本文主要研究内容
作者周栋（2019）在《番木瓜番茄红素环化酶基因的转录调控分析》一文中研究指出：番茄红素是一种类胡萝卜素,其在减缓衰老、抵抗氧化等方面起着重要的作用。番木瓜果肉中番茄红素含量和比例决定了果肉的外观品质、营养价值,最终会影响其经济效益。因此,研究番木瓜番茄红素的代谢具有重要的理论和实践意义。番茄红素环化酶是类胡萝卜素合成通路的关键酶。在番木瓜中,番茄红素环化酶其中的两种同工异构酶分别为CpCYC-B和CpLCY-B。据研究表明,CpCYC-B和CpLCY-B都是组织特异性表达基因,其中CpCYC-B是有色体特异性表达基因,主要在果肉中表达,因此它能影响果肉中类胡萝卜素的含量和组分比例并造成果肉的颜色差异;而CpLCY-B主要在番木瓜的叶片和果皮中高表达。本研究以CpCYC-B和CpLCY-B为研究对象,克隆和鉴定启动子序列、分析关键顺式元件,并对不同区段启动子活性进行分析。通过对不同发育阶段的番木瓜果肉进行转录组分析,筛选与CpCYC-B和CpLCY-B启动子互作的转录因子,并通过酵母单杂交、酵母双杂交和双荧光素酶系统验证候选转录因子对番茄红素环化酶基因的转录调控功能。主要研究结果如下:1.CpCYC-B和CpLCY-B启动子的克隆和活性分析。从番木瓜中克隆了CpCYC-B、CpLCY-B的启动子序列,对其进行生物学信息分析和功能鉴定。Plantcare分析表明两基因启动子序列的顺式作用元件有差异。构建CpCYC-B和CpLCY-B全长启动子及一系列5’端缺失启动子驱动GUS报告基因的植物表达载体,转化拟南芥及番茄检测启动子活性。结果表明,CpCYC-B和CpLCY-B启动子从翻译起始位点开始至其上游的500bp启动子分别具有最强和最弱活性。同时,对启动子缺失元件研究发现CpLCY-B启动子375bp区域存在1个沉默子元件,而CpCYC-B启动子235bp区域处的元件没发现特异性功能。2.CpCYC-B和CpLCY-B启动子与候选转录因子的互作筛选。对番木瓜“SunUp”和“Kapoho”不同发育阶段果实进行转录组测序,分析筛选出具有差异性表达的转录因子。选取其中可能参与番茄红素代谢的8个候选转录因子进行验证。以CpCYC-B、CpLCY-B的-0.5kb启动子及其关键顺式作用元件的序列为诱饵,利用酵母单杂交实验,最终筛选出能够结合启动子的两个转录调控因子CpbHLH1和CpbHLH2。3.候选转录因子CpbHLH1和CpbHLH2的功能鉴定。CpbHLH1和CpbHLH2均属于bHLH家族,与植物抗逆响应及光信号调控有关。构建含CpbHLH1、CpbHLH2的CDS序列和CpCYC-B、CpLCY-B启动子的双荧光素酶系统,侵染烟草瞬时表达,结果表明CpbHLH1和CpbHLH2可以分别抑制和促进CpCYC-B和CpLCY-B基因的表达。进一步实验表明CpbHLH1和CpbHLH2可能参与到了木瓜发育过程中的光信号调控,从而调控了类胡萝卜素通路的关键基因表达。
Abstract
fan jia gong su shi yi chong lei hu luo bo su ,ji zai jian huan cui lao 、di kang yang hua deng fang mian qi zhao chong yao de zuo yong 。fan mu gua guo rou zhong fan jia gong su han liang he bi li jue ding le guo rou de wai guan pin zhi 、ying yang jia zhi ,zui zhong hui ying xiang ji jing ji xiao yi 。yin ci ,yan jiu fan mu gua fan jia gong su de dai xie ju you chong yao de li lun he shi jian yi yi 。fan jia gong su huan hua mei shi lei hu luo bo su ge cheng tong lu de guan jian mei 。zai fan mu gua zhong ,fan jia gong su huan hua mei ji zhong de liang chong tong gong yi gou mei fen bie wei CpCYC-Bhe CpLCY-B。ju yan jiu biao ming ,CpCYC-Bhe CpLCY-Bdou shi zu zhi te yi xing biao da ji yin ,ji zhong CpCYC-Bshi you se ti te yi xing biao da ji yin ,zhu yao zai guo rou zhong biao da ,yin ci ta neng ying xiang guo rou zhong lei hu luo bo su de han liang he zu fen bi li bing zao cheng guo rou de yan se cha yi ;er CpLCY-Bzhu yao zai fan mu gua de xie pian he guo pi zhong gao biao da 。ben yan jiu yi CpCYC-Bhe CpLCY-Bwei yan jiu dui xiang ,ke long he jian ding qi dong zi xu lie 、fen xi guan jian shun shi yuan jian ,bing dui bu tong ou duan qi dong zi huo xing jin hang fen xi 。tong guo dui bu tong fa yo jie duan de fan mu gua guo rou jin hang zhuai lu zu fen xi ,shai shua yu CpCYC-Bhe CpLCY-Bqi dong zi hu zuo de zhuai lu yin zi ,bing tong guo jiao mu chan za jiao 、jiao mu shuang za jiao he shuang ying guang su mei ji tong yan zheng hou shua zhuai lu yin zi dui fan jia gong su huan hua mei ji yin de zhuai lu diao kong gong neng 。zhu yao yan jiu jie guo ru xia :1.CpCYC-Bhe CpLCY-Bqi dong zi de ke long he huo xing fen xi 。cong fan mu gua zhong ke long le CpCYC-B、CpLCY-Bde qi dong zi xu lie ,dui ji jin hang sheng wu xue xin xi fen xi he gong neng jian ding 。Plantcarefen xi biao ming liang ji yin qi dong zi xu lie de shun shi zuo yong yuan jian you cha yi 。gou jian CpCYC-Bhe CpLCY-Bquan chang qi dong zi ji yi ji lie 5’duan que shi qi dong zi qu dong GUSbao gao ji yin de zhi wu biao da zai ti ,zhuai hua ni na gai ji fan jia jian ce qi dong zi huo xing 。jie guo biao ming ,CpCYC-Bhe CpLCY-Bqi dong zi cong fan yi qi shi wei dian kai shi zhi ji shang you de 500bpqi dong zi fen bie ju you zui jiang he zui ruo huo xing 。tong shi ,dui qi dong zi que shi yuan jian yan jiu fa xian CpLCY-Bqi dong zi 375bpou yu cun zai 1ge chen mo zi yuan jian ,er CpCYC-Bqi dong zi 235bpou yu chu de yuan jian mei fa xian te yi xing gong neng 。2.CpCYC-Bhe CpLCY-Bqi dong zi yu hou shua zhuai lu yin zi de hu zuo shai shua 。dui fan mu gua “SunUp”he “Kapoho”bu tong fa yo jie duan guo shi jin hang zhuai lu zu ce xu ,fen xi shai shua chu ju you cha yi xing biao da de zhuai lu yin zi 。shua qu ji zhong ke neng can yu fan jia gong su dai xie de 8ge hou shua zhuai lu yin zi jin hang yan zheng 。yi CpCYC-B、CpLCY-Bde -0.5kbqi dong zi ji ji guan jian shun shi zuo yong yuan jian de xu lie wei you er ,li yong jiao mu chan za jiao shi yan ,zui zhong shai shua chu neng gou jie ge qi dong zi de liang ge zhuai lu diao kong yin zi CpbHLH1he CpbHLH2。3.hou shua zhuai lu yin zi CpbHLH1he CpbHLH2de gong neng jian ding 。CpbHLH1he CpbHLH2jun shu yu bHLHjia zu ,yu zhi wu kang ni xiang ying ji guang xin hao diao kong you guan 。gou jian han CpbHLH1、CpbHLH2de CDSxu lie he CpCYC-B、CpLCY-Bqi dong zi de shuang ying guang su mei ji tong ,qin ran yan cao shun shi biao da ,jie guo biao ming CpbHLH1he CpbHLH2ke yi fen bie yi zhi he cu jin CpCYC-Bhe CpLCY-Bji yin de biao da 。jin yi bu shi yan biao ming CpbHLH1he CpbHLH2ke neng can yu dao le mu gua fa yo guo cheng zhong de guang xin hao diao kong ,cong er diao kong le lei hu luo bo su tong lu de guan jian ji yin biao da 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自福建农林大学的周栋，发表于刊物福建农林大学2019-08-30论文，是一篇关于番木瓜论文,番茄红素环化酶论文,转录调控论文,福建农林大学2019-08-30论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自福建农林大学2019-08-30论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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