导读:本文包含了体外酶活分析论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:单核细胞增多性李斯特菌,M29家族氨基肽酶,酶学特性,金属离子
体外酶活分析论文文献综述
何展,王航,韩笑,马天天,杭奕[1]（2018）在《单核细胞增多性李斯特菌氨基肽酶Lmo1711体外表达及其酶活分析》一文中研究指出对单核细胞增多性李斯特菌(简称单增李斯特菌)lmo1711基因编码的氨基肽酶进行克隆表达与纯化,并研究该重组蛋白的体外酶学特性。首先通过生物信息学分析预测Lmo1711与氨基肽酶家族成员的亲缘关系及关键活性位点的保守性。利用SWISS-MODEL模拟预测该蛋白的空间结构;构建Lmo1711原核表达载体并转化入E.coli Rosetta中,诱导表达重组目的蛋白,并利用镍离子亲和层析方法纯化目的蛋白;以氨基酸-对硝基苯胺偶联物为底物,Lmo1711通过水解底物N端氨基酸残基产生游离对硝基苯胺单体,405 nm处检测吸光值对该产物进行检测从而分析Lmo1711的酶学特性。在此基础上系统研究Lmo1711对不同氨基酸残基底物的催化特异性,及不同金属离子对该酶活性的影响。经原核表达纯化获得49.3 kDa的重组Lmo1711蛋白,与预测分子量一致;生物信息学分析推测Lmo1711属于M29氨基肽酶家族,且存在保守关键氨基酸活性位点(Glu250、Glu316、His345、Tyr352、His378、Asp380);酶活分析显示,Lmo1711具有较强的氨基肽酶活性,针对不同底物的结合和催化能力差异较大,对亮氨酸残基的亲和程度最高;Lmo1711氨基肽酶活性具有金属离子依赖性,Co~(2+)、Cd~(2+)、Zn~(2+)等多种金属离子均能显着增强其活性,其中Co~(2+)的激活效应最显着。本试验首次发现并证实,单增李斯特菌Lmo1711属于M29氨基肽酶家族成员,具有较强的催化活性,且对金属离子具有不同程度的依赖性。(本文来源于《生物工程学报》期刊2018年05期）
李淑平,陈维中[2]（2002）在《采用体外酶免疫测定法对重庆地区40例哮喘患者进行过敏原的检测分析》一文中研究指出目的 采用体外酶免疫检测方法测定哮喘患者的过敏情况 ,以了解重庆地区过敏性哮喘患者常见过敏原的发生情况。方法 抽取哮喘病人静脉血 2ml,30 0 0rpm 10min分离血清 ,吸取 0 4 μl血清入反应管 ,室温孵育 10 0min后 ,去除管内血清 ,用 1ml清洗液清洗 ,再加入结合液孵育 16h ,去除结合液 ,再用清洗液清洗 ,加入底物 /指示剂 ,0～ 90min观察颜色变化。结果 对重庆地区 4 0例支气管哮喘病人进行 7种抗原的检查 ,过敏原的阳性检出率 95 % ,32名患者均对 2种以上的过敏原出现阳性反应。 4 0例患者中有 38例IgE呈阳性升高 ,占 95 % ;屋尘阳性 14例 ,占 35 0 % ,尘螨 /粉螨阳性 17例 ,占 4 2 5 % ,霉菌 (点青霉、交链孢霉、黑根霉 ) 11例 ,占 2 7 5 % ;秋季花粉 (普通豚草、巨大豚草 ) 5例 ,占 12 5 % ,秋季花粉 2 (蒿属植物、艾蒿 ) 13例 ,占 32 5 % ,春季花粉 (榆树、柳树、杨树 )阳性 5例 ,占 12 5 %。结论 过敏性哮喘患者IgE普遍升高 (95 % ) ,重庆地区致敏原以“螨类”引起的哮喘最为常见 ,其次为屋尘和蒿属类。这可能与重庆地区地处盆地 ,气候温暖潮湿 ,较利于螨的生长有关(本文来源于《重庆医学》期刊2002年06期）
严东辉,杨宝君[3]（1997）在《松材线虫体外酶组成分析》一文中研究指出将表面消毒的松材线虫，在Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ缓冲液中振荡培养，培养液经硫酸铵沉淀、透析、冷冻真空干燥，制成的干样，用于聚丙烯酰胺凝胶电泳。结果表明，松材线虫能向体外分泌多种可溶性蛋白，对其中酶组成分析发现有纤维素酶、过氧化物酶、蛋白酶、淀粉酶等。同样条件下未能检出β－半乳糖酶、β－木糖酶、β－葡聚糖酶、漆酶等(本文来源于《林业科学研究》期刊1997年03期）
体外酶活分析论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的 采用体外酶免疫检测方法测定哮喘患者的过敏情况 ,以了解重庆地区过敏性哮喘患者常见过敏原的发生情况。方法 抽取哮喘病人静脉血 2ml,30 0 0rpm 10min分离血清 ,吸取 0 4 μl血清入反应管 ,室温孵育 10 0min后 ,去除管内血清 ,用 1ml清洗液清洗 ,再加入结合液孵育 16h ,去除结合液 ,再用清洗液清洗 ,加入底物 /指示剂 ,0～ 90min观察颜色变化。结果 对重庆地区 4 0例支气管哮喘病人进行 7种抗原的检查 ,过敏原的阳性检出率 95 % ,32名患者均对 2种以上的过敏原出现阳性反应。 4 0例患者中有 38例IgE呈阳性升高 ,占 95 % ;屋尘阳性 14例 ,占 35 0 % ,尘螨 /粉螨阳性 17例 ,占 4 2 5 % ,霉菌 (点青霉、交链孢霉、黑根霉 ) 11例 ,占 2 7 5 % ;秋季花粉 (普通豚草、巨大豚草 ) 5例 ,占 12 5 % ,秋季花粉 2 (蒿属植物、艾蒿 ) 13例 ,占 32 5 % ,春季花粉 (榆树、柳树、杨树 )阳性 5例 ,占 12 5 %。结论 过敏性哮喘患者IgE普遍升高 (95 % ) ,重庆地区致敏原以“螨类”引起的哮喘最为常见 ,其次为屋尘和蒿属类。这可能与重庆地区地处盆地 ,气候温暖潮湿 ,较利于螨的生长有关
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
体外酶活分析论文参考文献
[1].何展,王航,韩笑,马天天,杭奕.单核细胞增多性李斯特菌氨基肽酶Lmo1711体外表达及其酶活分析[J].生物工程学报.2018
[2].李淑平,陈维中.采用体外酶免疫测定法对重庆地区40例哮喘患者进行过敏原的检测分析[J].重庆医学.2002
[3].严东辉,杨宝君.松材线虫体外酶组成分析[J].林业科学研究.1997
标签：单核细胞增多性李斯特菌; M29家族氨基肽酶; 酶学特性; 金属离子;