山羊地方性鼻内肿瘤病毒论文-沈克飞,唐达,杨柳,徐登峰,许国洋

山羊地方性鼻内肿瘤病毒论文-沈克飞,唐达,杨柳,徐登峰,许国洋

导读:本文包含了山羊地方性鼻内肿瘤病毒论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:地方性鼻内肿瘤,羊,基因组,遗传多样性

山羊地方性鼻内肿瘤病毒论文文献综述

沈克飞,唐达,杨柳,徐登峰,许国洋[1](2019)在《山羊地方性鼻内肿瘤病毒重庆株基因组序列分析》一文中研究指出目的分析山羊地方性鼻内肿瘤病毒(enzootic nasal tumor virus,ENTV)重庆株基因组序列。方法对临床病例进行剖检、病理学观察,提取组织总RNA,进行RT-PCR扩增,对获得的ENTV-2基因组序列进行测定及分析。结果鼻内肿瘤在鼻腔后端与鼻甲筛骨黏膜紧密相连,完全阻塞鼻腔,侵入鼻窦,呈灰红色、乳头状,表面覆盖大量透明黏液。肿瘤细胞以管状和乳头状结构排列。拼接出1条长度为7 243 nt的ENTV-2 CQ株基因组序列,约占ENTV-2基因组长度的96. 2%。该序列与四川ENTV-2的同源性,最高大于97%,与山羊内源性逆转录病毒(caprine endogenous retrovirus,CERV)gag(XM_018046415_CERV)的同源性高于98%,与陕西ENTV-2的同源性为91%~92%,与英国ENTV-2(AY197548)的同源性为88%。多序列比对显示,CQ株gag基因有2处多核苷酸插入,这一序列特征与XM_018046415_CERV的gag基因相同。除了AY197548_ENTV-2单独构成Ⅱ群外,ENTV-2在羊反转录病毒进化树中构成Ⅰ群;CQ株与四川ENTV-2构成一分支,与陕西ENTV-2构成另一分支。结论该病例为山羊地方性鼻内肿瘤(enzootic nasal tumor,ENT),提示其病原可能是1株古老ENTV-2毒株,有遗传多样性。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2019年08期)

林裕胜,江锦秀,张靖鹏,游伟,毛坤明[2](2018)在《福清山羊地方性鼻内肿瘤病毒 绵羊肺炎支原体和溶血性曼氏杆菌混合感染的诊断病例》一文中研究指出2017年10月福清市某山羊养殖场发生了以流鼻涕、呼吸困难为主要特征的传染病,其中1~6月龄小羊病死率高达50%以上。通过临床症状、剖检病变和实验室检验,确诊为山羊地方性鼻内肿瘤病毒(Enzootic nasal tumor virus,ENTV)、绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,Mo)和溶血性曼氏杆菌(Mannheimia haemolytica,Mh)混合感染引起的山羊呼吸道疾病,诊断过程报告如下。(本文来源于《中国兽医杂志》期刊2018年10期)

侯宏艳,朱德建,张丹俊,胡晓苗,赵瑞宏[3](2018)在《山羊地方性鼻内肿瘤病毒的gag基因克隆及分析》一文中研究指出安徽省某山羊场内部分羊只发生羊鼻漏,面部一侧肿胀,进行病理剖检观察后,取面部皮下肿瘤组织研磨,提取RNA,用特异性引物通过RT-PCR方法扩增获得目的片段并测序。序列比对分析表明,获得的目的基因和山羊地方性鼻内肿瘤病毒的同源性最高,达99%。结果显示,此羊场的山羊感染了由山羊地方性鼻内肿瘤病毒引起的山羊地方性鼻内肿瘤。(本文来源于《中国草食动物科学》期刊2018年02期)

何亚鹏,张琪,王景,周曼,付明哲[4](2017)在《山羊地方性鼻内肿瘤病毒gag蛋白的原核表达、纯化及多克隆抗体的制备》一文中研究指出为获得纯化的山羊地方性鼻内肿瘤病毒(enzootic nasal tumor virus of goats,ENTV)gag蛋白和抗gag蛋白的多克隆抗体,根据GenBank已登录的ENTVgag基因序列,设计合成1对特异性引物,应用PCP扩增gag基因并连接于原核表达载体pET-28a(+)中,构建重组质粒pET-gag,经鉴定正确后转化大肠杆菌Rosetta(DE3)株进行诱导表达,并进行SDS-PAGE分析。重组菌经IPTG诱导后成功表达相对分子质量约为69 000的重组蛋白,重组蛋白经镍柱亲和层析纯化、尿素梯度透析复性后免疫小鼠制备多克隆抗体。Western blot试验表明,重组蛋白能与制得的多克隆抗体反应,而与正常小鼠血清和山羊地方性鼻内肿瘤患羊血清不反应。本试验成功获得了纯化的ENTV gag蛋白和小鼠抗gag蛋白的多克隆抗体,为进一步研究gag蛋白在ENTV致病过程中的作用提供了材料。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2017年12期)

林裕胜,江锦秀,游伟,胡奇林[5](2017)在《山羊地方性鼻内肿瘤病毒和支原体混合感染山羊的诊断》一文中研究指出2016年10月福州市一山羊养殖户的山羊发病,经临床症状、剖检病变及实验室检验,确诊为羊地方性鼻内肿瘤病毒(Enzootic nasal tumor virus,ENTV)、绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,Mo)和丝状支原体山羊亚种(Mycoplasma mycoides subsp.capri,Mmc)混合感染引起的山羊呼吸(本文来源于《中国兽医杂志》期刊2017年10期)

何亚鹏[6](2017)在《山羊地方性鼻内肿瘤病毒陕西株序列分析及Gag和Su蛋白多克隆抗体的制备》一文中研究指出羊地方性鼻内肿瘤病毒(Enzootic nasal tumor virus,ENTV)是羊地方性鼻内腺瘤(Enzootic nasal adenocarcinoma,ENA)的病原,可导致鼻甲骨筛骨上皮细胞的致瘤性转化。ENTV-1感染绵羊,ENTV-2感染山羊。因为缺少感染性分子克隆和无法培养病毒,ENTV在ENA发病机理中的作用尚未被完全揭示,GenBank中收录的ENTV全基因组也很少。在中国该病主要流行于内蒙古、湖南、四川、重庆、陕西等多个省市。为了深入研究ENTV,本研究对陕西省疑似ENA的山羊进行诊断,建立了RT-PCR检测方法,对陕西省不同地区的4株ENTV-2进行全基因分段克隆和序列分析,并制备了Gag和Su蛋白多克隆抗体,获得如下研究结果:1.对陕西省4个山羊养殖场发生肿瘤的羊通过临床症状观察,剖检和病理学观察,确定该病为山羊地方性鼻内腺瘤。建立ENTV-2的RT-PCR方法,对临床样品进行检测,阳性率为15.5%。2.通过分段克隆得到陕西省4株ENTV-2的全基因,进行序列比较分析。ENTV-2-Shaanxi1~4全基因和ENTV-2-SC株(登录号:HM104174.1)全基因核苷酸相似度达到98.2~98.7%,和ENTV-2欧洲株(登录号:AY197548.1)相似度达到89.6~89.8%。序列差异部分主要集中在LTR,gag的两个可变区,Orf-x和env的跨膜区(Transmembrane region,Tm)序列。大部分的氨基酸差异存在于Orf-x,ENTV-2-Shaanxi株和ENTV-2-SC株的Orf-x均含有108个氨基酸,而ENTV-2欧洲株含有166个氨基酸。除了Orf-x,还有Gag蛋白的两个可变区域,ENTV-2-Shaanxi1~4株的可变区1区有6个连续的脯氨酸残基。囊膜蛋白的跨膜区,特别是胞质尾区差异也较大,但胞质尾部中的YXXM基序是很保守的,YXXM是PI3K的结合基序。遗传进化分析表明4个Shaanxi株和已发表的2株ENTV-2亲缘关系最近,特别是SC株。3.应用PCR分别扩增gag和su基因并和表达载体pET-28a(+)相连,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)株,经IPTG诱导后重组菌成功表达了重组蛋白,将诱导表达的重组蛋白经镍柱亲和层析纯化、复性后免疫小鼠,制备多克隆抗体。Western blot分析试验表明,原核表达纯化的Gag蛋白和Su蛋白能够与制得的鼠抗Gag蛋白和鼠抗Su蛋白多克隆抗体抗体特异性结合,而不与患羊的血清结合。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2017-05-01)

何桦,冯迎春,颜其贵,张国俊,张霞[7](2012)在《山羊地方性鼻内肿瘤病毒SC株gag基因分子克隆与原核表达》一文中研究指出克隆山羊地方性鼻内肿瘤病毒(ENTV)的群抗原基因gag,并通过原核表达系统对gag进行表达研究。参照GenBank中收录的山羊地方性鼻内肿瘤病毒(ENTV-2)gag基因序列设计1对特异引物,以地方性鼻内腺癌(ENA)山羊鼻内分泌物中病毒RNA为模板,RT-PCR扩增获得目的片段,并将产物连接到pMD18-T载体获得阳性克隆(pMD18-gag)并测序。根据gag基因的ORF设计1对表达用引物进行亚克隆,并将ORF重组到pET-32,重组质粒转化至宿主菌Rostta中,用IPTG诱导表达,对表达的蛋白用SDS-PAGE分析,纯化表达产物,通过ELISA初步分析产物的反应原性。结果显示:克隆获得长2 249 bp的核酸序列(GenBank:HM104174),含有完整的ORF,与已报道的ENTV-2 gag基因的同源性高达87%,氨基酸水平上的同源性高达96.4%。表达产物大小约87 ku,与理论推理一致。采用ELISA方法检测表达产物未能与ENA阳性血清发生特异性反应。结果表明:gag基因在原核系统pET-32/Rostta中得到表达,表达产物与ENA阳性血清不具反应原性。(本文来源于《畜牧与兽医》期刊2012年02期)

冯迎春,颜其贵,郭万柱,王小玉,舒蕾[8](2011)在《山羊地方性鼻内肿瘤病毒ENTV-SC株基因组cDNA文库的构建及生物信息学分析》一文中研究指出根据山羊地方性鼻内肿瘤病毒(ENTV-2)基因组序列设计5对引物,通过RT-PCR技术从山羊地方性鼻内肿瘤自然感染病例的鼻液中分段扩增获得了ENTV的基因组,构建了ENTV的cDNA文库,并对基因组序列进行了生物信息学分析。结果显示,获得的序列全长7 168bp,包含相互重迭的gag-pro-pol-env编码区及部分5′端非编码区,属B/D型病毒粒子。ENTV-SC与ENTV-2(2003年测序)高度相似,LTR、gag、pro、pol、env基因的相似性分别为91.0%、88.0%、88.6%、89.3%和91.0%。ENTV-SC与EN-TV-1及绵羊肺腺瘤病毒相似,主要差异存在于gag、env的跨膜区及LTR。(本文来源于《中国兽医科学》期刊2011年02期)

冯迎春[9](2010)在《山羊地方性鼻内肿瘤病毒ENTV cDNA文库的构建及功能基因的初步表达》一文中研究指出地方性鼻内肿瘤病是一种以呼吸道鼻内粘膜分泌型上皮细胞发生致瘤性转化为特征的接触性传染病,主要发生于山羊和绵羊,其临床症状主要表现为连续性鼻漏、呼吸困难、眼球突出、颅骨变形、面部肿大、喷嚏、打鼾和极度消瘦。除澳大利亚和新西兰外,所有其他主要养羊国家都有该病的流行,发病率为0.1%-15%,给各国养羊业造成了较大的损失。在国内,·该病主要流行于内蒙古、湖南及四川等主要养羊地区,严重影响了当地山羊种质资源的发展。目前,国内对该病病原学的研究甚少,仅有几例山羊地方性鼻内肿瘤性疾病病理学的相关研究报道。为了深入认识该病,本研究进行了以下几方面的工作:Ⅰ.山羊地方性鼻内腺瘤病毒ENTV cDNA文库的构建和基因组解析根据NCBI中收录的ENTV基因组序列设计6对引物,利用RT-PCR技术从山羊地方性鼻内肿瘤自然感染病例的鼻液中的病毒RNA中分段扩增出相应片段,经TA克隆筛选及测序鉴定,成功克隆了重组质粒pMD-ⅰ、pMD-ⅱ、pMD-ⅲ、pMD-ⅳ、pMD-ⅴ、pMD-ⅵ,构建了包含ENTV基因组序列的cDNA文库。序列分析结果显示,相应的gag编码区和env编码区均含有ENTV的独特区,与ENTV-2(登录号:NC_004994)对应序列的相似性分别为88%、90%、93%、88%和92%,而与JSRV及ERVs的差异性较大。序列拼接结果显示,ENTV基因组序列包含5'端非编码区、3'端非编码区和相互重迭的gag-pro-pol-env编码区,基因组全长为7168bp。Ⅱ.山羊地方性鼻内肿瘤病毒ENTV功能基因的分子克隆及初步表达研究利用PCR技术从ENTV cNDA文库中成功亚克隆了ENTV gag、env、SU、TM和SD的编码区,构建了pMD-gag、pMD-env、pMD-SU、pMD-TM和pMD-SD的亚克隆,并构建了表达这些编码区的表达质粒(pET-gag、pEGFP-env、pEGFP-SU、pEGFP-TM和pEGFP-SD)。将重组原核表达质粒pET-gag转入宿主菌E.coli Rosetta-gami-TM (DE3) plysS进行表达研究,SDS-PAGE电泳检测到大小约87ku的目的蛋白,为进一步研究gag的功能奠定了基础。重组质粒pEGFP-env、pEGFP-SU、pEGFP-TM、pEGFP-SD转染COS-7哺乳动物细胞,12h后即可观察到荧光,外源基因转录子的RT-PCR检测为阳性,说明重组质粒在启动子的驱动下可以融合荧光蛋白有效表达。(本文来源于《四川农业大学》期刊2010-06-01)

山羊地方性鼻内肿瘤病毒论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

2017年10月福清市某山羊养殖场发生了以流鼻涕、呼吸困难为主要特征的传染病,其中1~6月龄小羊病死率高达50%以上。通过临床症状、剖检病变和实验室检验,确诊为山羊地方性鼻内肿瘤病毒(Enzootic nasal tumor virus,ENTV)、绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,Mo)和溶血性曼氏杆菌(Mannheimia haemolytica,Mh)混合感染引起的山羊呼吸道疾病,诊断过程报告如下。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

山羊地方性鼻内肿瘤病毒论文参考文献

[1].沈克飞,唐达,杨柳,徐登峰,许国洋.山羊地方性鼻内肿瘤病毒重庆株基因组序列分析[J].中国生物制品学杂志.2019

[2].林裕胜,江锦秀,张靖鹏,游伟,毛坤明.福清山羊地方性鼻内肿瘤病毒绵羊肺炎支原体和溶血性曼氏杆菌混合感染的诊断病例[J].中国兽医杂志.2018

[3].侯宏艳,朱德建,张丹俊,胡晓苗,赵瑞宏.山羊地方性鼻内肿瘤病毒的gag基因克隆及分析[J].中国草食动物科学.2018

[4].何亚鹏,张琪,王景,周曼,付明哲.山羊地方性鼻内肿瘤病毒gag蛋白的原核表达、纯化及多克隆抗体的制备[J].中国兽医学报.2017

[5].林裕胜,江锦秀,游伟,胡奇林.山羊地方性鼻内肿瘤病毒和支原体混合感染山羊的诊断[J].中国兽医杂志.2017

[6].何亚鹏.山羊地方性鼻内肿瘤病毒陕西株序列分析及Gag和Su蛋白多克隆抗体的制备[D].西北农林科技大学.2017

[7].何桦,冯迎春,颜其贵,张国俊,张霞.山羊地方性鼻内肿瘤病毒SC株gag基因分子克隆与原核表达[J].畜牧与兽医.2012

[8].冯迎春,颜其贵,郭万柱,王小玉,舒蕾.山羊地方性鼻内肿瘤病毒ENTV-SC株基因组cDNA文库的构建及生物信息学分析[J].中国兽医科学.2011

[9].冯迎春.山羊地方性鼻内肿瘤病毒ENTVcDNA文库的构建及功能基因的初步表达[D].四川农业大学.2010

标签:;  ;  ;  ;  

山羊地方性鼻内肿瘤病毒论文-沈克飞,唐达,杨柳,徐登峰,许国洋
下载Doc文档

猜你喜欢