导读:本文包含了甲基结合域论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:甲基化Cp,G结合域蛋白2,胰腺癌,克隆形成,细胞增殖
甲基结合域论文文献综述
张尤历,王桢,何俊波,魏虹,葛璐[1]（2016）在《甲基化CpG结合域蛋白MBD2对胰腺癌细胞增殖和迁移的影响》一文中研究指出该文探讨甲基化Cp G结合域蛋白2(methyl-Cp G-binding domain protein 2,MBD2)对人胰腺癌细胞增殖和迁移的影响。将干扰质粒MBD2 sh RNA转染入MBD2高表达的Pa Tu8988细胞和SW1990细胞中,运用CCK-8法检测细胞的增殖活性并绘制生长曲线,克隆形成实验检测细胞克隆形成率,Transwell检测细胞迁移率。结果显示,下调MBD2后,Pa Tu8988细胞中MBD2基因的表达量明显降低,细胞增殖减慢,克隆形成率降低,细胞迁移率减少;在SW1990细胞中下调MBD2基因后,得到类似结果。由此说明,沉默MBD2基因可以抑制胰腺癌细胞Pa Tu8988和SW1990的增殖和迁移,为进一步研究MBD2在胰腺癌细胞增殖与迁移中的作用机制奠定了基础。(本文来源于《中国细胞生物学学报》期刊2016年02期）
周一青,何俊琳,陈雪梅,王应雄,刘学庆[2]（2014）在《小鼠围着床期子宫内膜甲基化CpG结合域蛋白2的表达规律》一文中研究指出为研究甲基化CpG结合域蛋白2(methyl-CpG binding domain protein 2,MBD2)在围植入期小鼠子宫内膜的表达规律,通过采用实时荧光定量PCR(Real-time fluorescence quantitative PCR,qPCR)、Western blot和免疫组化技术检测未孕小鼠(d0)和不同孕天小鼠子宫MBD2的表达情况。qPCR结果显示,d0至d7的小鼠子宫内膜组织均有MBD2 mRNA表达,在d5至d7高表达。MBD2蛋白在子宫内膜的表达规律与qPCR结果相符。MBD2蛋白在孕d1到d4中度表达于腔上皮、腺上皮和基质细胞,在d5至d7基质细胞表达增强,主要表达于蜕膜区。假孕小鼠子宫内膜中,MBD2在腔上皮、腺上皮和基质细胞中中度表达,d5至d7基质细胞表达明显减弱。动物模型中,宫角注射MBD2基因反义寡聚脱氧核苷酸,可抑制MBD2的表达,降低人工诱导蜕膜化反应和蜕膜化标志物PRL的表达。MBD2在早孕小鼠子宫内膜的表达模式提示其可能参与了蜕膜化过程。(本文来源于《中国细胞生物学学报》期刊2014年07期）
徐建,潘世扬,许雨乔,孙瑞红,黄蕾[3]（2012）在《甲基化CpG结合域重组蛋白的表达与鉴定》一文中研究指出目的:在大肠杆菌中表达甲基化CpG结合域(methyl-CpG-binding domain,MBD)重组蛋白。方法:对人甲基化CpG结合蛋白2(methyl-CpG-binding protein 2,Mecp2)的MBD区行密码子优化,将人工合成的DNA克隆至原核表达载体pGS21a,在大肠杆菌E.coli Rosetta(DE3)中诱导表达,通过SDS-PAGE和Western blot鉴定蛋白表达;镍亲和层析柱纯化重组蛋白。表面等离子共振分析重组MBD蛋白与甲基化DNA的结合能力。结果:酶切和核酸测序证实,成功构建了含密码子优化的MBD基因的原核表达载体。SDS-PAGE和Western blot结果显示,MBD重组蛋白在大肠杆菌中得到表达。亲和层析法纯化后获得了相对分子量为38 000的MBD重组蛋白。SPR分析显示MBD重组蛋白能特异结合甲基化DNA。结论:成功构建含密码子优化的MBD基因的原核表达载体,MBD重组蛋白能在大肠杆菌中表达。(本文来源于《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊2012年11期）
龙江,刘辰,刘亮,徐近,虞先浚[4]（2010）在《甲基化CpG结合域蛋白1和VIMENTIN在胰腺癌中的表达及其临床意义》一文中研究指出目的探讨甲基化CpG结合域蛋白1(MBD1)和VIMENTIN蛋白在胰腺癌组织中的表达情况及其与胰腺癌临床病理特征的关系。方法采用免疫组织化学方法检测40例经手术切除的胰腺癌组织和10例良性肿瘤患者的正常胰腺组织中MBD1和VIMENTIN蛋白的表达。结果在40例胰腺癌标本中有28例(70.0%)MBD1呈阳性表达,16例(40.0%)VIMENTIN蛋白呈阳性表达,显着高于正常胰腺组织标本的1例(1/10)和0例(P值均<0.05)。MBD1与VIMENTIN蛋白的阳性表达呈正相关(r=0.423,P=0.012)。在有淋巴结转移的胰腺癌中的MBD1表达阳性率显着高于无淋巴结转移的胰腺癌(P=0.023)。在病理分化较差和有淋巴结转移的胰腺癌中的VIMENTIN表达阳性率显着高于病理分化较好及无淋巴结转移的胰腺癌(P值分别=0.027、0.003)。结论胰腺癌组织中存在MBD1和VIMENTIN的过表达,并与病理分级和淋巴结转移有关,MBD1可能通过调控甲基化过程,干预VIMENTIN的表达,在胰腺癌的发生、发展中起到重要作用。(本文来源于《上海医学》期刊2010年11期）
张春晓,Paul,Soloway,赵茹茜[5]（2010）在《甲基化CpG结合域蛋白的原核表达、纯化及应用》一文中研究指出高甲基化的CpG岛所致基因转录失活已经成为表观遗传学研究的重要内容。传统的以亚硫酸盐为基础的检测方法都需要将DNA变性为单链,而甲基化CpG结合蛋白(methyl-CpG-binding domain protein,MBD1)能够在DNA处于双链的情况下,与甲基化CpG岛特异性结合。本试验目的是利用MBD1检测基因组DNA甲基化的组织分布特异性、品种差异以及特殊处理对甲基化产生的影响。将重组质粒1×MBD-pET30b~+转化到大肠(本文来源于《全国动物生理生化第十一次学术交流会论文摘要汇编》期刊2010-07-01）
朱小华,李锋,陈国梁,杨永生,林尽染[6]（2009）在《甲基CpG结合域四聚体蛋白的原核表达、纯化及鉴定》一文中研究指出目的在大肠埃希菌中表达甲基CpG结合域四聚体蛋白,并对其进行纯化和鉴定。方法将重组表达质粒4×MBD-pET30b+转化大肠埃希菌DH5a克隆扩增并测序鉴定后,转化大肠埃希菌BL21(DE3)后接种于LB培养基中,异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白的表达,表达产物经Ni-NTA亲和层析纯化,通过SDS-PAGE和Western blot鉴定蛋白表达,用此蛋白免疫染色人胚肾细胞后用荧光显微镜观察。结果克隆质粒测序结果与理论预期完全一致,SDS-PAGE显示在大肠埃希菌中表达出相对分子量为46000的目标蛋白,Western blot显示目标蛋白带有His融合标签(氨基端)和HA标签(羧基端)。荧光显微镜观察显示MBD蛋白能与细胞内的甲基化CpG基序特异性结合。结论成功表达并纯化了具有免疫原性的甲基CpG结合域四聚体蛋白,为今后进一步研究DNA甲基化奠定了基础。(本文来源于《复旦学报(医学版)》期刊2009年04期）
陈雅婷,张进,杜颖颖,王慧君,马端[7]（2008）在《利用甲基化CpG结合域富集甲基化DNA》一文中研究指出目的利用甲基化CpG结合蛋白(MBD)与甲基化CpG岛特异性结合并相互作用的特性,建立一种高效、简便富集甲基化DNA序列的方法。方法首先应用PCR扩增获得MeCP2基因的MBD编码序列,在大肠杆菌中诱导表达重组的GST-MBD,采用Glutathione Sepharose 4B(GSH-Beads)获得了高纯度的GST-MBD。并在不同盐浓度缓冲液体系中加入一定量用甲基化酶M.SssI处理过的DNA片段。结果不同NaCl盐浓度和pH值可以影响甲基化程度不同的DNA结合量,最佳结合条件是400～500mMNaCl,pH7.9。结合的甲基化DNA可以用高盐浓度(1M)进行有效洗脱。结论该方法能够充分区分甲基化与非甲基化DNA,可以用于无创性产前诊断。(本文来源于《中国产前诊断杂志(电子版)》期刊2008年01期）
狄扬,龙江,傅德良,虞先浚,金忱[8]（2006）在《甲基化CpG结合域蛋白1在胰腺癌组织中的表达和意义》一文中研究指出目的:检测甲基化CpG结合域蛋白1(MBD1)蛋白在胰腺癌组织中的表达,并探讨其临床意义。方法:应用S-P免疫组织化学法检测38例胰腺癌、17例胰腺癌旁组织、8例胰腺良性肿瘤、3例慢性胰腺炎和6例正常胰腺组织中MBD1蛋白的表达。结果:MBD1在胰腺癌组织、正常胰腺组织、胰腺良性肿瘤、胰腺癌旁组织中的表达阳性率分别是76.32%(29/38)、16.67%(1/6)、25.0%(2/8)、29.41%(5/17),3例慢性胰腺炎标本中未见表达;胰腺癌阳性表达率明显高于正常胰腺、慢性炎症、良性肿瘤和癌旁对照组织(P<0.05)。MBD1表达水平的高低与病人的性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、分化程度和TNM分期无显着性差异(P>0.05);而与淋巴结转移密切相关,有淋巴结转移者胰腺癌组织MBD1的表达阳性率为92.31%(24/26),高于无淋巴结转移者的41.67%(5/12)(P<0.01)。结论:胰腺癌中MBD1呈高水平表达,并与胰腺癌的高转移侵袭活性有关,其机制可能与MBD1介导抑制多个甲基化相关抑癌基因的表达有关。MBD1的转录调控机制有待进一步研究。(本文来源于《外科理论与实践》期刊2006年01期）
龙江[9]（2004）在《胰腺癌甲基化CpG结合域蛋白MBD1的表达、意义及其转录调控研究》一文中研究指出作为一个重要的转录调控因子,胰腺癌中甲基化 CpG 结合域蛋白 1(methyl-CpG binding domain protein 1 ,MBD1)介导的甲基化转录抑制作用可能是造成众多抑癌基因转录表达下降,以至失活的重要原因。探讨 MBD1 在胰腺癌中的表达、调控及其作用有重要的研究价值。 实验研究通过 RT-PCR 检测 MBD1mRNA 在两株胰腺癌细胞株AsPC-1 和 BxPC-3 中的表达,发现均有较高水平的基础表达。BxPC-3为原发癌细胞株,而 AsPC-1 具有很高的淋巴结转移侵袭活性,并同时具有原发癌的生物学特性,因此选择 AsPC-1 细胞株作为研究平台,探讨 MBD1 的表达、意义和调控。我们利用 RNA 干扰技术,设计合成了针对 MBD1 基因的 siRNAs,并在其上下游分别引入 BgLⅡ和HindⅢ限制性酶切位点,通过双酶切连接反应将 MBD1siRNAs 插入质粒载体 Rotro Super 多克隆位点中的 BgLⅡ和 HindⅢ之间,从而成功构建 MBD1siRNAs 真核表达质粒 Rotro Super-MBD1siRNAs,应用RT-PCR 行酶切鉴定,结果显示 MBD1siRNAs 能成功载入质粒。采用脂 质 体 介 导 的 方 法 将 MBD1siRNAs 表 达 质 粒 转 染 胰 腺 癌 细 胞 系AsPC-1,通过 G-418 的筛选获得稳定表达 MBD1siRNAs 的阳性克隆。 应用RT-PCR和Western-blot方法检测AsPC-1细胞中MBD1在基因水平和蛋白水平的表达变化,采用克隆形成实验和MTT法检测肿瘤细胞增殖能力,利用多点微列阵技术观察甲基化相关基因表达的变化。研究结果显示MBD1siRNAs表达质粒能显着抑制胰腺癌细胞AsPC-1中MBD1mRNA 的表达,且 MBD1在蛋白水平亦受到明显抑制;克隆形成实验和MTT测定生长曲线显示细胞生长受到显着抑制,表明MBD1siRNAs能抑制胰腺癌的细胞增殖能力,降低肿瘤细胞的独立生存能力;利用多点微列阵杂交发现在MBD1 mRNA表达下降的同时,其它甲基化相关抑癌基因CDH1、 RB和 E2F5表达上调恢复。 临床研究应用免疫组织化学法和RT-PCR技术分别从蛋白水平和基因水平检测证实MBD1在胰腺癌临床标本中的表达,并观察区域性动脉灌注化疗对MBD1表达的影响,研究结果表明MBD1蛋白在胰腺癌中的表达(阳性率 76.32%)明显高于正常胰腺、癌旁、慢性胰腺炎和胰腺良性肿瘤组织;RT-PCR同样显示MBD1mRNA在胰腺癌组织中的表达明显高于正常胰腺组织和癌旁对照组织(P<0.01)。MBD1的表达水平的高低与性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、分化程度和TNM分期之间无显着性差异;而有淋巴结转移的胰 4<WP=5>博士论文 第 5 页 共 100 页腺癌MBD1表达(阳性率92.31%)明显高于无淋巴结转移者(41.67%),其中7例强阳性表达的胰腺癌病理证实均有16组(腹主动脉旁)淋巴结的转移,说明MBD1与胰腺肿瘤转移和侵袭活性密切相关,检测MBD1对预测胰腺癌患者的预后有指导作用。区域动脉灌注介入化疗能明显抑制MBD1基因的表达(P<0.01)。 总之,研究表明MBD1在胰腺癌中的表达明显增高,并与胰腺癌转移侵袭活性相关,是致癌密切相关基因。MBD1siRNAs能抑制胰腺癌AsPC-1细胞株MBD1的表达及其增殖能力,并可上调其它甲基化相关抑癌基因表达,MBD1可能成为一个新的基因治疗靶点。区域性动脉灌注化疗明显抑制MBD1基因的表达,是一有效的临床治疗措施。(本文来源于《复旦大学》期刊2004-05-01）
甲基结合域论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为研究甲基化CpG结合域蛋白2(methyl-CpG binding domain protein 2,MBD2)在围植入期小鼠子宫内膜的表达规律,通过采用实时荧光定量PCR(Real-time fluorescence quantitative PCR,qPCR)、Western blot和免疫组化技术检测未孕小鼠(d0)和不同孕天小鼠子宫MBD2的表达情况。qPCR结果显示,d0至d7的小鼠子宫内膜组织均有MBD2 mRNA表达,在d5至d7高表达。MBD2蛋白在子宫内膜的表达规律与qPCR结果相符。MBD2蛋白在孕d1到d4中度表达于腔上皮、腺上皮和基质细胞,在d5至d7基质细胞表达增强,主要表达于蜕膜区。假孕小鼠子宫内膜中,MBD2在腔上皮、腺上皮和基质细胞中中度表达,d5至d7基质细胞表达明显减弱。动物模型中,宫角注射MBD2基因反义寡聚脱氧核苷酸,可抑制MBD2的表达,降低人工诱导蜕膜化反应和蜕膜化标志物PRL的表达。MBD2在早孕小鼠子宫内膜的表达模式提示其可能参与了蜕膜化过程。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
甲基结合域论文参考文献
[1].张尤历,王桢,何俊波,魏虹,葛璐.甲基化CpG结合域蛋白MBD2对胰腺癌细胞增殖和迁移的影响[J].中国细胞生物学学报.2016
[2].周一青,何俊琳,陈雪梅,王应雄,刘学庆.小鼠围着床期子宫内膜甲基化CpG结合域蛋白2的表达规律[J].中国细胞生物学学报.2014
[3].徐建,潘世扬,许雨乔,孙瑞红,黄蕾.甲基化CpG结合域重组蛋白的表达与鉴定[J].南京医科大学学报(自然科学版).2012
[4].龙江,刘辰,刘亮,徐近,虞先浚.甲基化CpG结合域蛋白1和VIMENTIN在胰腺癌中的表达及其临床意义[J].上海医学.2010
[5].张春晓,Paul,Soloway,赵茹茜.甲基化CpG结合域蛋白的原核表达、纯化及应用[C].全国动物生理生化第十一次学术交流会论文摘要汇编.2010
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[9].龙江.胰腺癌甲基化CpG结合域蛋白MBD1的表达、意义及其转录调控研究[D].复旦大学.2004