王娅:伯氏疏螺旋体TaqMan-MGB探针荧光定量PCR方法的建立及对新疆地区蜱的检测论文

王娅:伯氏疏螺旋体TaqMan-MGB探针荧光定量PCR方法的建立及对新疆地区蜱的检测论文

本文主要研究内容

作者王娅,叶锋,刘丽娅,谢彩云,谷文喜,钟旗,易新萍,古丽扎提塔力甫汗,马晓菁(2019)在《伯氏疏螺旋体TaqMan-MGB探针荧光定量PCR方法的建立及对新疆地区蜱的检测》一文中研究指出:为建立一种TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR方法,来快速、特异地检测伯氏疏螺旋体,根据GenBank发表的伯氏疏螺旋体16SrRNA序列,应用分子生物学软件进行比对,选取保守序列设计特异性引物及TaqMan-MGB探针,并优化荧光定量PCR反应体系及条件,分别对大肠杆菌、沙门氏菌及钩端螺旋体进行扩增;构建伯氏疏螺旋体标准株16SrRNA基因片段阳性质粒,10倍系列稀释后进行real-time PCR扩增,测定该方法的敏感性。结果可见:仅伯氏疏螺旋体出现阳性扩增,而大肠杆菌、沙门氏菌及钩端螺旋体扩增均为阴性;该方法对阳性质粒的检测限约为100 copies/μL。应用该方法对新疆地区的100份蜱DNA样本进行检测,发现7份为伯氏疏螺旋体阳性。结果表明,本研究建立的TaqMan-MGB探针荧光定量PCR方法具有较高的特异性及良好的敏感性,为今后伯氏疏螺旋体的快速诊断及流行病学调查提供了技术支撑。

Abstract

wei jian li yi chong TaqMan-MGBtan zhen shi shi ying guang ding liang PCRfang fa ,lai kuai su 、te yi de jian ce bai shi shu luo xuan ti ,gen ju GenBankfa biao de bai shi shu luo xuan ti 16SrRNAxu lie ,ying yong fen zi sheng wu xue ruan jian jin hang bi dui ,shua qu bao shou xu lie she ji te yi xing yin wu ji TaqMan-MGBtan zhen ,bing you hua ying guang ding liang PCRfan ying ti ji ji tiao jian ,fen bie dui da chang gan jun 、sha men shi jun ji gou duan luo xuan ti jin hang kuo zeng ;gou jian bai shi shu luo xuan ti biao zhun zhu 16SrRNAji yin pian duan yang xing zhi li ,10bei ji lie xi shi hou jin hang real-time PCRkuo zeng ,ce ding gai fang fa de min gan xing 。jie guo ke jian :jin bai shi shu luo xuan ti chu xian yang xing kuo zeng ,er da chang gan jun 、sha men shi jun ji gou duan luo xuan ti kuo zeng jun wei yin xing ;gai fang fa dui yang xing zhi li de jian ce xian yao wei 100 copies/μL。ying yong gai fang fa dui xin jiang de ou de 100fen pi DNAyang ben jin hang jian ce ,fa xian 7fen wei bai shi shu luo xuan ti yang xing 。jie guo biao ming ,ben yan jiu jian li de TaqMan-MGBtan zhen ying guang ding liang PCRfang fa ju you jiao gao de te yi xing ji liang hao de min gan xing ,wei jin hou bai shi shu luo xuan ti de kuai su zhen duan ji liu hang bing xue diao cha di gong le ji shu zhi cheng 。

论文参考文献

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自中国动物检疫的王娅,叶锋,刘丽娅,谢彩云,谷文喜,钟旗,易新萍,古丽扎提塔力甫汗,马晓菁,发表于刊物中国动物检疫2019年11期论文,是一篇关于伯氏疏螺旋体论文,探针论文,荧光定量论文,检测论文,新疆论文,中国动物检疫2019年11期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自中国动物检疫2019年11期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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