本文主要研究内容
作者杨帆（2019）在《Sima基因参与低氧联合规律运动对急性低氧所致心脏功能障碍和睡眠—觉醒节律紊乱的保护作用》一文中研究指出：1研究目的本研究以果蝇作为模式生物,利用Hand-Gal4系统对Sima基因敲减,通过低氧装置、运动装置对果蝇进行低氧、运动干预。探讨该干预措施对急性低氧引起的心脏功能障碍和睡眠-觉醒节律紊乱的保护作用及Sima基因是否参与了对心脏功能障碍和睡眠-觉醒节律紊乱的保护作用。对果蝇为期三周的低氧运动干预,干预结束后检测相关指标:心脏功能、睡眠-觉醒节律、SIMA m RNA表达量,得出数据并进行统计学分析。通过对Sima基因参与低氧联合规律运动对急性低氧引起的心脏功能障碍的保护作用的探讨,为研究低氧运动干预对急性缺氧引起的心脏功能障碍的保护作用提供理论依据,对改善心血管疾病患者的预后提供实践基础,同时也为研究Sima基因参与心功能障碍的保护作用机制提供研究的理论基础。2研究方法处女蝇v106187与雄蝇W1118雄蝇杂交获得F1代处女蝇Sima-RNAi/+果蝇分为:常氧对照组(NC)、正常组(N)、低氧组(H)、运动组(E)、低氧运动组(HE);处女蝇v106187与雄蝇48396杂交获得F1代处女蝇Hand>Sima RNAi果蝇分为:敲减常氧对照组(NCKd)、敲减组(Kd)、低氧敲减组(HKd)、运动敲减组(EKd)、低氧运动敲减组(HEKd)。两组产生的F1代作为实验果蝇各800只/组,20只/管,所有果蝇放入HWS智能型恒温恒湿培养箱中,恒温25摄氏度、恒湿50%、12小时昼∕夜循环饲养。运动组采用第3代果蝇运动装置进行运动,每天下午14:00—16:00。低氧组采用低氧装置进行低氧,每天上午9:00—13:00。运动组和低氧组均从第2天龄开始到第22天龄结束。指标检测:从各组中均随机挑选果蝇6只果蝇进行RT-PCR检测Sima基因的m RNA表达量构建Hand>Sima RNAi品系,各组随机挑选30只果蝇进行M-mood心脏功能检测获取心脏泵血功能(缩短分数),节律功能(纤维性震颤,心率不齐指数,舒张间期不齐指数,收缩间期不齐指数),抽取32只果蝇进行睡眠-觉醒节律监测(夜间睡眠时间,夜间深睡眠次数,日间活动次数,日间觉醒状态每分钟活动次数)。3研究结果3.1RT-pcr检测结果Sima-RNAi/+和Hand>Sima RNAi果蝇在相同的条件下通过低氧处理后进行RT-PCR检测SIMA m RNA表达量。与Sima-RNAi/+(基因正常表达组)相比,Hand>Sima RNAi(基因敲减组)心管SIMA m RNA表达降低,下调率为35%,由此证明F1代Hand>Sima RNAi果蝇品系构建成功。3.2低氧与运动诱导果蝇心脏SIMA m RNA表达检测结果在Sima-RNAi/+与Hand>Sima RNAi果蝇中通过组间比较得知,H组、E组、HE组SIMA m RNA表达量<HKd组、EKd组、HEKd组。其次Sima-RNAi/+果蝇中,H组、E组SIMA m RNA表达量<N组(P<0.05),HE组高于N组(P<0.05)。Hand>Sima RNAi果蝇,HKd组、EKd组、HEKd组显著高于Kd组(P<0.01)。3.3急性低氧对心脏功能影响检测结果与NC组比较,N组缩短分数低于NC组(P<0.01),而纤维性震颤,心律不齐指数,舒张间期不齐指数、收缩间期不齐指数高于NC组(P<0.01),与NCKd组比较,Kd组缩短分数降低(P<0.01),纤维性震颤,心律不齐指数,舒张间期不齐指数、收缩间期不齐指数升高(P<0.01)。3.4 Sima基因对心脏功能保护作用的检测结果与N组比较,Kd组缩短分数显著低于N组(P<0.01),纤维性震颤、心律不齐指数、舒张间期不齐指数,收缩间期不齐指数高于N组(P<0.01),N组SIMA m RNA表达量显著高于Kd组(P<0.01)。3.5低氧运动诱导Sima基因对心脏泵血功能影响的检测结果在Hand>Sima RNAi果蝇,HKd组高于Kd组(P<0.05),且HKd组SIMA m RNA表达量>Kd组(P<0.01)。在Sima-RNAi/+果蝇中,E组缩短分数高于N组(P<0.01),而E组SIMA m RNA表达量<N组(P<0.05);Hand>Sima RNAi果蝇中,EKd组高于Kd组(P<0.01),且EKd组SIMA m RNA表达量>Kd组。HE组、HEKd组分别显著高于N组、Kd组(P<0.01),HE组、HEKd组SIMA m RNA表达量>N组、Kd组(P<0.01)。3.6低氧与运动诱导Sima对果蝇心脏节律性影响检测结果在Sima-RNAi/+果蝇中,与N组比较,H组纤维性震颤、舒张间期不齐指数显著低于N组(P<0.01),而N组SIMA m RNA表达量<H组SIMA m RNA表达量(P<0.05);在Hand>Sima RNAi果蝇,与Kd组比较,HKd组纤维性震颤、心率不齐指数、舒张间期不齐指数、收缩间期不齐指数显著低于Kd组(P<0.01),且Kd组SIMA m RNA表达量<HKd组SIMA m RNA表达量(P<0.01)。在Sima-RNAi/+果蝇中,E组纤维性震颤、舒张间期不齐指数显著低于N组(P<0.01,P<0.05)、而N组SIMA m RNA表达量<E组SIMA m RNA表达量(P<0.05);在Hand>Sima RNAi果蝇,EKd组纤维性震颤、心率不齐指数、舒张间期不齐指数显著低于Kd组(P<0.01),且Kd组SIMA m RNA表达量<EKd组SIMA m RNA表达量(P<0.01)。HE组纤维性震颤、心率不齐指数、舒张间期不齐指数、收缩间期不齐指数显著低于N组(P<0.01)。且N组SIMA m RNA表达量<HE组SIMA m RNA表达量(P<0.01);HEKd组纤维性性震颤、心率不齐指数,舒张间期不齐指数、收缩间期不齐指数显著低于Kd组(P<0.01)且Kd组SIMA m RNA表达量<HEKd组SIMA m RNA表达量(P<0.01)。3.7急性低氧对果蝇睡眠-觉醒节律的影响检测结果与NC组比较,夜间深睡眠次数及日间觉醒状态下每分钟活动次数显著低于NC(P<0.05),P<0.01),与NCKd组比较,Kd组夜间睡眠时间,夜间深睡眠次数,日间活动次数及日间觉醒状态下每分钟活动次数显著低于NCKd组(P<0.01),且Kd组日间睡眠时间和深睡眠显著高于夜间睡眠时间和深睡眠(P<0.01)。3.8低氧与运动干预对果蝇夜间睡眠质量影响检测结果在Sima-RNAi/+果蝇中,H组果蝇夜间睡眠时间显著高于N组(P<0.01);Hand>Sima RNAi果蝇,HKd组果蝇夜间睡眠时间,夜间深睡眠次数显著高于Kd组(P<0.01)。在Sima-RNAi/+果蝇中,E组夜间睡眠时间、夜间深睡眠次数显著高于N组(P<0.01);Hand>Sima RNAi果蝇,EKd组夜间深睡眠次数显著高于Kd组(P<0.01)。在Sima-RNAi/+果蝇中,HE组夜间睡眠时间、夜间深睡眠次数显著高于N组(P<0.01,P<0.05);Hand>Sima RNAi果蝇,HEKd组夜间睡眠时间、夜间深睡眠次数显著高于Kd组(P<0.01)。3.9低氧与运动对果蝇日间活动情况检测结果在Sima-RNAi/+果蝇中,E组果蝇日间活动活动次数、日间觉醒状态下每分钟活动次数高于N组(P<0.01,P<0.05);Hand>Sima RNAi果蝇,EKd组果蝇日间活动次数高于Kd组(P<0.01)。在Sima-RNAi/+果蝇中,HE组日间活动次数,日间觉醒状态下每分钟活动次数显著高于N组(P<0.01,P<0.05);Hand>Sima RNAi果蝇,HEKd组日间活动时间、觉醒状态下每分钟活动次数显著高于Kd组(P<0.01,P<0.05)。4结论4.1通过UAS-Gal4系统成功构建了Hand>Sima RNAi果蝇品系,发现心脏Sima-RNAi/+与Hand>Sima RNAi果蝇急性低氧后导致了果蝇心脏泵血功能降低、纤维性震颤、心率不齐的发生和睡眠-觉醒节律紊乱。4.2低氧与规律运动干预后诱导了Sima基因在心脏的表达并参与对Sima-RNAi/+与Hand>Sima RNAi果蝇心脏泵血功能、节律功能的保护作用,改善了由于急性低氧所致的心脏功能障碍,低氧与规律运动改善了睡眠-觉醒节律紊乱,提高了夜间睡眠质量,增加了日间活动量。4.3低氧联合运动干预对Sima-RNAi/+与Hand>Sima RNAi果蝇心脏功能、睡眠-觉醒节律的改善作用优于单一的低氧或运动干预,低氧运动干预不但能提高Sima正常表达情况下心脏功能,还能改善心脏Sima基因表达下调果蝇的心脏功能损伤。
Abstract
1yan jiu mu de ben yan jiu yi guo ying zuo wei mo shi sheng wu ,li yong Hand-Gal4ji tong dui Simaji yin qiao jian ,tong guo di yang zhuang zhi 、yun dong zhuang zhi dui guo ying jin hang di yang 、yun dong gan yu 。tan tao gai gan yu cuo shi dui ji xing di yang yin qi de xin zang gong neng zhang ai he shui mian -jiao xing jie lv wen luan de bao hu zuo yong ji Simaji yin shi fou can yu le dui xin zang gong neng zhang ai he shui mian -jiao xing jie lv wen luan de bao hu zuo yong 。dui guo ying wei ji san zhou de di yang yun dong gan yu ,gan yu jie shu hou jian ce xiang guan zhi biao :xin zang gong neng 、shui mian -jiao xing jie lv 、SIMA m RNAbiao da liang ,de chu shu ju bing jin hang tong ji xue fen xi 。tong guo dui Simaji yin can yu di yang lian ge gui lv yun dong dui ji xing di yang yin qi de xin zang gong neng zhang ai de bao hu zuo yong de tan tao ,wei yan jiu di yang yun dong gan yu dui ji xing que yang yin qi de xin zang gong neng zhang ai de bao hu zuo yong di gong li lun yi ju ,dui gai shan xin xie guan ji bing huan zhe de yu hou di gong shi jian ji chu ,tong shi ye wei yan jiu Simaji yin can yu xin gong neng zhang ai de bao hu zuo yong ji zhi di gong yan jiu de li lun ji chu 。2yan jiu fang fa chu nv ying v106187yu xiong ying W1118xiong ying za jiao huo de F1dai chu nv ying Sima-RNAi/+guo ying fen wei :chang yang dui zhao zu (NC)、zheng chang zu (N)、di yang zu (H)、yun dong zu (E)、di yang yun dong zu (HE);chu nv ying v106187yu xiong ying 48396za jiao huo de F1dai chu nv ying Hand>Sima RNAiguo ying fen wei :qiao jian chang yang dui zhao zu (NCKd)、qiao jian zu (Kd)、di yang qiao jian zu (HKd)、yun dong qiao jian zu (EKd)、di yang yun dong qiao jian zu (HEKd)。liang zu chan sheng de F1dai zuo wei shi yan guo ying ge 800zhi /zu ,20zhi /guan ,suo you guo ying fang ru HWSzhi neng xing heng wen heng shi pei yang xiang zhong ,heng wen 25she shi du 、heng shi 50%、12xiao shi zhou ∕ye xun huan si yang 。yun dong zu cai yong di 3dai guo ying yun dong zhuang zhi jin hang yun dong ,mei tian xia wu 14:00—16:00。di yang zu cai yong di yang zhuang zhi jin hang di yang ,mei tian shang wu 9:00—13:00。yun dong zu he di yang zu jun cong di 2tian ling kai shi dao di 22tian ling jie shu 。zhi biao jian ce :cong ge zu zhong jun sui ji tiao shua guo ying 6zhi guo ying jin hang RT-PCRjian ce Simaji yin de m RNAbiao da liang gou jian Hand>Sima RNAipin ji ,ge zu sui ji tiao shua 30zhi guo ying jin hang M-moodxin zang gong neng jian ce huo qu xin zang beng xie gong neng (su duan fen shu ),jie lv gong neng (qian wei xing zhen chan ,xin lv bu ji zhi shu ,shu zhang jian ji bu ji zhi shu ,shou su jian ji bu ji zhi shu ),chou qu 32zhi guo ying jin hang shui mian -jiao xing jie lv jian ce (ye jian shui mian shi jian ,ye jian shen shui mian ci shu ,ri jian huo dong ci shu ,ri jian jiao xing zhuang tai mei fen zhong huo dong ci shu )。3yan jiu jie guo 3.1RT-pcrjian ce jie guo Sima-RNAi/+he Hand>Sima RNAiguo ying zai xiang tong de tiao jian xia tong guo di yang chu li hou jin hang RT-PCRjian ce SIMA m RNAbiao da liang 。yu Sima-RNAi/+(ji yin zheng chang biao da zu )xiang bi ,Hand>Sima RNAi(ji yin qiao jian zu )xin guan SIMA m RNAbiao da jiang di ,xia diao lv wei 35%,you ci zheng ming F1dai Hand>Sima RNAiguo ying pin ji gou jian cheng gong 。3.2di yang yu yun dong you dao guo ying xin zang SIMA m RNAbiao da jian ce jie guo zai Sima-RNAi/+yu Hand>Sima RNAiguo ying zhong tong guo zu jian bi jiao de zhi ,Hzu 、Ezu 、HEzu SIMA m RNAbiao da liang <HKdzu 、EKdzu 、HEKdzu 。ji ci Sima-RNAi/+guo ying zhong ,Hzu 、Ezu SIMA m RNAbiao da liang <Nzu (P<0.05),HEzu gao yu Nzu (P<0.05)。Hand>Sima RNAiguo ying ,HKdzu 、EKdzu 、HEKdzu xian zhe gao yu Kdzu (P<0.01)。3.3ji xing di yang dui xin zang gong neng ying xiang jian ce jie guo yu NCzu bi jiao ,Nzu su duan fen shu di yu NCzu (P<0.01),er qian wei xing zhen chan ,xin lv bu ji zhi shu ,shu zhang jian ji bu ji zhi shu 、shou su jian ji bu ji zhi shu gao yu NCzu (P<0.01),yu NCKdzu bi jiao ,Kdzu su duan fen shu jiang di (P<0.01),qian wei xing zhen chan ,xin lv bu ji zhi shu ,shu zhang jian ji bu ji zhi shu 、shou su jian ji bu ji zhi shu sheng gao (P<0.01)。3.4 Simaji yin dui xin zang gong neng bao hu zuo yong de jian ce jie guo yu Nzu bi jiao ,Kdzu su duan fen shu xian zhe di yu Nzu (P<0.01),qian wei xing zhen chan 、xin lv bu ji zhi shu 、shu zhang jian ji bu ji zhi shu ,shou su jian ji bu ji zhi shu gao yu Nzu (P<0.01),Nzu SIMA m RNAbiao da liang xian zhe gao yu Kdzu (P<0.01)。3.5di yang yun dong you dao Simaji yin dui xin zang beng xie gong neng ying xiang de jian ce jie guo zai Hand>Sima RNAiguo ying ,HKdzu gao yu Kdzu (P<0.05),ju HKdzu SIMA m RNAbiao da liang >Kdzu (P<0.01)。zai Sima-RNAi/+guo ying zhong ,Ezu su duan fen shu gao yu Nzu (P<0.01),er Ezu SIMA m RNAbiao da liang <Nzu (P<0.05);Hand>Sima RNAiguo ying zhong ,EKdzu gao yu Kdzu (P<0.01),ju EKdzu SIMA m RNAbiao da liang >Kdzu 。HEzu 、HEKdzu fen bie xian zhe gao yu Nzu 、Kdzu (P<0.01),HEzu 、HEKdzu SIMA m RNAbiao da liang >Nzu 、Kdzu (P<0.01)。3.6di yang yu yun dong you dao Simadui guo ying xin zang jie lv xing ying xiang jian ce jie guo zai Sima-RNAi/+guo ying zhong ,yu Nzu bi jiao ,Hzu qian wei xing zhen chan 、shu zhang jian ji bu ji zhi shu xian zhe di yu Nzu (P<0.01),er Nzu SIMA m RNAbiao da liang <Hzu SIMA m RNAbiao da liang (P<0.05);zai Hand>Sima RNAiguo ying ,yu Kdzu bi jiao ,HKdzu qian wei xing zhen chan 、xin lv bu ji zhi shu 、shu zhang jian ji bu ji zhi shu 、shou su jian ji bu ji zhi shu xian zhe di yu Kdzu (P<0.01),ju Kdzu SIMA m RNAbiao da liang <HKdzu SIMA m RNAbiao da liang (P<0.01)。zai Sima-RNAi/+guo ying zhong ,Ezu qian wei xing zhen chan 、shu zhang jian ji bu ji zhi shu xian zhe di yu Nzu (P<0.01,P<0.05)、er Nzu SIMA m RNAbiao da liang <Ezu SIMA m RNAbiao da liang (P<0.05);zai Hand>Sima RNAiguo ying ,EKdzu qian wei xing zhen chan 、xin lv bu ji zhi shu 、shu zhang jian ji bu ji zhi shu xian zhe di yu Kdzu (P<0.01),ju Kdzu SIMA m RNAbiao da liang <EKdzu SIMA m RNAbiao da liang (P<0.01)。HEzu qian wei xing zhen chan 、xin lv bu ji zhi shu 、shu zhang jian ji bu ji zhi shu 、shou su jian ji bu ji zhi shu xian zhe di yu Nzu (P<0.01)。ju Nzu SIMA m RNAbiao da liang <HEzu SIMA m RNAbiao da liang (P<0.01);HEKdzu qian wei xing xing zhen chan 、xin lv bu ji zhi shu ,shu zhang jian ji bu ji zhi shu 、shou su jian ji bu ji zhi shu xian zhe di yu Kdzu (P<0.01)ju Kdzu SIMA m RNAbiao da liang <HEKdzu SIMA m RNAbiao da liang (P<0.01)。3.7ji xing di yang dui guo ying shui mian -jiao xing jie lv de ying xiang jian ce jie guo yu NCzu bi jiao ,ye jian shen shui mian ci shu ji ri jian jiao xing zhuang tai xia mei fen zhong huo dong ci shu xian zhe di yu NC(P<0.05),P<0.01),yu NCKdzu bi jiao ,Kdzu ye jian shui mian shi jian ,ye jian shen shui mian ci shu ,ri jian huo dong ci shu ji ri jian jiao xing zhuang tai xia mei fen zhong huo dong ci shu xian zhe di yu NCKdzu (P<0.01),ju Kdzu ri jian shui mian shi jian he shen shui mian xian zhe gao yu ye jian shui mian shi jian he shen shui mian (P<0.01)。3.8di yang yu yun dong gan yu dui guo ying ye jian shui mian zhi liang ying xiang jian ce jie guo zai Sima-RNAi/+guo ying zhong ,Hzu guo ying ye jian shui mian shi jian xian zhe gao yu Nzu (P<0.01);Hand>Sima RNAiguo ying ,HKdzu guo ying ye jian shui mian shi jian ,ye jian shen shui mian ci shu xian zhe gao yu Kdzu (P<0.01)。zai Sima-RNAi/+guo ying zhong ,Ezu ye jian shui mian shi jian 、ye jian shen shui mian ci shu xian zhe gao yu Nzu (P<0.01);Hand>Sima RNAiguo ying ,EKdzu ye jian shen shui mian ci shu xian zhe gao yu Kdzu (P<0.01)。zai Sima-RNAi/+guo ying zhong ,HEzu ye jian shui mian shi jian 、ye jian shen shui mian ci shu xian zhe gao yu Nzu (P<0.01,P<0.05);Hand>Sima RNAiguo ying ,HEKdzu ye jian shui mian shi jian 、ye jian shen shui mian ci shu xian zhe gao yu Kdzu (P<0.01)。3.9di yang yu yun dong dui guo ying ri jian huo dong qing kuang jian ce jie guo zai Sima-RNAi/+guo ying zhong ,Ezu guo ying ri jian huo dong huo dong ci shu 、ri jian jiao xing zhuang tai xia mei fen zhong huo dong ci shu gao yu Nzu (P<0.01,P<0.05);Hand>Sima RNAiguo ying ,EKdzu guo ying ri jian huo dong ci shu gao yu Kdzu (P<0.01)。zai Sima-RNAi/+guo ying zhong ,HEzu ri jian huo dong ci shu ,ri jian jiao xing zhuang tai xia mei fen zhong huo dong ci shu xian zhe gao yu Nzu (P<0.01,P<0.05);Hand>Sima RNAiguo ying ,HEKdzu ri jian huo dong shi jian 、jiao xing zhuang tai xia mei fen zhong huo dong ci shu xian zhe gao yu Kdzu (P<0.01,P<0.05)。4jie lun 4.1tong guo UAS-Gal4ji tong cheng gong gou jian le Hand>Sima RNAiguo ying pin ji ,fa xian xin zang Sima-RNAi/+yu Hand>Sima RNAiguo ying ji xing di yang hou dao zhi le guo ying xin zang beng xie gong neng jiang di 、qian wei xing zhen chan 、xin lv bu ji de fa sheng he shui mian -jiao xing jie lv wen luan 。4.2di yang yu gui lv yun dong gan yu hou you dao le Simaji yin zai xin zang de biao da bing can yu dui Sima-RNAi/+yu Hand>Sima RNAiguo ying xin zang beng xie gong neng 、jie lv gong neng de bao hu zuo yong ,gai shan le you yu ji xing di yang suo zhi de xin zang gong neng zhang ai ,di yang yu gui lv yun dong gai shan le shui mian -jiao xing jie lv wen luan ,di gao le ye jian shui mian zhi liang ,zeng jia le ri jian huo dong liang 。4.3di yang lian ge yun dong gan yu dui Sima-RNAi/+yu Hand>Sima RNAiguo ying xin zang gong neng 、shui mian -jiao xing jie lv de gai shan zuo yong you yu chan yi de di yang huo yun dong gan yu ,di yang yun dong gan yu bu dan neng di gao Simazheng chang biao da qing kuang xia xin zang gong neng ,hai neng gai shan xin zang Simaji yin biao da xia diao guo ying de xin zang gong neng sun shang 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自湖南师范大学的杨帆，发表于刊物湖南师范大学2019-10-31论文，是一篇关于急性低氧论文,低氧运动论文,心脏功能论文,睡眠觉醒节律论文,湖南师范大学2019-10-31论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自湖南师范大学2019-10-31论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
标签：急性低氧论文; 低氧运动论文; 心脏功能论文; 睡眠觉醒节律论文; 湖南师范大学2019-10-31论文;