无色孔雀石绿论文-陈永平,张素青,李春青,高丽娜,时文博

无色孔雀石绿论文-陈永平,张素青,李春青,高丽娜,时文博

导读:本文包含了无色孔雀石绿论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:LC-MS,MS,淡水水体,沉积物,有色孔雀石绿

无色孔雀石绿论文文献综述

陈永平,张素青,李春青,高丽娜,时文博[1](2017)在《液质质联用法测定淡水水体与沉积物中有(无)色孔雀石绿的改进》一文中研究指出对淡水水体和沉积物中孔雀石绿(MG)及无色孔雀石绿(LMG)的高效液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)检测方法进行改进。主要对水及沉积物中孔雀石绿及无色孔雀石绿提取试剂进行优化探索,结果表明:二氯甲烷作为提取试剂提取效果最佳,两种待测物线性范围为0.20~100ng/mL,r~2≥0.999,空白水体在2.0、10、25ng/L 3个加标水平下的平均回收率为78.3%~88.8%,相对标准偏差(RSD)为1.2%~3.3%,检出限(LOD)和定量下限(LOQ)分别为0.20ng/L和0.40ng/L。空白沉积物基质在0.2、2.0、10μg/kg 3个加标水平下,平均回收率为78.9%~86.7%,RSD为0.6%~3.3%,检出限(LOD)和定量下限(LOQ)分别为0.020μg/kg和0.040μg/kg。该方法灵敏度高、选择性好,适用于淡水养殖环境水体和沉积物中MG和LMG的残留测定。(本文来源于《河北渔业》期刊2017年11期)

吴双,余淑苑,吕子全,柯跃斌[2](2017)在《水产品中无色孔雀石绿的悬液芯片检测方法研究》一文中研究指出目的建立水产品中无色孔雀石绿(LMG)的悬液芯片检测法。方法向聚苯乙烯微球中加入14μg/100μl的LMG抗原,利用碳二亚胺法使抗原与微球偶联构成捕获抗原。加入含LMG的样品,使用1∶800倍稀释的LMG单克隆抗体及藻红蛋白标记的二抗,37℃孵育1 h后在悬液芯片仪上检测平均荧光强度值并计算样品中LMG的含量。结果在10~100ng/ml的线性范围内,所得体系的回归方程为ΔF=2 035.6c+22.4,r=0.999 8。方法的检出限为0.125 ng/ml,加标回收率在88.7%~93.6%之间,RSD为3.2%~7.6%。结论该方法的灵敏度高,特异性好,可作为一种高通量检测的新技术用于水产品中无色孔雀石绿残留的分析。(本文来源于《环境与健康杂志》期刊2017年10期)

吴双,柯跃斌,吕子全,张艳炜[3](2016)在《无色孔雀石绿人工抗原的制备及免疫原性鉴定》一文中研究指出目的用免疫分析法检测水产品中无色孔雀石绿(LMG)的残留,研究LMG人工抗原及其多克隆抗体的制备和鉴定。方法通过混酸硝化还原法对LMG进行改造,获得氨基无色孔雀石绿(NH2-LMG),然后采用改良的碳二亚胺法制备LMG完全抗原。用该人工抗原免疫动物,获得多抗血清。采用酶联免疫法测定抗体效价。选择与LMG结构相似的5种药物进行交叉反应,计算交叉反应率。结果经紫外光谱及电泳法检测,LMG与载体蛋白偶联成功,偶联比为1∶17。利用该抗原免疫小鼠后获得了效价高于104的抗LMG抗体,交叉反应结果表明该抗体有较好的特异性。结论成功合成了LMG人工抗原,为进一步制备LMG单克隆抗体及研究LMG的新型、快速检测方法奠定了基础。(本文来源于《职业与健康》期刊2016年14期)

刘书贵,白野,尹怡,朱新平,单奇[4](2015)在《药浴条件下孔雀石绿及无色孔雀石绿在鳜体内的残留及消除规律》一文中研究指出为了解孔雀石绿(MG)及无色孔雀石绿(LMG)在鳜体内的残留和消除规律,达到对MG的禁用监控,本实验将初始体质量为(15±5)g的鳜在1 000μg/L孔雀石绿中药浴1 min后,再转移到清水中养殖,采用液相色谱串联质谱法测定鳜肌肉组织中MG及LMG的残留量。清水养殖过程中,在0~6 h范围内,肌肉中MG的残留量急剧下降,到12 h降为(5.42±4.32)μg/kg。从12~30 h范围内MG的残留量呈现上升趋势,而随后逐渐降低,到240 h后残留量低于检测限(0.5μg/kg)。LMG在0~30 h范围内随时间波动式上升到(56.54±4.82)μg/kg。在30~72 h范围内LMG的残留量急剧下降至(3.40±6.82)μg/kg,而随后缓慢下降,到960 h后残留量低于检测限(0.5μg/kg)。本研究可为加强MG的监督和执法管理工作提供参考依据,为水产品质量安全风险评估提供技术支撑。(本文来源于《中国渔业质量与标准》期刊2015年06期)

尹怡,白野,刘书贵,戴晓欣,陈昆慈[5](2015)在《阳性饵料鱼投喂模式下孔雀石绿及代谢物无色孔雀石绿在鳜体内的残留消除规律》一文中研究指出为了解鳜(Siniperca chuatsi)食用含有孔雀石绿(malachite green,MG)的饵料鱼后,其体内MG及其代谢物无色孔雀石绿(leucomalachite green,LMG)的残留消除规律,以期为孔雀石绿的监管提供基础数据,本实验模拟了自然养殖条件,对饲养于池塘网箱中的鳜连续投喂10 d经1 mg/L MG溶液浸泡2 min后的鲮(Cirrhinus molitorella),投喂量为5%(m/m),于停药后0、6、12 h及1、3、6、10、15、20、30、40、50、70、90、120、150和180 d采集鳜肌肉样品,各采集点随机取6尾以上鳜,采用液相色谱串联质谱法测定鳜肌肉中MG和LMG的残留量。结果发现,阳性饵料鱼投喂结束后,鳜体内未检出MG,LMG残留浓度也较低,在0 h鳜肌肉中LMG的浓度为8.62μg/kg,随后缓慢降低,10 d时鳜肌肉中检测不到LMG。本研究表明,养殖过程中,阳性饵料鱼体内的MG会通过食物链传递给鳜,造成鳜体内LMG检出,建议执法部门对鳜的饵料鱼进行监控,以确保鳜的食用安全。(本文来源于《中国渔业质量与标准》期刊2015年05期)

陈永平,张素青,李春青,李连庆,马丹[6](2013)在《不同水产品中有色和无色孔雀石绿的降解动力学研究》一文中研究指出目的研究不同水产品基质中有色和无色孔雀石绿的降解规律。方法样品经提取净化后,用HPLC进行检测,结果用SPSS软件、降解动力学软件进行分析。结果叁种基质中有色和无色孔雀石绿降解反应均符合准一级反应动力学。在10、50、100μg/kg叁个添加水平下,叁种基质中有色孔雀石绿平均降解率分别为57.9%、48.0%、23.0%,无色孔雀石绿平均降解率分别为46.6%、43.4%、19.8%。添加浓度为50μg/kg的鲤鱼基质,采用自然解冻时有色和无色孔雀石绿降解速率常数分别为K(50μg/kg)=0.00338d?1,K(50μg/kg)=0.00268d-1,采用微波解冻方式时有色和无色孔雀石绿降解速率常数分别为K(50μg/kg)=0.00359d?1,K(50μg/kg)=0.00321d?1。实际样品中无色孔雀石绿降解速率常数K(111.2μg/kg无色,鲤鱼)=0.000614d?1,K(50μg/kg无色,鲤鱼)=0.00125d?1。结论有色孔雀石绿较无色孔雀石绿降解快,低浓度比高浓度降解快;两种解冻方式对有色和无色孔雀石绿降解影响较小;实际样品中无色孔雀石绿降解速率常数均比空白基质中添加无色孔雀石绿降解慢。(本文来源于《食品安全质量检测学报》期刊2013年01期)

张秀妍,马琳,王慧龙[7](2013)在《液质联用法测定水产品中孔雀石绿和无色孔雀石绿的残留量》一文中研究指出优化了液相色谱-串联质谱法测定水产品中孔雀石绿和无色孔雀石绿残留量的检测方法。样品经匀浆、萃取、净化和浓缩后,用2mL的乙腈-5mmol/L乙酸铵溶液(1+1)定容,采用液相色谱-叁重四级杆串联质谱仪、多反应监测扫描模式(MRM)检测和同位素内标法定量。孔雀石绿和无色孔雀石绿检测的线性范围为0.25~10.0ng/mL,检出限均为0.50μg/kg。在加标量为2.50μg/kg时,样品加标平均回收率分别为98.1%和93.4%,相对标准偏差(RSD)小于10%,满足水产品中孔雀石绿和无色孔雀石绿残留量的检测要求。(本文来源于《现代科学仪器》期刊2013年01期)

陈力[8](2012)在《无色孔雀石绿残留快速检测技术的建立及应用》一文中研究指出孔雀石绿(Malachite Green,MG)化学名为四甲基代二氨基叁苯甲烷,分子式为C_(23)H_(25)ClN_2,又名碱性绿、孔雀绿或者中国绿,属叁苯甲烷类染料,孔雀石绿在水生动物体内会很快代谢成无色孔雀石绿。孔雀石绿及其代谢产物无色孔雀石绿成为重大的食品安全隐患。目前,孔雀石绿被我国被列为禁用渔药,世界其他各国,1992年加拿大就已经禁止孔雀石绿及无色孔雀石绿作为渔场杀菌剂;美国政府给出了严格的规定,禁止在食用水产品中检出孔雀石绿及其代谢产物无色孔雀石绿;2002年6月,欧盟政府颁布了相关法令,禁止在任何渔场中违禁使用孔雀石绿。2002年5月,中国政府将孔雀石绿列入《食品动物禁用的兽药及其化合物清单》中,禁止孔雀石绿用于所有食品动物的养殖及运输过程。尤其是无色孔雀石绿,其与孔雀石绿相比在水产品中的残留量更多,残留时间较更长,因此,建立水产品中无色孔雀石绿的快速检测技术已刻不容缓具有更加重要的意义。目前无色孔雀石绿的检测方法主要有薄层色谱法(TLC)、分光光度法、高效液相色谱法(HPLC)等。这些方法操作繁琐、仪器价格昂贵,需要专业的技术人员,而且不适合现场大规模的检测。以免疫学方法为基础的快速检测方法,具有快速、灵敏、价格低廉、适合现场大规模检测等优点,是目前公认最适合作为药物残留检测的快速筛选方法之一。酶联免疫检测试剂盒作为一种快速、灵敏、不需要任何仪器的检测技术可作为无色孔雀石绿的药物残留现场检测的一种重要的初筛手段。本实验通过合成无色孔雀石绿的人工抗原,免疫Balb/c小鼠后,通过采集免疫小鼠的脾脏细胞,利用杂交瘤实验技术制备了可用于检测无色孔雀石绿的单克隆抗体,并利用得到的特异性强的单克隆抗体制备了无色孔雀石绿的酶联免疫检测试剂盒。首先,利用混酸硝化还原法对无色孔雀石绿进行改造,获得氨基无色孔雀石绿(NH_2-LMG);同时,采用结构类似物副品红(PA),然后采用改进的碳二亚胺(carbodiimide)法制备了2种不同无色孔雀石绿完全抗原记作LMG-BSA和PA-BSA,通过紫外分光光度计扫描、聚丙烯酰胺SDS-PAGE凝胶电泳、质谱分析等方法对无色孔雀石绿完全抗原LMG-BSA和PA-BSA进行鉴定。结果表明:紫外扫描都发现了峰的漂移;PA-BSA偶联物质谱图中可观察到分子量为78180的高分子化合物。对比BSA的分子量和PA的分子量,可以判断偶联成功且偶联比率约为37:1,LMG-BSA偶联物质谱图中可观察到分子量为68759的高分子化合物。对比BSA的分子量和NH2-LMG的分子量,可以判断偶联成功且偶联比率约为7:1,利用LMG-BSA和PA-BSA免疫小鼠,得到的血清效价均为10~5以上,表明制备得到的LMG-BSA和PA-BSA偶联物均可以用于孔雀石绿及其代谢产物无色孔雀石绿人工抗原的制备。将LMG-BSA和PA-BSA偶联物分别免疫5只小白鼠,加强免疫后获得多抗血清,分别采用LMG-OVA和PA-OVA作为包被原进行血清效价测定,结果表明各抗体血清的效价均高于10~5。实验中选取血清效价最高的BALB/C小鼠用于细胞融合。采用杂交瘤技术将脾脏与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合。然后采用间接ELISA以及间接竞争ELISA法对杂交瘤细胞进行阳性克隆的筛选,同时利用有限稀释法进行3次亚克隆,最终筛选出4株稳定的可分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株,LMG-BSA免疫获得两株分别是B8、D5,PA-BSA免疫获得两株分别是E9和H-6。最后通过腹水大量制备单克隆抗体,采用饱和过硫酸铵法纯化获得单克隆抗体。对单克隆抗体的特性鉴定结果表明:这四株单克隆抗体的亲和力能达到10~8L/mol,均属于高亲和力的单克隆抗体,通过建立标准曲线,四株单克隆抗体B8、D5、E9和H6的最低检测限分别为5.61μ g/L、3.98μ g/L、4.62μ g/L和12.04μ g/L,均属于高灵敏的抗体;同时单克隆抗体的特异性良好,均可用于检测水产品中无色孔雀石绿残留的酶联免疫试剂盒的开发。本实验采用过碘酸钠法,对实验合成的完全人工抗原PA-BSA进行了辣根过氧化物酶的标记,成功的制备得到了辣根过氧化物酶标记PA-BSA,通过紫外分光光度计和ELISA实验实际操作,对制备得到的HRP酶标记抗原进行了鉴定,实验鉴定的结果表明,HRP酶标记抗原的效果良好,可用于ELISA试剂盒的建立。以辣根过氧化物酶标记的完全抗原为基础,成功的建立了酶联免疫检测试剂盒,并对其检测性能进行测定,在实验室建立前处理条件下,该酶联免疫检测试剂盒最低检测限为370ng/L,能够用于水产品中无色孔雀石绿的残留检测。综上,本实验制备的无色孔雀石绿酶联免疫试剂盒可用于水产品中无色孔雀石绿药物残留的现场检测。(本文来源于《上海海洋大学》期刊2012-04-05)

陈力,胡鲲,姜有声,黄宣运,安健[9](2011)在《应用改良的碳二亚胺法制备无色孔雀石绿完全抗原及鉴定》一文中研究指出为完善无色孔雀石绿的免疫检测方法,通过改良的碳二亚胺法,改造无色孔雀石绿结构类似物副品红半抗原。经过紫外分光法、十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、质谱法鉴定,偶联反应成功,且偶联比最高达37∶1。以副品红—牛血清白蛋白偶联物为完全抗原免疫Balb/c小鼠,产生针对无色孔雀石绿的多克隆抗体,效价可达6.25×105;取抗体与无色孔雀石绿进行竞争抑制测定,IC50可以达到11.8 mg/L。该抗体与孔雀石绿及副品红存在交叉反应,交叉反应率均为100%。(本文来源于《淡水渔业》期刊2011年06期)

陈力,杨先乐[10](2011)在《2种不同无色孔雀石绿单克隆抗体的制备》一文中研究指出制备无色孔雀石绿(LMG)单克隆抗体,并分析其生物学特性,为建立LMG残留的免疫学检测方法奠定基础。通过改进的碳二亚胺法制备无色孔雀石绿-牛血清白蛋白偶联物(LMG-BSA)与副品红-牛血清白蛋白偶联物(PA-BSA),用紫外扫描、质谱法方法鉴定偶联物。利用制备的LMG-BSA偶联物与PA-BSA偶联物作为免疫原,免疫4~5周龄Balb/c小鼠,用杂交瘤技术制备LMG单克隆抗体,并对其效价、亲和力、灵敏度和特异性等进行鉴定。LMG-BSA与PA-BSA的偶联比分别为7:1和37:1;经间接酶联免疫吸附(ELISA)法筛选,由以上两种抗原各获得1株杂交瘤细胞,分别命名为L-1、P-1。这2株细胞株分泌的单克隆抗体经纯化后,经测定效价分别为1.25×105和6.25×106,亲和力常数分别为4.92×109和1.44×108 L/mol,对2株抗体进行竞争抑制测定,其IC50分别可以达到8.03和10.5μg/L。L-1分泌的单克隆抗体仅与孔雀石绿存在交叉反应,交叉反应率为100%;P-1分泌的单克隆抗体与孔雀石绿及副品红均存在交叉反应,交叉反应率分别为80%与100%。(本文来源于《渔业科技创新与发展方式转变——2011年中国水产学会学术年会论文摘要集》期刊2011-11-15)

无色孔雀石绿论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的建立水产品中无色孔雀石绿(LMG)的悬液芯片检测法。方法向聚苯乙烯微球中加入14μg/100μl的LMG抗原,利用碳二亚胺法使抗原与微球偶联构成捕获抗原。加入含LMG的样品,使用1∶800倍稀释的LMG单克隆抗体及藻红蛋白标记的二抗,37℃孵育1 h后在悬液芯片仪上检测平均荧光强度值并计算样品中LMG的含量。结果在10~100ng/ml的线性范围内,所得体系的回归方程为ΔF=2 035.6c+22.4,r=0.999 8。方法的检出限为0.125 ng/ml,加标回收率在88.7%~93.6%之间,RSD为3.2%~7.6%。结论该方法的灵敏度高,特异性好,可作为一种高通量检测的新技术用于水产品中无色孔雀石绿残留的分析。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

无色孔雀石绿论文参考文献

[1].陈永平,张素青,李春青,高丽娜,时文博.液质质联用法测定淡水水体与沉积物中有(无)色孔雀石绿的改进[J].河北渔业.2017

[2].吴双,余淑苑,吕子全,柯跃斌.水产品中无色孔雀石绿的悬液芯片检测方法研究[J].环境与健康杂志.2017

[3].吴双,柯跃斌,吕子全,张艳炜.无色孔雀石绿人工抗原的制备及免疫原性鉴定[J].职业与健康.2016

[4].刘书贵,白野,尹怡,朱新平,单奇.药浴条件下孔雀石绿及无色孔雀石绿在鳜体内的残留及消除规律[J].中国渔业质量与标准.2015

[5].尹怡,白野,刘书贵,戴晓欣,陈昆慈.阳性饵料鱼投喂模式下孔雀石绿及代谢物无色孔雀石绿在鳜体内的残留消除规律[J].中国渔业质量与标准.2015

[6].陈永平,张素青,李春青,李连庆,马丹.不同水产品中有色和无色孔雀石绿的降解动力学研究[J].食品安全质量检测学报.2013

[7].张秀妍,马琳,王慧龙.液质联用法测定水产品中孔雀石绿和无色孔雀石绿的残留量[J].现代科学仪器.2013

[8].陈力.无色孔雀石绿残留快速检测技术的建立及应用[D].上海海洋大学.2012

[9].陈力,胡鲲,姜有声,黄宣运,安健.应用改良的碳二亚胺法制备无色孔雀石绿完全抗原及鉴定[J].淡水渔业.2011

[10].陈力,杨先乐.2种不同无色孔雀石绿单克隆抗体的制备[C].渔业科技创新与发展方式转变——2011年中国水产学会学术年会论文摘要集.2011

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