导读:本文包含了标记的探针论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:分子探针,纳米粒子,放射性同位素,放射性核素显像
标记的探针论文文献综述
戴五敏,易贺庆,李林法[1]（2019）在《放射性核素标记多功能纳米探针及其在PET显像中的研究进展》一文中研究指出分子影像学是精准医学的叁大支撑技术之一,其借助分子探针,运用影像设备实时监测活体细胞、组织乃至整个机体在细胞或分子水平发生的生理、生化事件[1]。目前常用的分子影像探针包括常规的非特异性造影剂、带有特异分子配体的分子探针及纳米探(本文来源于《中国医学影像学杂志》期刊2019年08期）
张凯丽,孙雨晴,王宇飞,赵虹,郝宇卉[2]（2019）在《地高辛标记Nkx2.1基因RNA探针的制备及应用》一文中研究指出目的制备地高辛(digoxigenin,DIG)标记的Nkx2. 1基因RNA探针,用于小鼠胚胎早期神经管发育关键时期Nkx2. 1基因表达的检测。方法巢式PCR法扩增Nkx2. 1基因,将其克隆至pGEM-T载体;以其为模板,通过Nkx2. 1特异性引物,PCR扩增RNA探针转录模板;采用T7 RNA聚合酶,制备DIG标记的正义、反义Nkx2. 1 RNA原位杂交探针。经全胚胎原位杂交(whole-mount in situ hybridization,WM-ISH)技术分析胚胎8. 5、9. 5、10. 5 d小鼠体内Nkx2. 1基因的表达情况。结果制备的探针浓度为1 521. 986 ng/mL,纯度A260/280=2. 39。Nkx2. 1基因反义探针能高效检测到Nkx2. 1基因在胚胎8. 5、9. 5及10. 5 d小鼠神经系统中表达,正义探针未能检测到表达信号。结论成功制备了特异高效的DIG标记的Nkx2. 1基因RNA原位杂交探针,为进一步研究Nkx2. 1基因在小鼠胚胎组织中的表达,探索其在神经管发育中的作用机制奠定了基础。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2019年08期）
王方方[3]（2019）在《无标记稀土上转换纳米探针的构建及生物分析应用研究》一文中研究指出稀土上转换发光是基于镧系离子丰富的电子能级,通过吸收多个长波低能光子而发射出短波高能光子的过程。镧系元素掺杂的上转换发光纳米材料由于具有在低能近红外光(NIR)激发下不存在自发荧光、anti-Stokes位移大和发光寿命长等优点而引起了研究者的广泛关注。稀土上转换发光纳米材料的诸多性质,决定了它在很多方面的应用,如太阳能转换、纳米印刷、近红外光防伪和生物传感与成像等。本论文主要以稀土离子f-f跃迁过程的上转换发光为检测信号开展其在生物传感与成像领域的应用研究。由于良好的生物相容性以及NIR独特的光频上转换能力,它们有可能在生物体系中达到较高的检测灵敏度。然而,绝大多数情况下上转换纳米材料的发光与体系的生化特性没有直接关系。因此,为了在生物化学识别过程(化学传感中的基本过程)中实现目标物的高选择性检测或成像,上转换纳米材料必须与合适的识别单元如有机染料结合使用。本论文我们选择将有机染料和金属有机配合物等识别单元与上转换纳米粒子(UCNPs)结合,设计了一系列新型上转换纳米传感平台,利用上转换发光为检测信号开展了目标分析物的生物传感与成像研究。主要内容如下:第一章绪论本章主要总结了稀土上转换发光纳米材料的简介、发光机理、合成方法、构建发光传感器的策略、对不同分析物的生物传感与检测以及当前存在的问题和未来的发展趋势。最后,总结了本论文的研究意义及展望。第二章基于无标记上转换纳米粒子探针连续检测Cu~(2+)、焦磷酸根和碱性磷酸酶本章采用一步溶剂热法合成了一种支链聚乙烯亚胺(PEI)修饰的NaGdF_4:Yb/Tm UCNPs,该NIR发光探针可基于"off-on-off"开关连续检测Cu~(2+)、焦磷酸根(P_2O_7~(4-),PPi)和碱性磷酸酶(ALP)。由于PEI与Cu~(2+)配位从而发生UCNPs到Cu~(2+)的能量转移使发光猝灭;Cu~(2+)与PPi之间的强亲和力形成Cu~(2+)-PPi复合物从而触发发光恢复;ALP可引起PPi水解导致Cu~(2+)-PPi复合物的解离和Cu~(2+)与PEI之间的重新结合,从而导致UCNPs的发光猝灭。该体系可以通过调节UCNPs发光的开和关,连续检测Cu~(2+)、PPi和ALP,检测限(LOD)分别为57.8 nM、184 nM和0.019 U/mL。由于NIR特征和良好的生物相容性,该探针成功用于活细胞内Cu~(2+)的成像。第叁章上转换纳米粒子-MoS_2纳米片组装体用于活细胞和斑马鱼体内活性氧成像的研究将纳米组装体应用于活细胞中进行生物成像,引起了科研工作者的广泛关注。本章通过将二硫化钼(MoS_2)纳米片和稀土UCNPs的结合,构建了一种高效、灵敏的可用于检测活细胞中活性氧(ROS)的发光探针。在此纳米组装体中,带负电的聚丙烯酸修饰的MoS_2纳米片可以通过静电作用与带正电的UCNPs进行结合。由于MoS_2纳米片具有优异的猝灭能力,从而导致UCNPs发光强度显着下降。相反,在ROS存在的情况下,通过与ROS的化学反应导致MoS_2纳米片分解,UCNPs的发光信号得到恢复。ROS介导的UCNPs-MoS_2纳米组装体的破环对ROS显示出优异的发光响应。该UCNPs-MoS_2纳米片组装体成功应用于细胞和斑马鱼体内ROS水平的监控。第四章阳离子花青发色团组装上转换纳米粒子用于活细胞和斑马鱼体内H_2S的传感与成像研究硫化氢(H_2S)水平升高与各种疾病密切相关。因此,H_2S的检测对于揭示其在这些疾病中的作用具有重要意义。在此,我们提出了一种基于巯基化反应检测H_2S的新型turn-on型探针Cy7-UCNPs。研究发现,当H_2S存在时Cy7-UCNPs的发光明显增强,并且在1-90μM浓度范围内表现出良好的线性关系(R~2=0.9952)。Cy7-UCNPs具有许多优良的性能,包括灵敏度高、选择性好和细胞毒性低并成功用于活细胞和肿瘤斑马鱼模型中H_2S的传感与成像。第五章基于内滤效应的比率型上转换发光探针用于检测抗坏血酸我们开发了基于UCNPs和方酸铁[SA-Fe(III)]之间内滤效应(IFE)的纳米传感体系,用于高灵敏和选择性检测抗坏血酸(AA)。在该体系中,Fe(III)可以快速(<1 min)与SA螯合生成SA-Fe(III)螯合物。UCNPs的蓝光发射带(400-500nm)与SA-Fe(III)的吸收带(400-750 nm)在很大程度上重迭,导致该范围内的发光猝灭,而800 nm处发光保持不变。当AA将Fe(III)还原为Fe(II)时,UCNPs400-500 nm处的蓝光显着回升。因此,可以基于SA-Fe(III)的形成构建比率型探针实现对AA的准确灵敏检测。在最佳条件下,I_(474)/I_(800)对AA呈现良好的线性响应,浓度范围为3-150μM,LOD为0.71μM。另外,该体系已成功用于实际样品中AA的检测。(本文来源于《华东师范大学》期刊2019-05-07）
葛跃伟,王淑美,张陆勇[4]（2019）在《无标记小分子探针技术与中药靶点发现》一文中研究指出靶点的确定是阐明中药作用机制的核心,是构建化学成分与药效作用相关性的关键。鉴于中药的多样性、化学成分的复杂性,传统的靶点筛选方法有所局限,靶点发现已成为中药机制研究的瓶颈。无标记小分子探针技术是化学蛋白组学领域的新兴技术,其突出特点为无需对小分子成分进行结构修饰与改造,普适于复杂的中药化学成分,同时该方法基于蛋白质组进行靶点筛选,利于发现中药作用的新靶点、新途径。鉴于该方法在中药研究中的应用潜力,该文综述了其分析原理与应用现状,总结了其一般性分析步骤,以促进该方法在中药化学成分靶点阐明中的应用。(本文来源于《中国中药杂志》期刊2019年19期）
朱华,刘特立,王风,蒋金泉,韩雪迪[5]（2019）在《~(64)Cu标记DKFZ-PSMA-617探针的制备、质控及体内分布的研究》一文中研究指出目的:利用医用回旋加速器固体靶系统制备PET核素~(64)Cu,进行前列腺特异性膜抗原(PSMA)分子探针DKFZ-PSMA-617(PSMA-617)研究。建立~(64)Cu-PSMA-617标记化合物生产及初步快速质量控制方法,为PSMA高表达肿瘤的PET显像及放射性免疫导向手术提供新型探针。方法:通过优化反应条件,实现固体靶制备的~(64)Cu对PSMA-617的快速标记与纯化。利用放射性薄层层析分析(Radio-thin layer chromatography, Radio-TLC)和放射性高效液相色谱(Radio-high performance liquid chromatography, Radio-HPLC),进行~(64)Cu-PSMA-617放化纯和稳定性检测。参考2015年《中国药典》进行~(64)Cu-PSMA-617的初步质量控制。通过静脉注射1.85 MBq的~(64)Cu-PSMA-617至Balb/c小鼠体内,进行该探针的体内分布研究。结果:~( 64)Cu-PSMA-617的标记率>96%,放化纯度>98%,标记化合物在多种缓冲液中放置24 h依然保持原有放化纯度。经过尾部静脉注射到小鼠体内后,放射性主要积累在肝脏/肾脏部位,符合该探针在生物体内的代谢行为。结论:本研究实现了~(64)Cu-PSMA-617探针的快速标记并建立了其质量控制方法,~(64)Cu-PSMA-617具有较好的理化性质,体内分布研究确认了其具有较好的生物学性质,该研究结果可为其进一步用于前列腺癌诊疗的临床转化奠定基础。(本文来源于《同位素》期刊2019年06期）
吴小环,刘文林,黄巧瑶,刘强[6]（2019）在《地高辛标记的斑马鱼酪氨酸羟化酶TH2基因RNA探针的制备与鉴定》一文中研究指出斑马鱼(zebrafish)在脊椎动物基因功能的研究中得到广泛应用,并且越来越多地应用到人类遗传疾病的研究中。基因测序发现在直系同源基因中,47%的人类基因与斑马鱼直向同源物具有一对一的关系[1]。此外,斑马鱼体形小、繁殖周期短,可在实验室中进行空间高效维护。在硬骨鱼进化上的基因组重复导致两个旁系同源的斑马鱼酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase, TH)编码基因TH1和TH2,其中TH1主要分布在脑内,TH2则主要分布(本文来源于《基础医学与临床》期刊2019年04期）
堵瑄[7]（2019）在《卤醇脱卤酶红外及荧光探针标记及其结构动力学研究初探》一文中研究指出卤醇脱卤酶不仅能够降解环境中存在的有机卤化物,还能合成具有手性的环氧化物和β-取代醇,其催化机理和广泛的应用前景近年来备受关注。卤醇脱卤酶的动态结构变化与其生物功能紧密相连,是卤醇脱卤酶发挥功能的重要结构基础,对其结构动力学的研究有助于揭示卤醇脱卤酶的催化反应机理,以及提升酶的改造效率。众所周知,光谱技术在研究酶蛋白结构的动态性方面具有广泛应用,相关研究需要在酶蛋白中嵌入合适的光谱探针,因此探针对酶蛋白的标记就显得尤为重要。本研究结合了生物学技术和光谱技术,将红外、荧光探针位点特异性的嵌入卤醇脱卤酶中,探针标记卤醇脱卤酶的位点不受局限,对所处的微环境非常敏感,且能精准地反映出酶蛋白动态结构的微小变化,在蛋白质结构动力学研究中具有显着优势。本研究应用密码子扩展法将非天然氨基酸Naek引入HheC的K140,K161,P184叁个位点,通过优化表达体系和亲和层析得到了迭氮基团修饰的酶蛋白,并进行了酶催化特性及红外光谱检测。实验结果表明:(1)184~+突变体的酶活最佳,并且具有与野生型相当的热稳定性、最适反应温度;(2)由于探针所处微环境的极性不同,K140,K161,P184叁个突变体的红外特征峰分别位于2131 cm~(-1),2137 cm~(-1),2183 cm~(-1)波数处,并且迭氮的峰位会随着溶液极性的强弱而变化;(3)高浓度盐酸胍溶液使酶蛋白结构趋向统一,其红外特征峰变窄,分布更为集中。然而,红外光谱检测氯离子结合后酶的构象变化不够灵敏,因此在后续实验中尝试用荧光手段探究卤离子对卤醇脱卤酶构象的影响在上述研究基础上,通过SPAAC环加成点击反应,将含有炔烃的化学荧光染料DBCO-CY_5位点特异性的连在卤醇脱卤酶上,进行了酶活力和荧光光谱检测;研究还通过定点突变构建了卤醇脱卤酶的单色氨酸突变体。实验结果表明:(1)卤醇脱卤酶的外源荧光嵌入效率可以达到49.03%,突变体在670 nm处有最大荧光发射峰,最大荧光强度为1469,并且点击反应过程不会损失酶活力;(2)在卤离子结合实验中,Cl~-和Br~-与卤醇脱卤酶的结合能够影响其外源相对荧光强度,而F~-却不能影响酶蛋白的外源荧光强度,这也说明184位点参与了酶蛋白在行使催化功能时的构象变化。综上所述,本研究成功构建了卤醇脱卤酶的红外和荧光探针,为后续研究卤醇脱卤酶的结构动力学奠定了基础。(本文来源于《电子科技大学》期刊2019-04-01）
张璐[8]（2019）在《~(99)Tc~m标记PSMA靶向分子探针对前列腺癌显像的实验研究》一文中研究指出目的:目前多种前列腺特异性膜抗原(prostate-specific membrane antigen,PSMA)靶向放射性示踪剂已成功用于临床PET/SPECT成像、放射性核素治疗以及引导转移性前列腺癌患者手术治疗,如~(99)Tc~m-MIP-1404、~(18)F-DCFPyL、~(68)Ga-PSMA-11、~(68)Ga/~(177)LU-PSMA-617、~(18)F-PSMA-1007、~(68)Ga/~(177)LU-PSMA-I&T、~(99)Tc~m-PSMA-I&S等。多数放射性示踪剂由放射性核素~(68)Ga/~(18)F标记,而~(99)Tc~m因为优良的物理特性,价格便宜,方便获取,~(99)Tc~m标记的放射性示踪剂也具有一定的优势。本文以G(Gly)GGC(Cys)作为螯合序列对PSMA(prostrate specific membrane antigen,PSMA)小分子抑制剂的核心基团Glutamate-urea-R进行修饰,并应用放射性核素~(99)Tc~m进行标记,制备单光子核素PSMA靶向分子影像探针,并对其进行质量控制,探讨该分子探针用于前列腺癌SPECT显像的可行性。方法:应用Fmoc/tBu多肽固相合成法合成GGGC-PSMA,并在室温条件下进行放射性核素的标记。用反相高效液相色谱法(reverse-phase high performance liquid chromatography,RT-HPLC)测定~(99)Tc~m-GGGC-PSMA的放化纯,并将该分子探针分别置于生理盐水及人新鲜血清试管中,于水浴箱内分别孵育1、2、4、6、8、12h,不同时间点均用RT-HPLC测定其放化纯,以检测探针的体外稳定性。选用前列腺癌细胞—22Rv1(PSMA~+)和PC-3(PSMA~-)细胞及前列腺癌动物模型进行实验研究。研究该分子探针在人前列腺癌22Rv1细胞(PSMA~+)及人前列腺癌PC-3细胞(PSMA~-)的摄取、滞留、内化及阻断情况,以了解该探针在体外的药代动力学及特异性;体外细胞饱和结合实验中,检测该分子探针对于PSMA阳性细胞的亲和力。采用静置贴壁法培养人前列腺癌22Rv1细胞(PSMA~+)及人前列腺癌PC-3细胞(PSMA~-),收集适量处于对数生长期的22Rv1和PC-3细胞,分别用生理盐水或PBS溶液制备0.2ml单细胞悬液,接种于SPF(specific pathogen free,无特定病原体)级BALB/c裸鼠右前肢外侧皮下,制备荷瘤裸鼠模型。待肿瘤直径约1.5cm时,选取肿瘤大小无明显差异的荷瘤裸鼠用于实验。将标记好的分子探针经尾静脉注射入荷瘤裸鼠体内,收集其尿液,应用RT-HPLC测定尿液中的放射性化学纯度,以检测~(99)Tc~m-GGGC-PSMA的体内稳定性。选取4只22Rv1细胞荷瘤裸鼠模型及3只PC-3细胞荷瘤裸鼠模型,经尾静脉注射~(99)Tc~m-GGGC-PSMA后4h,眼静脉取血,后颈椎脱臼处死,即刻取出心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胃、小肠、肌肉、骨骼、脑、肿瘤分别称重并测定其放射性计数,计算每克组织中放射性计数与标准源的比值即%ID/g,研究该分子探针在PSMA阳性动物模型及阴性动物模型的体内分布情况。选取5只22Rv1细胞荷瘤裸鼠模型及5只PC-3细胞荷瘤裸鼠模型,经尾静脉注射~(99)Tc~m-GGGC-PSMA,于注药后1、2、4、6、8h行SPECT显像,观察各组内随时间变化肿瘤部位放射性核素浓聚的情况,利用感兴趣区技术测定肿瘤部位放射性计数与对侧同等区域正常组织放射性计数的比值(target to nontarget ratio,T/NT),并比较2组间显像的差异。另随机取2只22Rv1细胞荷瘤裸鼠模型进行阻断显像实验,于实验前30min注射过量未标记的小分子化合物,于注射后1、2、4、6、8h行SPECT显像,观察肿瘤部位放射性浓聚随时间变化的情况,计算T/NT比值,并与非阻断组进行比较。所有实验数据均以(?)±s(均数±标准差)表示,采用SPSS 22.0及GraphPad Prism 5.0统计学软件进行统计学分析及统计图制作,对数据进行两样本t检验(或t'检验)或Wilcoxon秩和检验,以P<0.05为差异有统计学意义。结果:经RT-HPLC检测,~(99)Tc~m-GGGC-PSMA放射峰保留时间为11.66min,放化纯为(99.23±0.43)%(n=6),纯度较高,无需进一步纯化。体外稳定性实验结果,12h内不同介质中分子探针放化纯均在95%以上,且放射峰位置较稳定,未见漂移。收集22Rv1荷瘤裸鼠模型注射药物后的尿液,经RT-HPLC测定,放射峰保留时间呈双峰,主峰与~(99)Tc~m-GGGC-PSMA放射峰保留时间相似,主峰前的小峰,该峰保留时间与游离锝不一致,可能为代谢物峰。细胞实验结果,人前列腺癌22Rv1细胞各时间点对~(99)Tc~m-GGGC-PSMA的体外摄取率显示摄取率随着时间的延长先增加后逐渐下降,4h摄取率(17.72±0.68)达到高峰,且各时间摄取率均高于对照组。PSMA阳性表达人前列腺癌22Rv1细胞对~(99)Tc~m-GGGC-PSMA的细胞滞留实验结果,分子探针在细胞内滞留率相对较高,各时间点滞留率为(87.41±3.30)%、(88.42±3.79)%、(68.66±2.37)%、(64.03±1.20)%、(48.63±2.00)%。阻断实验,实验前30min,在PSMA阳性表达22Rv1细胞液中加入500倍或1000倍未标记的GGGC-PSMA(N=3),培养箱孵育4h,细胞摄取率由(17.72±0.68)%分别降至(0.55±0.02)%、(0.43±0.02)%,统计学分析有显着性差异(t=-8.88,P=0.001;t=-9.01,P=0.001),表明~(99)Tc~m-GGGC-PSMA与PSMA受体体外结合可被未标记的化合物阻断,探针具有靶向特异性。体外细胞饱和结合实验,分子探针与PSMA受体结合的K_d值为1.316。荷瘤裸鼠体内分布结果,~(99)Tc~m-GGGC-PSMA在PSMA阳性表达22Rv1细胞荷瘤裸鼠体内分布结果显示:血(0.60±0.20)%ID/g、心脏(3.37±1.18)%ID/g、肝脏(0.89±0.5)%ID/g、脾脏(7.78±1.46)%ID/g、肺脏(3.04±0.78)%ID/g、肾脏(325.97±58.27)%ID/g、胃(1.50±0.22)%ID/g、小肠(0.93±0.20)%ID/g、肌肉(0.81±0.21)%ID/g、骨骼(1.54±0.50)%ID/g、脑(0.06±0.02)%ID/g、肿瘤(5.74±2.14)%ID/g,分子探针主要分布于肿瘤组织、肾脏以及脾脏;PSMA阴性表达PC-3细胞荷瘤裸鼠体内分布结果显示:血(0.41±0.10)%ID/g、心脏(0.91±0.48)%ID/g、肝脏(1.06±0.15)%ID/g、脾脏(8.83±0.87)%ID/g、肺脏(1.76±0.54)%ID/g、肾脏(328.72±86.33)%ID/g、胃(0.57±0.33)%ID/g、小肠(0.55±0.03)%ID/g、肌肉(0.76±0.05)%ID/g、骨骼(0.44±0.04)%ID/g、脑(0.02±0.01)%ID/g、肿瘤(0.34±0.07)%ID/g。PSMA阳性22Rv1荷瘤裸鼠与PSMA阴性PC-3荷瘤裸鼠肿瘤组织%ID/g值分别是(5.74±2.14 versus 0.34±0.07),表明分子探针可以被PSMA阳性表达的肿瘤组织摄取。SPECT显像实验表明,PSMA阳性表达22Rv1细胞荷瘤裸鼠各时间点T/NT比值分别为(2.01±0.81)、(2.26±0.92)、(3.63±1.52)、(4.29±2.06)、(5.17±1.97);并且可以观察到~(99)Tc~m-GGGC-PSMA在非靶器官中快速清除。相反,PSMA阴性PC-3细胞荷瘤裸鼠肿瘤部位未观察到明显放射性核素浓聚,不同时间点T/NT比值分别为(0.74±0.01)、(0.71±0.03)、(0.66±0.16)、(0.66±0.01)、(0.64±0.03)。PSMA阳性表达22Rv1细胞荷瘤裸鼠模型组T/NT比值明显高于PSMA阴性表达PC-3细胞荷瘤裸鼠模型组(t=3.547~4.878,P=0.001~0.008),差异有统计学意义。PSMA阳性表达22Rv1荷瘤裸鼠阻断实验中各时间点T/NT比值分别为(1.21±0.17)、(1.28±0.15)、(1.28±0.17)、(1.58±0.45)、(1.58±0.46),实验数据表明肿瘤部位放射性核素的摄取可以被未标记的小分子化合物阻断,各时间点的T/NT比值具有统计学差异(各时间点P值均小于0.001)。结论:用短肽GGGC为螯合剂,~(99)Tc~m标记PSMA靶向小分子抑制剂的方法简便,标记率高,无需纯化,体内外稳定性好,能够被PSMA阳性表达的前列腺癌细胞特异性摄取,并且可用于PSMA阳性表达前列腺癌体内特异性显像,对前列腺癌组织有较高的靶向性,~(99)Tc~m-GGGC-PSMA可作为新型PSMA靶向分子探针用于前列腺癌SPECT显像诊断。(本文来源于《河北医科大学》期刊2019-03-01）
李超华,王建农,孙娅楠,王毅[9]（2019）在《两种荧光探针标记鹿茸提取物的稳定性和生物活性比较研究》一文中研究指出比较两种荧光探针异硫氰酸荧光素FITC和Cy5标记鹿茸提取物PAEs的最佳方法。用FITC和Cy5分别标记PAEs得到标记物FITC-PAEs和Cy5-PAEs;用SDS-PAGE凝胶电泳检测并比较两种荧光染料标记蛋白分子量的差异;用酶标仪检测在特定波长处OD值计算其标记率;用PC12细胞验证两种荧光染料的生物安全性;将荧光标记物分别与人工胃液和人工肠液共孵育,观察它们在其中的稳定性。结果表明,两种荧光染料标记PAEs蛋白分子量并无明显差异,但FITC-PAEs荧光强度稍强。通过计算标记率表明两种荧光染料均可充分标记PAEs,但Cy5价格昂贵。相比于FITC-PAEs,Cy5-PAEs在人工胃液和人工肠液中稳定性较差。因此,我们选择标记率高,在人工胃液和人工肠液中较为稳定且对机体无毒副作用,价格合理的FITC荧光染料标记PAEs并用于后续实验研究。这为建立蛋白类中药大分子的活性示踪方法,开发口服蛋白类药物奠定基础。(本文来源于《激光生物学报》期刊2019年01期）
代义文[10]（2019）在《Au@SiO_2@CuInS_2-ZnS量子点探针对肝癌细胞的靶向标记及热疗的研究》一文中研究指出目的:合成一种新型金纳米星-二氧化硅-硫铟铜硫化锌抗甲胎蛋白抗体(Au@SiO_2@CuInS_2/ZnS-anti-AFP)量子点探针并探究其对肝癌细胞的靶向标记和荧光成像能力、细胞毒性、光热效率以及热疗效应,以期为肝癌诊治提供新的方法。方法:通过免疫组化方法检测肝癌细胞系HepG2的甲胎蛋白表达情况。采用水热法合成金纳米星-二氧化硅-硫铟铜硫化锌抗甲胎蛋白抗体复合探针与金纳米笼硫铟铜硫化锌抗甲胎蛋白抗体复合探针,并进行理化和生物学性能比较。Hep-G2细胞株与探针孵育后激光共聚焦显微镜用于检测探针的靶向标记和荧光成像能力,MTT法用于检测探针的细胞抑制率以评价探针的生物相容性。Hep-G2细胞与探针孵育,用808nm、1.5W/cm~2的激光对细胞培养液照射,用温度计检测光热热疗时细胞培养液温度;使用流式细胞术检测热疗细胞凋亡率。结果:免疫组化实验结果显示,Hep-G2细胞胞质和细胞膜呈现褐色,胞核呈现蓝色,胞质和胞膜强阳性表达AFP。靶向标记实验:激光共聚焦显微镜观察到HepG2细胞质被520nm波长光的激发下发出黄色荧光,细胞核被360nm波长光的激发下发出蓝色荧光。MTT实验显示,在2h、12h和24h,浓度为20%的金纳米星探针对HepG2细胞抑制率较20%的金纳米笼探针明显降低(0.61±0.0105VS 0.167±0.0117;0.201±0.0111 VS 0.467±0.0272;0.387±0.0446 VS 0.774±0.0375;P<0.05)。光热实验显示,20%的金纳米星探针的温度上升速度和平台期温度明显高于20%的金纳米笼探针(45.5℃,43.3℃),差异具有统计学意义(Z=-5.895,P<0.001)。热疗实验结果显示,金纳米星探针热疗凋亡率40min进入95%-98%平台期;金纳米笼探针凋亡率需要50min后逐渐稳定至86%平台期。两种探针热疗实验平台期凋亡率差异有统计学意义,金纳米星探针热疗效果显着高于金纳米笼探针(Z=-4.846,P<0.001)。结论:(1)AFP在肝癌细胞系HepG2的胞质和胞膜上表达。(2)新型金纳米星探针通过抗原抗体反应对HepG2细胞进行特异性的靶向识别和标记,并可以通过量子点激发的荧光对细胞进行荧光成像。(3)20%的金纳米星探针的细胞毒性比20%的金纳米笼探针有显着的减小,生物相容性优良。(4)20%的新型金纳米星探针比20%的金纳米笼探针具有更高的光热温度(45.5℃,43.3℃,Z=-5.895,P<0.001),在热疗时拥有更高的细胞杀伤率(Z=-4.846,P<0.001),光热热疗效率更高。(本文来源于《安徽医科大学》期刊2019-02-01）
标记的探针论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的制备地高辛(digoxigenin,DIG)标记的Nkx2. 1基因RNA探针,用于小鼠胚胎早期神经管发育关键时期Nkx2. 1基因表达的检测。方法巢式PCR法扩增Nkx2. 1基因,将其克隆至pGEM-T载体;以其为模板,通过Nkx2. 1特异性引物,PCR扩增RNA探针转录模板;采用T7 RNA聚合酶,制备DIG标记的正义、反义Nkx2. 1 RNA原位杂交探针。经全胚胎原位杂交(whole-mount in situ hybridization,WM-ISH)技术分析胚胎8. 5、9. 5、10. 5 d小鼠体内Nkx2. 1基因的表达情况。结果制备的探针浓度为1 521. 986 ng/mL,纯度A260/280=2. 39。Nkx2. 1基因反义探针能高效检测到Nkx2. 1基因在胚胎8. 5、9. 5及10. 5 d小鼠神经系统中表达,正义探针未能检测到表达信号。结论成功制备了特异高效的DIG标记的Nkx2. 1基因RNA原位杂交探针,为进一步研究Nkx2. 1基因在小鼠胚胎组织中的表达,探索其在神经管发育中的作用机制奠定了基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
标记的探针论文参考文献
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