本文主要研究内容
作者吴俊（2019）在《基于金属氧化物纳米材料富集水中诺如病毒的检测方法研究》一文中研究指出：诺如病毒是一种致病性较强的食源性及水源性病毒,该病毒常通过污染水源引起人群的急性胃肠炎的暴发。对于诺如病毒的鉴定主要是通过实时荧光定量RT-PCR的方法,因为诺如病毒无法通过细胞和组织培养法在实验室进行培养,当水中诺如病毒量较低的时就无法检测到。为了克服水体中诺如病毒的富集难题,本论文拟建立以纳米金属氧化物(纳米氧化钛、纳米氧化锆)修饰纤维素滤纸富集水中病毒的方法,通过优化有关具体构筑及检测的参数,最终建立一套能够快速、高效、简便、便宜富集检测的方法,解决水中诺如病毒检测技术的问题。1、建立了实时荧光定量RT-PCR检测诺如病毒的方法,对方法的灵敏度、特异性、稳定性进行了验证,利用临床标本对方法的实际检测效果进行了实验。将GII型诺如病毒标准质粒绘制细针绝对定量标准曲线,回归方程为Y=-3.3661x+46.441,相关系数R~2值为0.9993,方法的最低检测浓度为9.1×10~2copies/μL,三个浓度批内和批间重复试验CT值的变异系数均小于2%,该方法具有较高灵敏度,准确性和重复性好,可以应用于水中诺如病毒富集的检测。2、通过比较纳米二氧化钛和二氧化锆修饰滤纸的富集效果发现,纳米二氧化钛修饰滤纸的富集效果更好,能够用于水中诺如病毒的检测方法中。3、对纳米二氧化钛修饰滤纸富集水中诺如病毒方法的条件进行优化。当水中诺如病毒浓度为9.1×10~3copies/μL时,用10L水样通过3层纳米二氧化钛修饰滤纸进行富集,流速控制在0.5L/min,并用含(3%牛肉膏和0.1M甘氨酸、pH为9.5)的洗脱液进行洗脱时效果最好,能将水中病毒浓度提高到3.9×10~6copies/μL,实现了429倍浓缩,方法回收率为4.3%。4、通过对阴离子膜法和絮凝沉淀法对比发现,纳米二氧化钛修饰滤纸富集方法具有浓缩体积大的特点,在一定的条件下,可以富集到更多数量诺如病毒进行实时荧光定量RT-PCR检测。对54份实际样本进行检测,检出GⅡ型诺如病毒4份,说明方法对具有一定实用价值。
Abstract
nuo ru bing du shi yi chong zhi bing xing jiao jiang de shi yuan xing ji shui yuan xing bing du ,gai bing du chang tong guo wu ran shui yuan yin qi ren qun de ji xing wei chang yan de bao fa 。dui yu nuo ru bing du de jian ding zhu yao shi tong guo shi shi ying guang ding liang RT-PCRde fang fa ,yin wei nuo ru bing du mo fa tong guo xi bao he zu zhi pei yang fa zai shi yan shi jin hang pei yang ,dang shui zhong nuo ru bing du liang jiao di de shi jiu mo fa jian ce dao 。wei le ke fu shui ti zhong nuo ru bing du de fu ji nan ti ,ben lun wen ni jian li yi na mi jin shu yang hua wu (na mi yang hua tai 、na mi yang hua gao )xiu shi qian wei su lv zhi fu ji shui zhong bing du de fang fa ,tong guo you hua you guan ju ti gou zhu ji jian ce de can shu ,zui zhong jian li yi tao neng gou kuai su 、gao xiao 、jian bian 、bian yi fu ji jian ce de fang fa ,jie jue shui zhong nuo ru bing du jian ce ji shu de wen ti 。1、jian li le shi shi ying guang ding liang RT-PCRjian ce nuo ru bing du de fang fa ,dui fang fa de ling min du 、te yi xing 、wen ding xing jin hang le yan zheng ,li yong lin chuang biao ben dui fang fa de shi ji jian ce xiao guo jin hang le shi yan 。jiang GIIxing nuo ru bing du biao zhun zhi li hui zhi xi zhen jue dui ding liang biao zhun qu xian ,hui gui fang cheng wei Y=-3.3661x+46.441,xiang guan ji shu R~2zhi wei 0.9993,fang fa de zui di jian ce nong du wei 9.1×10~2copies/μL,san ge nong du pi nei he pi jian chong fu shi yan CTzhi de bian yi ji shu jun xiao yu 2%,gai fang fa ju you jiao gao ling min du ,zhun que xing he chong fu xing hao ,ke yi ying yong yu shui zhong nuo ru bing du fu ji de jian ce 。2、tong guo bi jiao na mi er yang hua tai he er yang hua gao xiu shi lv zhi de fu ji xiao guo fa xian ,na mi er yang hua tai xiu shi lv zhi de fu ji xiao guo geng hao ,neng gou yong yu shui zhong nuo ru bing du de jian ce fang fa zhong 。3、dui na mi er yang hua tai xiu shi lv zhi fu ji shui zhong nuo ru bing du fang fa de tiao jian jin hang you hua 。dang shui zhong nuo ru bing du nong du wei 9.1×10~3copies/μLshi ,yong 10Lshui yang tong guo 3ceng na mi er yang hua tai xiu shi lv zhi jin hang fu ji ,liu su kong zhi zai 0.5L/min,bing yong han (3%niu rou gao he 0.1Mgan an suan 、pHwei 9.5)de xi tuo ye jin hang xi tuo shi xiao guo zui hao ,neng jiang shui zhong bing du nong du di gao dao 3.9×10~6copies/μL,shi xian le 429bei nong su ,fang fa hui shou lv wei 4.3%。4、tong guo dui yin li zi mo fa he xu ning chen dian fa dui bi fa xian ,na mi er yang hua tai xiu shi lv zhi fu ji fang fa ju you nong su ti ji da de te dian ,zai yi ding de tiao jian xia ,ke yi fu ji dao geng duo shu liang nuo ru bing du jin hang shi shi ying guang ding liang RT-PCRjian ce 。dui 54fen shi ji yang ben jin hang jian ce ,jian chu GⅡxing nuo ru bing du 4fen ,shui ming fang fa dui ju you yi ding shi yong jia zhi 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自浙江农林大学的吴俊，发表于刊物浙江农林大学2019-06-03论文，是一篇关于诺如病毒论文,纳米金属氧化物论文,纤维素滤纸论文,实时荧光定量论文,浙江农林大学2019-06-03论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自浙江农林大学2019-06-03论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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