发现只有MTB阳性。临床检测结果显示,RT-LAMP、LAMP和L-J法检测临床痰标本中MTB阳性检测率分别为97.7%(128/131)、78.6%(103/131)、73.2%(96/131),阴性对照只有L-J法有1例假阳性。RT-LAMP方法的阳性检测率高于LAMP和L-J法(P<0.01,P<0.01)。18例痰菌阳性的肺结核患者,在抗结核治疗前应用RT-LAMP和LAMP检测痰液标本,两种方法均具有较高的阳性检测率,但随着治疗时间的延长,RT-LAMP阳性检测率很快下降,而LAMP阳性检测率下降缓慢,说明RT-LAMP可以用来检测活菌。结论:1.本研究首次利用16S rRNA在MTB内呈多拷贝且仅存在于活菌的特点,创建了针对16S rRNA的RT-LAMP技术,用于检测MTB活菌。不仅证明了其灵敏度高、特异性强,而且操作简便、耗时短,适合基层及低资源医院。该技术有望发展成为快速检测MTB的有效手段。2.利用RT-LAMP技术,针对MTB 16S rRNA设计特异性引物,用于检测痰中MTB。通过与LAMP技术及L-J法比较,证明了其具有较高的灵敏度和特异性。第二部分应用逆转录-环介导等温扩增技术检测脑脊液中结核分枝杆菌16S rRNA目的:利用前期建立的RT-LAMP技术检测脑脊液中MTB,为结核性脑膜炎(Tuberculous meningitis,TBM)提供快速诊断的新方法。方法:选取105例患者脑脊液(Cerebrospinal Fluid,CSF)标本,其中确诊TBM有52例,疑似TBM有33例,阴性对照有20例。利用前期建立的MTB 16S rRNA RT-LAMP方法,比较RT-LAMP与RT-PCR的灵敏度与特异性,在临床样本检测中,以FQ-PCR为对照,比较两种方法检测效果。结果:灵敏度试验结果显示RT-LAMP比RT-PCR的灵敏度高,RT-LAMP与RT-PCR最低检测值分别为1CFU/mL和10~2 CFU/mL。在常见的5种中枢神经系统病原体脑脊液标本中,利用两种方法均未扩增出特异性条带。RT-LAMP对TBM组、疑似TBM组阳性检出率分别为96.1%(50/52)、72.3%(24/33),RT-PCR对TBM组、疑似TBM组的阳性检出率分别为71.1%(37/52)、33.3%(11/33),FQ-PCR对TBM组、疑似TBM组阳性检出率分别为65.3%(34/52)、24.2%(8/33),叁种方法对照组均无非特异性扩增。RT-LAMP阳性检出率高于FQ-PCR,两种检测方法差异有统计学意义(P<0.01);虽然在TBM组、疑似TBM组中,RT-PCR的阳性检出率略高于FQ-PCR,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:通过RT-LAMP检测技术检测脑脊液中MTB,与RT-PCR方法比较,也证明了其具有灵敏度高和特异性强的特点。(本文来源于《承德医学院》期刊2019-03-01)

周毅[3](2019)在《一种抗突变的逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)方法及其在虫媒病检测上的应用》一文中研究指出登革热在全球范围分布广泛,是传播最快的虫媒病之一,对公共医疗卫生造成了极大的负担。而超过半数的登革热患者表现为普通发热的症状或者无症状,所以仅仅通过临床症状上来判断是否被登革病毒(Dengue Virus,DENV)感染有很大难度,因此建立一种灵敏度高、特异性强的DENV检测方法就变得很重要。环介导的等温扩增(LAMP)恒温反应、反应时间短、灵敏度高、特异性强,被广泛用于检测各种流行性疾病。然而,引物(特别是3’端)与模板之间的错配将显着削弱LAMP的效率,限制其对于基因多样性的病原微生物的应用。本研究针对这一问题,对传统LAMP体系进行优化,首次将具有3’-5’的外切酶活性的高保真酶应用于DENV的RT-LAMP检测中。当LAMP引物的3’端出现各种错配时,错配碱基都会因为高保真酶的3’-5’的外切酶活性而被切除,该方法展现出了对错配极佳的抗性。在每25μl的LAMP体系中,本研究通过优化,高保真酶的量为0.15 U时效果最佳。当检测30000拷贝/反应的DENV-4野生型与突变型模板时,改良过的新型抗突变RT-LAMP的检测阈值比传统RT-LAMP快了5.6-22.6 min,新型方法的检测时间阈值与传统方法之间也显示出了极显着差异(P<0.01)。本研究改良了之前建立的一种检测DENV四种血清型的RT-LAMP方法。相比之前的方法,新方法展现了更高的灵敏度。针对四种血清型,新方法的检测限(limit of detection,LOD)分别为74、252、78和35拷贝/反应。本研究用改良过的DENV抗突变RT-LAMP方法检测了10种与登革热临床症状类似的病毒,检测结果全为阴性,表明了新方法的高度特异性。本研究收集了153个来自疑似DENV感染的病人的临床样本,其中94.8%的样本被检测为DENV阳性,检出率高于商业化NS1抗原方法(92.2%),实验室自建的RT-LAMP方法(78.4%)和传统RT-LAMP方法(86.9%)。此外,本研究通过在体系中加入HNB和甲酚红,建立了新型RT-LAMP方法的比色法可视化检测。本研究建立的抗突变RT-LAMP方法并不仅限于检测DENV,未来也完全有可能推广应用至寨卡、日本脑炎、基孔肯亚等虫媒病的检测,提高了检测灵敏度,缩短了检测时间,特别适合应用于资源匮乏的地区。(本文来源于《华东师范大学》期刊2019-03-01)

吴丹丹,张超群,马士朝,李东,孙殿兴[4](2019)在《应用逆转录-环介导等温扩增技术检测乙型肝炎病毒RNA方法的建立》一文中研究指出目的建立逆转录-环介导等温扩增(reverse transcription-loop-mediated isothermal amplification,RTLAMP)方法检测乙型肝炎病毒(HBV) RNA,为乙型肝炎抗病毒治疗安全停药的研究提供技术支持。方法从NCBI数据库下载HBV A~D型,通过序列对比选出S区保守序列设计LAMP引物;提取HBV血清样本RNA与DNA,用RT-LAMP、LAMP进行检测;通过对非特异模板扩增实验验证扩增特异性;通过倍比稀释的HBV-RNA模板,用RTPCR法与RT-LAMP法检测以评价灵敏性。结果经过特异性实验证明LAMP特异性高,未检测到非特异性扩增。RT-LAMP的灵敏性为5×103IU/ml,RT-PCR的灵敏性为5×101IU/ml。用RT-LAMP与LAMP检测RNA与DNA证明了HBV-DNA检测不到后,HBV-RNA仍存在。结论本研究针对HBV S区保守序列,设计了针对我国主要的4种HBV基因型(A、B、C、D) LAMP通用引物,从而建立了检测HBV-RNA的RT-LAMP新技术,有助于为应用核苷类似物的乙型肝炎患者安全停药标志物的研究提供技术支持。(本文来源于《解放军医药杂志》期刊2019年01期)

张锦海,陈文琦,韩一芳,张琪,叶福强[5](2019)在《逆转录环介导等温扩增技术检测H7N9禽流感病毒基因》一文中研究指出目的建立检测H7N9禽流感病毒基因的逆转录环介导等温扩增(reverse transcription Loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP)方法,并初步评估应用。方法设计、合成H7N9禽流感病毒血凝素(HA)基因、神经氨酸酶(NA)基因的引物组,通过优化参数,建立RT-LAMP反应体系,使用梯度稀释的标准品测试该体系检测灵敏度,并使用对比毒株测试特异性,再对142份临床标本进行实样检测。结果成功建立了检测H7N9禽流感病毒HA基因、NA基因的RT-LAMP方法,可直接肉眼观察判读结果,检测其HA基因、NA基因的敏感性分别达到10拷贝每反应、5拷贝每反应,对其他常见呼吸道病原无交叉反应;在测序证实阳性的临床样本中,对于病毒HA基因、NA基因检出率分别为100%、92.68%。结论逆转录环介导等温扩增技术检测H7N9禽流感病毒基因,具有简单、快速、灵敏度高,检测结果可视化,无需特殊设备等优点,在禽流感病原监测上有一定应用前景。(本文来源于《东南国防医药》期刊2019年01期)

刘艳华,任彤,谈艳苗,张利峰[6](2018)在《鲑鱼甲病毒逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法研究》一文中研究指出鲑鱼甲病毒(Salmonid alphavirus,SAV)是鲑鱼胰脏病(Salmon pancreas disease,PD)病原,主要感染鲑科鱼类,目前在我国尚未分离到。为提高出入境鱼类中的SAV检测效率,根据SAV nsP1基因片段,设计3对特异性引物,建立了检测SAV的逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法。该方法使用25μL反应体系,经优化后的反应温度为65℃,反应时间为1 h,检测限可达10个拷贝数的病毒核酸,且不与传染性鲑鱼贫血病毒、病毒性出血性败血症病毒、传染性造血器官坏死病毒、病毒性神经坏死病病毒、草鱼呼肠孤病毒和鲤春病毒血症病毒的RNA产生交叉反应。在反应体系中加入染料后,反应结果肉眼直接可见。本研究建立的RTLAMP方法是一种特异性强、方便快捷的SAV检测方法,适合SAV的现场初筛和核酸检测。(本文来源于《中国动物检疫》期刊2018年10期)

张旻,王娜,景宏丽,吴绍强[7](2018)在《草鱼呼肠孤病毒873株逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法研究》一文中研究指出为提高草鱼呼肠孤病毒(grass carp reovirus,GCRV)的检测效率,根据GCRV-873株VP5基因片段,设计了2对特异性引物,建立了检测GCRV-873株的逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法。结果显示:该方法使用25μL反应体系,经优化后的反应温度为65℃,反应时间1 h,检测限可达10个拷贝数的病毒核酸,比传统的RT-PCR方法要高10倍。且不与鲤春病毒、传染性造血器官坏死病病毒、传染性胰脏坏死病毒和病毒性出血性败血症病毒RNA产生交叉反应。在反应体系中加入染料后,反应结果肉眼直接可见,是一种特异性强、方便快捷的检测方法,适合GCRV-873株的现场初筛和核酸检测工作。(本文来源于《淡水渔业》期刊2018年04期)

赵剑虹,张登城,高艳,焦洋,张士尧[8](2018)在《实时逆转录环介导等温扩增检测GⅡ.4型诺如病毒的研究》一文中研究指出目的建立快速检测诺如病毒GⅡ.4型的实时逆转录环介导等温扩增方法(RT-LAMP)。方法选取GⅡ.4型诺如病毒的ORF1与ORF2接头处较为保守的基因序列设计RT-LAMP引物并进行筛选,优化反应条件,分析方法的灵敏度、分析特异性和稳定性,采用优化的方法检测40例临床病毒性腹泻样本,结果与实时荧光逆转录PCR(RT-PCR)比较。结果该研究建立的诺如病毒GⅡ.4型RT-LAMP的最佳反应温度为65℃;该方法检测GⅠ型和GⅡ非诺如病毒4型、轮状病毒、札如病毒、星状病毒、腺病毒、CA16、EV71、CA6和CA10等常见10种其他腹泻病毒的结果为阴性;该方法对诺如病毒GⅡ.4型的检测能力与实时荧光RT-PCR相当;与实时荧光RT-PCR相比,该研究建立的RT-LAMP法检测诺如病毒GⅡ.4型阳性样本和诺如病毒阴性样本的符合率为100%。结论该研究建立的诺如病毒GⅡ.4型RT-LAMP快速检测方法灵敏度高,特异性好,为建立诺如病毒其他基因型的RT-LAMP检测方法奠定了基础。(本文来源于《中国卫生检验杂志》期刊2018年08期)

郝贵杰,林锋,陈智慧,黄小红,潘晓艺[9](2018)在《逆转录环介导等温扩增联合横向流动试纸条快速检测草鱼(Ctenopharyngodon idellus)呼肠孤病毒(GCRV)的研究》一文中研究指出草鱼呼肠孤病毒(grass carp reovirus,GCRV)是一种双链分节段RNA病毒,是引起草鱼出血病的(hemorrhage of grass carp)的病原,目前临床上较为流行的为基因I型和II型GCRV。本研究利用逆转录环介导等温扩增技术(reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP)进行核酸扩增,通过横向流动试纸条方法(lateral flow dipstick,LFD)进行可视化检测,分别建立了可应用于基因I型和II型GCRV快速检测的RT-LAMP-LFD技术。该技术以基因I型和II型GCRV第六基因为检测靶标,分别设计了2对特异性引物(其中,上游内引物由生物素biotin标记)和1条异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)标记的探针。结果表明,RT-LAMP最适反应温度为63oC,扩增时间为40min,从核酸扩增到LFD结果判读仅需50min。利用RT-LAMP-LFD可特异性检出基因I型和II型GCRV,而对鲤疱疹病毒II型(Cy HV-2)、鲤春病毒血症病毒(SVCV)、嗜水气单胞菌等鱼类常见病原的核酸检测结果为阴性,而且两种基因型RT-LAMP-LFD方法只能检测本基因型GCRV,特异性良好。该方法最低可检测到1.19pg的基因I型GCRV的RNA,1.88pg基因II型GCRV的RNA,其灵敏度分别比相应的RT-PCR方法高2个数量级和1个数量级。对实际样品的检测结果表明,两种基因型RT-LAMP-LFD方法检测GCRV与普通RT-PCR扩增并测序的结果一致。因此,该方法可快速、特异地检测出GCRV,而且操作简单,费用低且耗时短,不需特殊仪器设备,有望成为GCRV现场检测的常规技术手段。(本文来源于《海洋与湖沼》期刊2018年01期)

徐颖,张峰,于莹,邱志君[10](2017)在《逆转录环介导等温扩增技术在玉米褪绿矮缩病毒快速检测中的应用(英文)》一文中研究指出玉米褪绿矮缩病毒(Maize chlorotic dwarf virus,MCDV)是我国对外公布的检疫性有害生物,该研究采用逆转录环介导等温扩增技术(Reverse transcription-loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP),建立了一种快速、灵敏和特异的MCDV检测方法。根据MCDV外壳蛋白基因序列的保守区设计特异性引物,灵敏度试验显示该方法的灵敏度与RTPCR方法相当,而检测时间明显缩短,1 h即可完成反应。此外,反应体系中加入钙黄绿素,可通过裸眼观察荧光的有无来判断是否有扩增。笔者还对玉米种子中携带的玉米褪绿矮缩病毒病毒进行了RT-LAMP检测,结果表明,裸眼判定与仪器监测结果一致。(本文来源于《Agricultural Science & Technology》期刊2017年12期)

逆转录的环介导等温论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

结核分枝杆菌(Mycobacterium Tuberculosis,MTB)是引起结核病的病原菌,结核病的早期诊断对合理治疗和终止传染具有重要作用。目前应用的PCR、荧光定量PCR(Fluorescence Quantitive PCR,FQ-PCR)、环介导等温扩增法(Loop-mediated Isothermal Amplification,LAMP)等分子生物学检测法是以MTB-DNA为靶序列设计引物并进行扩增的,以DNA为基础的引物检测法对死菌或活菌都呈现阳性结果,在临床上无法评估抗结核治疗效果,并且检测灵敏度和特异性有限,不能满足临床诊断的需要。MTB-DNA通常为单一或少数拷贝,而16S rRNA在一个活的MTB中最高可达10~4拷贝,因此检测16S rRNA可提高检测的灵敏度;同时,结核杆菌16S rRNA仅存在于代谢增殖的活菌中,因而检测16S rRNA不但可提高诊断灵敏性,还可以用来评估抗结核疗效;此外,LAMP技术设备廉价、操作简便,产物无需任何仪器观察,经钙黄绿素或羟基萘酚蓝等染色后,肉眼可见,扩增快速高效,适合各种条件下检测,尤其适用于基层及现场使用。本研究针对16S rRNA区段设计MTB引物,建立逆转录-环介导等温扩增技术(Reverse Transcription Loop-mediated Isothermal Amplification,RT-LAMP)用以检测MTB,为结核病的临床诊断提供技术支持。第一部分应用逆转录-环介导等温扩增技术检测痰液中结核分枝杆菌16S rRNA目的:通过在结核分枝杆菌16S rRNA区段设计引物,建立RT-LAMP检测技术,为结核病的快速检测提供一个灵敏度高、特异性强、可检测活菌的简便的方法。方法:将MTB的16S rRNA完整序列与非结核分枝杆菌(nontuberculosis mycobacteria,NTM)进行比较,用Primer Explorer V5软件设计引物。通过对MTB细菌溶液进行连续性10倍的稀释后,比较RT-LAMP和LAMP的灵敏度,并观察NTM和其他已知的呼吸道病原菌(金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯杆菌)的检测结果,以确定引物特异性。用RT-LAMP、LAMP和罗氏培养法(Lowenstein-Jensen,L-J)检测131例结核病患者痰标本和24例阴性对照痰标本比较其临床检测效果。结果:通过灵敏度试验比较了RT-LAMP、LAMP方法的灵敏度,结果显示RT-LAMP方法比LAMP法高约10倍。RT-LAMP可检测出单个MTB菌。特异性试验利用RT-LAMP方法对已知的1株MTB、8株NTM和3株常见呼吸道细菌检测,结果发现只有MTB阳性。临床检测结果显示,RT-LAMP、LAMP和L-J法检测临床痰标本中MTB阳性检测率分别为97.7%(128/131)、78.6%(103/131)、73.2%(96/131),阴性对照只有L-J法有1例假阳性。RT-LAMP方法的阳性检测率高于LAMP和L-J法(P<0.01,P<0.01)。18例痰菌阳性的肺结核患者,在抗结核治疗前应用RT-LAMP和LAMP检测痰液标本,两种方法均具有较高的阳性检测率,但随着治疗时间的延长,RT-LAMP阳性检测率很快下降,而LAMP阳性检测率下降缓慢,说明RT-LAMP可以用来检测活菌。结论:1.本研究首次利用16S rRNA在MTB内呈多拷贝且仅存在于活菌的特点,创建了针对16S rRNA的RT-LAMP技术,用于检测MTB活菌。不仅证明了其灵敏度高、特异性强,而且操作简便、耗时短,适合基层及低资源医院。该技术有望发展成为快速检测MTB的有效手段。2.利用RT-LAMP技术,针对MTB 16S rRNA设计特异性引物,用于检测痰中MTB。通过与LAMP技术及L-J法比较,证明了其具有较高的灵敏度和特异性。第二部分应用逆转录-环介导等温扩增技术检测脑脊液中结核分枝杆菌16S rRNA目的:利用前期建立的RT-LAMP技术检测脑脊液中MTB,为结核性脑膜炎(Tuberculous meningitis,TBM)提供快速诊断的新方法。方法:选取105例患者脑脊液(Cerebrospinal Fluid,CSF)标本,其中确诊TBM有52例,疑似TBM有33例,阴性对照有20例。利用前期建立的MTB 16S rRNA RT-LAMP方法,比较RT-LAMP与RT-PCR的灵敏度与特异性,在临床样本检测中,以FQ-PCR为对照,比较两种方法检测效果。结果:灵敏度试验结果显示RT-LAMP比RT-PCR的灵敏度高,RT-LAMP与RT-PCR最低检测值分别为1CFU/mL和10~2 CFU/mL。在常见的5种中枢神经系统病原体脑脊液标本中,利用两种方法均未扩增出特异性条带。RT-LAMP对TBM组、疑似TBM组阳性检出率分别为96.1%(50/52)、72.3%(24/33),RT-PCR对TBM组、疑似TBM组的阳性检出率分别为71.1%(37/52)、33.3%(11/33),FQ-PCR对TBM组、疑似TBM组阳性检出率分别为65.3%(34/52)、24.2%(8/33),叁种方法对照组均无非特异性扩增。RT-LAMP阳性检出率高于FQ-PCR,两种检测方法差异有统计学意义(P<0.01);虽然在TBM组、疑似TBM组中,RT-PCR的阳性检出率略高于FQ-PCR,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:通过RT-LAMP检测技术检测脑脊液中MTB,与RT-PCR方法比较,也证明了其具有灵敏度高和特异性强的特点。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

逆转录的环介导等温论文参考文献

[1].樊荣辉,罗远华,钟淮钦,叶秀仙,黄敏玲.逆转录环介导等温扩增技术检测齿兰环斑病毒[J].福建农业学报.2019

[2].吴丹丹.应用逆转录-环介导等温扩增技术检测结核分枝杆菌16SrRNA的研究[D].承德医学院.2019

[3].周毅.一种抗突变的逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)方法及其在虫媒病检测上的应用[D].华东师范大学.2019

[4].吴丹丹,张超群,马士朝,李东,孙殿兴.应用逆转录-环介导等温扩增技术检测乙型肝炎病毒RNA方法的建立[J].解放军医药杂志.2019

[5].张锦海,陈文琦,韩一芳,张琪,叶福强.逆转录环介导等温扩增技术检测H7N9禽流感病毒基因[J].东南国防医药.2019

[6].刘艳华,任彤,谈艳苗,张利峰.鲑鱼甲病毒逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法研究[J].中国动物检疫.2018

[7].张旻,王娜,景宏丽,吴绍强.草鱼呼肠孤病毒873株逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法研究[J].淡水渔业.2018

[8].赵剑虹,张登城,高艳,焦洋,张士尧.实时逆转录环介导等温扩增检测GⅡ.4型诺如病毒的研究[J].中国卫生检验杂志.2018

[9].郝贵杰,林锋,陈智慧,黄小红,潘晓艺.逆转录环介导等温扩增联合横向流动试纸条快速检测草鱼(Ctenopharyngodonidellus)呼肠孤病毒(GCRV)的研究[J].海洋与湖沼.2018

[10].徐颖,张峰,于莹,邱志君.逆转录环介导等温扩增技术在玉米褪绿矮缩病毒快速检测中的应用(英文)[J].AgriculturalScience&Technology.2017

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