裂解基因论文-李栋,林俊芳,刘聪,叶志伟,郭丽琼

裂解基因论文-李栋,林俊芳,刘聪,叶志伟,郭丽琼

导读:本文包含了裂解基因论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:蛹虫草,类胡萝卜素,类胡萝卜素双加氧裂解酶,生物信息学分析

裂解基因论文文献综述

李栋,林俊芳,刘聪,叶志伟,郭丽琼[1](2019)在《蛹虫草类胡萝卜素双加氧裂解酶基因的克隆及表达分析》一文中研究指出目的:类胡萝卜素双加氧裂解酶(CCD)是类胡萝卜素生物合成途径中的一个关键酶。旨在鉴定并克隆蛹虫草中的CCD酶,通过相关生物信息学分析和荧光定量PCR探究其结构、功能聚类以及表达调控。方法:用GenBank登录的CCD酶基因序列与蛹虫草基因组比对,在保守区域设计1对引物,以蛹虫草基因组的DNA为模板对CCD酶基因进行扩增,扩增产物命名为car-TC。car-TC基因连接载体后由生物公司测序;序列通过多种生物信息学软件和在线工具分析;表达量随生长情况的变化关系通过实时荧光定量PCR进行测定。结果:克隆了car-TC基因,该基因长1 784 bp,编码一个577aa的蛋白质,该蛋白质含有CCD酶活性必需的4个组氨酸残基,系统发育进化分析表明该蛋白和棒束菌、白僵菌的同源蛋白聚在同一簇,实时荧光定量PCR结果表明该蛋白的表达量随生长时间的延长而减少。结论:获得一个类胡萝卜素合成途径中的关键酶——双加氧裂解酶基因car-TC,该基因的表达主要受时序调控,随生活周期的进行有逐渐降低的趋势。(本文来源于《中国食品学报》期刊2019年07期)

马慧娇[2](2019)在《枯草杆菌芽孢皮层裂解酶CwlJ基因的克隆表达、纯化及其水解肽聚糖产物分析》一文中研究指出食品会因芽孢的存在而引发腐败及一些安全问题,但是芽孢却又很难被各种杀菌方法杀灭,所以找到杀灭芽孢的路径迫在眉睫。造成芽孢死亡的关键之处在于芽孢皮层肽聚糖水解,由于芽孢萌发、核心水化、皮层裂解酶被激活,所以芽孢抗性消失,故将皮层裂解酶分离纯化出来就显得尤为重要。从天然菌种中提取皮层裂解酶,工作量大、难以分离纯化且产率还低,所以本文通过基因工程操作技术,构建了皮层裂解酶CwlJ的基因工程菌,以获得大量的皮层裂解酶,为后续试验提供了原材料,为推动CwlJ水解肽聚糖进而杀灭芽孢并应用于食品杀菌奠定了基础。本文研究了枯草杆菌芽孢皮层裂解酶CwlJ基因的克隆及酶生物信息学分析、皮层裂解酶CwlJ的诱导表达及分离纯化、皮层裂解酶CwlJ水解肽聚糖产物分析。主要研究内容及结论如下:(1)为了构建含有皮层裂解酶CwlJ基因的克隆,依据查到的基因序列,设计CwlJ的特异引物,合成CwlJ基因片段后与pCZN 1质粒连接,重组子pCZN 1-CwlJ转化Topl0感受态细胞,阳性克隆测序结果采用NCBI和ExPASy网站中的各种信息分析工具,并结合DNAMAN软件对CwlJ基因序列进行生物信息学分析。结果表明:CwlJ蛋白是一种碱性、不稳定、亲水、非分泌性蛋白;其二级结构中a-螺旋占26.06%,β-折迭占21.83%,β-转角占4.93%,无规则卷曲占47.18%;CwlJ基因表达的酶蛋白形成包涵体的可能性为68.11%;系统进化分析中枯草芽孢杆菌皮层裂解酶CwlJ与苏云金芽孢杆菌皮层裂解酶CwlJ、苏云金芽孢杆菌Bt18247皮层裂解酶CwlJ亲缘关系较近。以上结果为后续CwlJ基因的异源表达、纯化与功能研究提供了参考信息。(2)为了获得大批量的皮层裂解酶CwlJ,运用IPTG诱导重组菌表达目的蛋白CwlJ,SDS-PAGE和Western-Blot检验重组皮层裂解酶的表达情况,并用亲和层析法纯化重组蛋白CwlJ。研究发现0.5 mM的IPTG能实现CwlJ基因的大量表达,纯化后的重组皮层裂解酶CwlJ分子量为17.9KD,最适温度为40℃、最适pH值为5,比酶活力146.67U/mg,相比从天然芽孢中提取出来的皮层裂解酶,重组皮层裂解酶的活性提高了 2倍,保证了皮层裂解酶CwlJ进一步水解肽聚糖实验的进行。(3)为了进一步了解酶水解肽聚糖的产物特点,先提取了芽孢皮层肽聚糖,然后分析了在酶CwlJ的参与下肽聚糖的水解产物。研究发现,水解产物的SDS-PAGE图中共有7条蛋白条带,质谱数据显示水解产物中有蛋白质1300种,分子量以20~40KD居多,肽段2609个;氨基酸分析中显示水解产物中有四种游离氨基酸,分别是赖氨酸、精氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸;水解液中蛋白质含量0.1600 mg/mL、NAG含量0.1625 mg/mL;元素分析中表明水解产物中C、N比为2.95%,C、H 比为 5.88%。本研究构建了皮层裂解酶CwlJ的基因工程菌,成功诱导表达,并纯化出有活性的CwlJ,为后续实验提供了研究材料。肽聚糖水解产物分析中蛋白种类1300余种,不排除肽聚糖提取不纯的原因,对水解产物进行分析,其分析结果为后继研究肽聚糖水解进而杀灭芽孢的其他杀菌技术提供对照与参考信息。(本文来源于《宁夏大学》期刊2019-05-01)

缪胜男[3](2019)在《自裂解型人工适体核酶的设计及其在枯草芽胞杆菌基因表达中的应用》一文中研究指出枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)作为一种重要的革兰氏阳性菌,在工业生物技术以及合成生物学领域被广泛用于代谢工程、重组蛋白表达以及用作新型疫苗的运载体,是一种极具应用前景的新型合成生物学底盘。目前在B.subtilis中所使用的基因表达调控元件有限,主要是组成型或诱导型启动子以及终止子等,高精准性的人工调控工具较少,并且这类元件易受到底盘细胞内源遗传系统的干扰,影响基因线路的功能。因此亟待开发新的基因调控工具以充分挖掘B.subtilis在合成生物学中的应用。RNA分子元件的调节不依赖底盘细胞自身的反式作用因子,因此具有良好的正交性,有较大的应用潜力。本研究成功地在B.subtilis中构建出了基于核酶和人工适体域的适体核酶分子开关,实现了对外源基因的调控,并系统考察了这一元件在不同遗传环境中的性能。具体研究结果如下:(1)以B.subtilis为宿主,验证曼氏血吸虫锤头状核酶的功能,证明其可用性。据此构建了表达质粒pP43RZGFP,利用核酶调控报告基因GFP的表达,检测茶碱及DMSO对核酶功能的影响。结果显示,含有核酶元件RZ的枯草芽胞菌株PBP43RZGFP表达GFP的荧光强度为118 083±7 365 a.u.,而在RZ元件失活的菌株PBP43inRZGFP中,荧光强度仅为22 048±109 a.u.,表明RZ元件能够在B.subtilis中调控GFP的表达。同时,发现添加DMSO后,PBP43RZGFP的荧光强度有所提高,而添加了茶碱后,荧光强度降低。(2)将茶碱适体域融合到锤头状核酶RZ的茎环III部位,对连接茶碱适体域和核酶的通信模块进行建库筛选,构建出受茶碱调控的一系列人工适体核酶,对其中33个突变株进一步研究。使用WHBS参数分析适体核酶结构特征和调控性能之间的量化关系,结果显示,本底荧光强度和WHBS参数显着相关,表明可根据WHBS参数对适体核酶进行理性设计;另外,BG8(5’-GGT-32 nt-TCT-3’)相比其他突变体,诱导率最高,因此将该适体核酶命名为AZ进行后续研究。(3)系统鉴定了适体核酶AZ与不同启动子的适配性并以核糖开关介导的基因调控作为比较。将6种启动子P_(rpoB)、P_(ylbp)、P_(spoVG)、P_(minC)、P_(sigW)、P_(yqeZ)分别与AZ和E进行适配,考察两者调控异源基因表达的性能。发现由适体核酶和启动子匹配构成的表达调控元件中,AZ与启动子P_(rpoB)适配后(rpoBAZ)诱导率最高,达到了6.2。而核糖开关E和启动子P_(sigW)构成的表达调控组件(sigWE)对GFP表达的诱导率最高,达到16.8。尽管核糖开关的诱导率高于适体核酶,但是适体核酶的本底表达更低,表明适体核酶对于基因表达调控更加严谨。(4)为了进一步考察这两种RNA调控元件的应用范围,将适体核酶和核糖开关与不同的外源蛋白进行匹配,分析适体核酶和核糖开关调控mCherry、普鲁兰酶、纳豆激酶表达的性能。研究发现,核糖开关E构成的调控元件sigWE介导mCherry的诱导率最高(诱导率=9.2);与此类似,P43E调控元件介导的普鲁兰酶的诱导率最高(诱导率=32.8),产酶水平达到81 U·mL~(-1)。适体核酶调控元件P43AZ介导的纳豆激酶诱导率最高(诱导率=2.9)。结果确证适体核酶和核糖开关对mCherry、普鲁兰酶和纳豆激酶均能实现调控。本文成功构建了可用于基因表达调控的人工适体核酶,并将适体核酶与核糖开关的调控性能进行了比较。发现适体核酶调控的严谨性好,本底表达较低,而核糖开关的调控范围大,诱导率高。本研究为在枯草芽胞杆菌中利用调控严谨的适体核酶设计复杂的遗传线路提供了依据。(本文来源于《江南大学》期刊2019-05-01)

何玉兰[4](2019)在《酸性果胶裂解酶的基因筛选及其在黑曲霉中高效重组表达研究》一文中研究指出酸性果胶裂解酶可通过β-消除反应有效降解果胶类物质,在食品工业中具有广泛用途,尤其是果蔬汁加工业,有助于果蔬汁澄清和提高出汁率。酸性果胶裂解酶主要由真菌产生,尤其是黑曲霉,但其天然原始菌株普遍存在产酶量低和产物杂质多的问题,远达不到工业需求。本研究旨在以具有低蛋白背景的安全菌株黑曲霉SH-2为表达宿主,将来自黑曲霉全基因组的5个果胶裂解酶基因(pelA、pelB、pelC、pelD、pelF)分别进行过量表达以期实现酸性果胶裂解酶的高效重组表达,并对重组酶的酶学性质和其在果汁澄清方面的实际应用进行探究。主要研究内容如下:(1)将构成黑曲霉果胶裂解酶基因家族的5个果胶裂解酶基因(pelA、pelB、pelC、pelD和pelF)成功克隆,并利用黑曲霉自身强启动子(葡萄糖淀粉酶启动子,PglaA)分别实现5个果胶裂解酶基因在黑曲霉SH-2中进行重组过量表达。通过酶活测定成功筛选得到两个高表达的酸性果胶裂解酶基因pelA和pelD,转化菌株分别为SH2-PelA和SH2-PelD,在摇瓶发酵条件下最高酶活力分别为11069.2 U/mL和8822.6 U/mL,在液体深层发酵条件下最高酶活力分别为65148.8 U/mL和35670.0 U/mL,分别比摇瓶发酵酶活提高5.9倍和4.0倍,表明重组菌株具有工业化大量生产酸性果胶裂解酶的潜力,并且重组菌株SH2-PelA具有较高的表达水平。(2)高产重组酸性果胶裂解酶经镍柱亲和层析纯化后进行western blot检测及酶学性质研究。经一步纯化后,重组酶rePelA和rePelD的比酶活分别为4618.0 U/mg和8522.7 U/mg,回收率分别为88.4%和79.4%,纯化倍数分别为5.7和4.9倍;底物特异性分析表明:重组酶rePelA和rePelD的比活力随果胶底物甲酯化程度增加而增加,对柑橘果胶(≥85%酯化度)酶活分别为22423.3 U/mL和31248.0 U/mL;rePelA和rePelD的最适反应温度均为50℃,并在30-50℃的范围内热稳定性良好;rePelA和rePelD的最适反应pH分别为4.5和5.0,并在酸性pH条件下稳定性良好;加入Na~+、Mg~(2+)、Zn~(2+)、Ni~(2+)、Mn~(2+)、Ba~(2+)对rePelA具有不同程度的激活作用,其中Zn~(2+)、Mn~(2+)对rePelA激活作用较为显着,能提高约30%的酶活力,而Ca~(2+)、Cu~(2+)及表面活性剂SDS对rePelA有明显的抑制作用;加入Ca~(2+)、Mg~(2+)、Cu~(2+)、Zn~(2+)、Ni~(2+)、Mn~(2+)、Ba~(2+)对重组酶rePelD具有不同程度的激活作用,而SDS表现为抑制作用。(3)将重组酸性果胶裂解酶应用于不同果汁澄清,结果表明:rePelA和rePelD对橙汁、苹果汁以及葡萄汁具有良好的澄清效果。经rePelA和rePelD处理后,橙汁的透光度分别提高了19.2和17.9倍,苹果汁的透光度分别提高了7.3和11.5倍,葡萄汁的透光度分别提高了3.8和5.7倍;此外,相比于添加单一果胶酶,复合添加不同果胶酶可在较短时间获得更好的果汁澄清效果。(本文来源于《华南理工大学》期刊2019-04-20)

胥方琴,韩兵,朱惠,朱文娇,王浩[5](2019)在《2例合并2型糖尿病的17α-羟化酶/17,20-裂解酶缺陷症患者基因诊断和临床分析》一文中研究指出目的探讨2例合并2型糖尿病的17α-羟化酶/17,20-裂解酶缺陷症(17-hydroxylation/17,20-lyase deficiency, 17OHD)患者的临床特点、基因诊断和治疗方法。方法回顾性分析2例17OHD合并2型糖尿病患者的临床资料、实验室检查和影像学结果,2例患者均行外周血DNA抽提,采用PCR扩增CYP17A1基因后进行基因测序。结果 2例均表现为高血糖、高血压、低血钾、原发性闭经和第二性征发育不良,实验室检查提示促肾上腺皮质激素明显升高,皮质醇降低,孕酮升高,空腹及餐后血糖升高,多种免疫自身标记阴性;例1同时存在CYP17A1基因外显子1 R96Q杂合点突变及外显子8 Arg487-Ser488-Phe489缺失的杂合突变,例2为外显子8 Arg487-Ser488-Phe489缺失的纯合突变。结论17OHD合并2型糖尿病患者临床表现复杂,激素测定、影像学检查和CYP17A1基因检测有助于早期诊断,其机制尚不明确。(本文来源于《中华实用诊断与治疗杂志》期刊2019年04期)

马慧娇,曾朝玮,郭洪伟,郭家俊,章中[6](2019)在《枯草芽孢杆菌芽孢皮层裂解酶CwlJ基因的克隆及酶生物信息学分析》一文中研究指出高压热杀菌(HPTS)技术是一种重要的食品杀菌技术,能有效杀灭细菌芽孢。分离纯化出芽孢皮层裂解酶CwlJ可用于研究HPTS杀灭芽孢的机理。通过基因克隆得到了皮层裂解酶基因CwlJ,并构建了表达载体pET-28a(+)-CwlJ。结果表明,CwlJ基因大小为440 bp,编码142个氨基酸;生物信息学分析表明,皮层裂解酶CwlJ为亲水性的碱性不稳定蛋白;皮层裂解酶CwlJ中α-螺旋占26.06%,β-延伸链占21.83%,β-转角占4.93%,无规则卷曲占47.18%;不是分泌性蛋白,形成包涵体的可能性为68.11%;与苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)、苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)Bt18247的同类酶CwlJ亲缘关系最近。该研究为后续皮层裂解酶CwlJ基因的表达、分离纯化以及阐明HPTS下皮层肽聚糖水解机制奠定了理论基础。(本文来源于《中国酿造》期刊2019年02期)

岳远征,王晰,丁文杰,李娅,刘家伟[7](2019)在《长筒石蒜类胡萝卜素裂解双加氧酶基因LlCCD4的克隆与表达》一文中研究指出长筒石蒜(Lycoris longituba)是石蒜属植物,为中国特有的观赏花卉,具有极高的观赏价值也是石蒜属少有的香花品种,然而目前尚未有关于其花香方面的报道。故本研究以长筒石蒜花瓣为材料,在长筒石蒜中开展了花香基因CCD4的研究。利用课题组已获得的长筒石蒜花瓣转录组数据库,我们筛选到1个与拟南芥CCD4基因同源性最高的序列,并克隆得到了其完整的编码区,命名为LlCCD4。该基因编码区全长为1 815 bp,编码604 aa,蛋白质分子量约为66.20 kD,理论等电点为6.43,属于酸性不稳定的疏水性蛋白,且具有CCD4基因共有的保守结构域。进化分析进一步表明该基因为CCDs基因家族中的CCD4成员,与单子叶植物番红花中的CCD4基因具有较高的同源性。实时荧光定量分析证实该基因在长筒石蒜的盛花期即长筒石蒜花瓣最香的时期表达量最高。本研究将有助于揭示长筒石蒜花香形成的分子机理,并为石蒜属植物花香改良提供基因资源。(本文来源于《分子植物育种》期刊2019年03期)

洪坤奇,赵莹,尹新明,习慧君,刘闯[8](2019)在《苹果轮纹病菌(Botryosphaeria dothidea)果胶裂解酶基因Bdpl1的致病功能分析》一文中研究指出由葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)引起的苹果轮纹病是影响我国苹果安全生产的重大病害之一。因此,本研究基于受苹果轮纹菌侵染的苹果组织中果胶裂解酶基因Bdpl1表达上调这一现象,通过Split-marker PCR技术构建Bdpl1基因敲除载体,并通过PEG介导的原生质体转化获得转化子,经常规PCR和qRT-PCR对所获得的转化子进行筛选,成功获得1个Bdpl1基因缺失阳性突变子。该转化子在PDA上的培养基性状与野生型没有明显差异,但在果胶培养基上菌落直径明显小于野生型。其胞外果胶酶活相比野生型明显下降,但在离体"早富"苹果枝条上的致病力并没有明显的下降。通过qRT-PCR技术发现在基因Bdpl1敲除后,其家族内有3个基因在病菌侵染过程中相比野生型明显上调表达(>3倍)。这些现象表明果胶裂解酶基因Bdpl1与病原菌的营养生长过程关系不大,但其参与对寄主果胶类物质的降解。Bdpl1基因对轮纹病菌致病力的影响较小,有可能是Bdpl1基因敲除后,该基因家族内其他基因的上调表达补偿了Bdpl1基因的功能。(本文来源于《植物病理学报》期刊2019年03期)

吴晨烁,李晓月,秦明珍,严芬[9](2019)在《海洋来源褐藻胶裂解酶及其基因B1SM的克隆和表达》一文中研究指出从海洋来源的假交替单胞菌(Pseudoalteromonas sp.) B1基因组中克隆1个褐藻胶裂解酶基因,并在大肠杆菌中实现异源表达,分离纯化重组酶并研究其酶学性质。通过Touch down PCR与热不对称交错PCR(thermal asymmetric interlaced PCR,TAIL-PCR)从假交替单胞菌B1基因组中扩增到1个褐藻胶裂解酶基因(B1SM),将目的基因插入到p GEX-4T-1载体,转化到宿主大肠杆菌(Escherichia coli,E. coli) BL21 (DE3)。结果显示,从菌株B1克隆得到褐藻胶裂解酶基因B1SM,序列长度为1 005 bp,编码334个氨基酸,理论等电点为8. 51,编码蛋白质的理论分子质量为37. 13 k Da。重组褐藻胶裂解酶B1SM的最适pH和温度分别为8. 0和25℃。该褐藻胶裂解酶在pH 7. 0~9. 0范围内,25℃下保温1 h,仍剩余60%以上活力,pH稳定性较好。在最适pH 8. 0和30℃下保温1 h重组酶仍剩余60%以上活力。该研究为褐藻胶裂解酶基因B1SM在E. coli BL21(DE3)中实现了异源表达,为褐藻胶裂解酶的制备和研究奠定基础。(本文来源于《食品与发酵工业》期刊2019年03期)

宋立立,顿宝庆,张亚楠,张兆英[10](2018)在《果胶裂解酶基因与木聚糖酶基因的共表达》一文中研究指出利用重迭引物PCR方法将从海栖热袍杆菌中克隆得到的果胶裂解酶基因和从桔青霉CR-2菌株中克隆得到的木聚糖酶基因做重迭引物PCR扩增,扩增后得到融合基因plyxyl,将其构建载体后转化到大肠杆菌菌株BL21,克隆子经IPTG诱导在原核系统中实现了表达,p H值为中性,诱导6 h后最高酶活性分别达30.11 U/m L、2.03 IU/m L。(本文来源于《江苏农业科学》期刊2018年17期)

裂解基因论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

食品会因芽孢的存在而引发腐败及一些安全问题,但是芽孢却又很难被各种杀菌方法杀灭,所以找到杀灭芽孢的路径迫在眉睫。造成芽孢死亡的关键之处在于芽孢皮层肽聚糖水解,由于芽孢萌发、核心水化、皮层裂解酶被激活,所以芽孢抗性消失,故将皮层裂解酶分离纯化出来就显得尤为重要。从天然菌种中提取皮层裂解酶,工作量大、难以分离纯化且产率还低,所以本文通过基因工程操作技术,构建了皮层裂解酶CwlJ的基因工程菌,以获得大量的皮层裂解酶,为后续试验提供了原材料,为推动CwlJ水解肽聚糖进而杀灭芽孢并应用于食品杀菌奠定了基础。本文研究了枯草杆菌芽孢皮层裂解酶CwlJ基因的克隆及酶生物信息学分析、皮层裂解酶CwlJ的诱导表达及分离纯化、皮层裂解酶CwlJ水解肽聚糖产物分析。主要研究内容及结论如下:(1)为了构建含有皮层裂解酶CwlJ基因的克隆,依据查到的基因序列,设计CwlJ的特异引物,合成CwlJ基因片段后与pCZN 1质粒连接,重组子pCZN 1-CwlJ转化Topl0感受态细胞,阳性克隆测序结果采用NCBI和ExPASy网站中的各种信息分析工具,并结合DNAMAN软件对CwlJ基因序列进行生物信息学分析。结果表明:CwlJ蛋白是一种碱性、不稳定、亲水、非分泌性蛋白;其二级结构中a-螺旋占26.06%,β-折迭占21.83%,β-转角占4.93%,无规则卷曲占47.18%;CwlJ基因表达的酶蛋白形成包涵体的可能性为68.11%;系统进化分析中枯草芽孢杆菌皮层裂解酶CwlJ与苏云金芽孢杆菌皮层裂解酶CwlJ、苏云金芽孢杆菌Bt18247皮层裂解酶CwlJ亲缘关系较近。以上结果为后续CwlJ基因的异源表达、纯化与功能研究提供了参考信息。(2)为了获得大批量的皮层裂解酶CwlJ,运用IPTG诱导重组菌表达目的蛋白CwlJ,SDS-PAGE和Western-Blot检验重组皮层裂解酶的表达情况,并用亲和层析法纯化重组蛋白CwlJ。研究发现0.5 mM的IPTG能实现CwlJ基因的大量表达,纯化后的重组皮层裂解酶CwlJ分子量为17.9KD,最适温度为40℃、最适pH值为5,比酶活力146.67U/mg,相比从天然芽孢中提取出来的皮层裂解酶,重组皮层裂解酶的活性提高了 2倍,保证了皮层裂解酶CwlJ进一步水解肽聚糖实验的进行。(3)为了进一步了解酶水解肽聚糖的产物特点,先提取了芽孢皮层肽聚糖,然后分析了在酶CwlJ的参与下肽聚糖的水解产物。研究发现,水解产物的SDS-PAGE图中共有7条蛋白条带,质谱数据显示水解产物中有蛋白质1300种,分子量以20~40KD居多,肽段2609个;氨基酸分析中显示水解产物中有四种游离氨基酸,分别是赖氨酸、精氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸;水解液中蛋白质含量0.1600 mg/mL、NAG含量0.1625 mg/mL;元素分析中表明水解产物中C、N比为2.95%,C、H 比为 5.88%。本研究构建了皮层裂解酶CwlJ的基因工程菌,成功诱导表达,并纯化出有活性的CwlJ,为后续实验提供了研究材料。肽聚糖水解产物分析中蛋白种类1300余种,不排除肽聚糖提取不纯的原因,对水解产物进行分析,其分析结果为后继研究肽聚糖水解进而杀灭芽孢的其他杀菌技术提供对照与参考信息。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

裂解基因论文参考文献

[1].李栋,林俊芳,刘聪,叶志伟,郭丽琼.蛹虫草类胡萝卜素双加氧裂解酶基因的克隆及表达分析[J].中国食品学报.2019

[2].马慧娇.枯草杆菌芽孢皮层裂解酶CwlJ基因的克隆表达、纯化及其水解肽聚糖产物分析[D].宁夏大学.2019

[3].缪胜男.自裂解型人工适体核酶的设计及其在枯草芽胞杆菌基因表达中的应用[D].江南大学.2019

[4].何玉兰.酸性果胶裂解酶的基因筛选及其在黑曲霉中高效重组表达研究[D].华南理工大学.2019

[5].胥方琴,韩兵,朱惠,朱文娇,王浩.2例合并2型糖尿病的17α-羟化酶/17,20-裂解酶缺陷症患者基因诊断和临床分析[J].中华实用诊断与治疗杂志.2019

[6].马慧娇,曾朝玮,郭洪伟,郭家俊,章中.枯草芽孢杆菌芽孢皮层裂解酶CwlJ基因的克隆及酶生物信息学分析[J].中国酿造.2019

[7].岳远征,王晰,丁文杰,李娅,刘家伟.长筒石蒜类胡萝卜素裂解双加氧酶基因LlCCD4的克隆与表达[J].分子植物育种.2019

[8].洪坤奇,赵莹,尹新明,习慧君,刘闯.苹果轮纹病菌(Botryosphaeriadothidea)果胶裂解酶基因Bdpl1的致病功能分析[J].植物病理学报.2019

[9].吴晨烁,李晓月,秦明珍,严芬.海洋来源褐藻胶裂解酶及其基因B1SM的克隆和表达[J].食品与发酵工业.2019

[10].宋立立,顿宝庆,张亚楠,张兆英.果胶裂解酶基因与木聚糖酶基因的共表达[J].江苏农业科学.2018

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