环阿乔醇合成酶论文-陈晓仪,张甜甜,赵琦

环阿乔醇合成酶论文-陈晓仪,张甜甜,赵琦

导读:本文包含了环阿乔醇合成酶论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:卷叶贝母,环阿屯醇合成酶,克隆,生物信息学

环阿乔醇合成酶论文文献综述

陈晓仪,张甜甜,赵琦[1](2018)在《卷叶贝母环阿屯醇合成酶基因的克隆及表达分析》一文中研究指出目的对卷叶贝母Fritillaria cirrhosa中参与生物碱合成的关键酶环阿屯醇合成酶(cycloartenol synthase,CAS)基因进行克隆,并对其进行生物信息学和表达分析。方法基于转录组测序结果,通过PCR技术克隆卷叶贝母CAS基因(FcCAS)开放阅读框(open reading frame,ORF)序列,并基于在线工具对cDNA序列进行生物信息学分析。通过荧光定量(q RT-PCR)手段检测FcCAS在野生鳞茎与愈伤组织(通过激素组合刺激获得的组织培养物)中的表达情况并测定总生物碱的含量。结果 FcCAS编码区ORF长为2 271 bp,编码756个氨基酸,并与NCBI上公布的天门冬、芭蕉、油棕等植物CAS蛋白的相似性达80%以上;qRT-PCR与总生物碱含量测定实验表明FcCAS的表达水平与总生物碱含量的变化趋势一致,都是愈伤组织高于野生鳞茎。结论 FcCAS在不同组织状态下表达量差异较大,FcCAS是一个有生物学功能的蛋白质,受激素组合诱导表达,为进一步研究CAS对卷叶贝母生物碱含量的影响和表达调控奠定基础。(本文来源于《中草药》期刊2018年18期)

许勇,李静,蔡标,王红萍,戴陈伟[2](2018)在《贝母中环阿屯醇合成酶的生物信息学分析》一文中研究指出目的:采用多种生物信息学手段,分析预测贝母中环阿屯醇合成酶的特征信息。方法:以浙贝母的环阿屯醇合成酶氨基酸序列为研究对象,利用Prot Param、Signal P、PSORT、Prot Scale、SOMPA、Predict Protein、PROSITE、COILS和SWISS-MODEL等在线预测工具,对其理化性质、亚细胞定位、亲疏水性、二级结构、叁级结构等进行分析。结果:该酶由756个氨基酸残基构成,是一种无信号肽、无跨膜结构、定位于微体的可溶性亲水蛋白。α螺旋和无规则卷曲为主要的二级结构元件。三级结构以羊毛甾醇合成酶为模板建模,功能位点是萜类合酶位点,位于603~617 aa;结合配体为Zn~(2+),结合位点为676His、677Ala、678Val、679Asn、682Trp和723Ala。结论:生物信息学手段分析预测结果可靠性较高,为进一步研究贝母活性生物碱的生物合成调控机制奠定了理论基础。(本文来源于《生物技术通讯》期刊2018年04期)

王霞,陈迪嘉,谢君[3](2016)在《菊叶薯蓣环阿屯醇合成酶基因的克隆与表达差异分析》一文中研究指出菊叶薯蓣环阿屯醇合成酶CAS是薯蓣皂素合成代谢途径中的关键酶之一。经克隆和分析,菊叶薯蓣中CAS的序列长度为2351bp,编码的产物经预测由653个氨基酸组成,含有SQCY_1的特征结构域。菊叶薯蓣CAS在块茎、叶片和茎中均有表达,在叶片中的表达最高。菊叶薯蓣中薯蓣皂素的含量是盾叶薯蓣的1.56倍,而CAS在菊叶薯蓣中的表达量为盾叶薯蓣的159.1倍。(本文来源于《科学家》期刊2016年06期)

梁甜,马泓思,尹静,詹亚光,张梦岩[4](2015)在《白桦环阿齐醇合成酶(CAS)基因与达玛烯二醇合成酶(DS)基因的双基因RNA干扰载体构建》一文中研究指出环阿齐醇合成酶(Cycloartenol synthase,CAS)和达玛烯二醇合成酶(Dammarenediol synthase,DS)为白桦叁萜合成过程分支途径关键酶基因,对CAS和DS基因的抑制或沉默将有利于叁萜前体-2,3氧化角鲨烯向目标产物白桦脂醇和齐墩果酸合成。利用同源序列PCR方法及pRNAi-GG新型载体,进行DS单基因RNAi及DS与CAS双基因RNAi载体的构建。结果显示,分别克隆获得CAS和DS c DNA序列长度为300和509 bp,Blast同源序列比对与已知日本白桦BPX1和OSCBPD相似度为100%和92%。依据基因RNAi引物设计及pRNAi-GG使用原则,分别将CAS、DS的正向片段和反向片段有序地连接到pRNAi-GG载体PDK内含子两侧,并转化大肠杆菌Trans1-T1中,经PCR及克隆测序验证,获得白桦DS单基因和CAS、DS双基因干扰载体,并通过叁亲杂交方法分别获得含有两个RNAi载体的工程农杆菌菌株。该研究为进一步通过基因工程手段阻断白桦叁萜分支途径及促进前体物质向目标产物白桦酯醇和齐墩果酸方向合成奠定了基础。(本文来源于《植物研究》期刊2015年03期)

赵寿经,安岩,孟洋,何沐阳,曲庆玲[5](2014)在《干扰环阿乔醇合成酶基因的表达对人参皂苷含量的影响》一文中研究指出通过RNA干扰技术(RNA interference,RNAi)调控人参发根中环阿乔醇合成酶(CS)的表达,实现了在分子水平上对人参皂苷合成途径进行调控,并获得了人参总皂苷含量提高82.17%的可遗传人参发根系。同时,证明了RNAi可成功调控植物次生代谢产物。(本文来源于《吉林大学学报(工学版)》期刊2014年06期)

牛云云,罗红梅,陈士林,黄林芳[6](2012)在《龙骨马尾杉环阿屯醇合成酶(HcCAS1)基因的克隆和生物信息学分析》一文中研究指出目的:对大伸筋草的原植物龙骨马尾杉Huperzia carinata环阿屯醇合成酶(cycloartenol synthase,CAS)基因HcCAS编码区进行克隆及序列分析。方法:根据本实验室已报道的龙骨马尾杉转录组高通量测序结果分析获得1条具有环氧角鲨烯环化酶保守结构域的CAS基因序列,采用RT-PCR技术,以龙骨马尾杉根、茎、叶混合样品总RNA为模板克隆得到龙骨马尾杉HcCAS基因的编码区序列,并对HcCAS蛋白进行理化性质、蛋白二级结构及叁维结构预测分析。结果:序列分析表明,所克隆的HcCAS基因编码区开放阅读框(open reading frame,ORF)长为2 274 bp,编码757个氨基酸残基,命名为HcCAS1(GenBank登陆号JN790125)。结论:该研究在国内外首次获得龙骨马尾杉HcCAS基因的编码区序列,为进一步研究HcCAS蛋白在石杉科植物甾醇合成途径中的功能及酶活性位点的鉴定奠定基础。(本文来源于《中国中药杂志》期刊2012年12期)

朱振洪,葛立军,王丽丽,李雪玲[7](2012)在《浙贝母环阿屯醇合成酶基因5`-RACE快速扩增及序列分析》一文中研究指出[目的]克隆浙贝母环阿屯醇合成酶(Cycloartenol synthase,CAS)5`末端cDNA序列。[方法]利用简并引物及RT-PCR方法获得CAS的核心基因,应用cDNA末端快速扩增(Rapid-amplification of cDNA ends,RACE)技术快速克隆5`末端片段,采用NCBI网站上的Protein Blast软件进行氨基酸同源性比对。[结果]从浙贝母叶片中成功地克隆出一条长691bp的CAS基因5`末端cDNA片段,含起始密码子及163bp的5`延伸区。对5`末端的150个氨基酸同源性分析表明,该片段与C.asiatica,G.glabra,A.thaliana,W.somnifera的CAS同源性分别达72%,66%,71%,71%。[结论]上述结果表明所克隆的片段为浙贝母CAS的5`末端序列,为下一步CAS全长基因的克隆及CAS在浙贝母次生代谢中的功能研究打下基础。(本文来源于《浙江中医药大学学报》期刊2012年05期)

牛云云,罗红梅,黄林芳,陈士林[8](2011)在《龙骨马尾杉环阿屯醇合成酶HcCAS基因的克隆和生物信息学分析》一文中研究指出目的:对龙骨马尾杉环阿屯醇合成酶(cycloartenol synthase,CAS)编码区进行克隆及序列分析。方法:根据对已报道的龙骨马尾杉的转录组高通量测序结果分析获得1条具有鲨烯环化酶保守结构域的CAS基因序列,采用RT-PCR技术,以龙骨马尾杉根、茎、叶混合样品总RNA为模板克隆得到龙骨马尾杉HcCAS基因的编码区序列,并对HcCAS蛋白进行理化性质、蛋白二级结构及叁级结构的预测。结果:序列分析表明,所克隆的HcCAS基因编码区长为2274bp,编码757个氨基酸残基,具有鲨烯环氧酶保守结构域,命名为HcCAS1(GenBank登陆号:JN790125)。结论:国内外首次报道得到龙骨马尾杉HcCAS基因的编码区序列,为进一步研究石杉科植物叁萜合成途径中HcCAS蛋白的功能及酶活性位点的鉴定奠定基础。(本文来源于《2011年中国药学大会暨第11届中国药师周论文集》期刊2011-11-04)

梁彦龙[9](2009)在《反义抑制环阿乔醇合成酶基因对人参发根皂苷合成的影响》一文中研究指出人参皂苷是人参的主要药理活性物质。研究表明,人参皂苷的前体为2,3-氧化角鲨烯,人参中2,3-氧化角鲨烯分别流向人参皂苷和固醇两条支路。环阿乔醇合成酶(CS)和达玛烯二醇合成酶(DS)分别是控制2,3-氧化角鲨烯流向植物固醇和人参皂苷合成途径的关键酶。环阿乔醇合成酶催化2,3-氧化角鲨烯生成环阿乔醇,环阿乔醇经一系列生化反应生成植物固醇。达玛烯二醇合成酶催化2,3-氧化角鲨烯生成达玛烯二醇,达玛烯二醇经一系列生化反应生成人参皂苷。本研究通过反义RNA技术抑制了人参发根CS的表达,使代谢流主要流向人参皂苷,从而达到提高人参皂苷含量的目的。本文首先利用RT-PCR方法从人参总RNA中扩增出901bp的CS基因片段,并把此片段插入到pMD18-T载体上,进而克隆到大肠杆菌JM109中。然后,把CS基因片段以反义方向亚克隆到植物表达载体pBI121中,并转化发根农杆菌A4。利用阳性发根农杆菌A4侵染3年生的人参根片,获得表达反义CS的人参发根。Northern blot分析表明,反义CS发根能表达大量的反义CS-RNA,其正义CS-RNA水平降低。同时,反义CS人参发根的固醇合成水平降低,而人参皂苷含量提高。进一步深入研究表明反义CS人参发根的CS酶活性有所降低,而DS酶活性得到提高。此外,反义发根系早期的2,3-氧化角鲨烯水平也有所提高。(本文来源于《吉林大学》期刊2009-06-01)

陈迪,杨之帆,陈永勤,蔡敏,熊敏[10](2007)在《盾叶薯蓣环阿屯醇合成酶基因的克隆》一文中研究指出薯蓣皂甙元(diosgenin,俗称皂素)是生产肾上腺皮质激素、可的松、强的松、地塞米松、雌激素、孕激素、睾丸酮、米非司酮、黄体酮、口服避孕药、蛋白同化激素等百余种激素类药物的重要原料。我国是生产皂素的主要国家之一,并出口原料及有关深加工产品和药物。盾叶薯蓣(Dioscorea zingiberensis Wright)为我国特有的药用植物,主要分布在湖北(本文来源于《2007中国植物生理学会全国学术会议论文摘要汇编》期刊2007-08-01)

环阿乔醇合成酶论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的:采用多种生物信息学手段,分析预测贝母中环阿屯醇合成酶的特征信息。方法:以浙贝母的环阿屯醇合成酶氨基酸序列为研究对象,利用Prot Param、Signal P、PSORT、Prot Scale、SOMPA、Predict Protein、PROSITE、COILS和SWISS-MODEL等在线预测工具,对其理化性质、亚细胞定位、亲疏水性、二级结构、叁级结构等进行分析。结果:该酶由756个氨基酸残基构成,是一种无信号肽、无跨膜结构、定位于微体的可溶性亲水蛋白。α螺旋和无规则卷曲为主要的二级结构元件。三级结构以羊毛甾醇合成酶为模板建模,功能位点是萜类合酶位点,位于603~617 aa;结合配体为Zn~(2+),结合位点为676His、677Ala、678Val、679Asn、682Trp和723Ala。结论:生物信息学手段分析预测结果可靠性较高,为进一步研究贝母活性生物碱的生物合成调控机制奠定了理论基础。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

环阿乔醇合成酶论文参考文献

[1].陈晓仪,张甜甜,赵琦.卷叶贝母环阿屯醇合成酶基因的克隆及表达分析[J].中草药.2018

[2].许勇,李静,蔡标,王红萍,戴陈伟.贝母中环阿屯醇合成酶的生物信息学分析[J].生物技术通讯.2018

[3].王霞,陈迪嘉,谢君.菊叶薯蓣环阿屯醇合成酶基因的克隆与表达差异分析[J].科学家.2016

[4].梁甜,马泓思,尹静,詹亚光,张梦岩.白桦环阿齐醇合成酶(CAS)基因与达玛烯二醇合成酶(DS)基因的双基因RNA干扰载体构建[J].植物研究.2015

[5].赵寿经,安岩,孟洋,何沐阳,曲庆玲.干扰环阿乔醇合成酶基因的表达对人参皂苷含量的影响[J].吉林大学学报(工学版).2014

[6].牛云云,罗红梅,陈士林,黄林芳.龙骨马尾杉环阿屯醇合成酶(HcCAS1)基因的克隆和生物信息学分析[J].中国中药杂志.2012

[7].朱振洪,葛立军,王丽丽,李雪玲.浙贝母环阿屯醇合成酶基因5`-RACE快速扩增及序列分析[J].浙江中医药大学学报.2012

[8].牛云云,罗红梅,黄林芳,陈士林.龙骨马尾杉环阿屯醇合成酶HcCAS基因的克隆和生物信息学分析[C].2011年中国药学大会暨第11届中国药师周论文集.2011

[9].梁彦龙.反义抑制环阿乔醇合成酶基因对人参发根皂苷合成的影响[D].吉林大学.2009

[10].陈迪,杨之帆,陈永勤,蔡敏,熊敏.盾叶薯蓣环阿屯醇合成酶基因的克隆[C].2007中国植物生理学会全国学术会议论文摘要汇编.2007

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