导读:本文包含了人甲状腺细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:细胞自噬,RFP,GFP,抑制剂
人甲状腺细胞论文文献综述
胡帅尔,张紫虹,杨美玲,李文立,黄建康[1]（2019）在《邻苯二甲酸单（2-乙基）己酯对人正常甲状腺细胞自噬的影响及作用机制》一文中研究指出目的:邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)是最常用的增塑剂。人类可经消化道、呼吸道、静脉注射等途径摄入DEHP,进入体内的DEHP在多种酶的反应下主要通过邻苯二甲酸单(2-乙基)己酯(MEHP)来发挥作用。本研究拟探讨DEHP代谢物MEHP对人正常甲状腺细胞自噬的影响及其毒作用机制。方法:将不同浓度(100、200、400、800μmol/L)的MEHP处理人正常甲状腺细胞(Nthy-Ori3-1)24h后,应用Western Blot检测LC3Ⅰ、Ⅱ蛋白和p62蛋白表达,分析MEHP的剂量反应关系;将800μmol/LMEHP分别处理Nthy-Ori3-1细胞3、6、12、24h后,分析时间反应关系;联合自噬诱导剂EBSS处理细胞3h、自噬抑制剂氯喹30μmol/L处理细胞24h后,应用Western Blot检测LC3Ⅱ蛋白及p62蛋白的表达水平,并利用荧光显微镜观察细胞RFP-GFP-LC3荧光斑点和RFP-p62荧光斑点的变化,以分析和比较MEHP和自噬诱导剂或自噬抑制剂的异同;应用LysoSensor~(TM) Green DND-189测定细胞内溶酶体pH值变化,使用荧光显微镜下观察试验结果,以确定MEHP是否通过抑制溶酶体酸化而抑制自噬。结果:Western Blot结果显示随剂量和时间的增加,细胞内LC3Ⅰ、Ⅱ蛋白和p62蛋白表达增加,且联合自噬诱导剂EBSS后,Western Blot结果显示LC3Ⅱ蛋白和p62蛋白表达进一步增加;而联合自噬抑制剂氯喹后,LC3Ⅱ蛋白和p62蛋白并没有进一步增加。利用荧光显微镜观察细胞内RFP-GFP-LC3串联体,结果显示黄色点状聚集增加(自噬体增加),红色不增加(自噬溶酶体不增加),RFP-P62荧光斑点较对照组增加。提示MEHP通过抑制自噬小体的降解抑制Nthy-Ori3-1细胞自噬。使用LysoSensor测定细胞pH值变化,结果显示氯喹组绿色荧光斑点增多,MEHP组无明显变化,则表明MEHP对溶酶体内pH变化无影响。结论:MEHP对细胞的自噬的抑制有明显的剂量和时间效应;MEHP通过抑制自噬小体的降解抑制自噬;且MEHP与氯喹抑制溶酶体酸化从而抑制自噬的途径不同,但具体是抑制自噬体与溶酶体的融合还是抑制溶酶体蛋白酶活性有待于进一步探讨。(本文来源于《2019年海峡两岸暨港澳青年科学家毒理学学术交流会论文集》期刊2019-09-17）
胡帅尔,张紫虹,杨美玲,李文立,黄建康[2]（2019）在《邻苯二甲酸单（2-乙基）己酯对人正常甲状腺细胞自噬的影响及作用机制》一文中研究指出目的:邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)是最常用的增塑剂。人类可经消化道、呼吸道、静脉注射等途径摄入DEHP,进入体内的DEHP在多种酶的反应下主要通过邻苯二甲酸单(2-乙基)己酯(MEHP)来发挥作用。本研究拟探讨DEHP代谢物MEHP对人正常甲状腺细胞自噬的影响及其毒作用机制。方法将不同浓度(100、200、400、800μmol·L~(-1))的MEHP处理人正常甲状腺细胞(Nthy-Ori3-1)24 h后,应用Western Blot检测LC3Ⅰ、Ⅱ蛋白和p62蛋白表达,分析MEHP的剂量反应关系;将800μmol·L~(-1)MEHP分别处理Nthy-Ori3-1细胞3、6、12、24 h后,分析时间反应关系;联合自噬诱导剂EBSS处理细胞3 h、自噬抑制剂氯喹30μmol·L~(-1)处理细胞24 h后,应用Western Blot检测LC3Ⅱ蛋白及p62蛋白的表达水平,并利用荧光显微镜观察细胞RFP-GFP-LC3荧光斑点和RFP-p62荧光斑点的变化,以分析和比较MEHP和自噬诱导剂或自噬抑制剂的异同;应用LysoSensor~(TM)Green DND-189测定细胞内溶酶体pH值变化,使用荧光显微镜下观察试验结果,以确定MEHP是否通过抑制溶酶体酸化而抑制自噬。结果 Western Blot结果显示随剂量和时间的增加,细胞内LC3Ⅰ、Ⅱ蛋白和p62蛋白表达增加,且联合自噬诱导剂EBSS后,Western Blot结果显示LC3Ⅱ蛋白和p62蛋白表达进一步增加;而联合自噬抑制剂氯喹后,LC3Ⅱ蛋白和p62蛋白并没有进一步增加。利用荧光显微镜观察细胞内RFP-GFP-LC3串联体,结果显示黄色点状聚集增加(自噬体增加),红色不增加(自噬溶酶体不增加),RFP-P62荧光斑点较对照组增加。提示MEHP通过抑制自噬小体的降解抑制Nthy-Ori3-1细胞自噬。使用LysoSensor测定细胞pH值变化,结果显示氯喹组绿色荧光斑点增多,MEHP组无明显变化,则表明MEHP对溶酶体内pH变化无影响。结论 MEHP对细胞的自噬的抑制有明显的剂量和时间效应;MEHP通过抑制自噬小体的降解抑制自噬;且MEHP与氯喹抑制溶酶体酸化从而抑制自噬的途径不同,但具体是抑制自噬体与溶酶体的融合还是抑制溶酶体蛋白酶活性有待于进一步探讨。(本文来源于《中国毒理学会第九次全国毒理学大会论文集》期刊2019-09-17）
李心歆[3]（2019）在《金雀异黄酮联合紫外线辐射对正常甲状腺细胞株及甲状腺癌细胞株增殖的影响》一文中研究指出目的:研究金雀异黄酮(即染料木素,genistein,GEN)单独及与紫外线(ultraviolet,UV)辐射联合作用时对于对甲状腺正常细胞株Nthy-ori 3-1、甲状腺乳头状癌细胞株TPC-1、人未分化甲状腺癌细胞株8305C增殖的影响,探讨金雀异黄酮应用于甲状腺癌治疗的可能性。方法:常规培养Nthy-ori 3-1、TPC-1、8305C细胞,将3种细胞分为单独药物处理组与药物联合紫外线照射组,分别向两组细胞的培养液中加入不同剂量金雀异黄酮,再用波长为254nm的紫外线照射联合组的细胞,以噻唑兰(即3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,MTT)法分别观察药物单独处理组及药物联合紫外线组细胞增殖率的影响。结果:MTT结果显示,金雀异黄酮对正常甲状腺细胞株Nthy-ori 3-1、甲状腺乳头状癌细胞株TPC-1、人未分化甲状腺癌细胞株8305C的增殖活性都有抑制作用,抑制程度随药物浓度增加而增加。紫外线联合金雀异黄酮对于叁个细胞株的抑制作用强于单独紫外线照射,同样的紫外线照射条件下抑制程度随药物浓度增加而增加。结论:金雀异黄酮可抑制甲状腺细胞株Nthy-ori 3-1、分化型甲状腺癌细胞株TPC-1、未分化甲状腺癌细胞株8305C的增殖,与紫外线联合作用时抑制效果更强。(本文来源于《广西医科大学》期刊2019-05-01）
李叙颖,张兰,王琳,武佳琦,范思有[4]（2019）在《软坚消瘿颗粒对肝郁脾虚型桥本甲状腺炎大鼠甲状腺细胞凋亡的影响》一文中研究指出目的考察软坚消瘿颗粒对肝郁脾虚型桥本甲状腺炎大鼠甲状腺细胞凋亡的影响。方法高碘饮水联合皮下注射甲状腺球蛋白建立桥本甲状腺炎大鼠模型,慢性束缚应激、过度疲劳、饮食失节等复合方法建立肝郁脾虚大鼠模型。36只造模大鼠随机分为模型组、雷公藤多苷片组、软坚消瘿颗粒组,另取12只正常大鼠作为正常组,给药8周后采集大鼠腹主动脉血和甲状腺组织,ELISA法检测血清TGAb、TPOAb水平,TUNEL法检测甲状腺细胞凋亡数,Western blot法检测甲状腺组织TLR2、TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白表达。结果与模型组比较,软坚消瘿颗粒组TGAb、TPOAb水平,TLR2、TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白表达显着降低(P<0.01),细胞凋亡数显着减少(P<0.01)。结论软坚消瘿颗粒可抑制肝郁脾虚型桥本甲状腺炎大鼠甲状腺细胞凋亡,其机制可能与抑制TLRs/MyD88/NF-κB信号通路有关。(本文来源于《中成药》期刊2019年04期）
谭雪,徐菁,马巍,王海燕,曹晓晓[5]（2019）在《Bcl-2家族参与碘诱发自身免疫性甲状腺炎小鼠甲状腺细胞凋亡》一文中研究指出目的研究Bcl-2家族成员在高碘诱发实验性自身免疫性甲状腺炎(experimental autoimmune thyroiditis,EAT)小鼠甲状腺细胞凋亡中的作用,初步探索自身免疫性甲状腺炎的发病机制。方法选取24只4～5周龄雌性NOD-SCID小鼠,随机分为4组,每组6只:对照组、高碘组、聚肌胞苷-聚胞苷酸[Poly(I:C)]组、高碘联合Poly(I:C)组,对照组和Poly(I:C)组自由饮用蒸馏水,高碘组和高碘联合Poly(I:C)组自由饮用0.05%NaI水,持续16周,Poly(I:C)组和高碘联合Poly(I:C)组第11周和第15周的周一、叁、五每天腹腔注射一次1μg/μL Poly(I:C) 100μL。16周末取血清和甲状腺,分别利用ELISA法和病理学HE染色法验证EAT模型,TUNEL法和细胞色素C(Cyt-C)免疫组化法检测甲状腺滤泡细胞凋亡情况,real-time qPCR法检测Bcl-2家族成员在小鼠甲状腺中的mRNA表达水平。结果高碘饲养联合Poly(I:C)腹腔注射NOD-SCID小鼠建立了EAT模型;甲状腺滤泡上皮细胞凋亡程度和Cyt-C表达水平与炎症成正相关。高碘组和高碘联合Poly(I:C)组中Bcl-2家族促凋亡成员Noxa、PUMA、Bid的mRNA表达水平显着高于对照组和Poly(I:C)组(P<0.05)。结论线粒体细胞凋亡途径参与高碘诱发EAT的甲状腺细胞凋亡过程,细胞凋亡可能受到Bcl-2家族促凋亡成员Noxa、PUMA和Bid表达上调的调控。(本文来源于《卫生研究》期刊2019年02期）
张颖,温爽,王玲,李会政[6]（2019）在《传统涂片联合液基细胞学在甲状腺细胞学诊断中的应用价值探讨》一文中研究指出目的探讨传统涂片联合液基细胞学在超声引导下甲状腺细针穿刺细胞学诊断中的应用价值。方法超声引导下对152例甲状腺结节行细针穿刺传统细胞涂片及液基细胞学涂片,且152例患者均行手术治疗,将细胞学与组织病理进行对比分析。结果细针穿刺细胞学与术后组织病理结果进行对照,传统涂片联合液基细胞学涂片对于甲状腺结节诊断的符合率为91%,对于甲状腺恶性结节的诊断符合率达到93.2%,均高于单纯传统涂片。结论甲状腺结节细针穿刺传统涂片与液基细胞学联合使用,诊断准确性更高,具有良好的应用价值,值得临床推广使用。(本文来源于《中国耳鼻咽喉头颈外科》期刊2019年03期）
孟烈[7]（2019）在《甲状腺肿瘤患者外周血炎性因子和氧化应激水平、甲状腺细胞内GPX7蛋白和中医症候的相关性》一文中研究指出目的:探讨甲状腺肿瘤患者外周血炎性因子和氧化应激水平与甲状腺细胞内GPX7蛋白的相关性。方法:本研究选取2015年2月-2018年2月期间我院收治的116例甲状腺肿瘤患者为研究对象,采用ELISA法检测患者外周血GPX7蛋白表达情况,根据检测结果将其分为GPX7阴性组(n=21)、GPX7阳性组(n=95)。按照新世纪全国高中医药院校规划教材《中医诊断学》所载证型标准对患者的中医症候进行归类。采用ELISA法检测两组受试者外周血IL-1α、IL-1β、COX-2、IL-17、IL-35、SIL-2R等炎性因子表达水平,采用相应检测试剂盒测定受试者外周血氧化应激指标MDA、SOD、TAOC表达水平。采用Pearson相关性分析甲状腺肿瘤患者外周血炎性因子和氧化应激水平与甲状腺细胞内GPX7蛋白的相关性。结果:患者证候病机以实证偏多,占87.86%,主要有气滞、痰浊、血瘀、火热;虚证占12.02%,主要是阴虚、气虚和血虚,两组间差异具有统计学意义(P<0.05)。ELISA检测结果显示,GPX7阳性组受试者外周血IL-1α、IL-1β、 COX-2、IL-17、SIL-2R表达水平明显高于GPX7阴性组,IL-35表达水平明显低于GPX7阴性组(P<0.05);氧化应激指标检测结果显示,GPX7阳性组受试者外周血MDA水平明显高于GPX7阴性组,SOD、TAOC水平明显低于GPX7阴性组(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,GPX7蛋白表达水平与甲状腺肿瘤患者外周血IL-1α、IL-1β、COX-2、IL-17、SIL-2R、MDA水平以及中医症候分型呈显着正相关(P<0.05),与外周血IL-35、SOD、TAOC呈显着负相关(P<0.05)。结论:甲状腺肿瘤患者外周血炎性因子IL-1α、IL-1β、COX-2、IL-17、SIL-2R、IL-35以及氧化应激指标MDA、SOD、TAOC以及中医症候分型与甲状腺肿瘤患者细胞内GPX7蛋白具有显着相关性。(本文来源于《黑龙江中医药》期刊2019年01期）
李浩[8]（2019）在《双酚A协同BRAF~(V600E)突变促进甲状腺细胞上皮间充质转化的实验研究》一文中研究指出目的:近几十年以来甲状腺癌的发病率不断上升,逐渐成为内分泌系统和头颈部最常见的实体恶性肿瘤。双酚A(BPA),是一种生活中常见的环境内分泌干扰物(environment endocrine disruptors,EEDs),近年来其对甲状腺癌发生发展的影响逐渐引起人们关注。甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)是最主要的甲状腺恶性肿瘤,其中50%以上PTC患者肿瘤组织存在BRAF~(V600E)基因突变,研究认为BRAF~(V600E)突变与PTC的发生、发展密切相关。本研究采用甲状腺癌临床病例研究与体外细胞实验验证相结合的方法,探讨BPA暴露是否与BRAF~(V600E)突变发挥协同作用经ERK-Cox2通路促进甲状腺细胞上皮间充质转化(EMT)过程,从而对甲状腺肿瘤的转移、侵袭等生物学行为产生重要影响,以期为BRAF~(V600E)突变的PTC患者的精准预防及合理治疗提供新的理论依据和科学线索。方法:1.甲状腺癌临床病例研究(1)签署知情同意书后,收集45例PTC患者的血液样本和术中切除肿瘤组织以及50例健康对照人群血样,应用免疫组织化学技术检测PTC患者BRAF~(V600E)突变情况;通过酶联免疫分析方法检测PTC患者和同期健康对照人群血浆中游离型BPA含量。(2)术中采集PTC患者的肿瘤组织样本,通过qRT-PCR方法检测EMT相关E-cadherin、N-cadherin和MMP-9 mRNA表达水平,免疫组化SP法检测E-cadherin、N-cadherin和MMP-9的蛋白表达水平。2.体外细胞实验验证(1)采用BRAF野生型人甲状腺滤泡上皮细胞Nthy-ori 3-1构建BRAF~(V600E)突变的转染细胞模型Nthy-BRAF~(V600E)。(2)不同浓度BPA染毒处理转染细胞,分析对细胞迁移、侵袭和克隆形成能力的影响。(3)不同浓度BPA处理对转染细胞中BRAF、ERK、p-ERK、Cox2及EMT相关指标E-cadherin、N-cadherin以及MMP-9蛋白表达水平的影响。结果:1.与BRAF野生型患者相比,BRAF~(V600E)突变的PTC患者肿瘤组织中N-cadherin、MMP-9 mRNA和蛋白表达水平升高,E-cadherin表达降低,且与BPA暴露水平具有一定的相关性。2.不同浓度BPA染毒处理后,与Nthy-Vector(转染空载体质粒)细胞相比,在BPA各染毒剂量组Nthy-BRAF~(V600E)细胞的迁移、侵袭和克隆形成能力均明显增强(P(27)0.05)。与BPA对照组相比,10~(-7)mol/L BPA增强细胞的迁移、侵袭和克隆形成能力(P(27)0.05);3.33?10~(-4)mol/L BPA抑制细胞的迁移、侵袭和克隆形成能力(P(27)0.05)。3.不同浓度BPA染毒处理后,与Nthy-Vector细胞相比,Nthy-BRAF~(V600E)细胞的BRAF蛋白表达及ERK磷酸化水平显着升高(P(27)0.05),Cox2以及N-cadherin、MMP-9的蛋白表达水平升高,E-cadherin的蛋白表达水平降低(P(27)0.05)。与BPA对照组相比,10~(-7)mol/L BPA促进细胞ERK磷酸化,Cox2以及EMT相关分子的蛋白表达水平的升高(P(27)0.05);3.33?10~(-4)mol/L BPA抑制细胞ERK磷酸化,降低Cox2以及EMT相关分子的蛋白表达水平(P(27)0.05)。结论:1.与BRAF野生型患者相比,BRAF~(V600E)突变的PTC患者肿瘤组织更易发生EMT过程,BPA暴露水平的增加进一步促进了EMT过程的发生。2.人体暴露剂量(10~(-7)mol/L)的BPA可与BRAF~(V600E)突变协同作用通过激活ERK-Cox2信号通路促进甲状腺细胞EMT过程的发生,进而增强细胞的迁移、侵袭和克隆形成能力。(本文来源于《中国医科大学》期刊2019-02-01）
赵璐,孙俊波,史素琴,孙亚茹[9]（2019）在《沉默SPARC基因抑制高氟介导的甲状腺细胞凋亡》一文中研究指出目的研究富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(SPARC)对高氟介导的甲状腺细胞凋亡的作用及可能机制。方法培养人甲状腺细胞Nthy-ori 3-1,给予不同浓度的NaF(0.1、1、10 mmol/L)处理24 h,通过实时定量PCR和蛋白印迹法评价SPARC的表达,确定后续实验NaF作用浓度。另将细胞分组进行实验:对照组、NaF组(1 mmol/L孵育24 h)、si-SPARC组(转染SPARC siRNA 48 h用NaF处理)和si-NC组(转染Negative control siRNA 48 h用NaF处理)。CCK-8法和乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测细胞毒性;细胞凋亡试剂盒检测细胞凋亡率,蛋白印迹法检测活化caspase3(c-caspase3)和IGF-1R的蛋白表达。此外,将siSPARC和siIGF-1R共同转染至甲状腺细胞,通过评价细胞凋亡进一步探讨SPARC的作用机制。结果随着NaF的浓度增大,SPARC mRNA和蛋白表达均逐渐升高(P<0.05)。si-SPARC组细胞活性较si-NC组增高[(84.02±9.51)%vs.(58.31±6.86)%,P<0.05],且LDH释放率减少[(134.25±18.98)%vs.(195.18±23.50)%,P<0.05]。si-SPARC组较si-NC组细胞凋亡率减少[(124.67±19.44)%vs.(175.24±16.46)%,P<0.05]。此外,si-SPARC组(1.95±0.24 vs. 0.93±0.08,P<0.05)IGF-1R蛋白表达上调,抑制IGF-1R逆转SPARC对细胞凋亡的作用。结论沉默SPARC基因降低高氟介导的细胞毒性、抑制细胞凋亡,其机制可能是通过负调控IGF-1R实现的。(本文来源于《西安交通大学学报(医学版)》期刊2019年02期）
韩彦渊,刘杰,张惠莉,周欣[10]（2018）在《高碘调控PTEN诱导甲状腺细胞凋亡的实验研究》一文中研究指出目的探讨高碘调控第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(PTEN)对甲状腺细胞凋亡的影响及其机制。方法以不同浓度(0、10 mmol/L、20 mmol/L、40 mmol/L)碘化钾染毒人正常甲状腺Nthy-ori3-1细胞24 h后,采用RT-PCR和Western blot检测PTEN mRNA和蛋白的表达。将Nthy-ori3-1细胞随机分为空白组(不做处理)、髙碘组(以40 mmol/L碘化钾染毒48 h)、髙碘+空载体组(转染pc DNA3.0质粒后,以40 mmol/L碘化钾染毒48h)和髙碘+PTEN组(转染pc DNA3.0-PTEN质粒后,以40 mmol/L碘化钾染毒48 h)。流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率,RT-PCR检测细胞中PTEN mRNA表达,Western blot检测PTEN、Bax和Bcl-2蛋白的表达。结果 10 mmol/L、20 mmol/L和40 mmol/L碘化钾染毒后Nthy-ori3-l细胞中PTEN mRNA和蛋白的表达水平均明显升高(P<0.05),且20 mmol/L剂量组和40 mmol/L剂量组明显高于10 mmol/L剂量组(P<0.05),而20 mmol/L剂量组和40 mmol/L剂量组差异无显着性(P>0.05)。与空白组相比,髙碘组、髙碘+空载体组和髙碘+PTEN组的凋亡率、PTEN mRNA表达和PETN、Bax蛋白表达均显着升高,而Bcl-2蛋白表达均明显降低(P<0.05);与髙碘组相比,髙碘+PTEN组凋亡率、PTEN mRNA表达和PETN、Bax蛋白表达显着升高,而Bcl-2蛋白显着降低(P<0.05),而髙碘+空载体组与髙碘组各指标相比,差异无显着性(P>0.05)。结论高碘可通过上调PTEN表达诱导甲状腺细胞凋亡。(本文来源于《临床和实验医学杂志》期刊2018年20期）
人甲状腺细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)是最常用的增塑剂。人类可经消化道、呼吸道、静脉注射等途径摄入DEHP,进入体内的DEHP在多种酶的反应下主要通过邻苯二甲酸单(2-乙基)己酯(MEHP)来发挥作用。本研究拟探讨DEHP代谢物MEHP对人正常甲状腺细胞自噬的影响及其毒作用机制。方法将不同浓度(100、200、400、800μmol·L~(-1))的MEHP处理人正常甲状腺细胞(Nthy-Ori3-1)24 h后,应用Western Blot检测LC3Ⅰ、Ⅱ蛋白和p62蛋白表达,分析MEHP的剂量反应关系;将800μmol·L~(-1)MEHP分别处理Nthy-Ori3-1细胞3、6、12、24 h后,分析时间反应关系;联合自噬诱导剂EBSS处理细胞3 h、自噬抑制剂氯喹30μmol·L~(-1)处理细胞24 h后,应用Western Blot检测LC3Ⅱ蛋白及p62蛋白的表达水平,并利用荧光显微镜观察细胞RFP-GFP-LC3荧光斑点和RFP-p62荧光斑点的变化,以分析和比较MEHP和自噬诱导剂或自噬抑制剂的异同;应用LysoSensor~(TM)Green DND-189测定细胞内溶酶体pH值变化,使用荧光显微镜下观察试验结果,以确定MEHP是否通过抑制溶酶体酸化而抑制自噬。结果 Western Blot结果显示随剂量和时间的增加,细胞内LC3Ⅰ、Ⅱ蛋白和p62蛋白表达增加,且联合自噬诱导剂EBSS后,Western Blot结果显示LC3Ⅱ蛋白和p62蛋白表达进一步增加;而联合自噬抑制剂氯喹后,LC3Ⅱ蛋白和p62蛋白并没有进一步增加。利用荧光显微镜观察细胞内RFP-GFP-LC3串联体,结果显示黄色点状聚集增加(自噬体增加),红色不增加(自噬溶酶体不增加),RFP-P62荧光斑点较对照组增加。提示MEHP通过抑制自噬小体的降解抑制Nthy-Ori3-1细胞自噬。使用LysoSensor测定细胞pH值变化,结果显示氯喹组绿色荧光斑点增多,MEHP组无明显变化,则表明MEHP对溶酶体内pH变化无影响。结论 MEHP对细胞的自噬的抑制有明显的剂量和时间效应;MEHP通过抑制自噬小体的降解抑制自噬;且MEHP与氯喹抑制溶酶体酸化从而抑制自噬的途径不同,但具体是抑制自噬体与溶酶体的融合还是抑制溶酶体蛋白酶活性有待于进一步探讨。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
人甲状腺细胞论文参考文献
[1].胡帅尔,张紫虹,杨美玲,李文立,黄建康.邻苯二甲酸单（2-乙基）己酯对人正常甲状腺细胞自噬的影响及作用机制[C].2019年海峡两岸暨港澳青年科学家毒理学学术交流会论文集.2019
[2].胡帅尔,张紫虹,杨美玲,李文立,黄建康.邻苯二甲酸单（2-乙基）己酯对人正常甲状腺细胞自噬的影响及作用机制[C].中国毒理学会第九次全国毒理学大会论文集.2019
[3].李心歆.金雀异黄酮联合紫外线辐射对正常甲状腺细胞株及甲状腺癌细胞株增殖的影响[D].广西医科大学.2019
[4].李叙颖,张兰,王琳,武佳琦,范思有.软坚消瘿颗粒对肝郁脾虚型桥本甲状腺炎大鼠甲状腺细胞凋亡的影响[J].中成药.2019
[5].谭雪,徐菁,马巍,王海燕,曹晓晓.Bcl-2家族参与碘诱发自身免疫性甲状腺炎小鼠甲状腺细胞凋亡[J].卫生研究.2019
[6].张颖,温爽,王玲,李会政.传统涂片联合液基细胞学在甲状腺细胞学诊断中的应用价值探讨[J].中国耳鼻咽喉头颈外科.2019
[7].孟烈.甲状腺肿瘤患者外周血炎性因子和氧化应激水平、甲状腺细胞内GPX7蛋白和中医症候的相关性[J].黑龙江中医药.2019
[8].李浩.双酚A协同BRAF~(V600E)突变促进甲状腺细胞上皮间充质转化的实验研究[D].中国医科大学.2019
[9].赵璐,孙俊波,史素琴,孙亚茹.沉默SPARC基因抑制高氟介导的甲状腺细胞凋亡[J].西安交通大学学报(医学版).2019
[10].韩彦渊,刘杰,张惠莉,周欣.高碘调控PTEN诱导甲状腺细胞凋亡的实验研究[J].临床和实验医学杂志.2018