反式包装论文-刘娜

反式包装论文-刘娜

导读:本文包含了反式包装论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:寨卡病毒,复制子,抗病毒药物,反式包装

反式包装论文文献综述

刘娜[1](2018)在《寨卡病毒复制子反式包装系统的构建和药物筛选应用》一文中研究指出Zika virus(ZIKV)是一种虫媒传播病毒,与登革病毒、黄热病毒和西尼罗病毒等都是一个单股正链的RNA病毒,属于黄病毒属,黄病毒科。自1947年4月从发热的哨兵恒河猴的血清中分离后,已经在很多国家和地区引起疫情并且流行开来,与严重的临床表现和先天性畸形有关。但是,目前还没有有效的抗病毒药物和疫苗可以用于ZIKV的临床治疗,因此对于安全有效的ZIKV抗病毒药物和疫苗的研究刻不容缓。复制子系统已经被证明是一个有效的药物筛选工具。在本文中,我们主要开展了以下叁个方面的工作:稳定表达海肾荧光素酶(Rluc)的ZIKV复制子的构建;复制子用于抗病毒药物筛选实验;ZIKV复制子反式包装系统的构建。一、稳定表达海肾荧光素酶(Rluc)的ZIKV复制子的构建在本文中,我们在ZIKV感染性克隆的cDNA基础上构建了一个ZIKV复制子(Rluc-ZIKV-Rep)。在这个复制子中,引入了一个表达海肾荧光素酶的报告基因Renilla luciferase,复制子在细胞中的表达和复制可以通过细胞中的海肾荧光素酶活性和RT-PCR检测到。二、复制子用于抗病毒药物筛选实验在抗病毒药物筛选研究中,我们使用了一些小分子药物,特别是马尼地平和西尼地平。随着这些药物浓度的增加,Rluc-ZIKV-Rep在细胞内的复制呈现剂量依赖的抑制效应。证明我们构建的ZIKV复制子是一个有效的抗病毒药物筛选的工具。叁、ZIKV复制子反式包装系统的构建在本文中,运用反向遗传学的方法构建ZIKV复制子的反式包装系统,通过PCR的方法从ZIKV感染性克隆的cDNA上扩增出ZIKV的结构蛋白基因,构建了一个含ZIKV结构蛋白的真核表达载体——CprME-pcDNA3.1,并通过Western Blot鉴定了其在两种不同细胞(293T和Vero)中的表达。为了制备复制子包装颗粒,我们将复制子和表达结构蛋白的质粒通过共转染和顺次转染的方法转入细胞,使结构蛋白基因和非结构蛋白基因共表达于细胞中。然后,收集细胞上清,继续感染Vero细胞,通过检测细胞中的荧光素酶活性,定量复制子包装出的缺陷型病毒的产量。在此基础上,我们可以通过293T细胞制备出缺陷型的病毒样颗粒,为ZIKV新型疫苗的研究奠定基础。(本文来源于《辽宁大学》期刊2018-05-01)

荣倩[2](2011)在《营养标签该咋标,有谱了》一文中研究指出超市里功能各异的食品该如何选择?有没有既美味脂肪含量又低的食品呢?如今生活越来越好,如何吃得更营养健康,成了普通消费者越来越关心的话题。随着人们对营养健康食品的关注,食品营养标签的标示工作势在必行。 近日,卫生部发布了《预包装食品营养标签(本文来源于《中国食品报》期刊2011-11-10)

岳磊[3](2010)在《登革病毒复制子反式包装系统的建立》一文中研究指出目的:利用反向遗传学操作构建登革病毒复制子的反式包装系统;在此基础上,制备登革病毒单轮感染性颗粒,为登革热新型疫苗的研究奠定基础。方法:1.在登革1型病毒广州分离株基因组全长感染性克隆的基础上,利用重迭PCR扩增获得病毒基因组5’端与GFP融合片段,将其插入病毒基因组中以替换病毒的绝大部分结构基因,并获得带有绿色荧光蛋白的病毒复制子DV1-EGFP-RP。同步构建其致死性突变复制子DV1-EGFP△GDD-RP作为对照。通过报告基因和RT-PCR的方法鉴定病毒复制子的复制特性。2.利用重迭PCR扩增获得DV/JEV嵌合型prME片段,将其插入pcDNA3.1质粒构建相应真核表达载体,转染BHK21细胞后,通过RT-PCR和免疫荧光鉴定登革病毒prME的胞内表达特性。利用超速离心对上清中的病毒样颗粒进行纯化,通过电镜和western blot对其进行鉴定。3.为制备获得复制子包装颗粒,首先将病毒复制子RNA电转BHK-21细胞后,再利用脂质体转染方法将辅助包装质粒导入细胞,以使病毒结构和非结构蛋白共表达于宿主细胞中。利用超速离心获得细胞培养上清中的病毒样颗粒,利用RT-PCR、western blot方法对其复制子包装颗粒的生化组分进行鉴定。最后将该病毒样颗粒接种BHK-21细胞,明确其单轮感染性特征。结果:1.获得了高效表达的含绿色荧光蛋白报告基因的登革病毒复制子载体。2.成功构建了登革病毒prME嵌合质粒pcDV/JEV prME,并制备了分泌性病毒样颗粒。3.制备了具有单轮感染性的登革病毒病毒样颗粒。结论:成功建立了基于登革病毒复制子的反式包装系统,制备了具有单轮感染性的病毒样颗粒,为下一步的研究工作打下良好的基础。(本文来源于《暨南大学》期刊2010-05-15)

王克夷[4](1995)在《肽链的翻译后加工5.在反式高尔基体中发生的一些包装和激活过程》一文中研究指出肽链的翻译后加工5.在反式高尔基体中发生的一些包装和激活过程王克夷(中国科学院上海生物化学研究所,上海200031)关键词肽链加工,反式高尔基体许多分泌蛋白和活性小肽的前体由ER进入高尔基体后经过的途径基本相同,但在反式高尔基体内遇到了不同的加工和修...(本文来源于《生命的化学(中国生物化学会通讯)》期刊1995年05期)

反式包装论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

超市里功能各异的食品该如何选择?有没有既美味脂肪含量又低的食品呢?如今生活越来越好,如何吃得更营养健康,成了普通消费者越来越关心的话题。随着人们对营养健康食品的关注,食品营养标签的标示工作势在必行。 近日,卫生部发布了《预包装食品营养标签

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

反式包装论文参考文献

[1].刘娜.寨卡病毒复制子反式包装系统的构建和药物筛选应用[D].辽宁大学.2018

[2].荣倩.营养标签该咋标,有谱了[N].中国食品报.2011

[3].岳磊.登革病毒复制子反式包装系统的建立[D].暨南大学.2010

[4].王克夷.肽链的翻译后加工5.在反式高尔基体中发生的一些包装和激活过程[J].生命的化学(中国生物化学会通讯).1995

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