鸡胚肠组织细胞论文-邰大鹏

鸡胚肠组织细胞论文-邰大鹏

导读:本文包含了鸡胚肠组织细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:原代及传代培养,生物学特性,免疫组化鉴定,永生化

鸡胚肠组织细胞论文文献综述

邰大鹏[1](2011)在《鸡胚不同组织细胞的体外培养及永生化》一文中研究指出鸡胚永生化细胞系可用于病理学诊断、疫苗生产及其效力与安全性检测。鉴于目前国内还没有该细胞系的建立,本研究通过体外培养鸡胚不同的组织细胞,对其基本生物特性进行了测定,并采用物理、化学及细胞融合等方法,体外诱导鸡胚各组织细胞发生转化,建立鸡胚永生化细胞系。研究中取鸡胚躯体来源细胞(Body Tissue Cells, BTC)、心脏来源细胞(Heart Tissue Cells, HTC),肺来源细胞(Lung Tissue Cells,LTC)进行体外培养及细胞冻存。对上述细胞的形态学特点、生长曲线、分裂指数、染色体核型等指标进行了综合分析。采用刮除法和相差消化法,从上述叁种组织细胞中分离纯化了以上相应组织细胞。纯化的细胞大小相近,形态相似,生长特性一致。用DAPi染色对分离纯化得到的细胞进行进一步的形态鉴定及支原体污染检测。用抗波形蛋白单克隆抗体、抗结蛋白单克隆抗体、抗角蛋白-19单克隆抗体对BTC、HTC、LTC细胞分别做了免疫组化鉴定,检测得出BTC为成纤维细胞、HTC为成肌细胞、LTC为上皮类细胞。用MNNG、迭氮钠及紫外线诱导鸡胚不同组织的叁、四代细胞,计算半致死剂量。筛选诱导后的细胞,并长期传代培养和冻存,其中有两株细胞(BTC、HTC)分别传代到第36代和29代。探索不同分子量、不同浓度的PEG作融合剂对诱导癌细胞与鸡胚体细胞融合的最适条件,在HAT选择培养基下筛选融合细胞,得到杂交瘤细胞。对其进行克隆和传代培养后,杂交细胞生长速度明显提高。(本文来源于《内蒙古大学》期刊2011-05-01)

王占锋[2](2010)在《鸡胚肠组织细胞培养及益生菌抗NDV作用研究》一文中研究指出已有的研究证实益生菌具有抑制轮状病毒和HIV所致腹泻的作用,但益生菌的抗病毒作用尚缺乏系统研究。因此,本实验采用MTT和NDV-HA方法,分别在体外、鸡胚成纤维细胞(CEF)和鸡胚肠组织细胞上初步评价了益生菌对NDV血凝价和抑制率的影响,从而探讨益生菌的抗病毒作用并分析其可能的机制。实验中首先利用革兰氏染色方法检测了益生菌对CEF和鸡胚肠组织细胞的黏附能力,结果确定益生菌对CEF具有一定的黏附能力,但明显低于对鸡胚肠组织细胞黏附能力;利用MTT法测定益生菌处理后的细胞活性,经统计分析得出益生菌对细胞的最大无毒浓度为干酪乳杆菌1011cfu/ml,嗜酸乳杆菌1012cfu/ml,益生菌培养上清1:2的稀释液,益生菌灭活菌体和破碎菌体成分在实验浓度均未显现细胞毒害现象;利用药敏试验筛选出对干酪乳杆菌和嗜酸乳杆菌均高度敏感的抗生素—庆大霉素。然后,根据上述实验结果进行了细胞上的益生菌抗病毒研究。实验分组如下:第1组:益生菌与上述2种细胞预先分别孵育后再攻毒;第2组:2种细胞感染病毒后再接入益生菌;第3组:益生菌与病毒同时接入细胞;第4组:益生菌对照;第5组:病毒对照;第6组:正常细胞对照。结果显示:在体外益生菌对NDV血凝价影响的实验中,所选择的5种益生菌及其培养上清都极显着地降低了NDV的血凝价,但各菌种之间存在程度不同的差异;而实验中选择的2种致病菌及其培养上清对NDV的血凝价均没有影响,这一结果说明益生菌可能具有直接破坏病毒的作用,并且具有菌种特异性。以MTT法测定益生菌和NDV处理后的细胞活性,通过公式计算病毒抑制率,结果显示,无论是在CEF上,还是在鸡胚肠组织细胞上,益生菌都可以显着的提高对NDV的抑制率,并且益生菌的这种作用具有量效关系和时效关系。益生菌-细胞-NDV相互作用后的细胞培养上清中NDV血凝价的变化结果显示,益生菌及其培养上清与NDV同时接入细胞可以极显着的降低NDV的血凝价,推测其可能具有直接的杀灭病毒作用。在实验中,我们分别研究了益生菌活菌、培养上清、灭活菌体和破碎菌体成分的抗病毒作用,结果表明,益生菌的各种形式均具有一定的抗病毒作用,但在效果上存在一定的差异,原因可能是其抗病毒作用的机制不同。益生菌与细胞作用后再感染病毒,对NDV抑制率升高的结果反映出了益生菌对NDV吸附细胞的阻断作用;从益生菌与病毒同时接入细胞后降低病毒对细胞侵害的现象,可以看出益生菌可能对病毒结构具有直接破坏作用;细胞感染病毒后再接入益生菌对NDV抑制率极低的现象说明,病毒感染后益生菌再很难发挥作用。综上所述,益生菌对NDV的抗病毒作用可能是多方位的,既具有对NDV的直接破坏作用,又可以阻断病毒对细胞的感染、抑制病毒在细胞内的增殖。(本文来源于《东北农业大学》期刊2010-04-08)

鸡胚肠组织细胞论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

已有的研究证实益生菌具有抑制轮状病毒和HIV所致腹泻的作用,但益生菌的抗病毒作用尚缺乏系统研究。因此,本实验采用MTT和NDV-HA方法,分别在体外、鸡胚成纤维细胞(CEF)和鸡胚肠组织细胞上初步评价了益生菌对NDV血凝价和抑制率的影响,从而探讨益生菌的抗病毒作用并分析其可能的机制。实验中首先利用革兰氏染色方法检测了益生菌对CEF和鸡胚肠组织细胞的黏附能力,结果确定益生菌对CEF具有一定的黏附能力,但明显低于对鸡胚肠组织细胞黏附能力;利用MTT法测定益生菌处理后的细胞活性,经统计分析得出益生菌对细胞的最大无毒浓度为干酪乳杆菌1011cfu/ml,嗜酸乳杆菌1012cfu/ml,益生菌培养上清1:2的稀释液,益生菌灭活菌体和破碎菌体成分在实验浓度均未显现细胞毒害现象;利用药敏试验筛选出对干酪乳杆菌和嗜酸乳杆菌均高度敏感的抗生素—庆大霉素。然后,根据上述实验结果进行了细胞上的益生菌抗病毒研究。实验分组如下:第1组:益生菌与上述2种细胞预先分别孵育后再攻毒;第2组:2种细胞感染病毒后再接入益生菌;第3组:益生菌与病毒同时接入细胞;第4组:益生菌对照;第5组:病毒对照;第6组:正常细胞对照。结果显示:在体外益生菌对NDV血凝价影响的实验中,所选择的5种益生菌及其培养上清都极显着地降低了NDV的血凝价,但各菌种之间存在程度不同的差异;而实验中选择的2种致病菌及其培养上清对NDV的血凝价均没有影响,这一结果说明益生菌可能具有直接破坏病毒的作用,并且具有菌种特异性。以MTT法测定益生菌和NDV处理后的细胞活性,通过公式计算病毒抑制率,结果显示,无论是在CEF上,还是在鸡胚肠组织细胞上,益生菌都可以显着的提高对NDV的抑制率,并且益生菌的这种作用具有量效关系和时效关系。益生菌-细胞-NDV相互作用后的细胞培养上清中NDV血凝价的变化结果显示,益生菌及其培养上清与NDV同时接入细胞可以极显着的降低NDV的血凝价,推测其可能具有直接的杀灭病毒作用。在实验中,我们分别研究了益生菌活菌、培养上清、灭活菌体和破碎菌体成分的抗病毒作用,结果表明,益生菌的各种形式均具有一定的抗病毒作用,但在效果上存在一定的差异,原因可能是其抗病毒作用的机制不同。益生菌与细胞作用后再感染病毒,对NDV抑制率升高的结果反映出了益生菌对NDV吸附细胞的阻断作用;从益生菌与病毒同时接入细胞后降低病毒对细胞侵害的现象,可以看出益生菌可能对病毒结构具有直接破坏作用;细胞感染病毒后再接入益生菌对NDV抑制率极低的现象说明,病毒感染后益生菌再很难发挥作用。综上所述,益生菌对NDV的抗病毒作用可能是多方位的,既具有对NDV的直接破坏作用,又可以阻断病毒对细胞的感染、抑制病毒在细胞内的增殖。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

鸡胚肠组织细胞论文参考文献

[1].邰大鹏.鸡胚不同组织细胞的体外培养及永生化[D].内蒙古大学.2011

[2].王占锋.鸡胚肠组织细胞培养及益生菌抗NDV作用研究[D].东北农业大学.2010

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