RBPT、SAT、GICA对布鲁氏菌病诊断的价值分析

RBPT、SAT、GICA对布鲁氏菌病诊断的价值分析

陕西省西安市鄠邑区疾病预防控制中心陕西西安710300)

【摘要】目的:探讨虎红平板凝集实验(RBPT)、试管凝集实验(SAT)、胶体金法(GICA)对布鲁氏菌病诊断的价值。方法:采用回顾性方法分析,选取我中心自2012年1月到2017年12月的212例从事牛羊养殖、皮毛加工从业受检者作为研究对象,均给予RBPT、SAT、GICA实验,比较分析三种检测结果。结果:RBPT、SAT、GICA检测结果经对比分析,无统计学意义(P>0.05)。结论:布鲁氏菌病需结合临床表现、合理应用检查方法来判断其发展阶段,并给予规范诊断治疗。

【关键词】布鲁氏菌病;RBPT;SAT;GICA

【中图分类号】R516.7【文献标识码】A【文章编号】1007-8231(2019)03-0126-02

布鲁氏菌病是由布鲁氏菌引起的自然疫源性人畜共患传染病,以长时间发热、多汗,体乏,关节疼痛及肝脾肿大为临床特征,易转变为慢性,复发率高,不仅给生命财产带来损失,而且还制约了畜牧业的发展[1]。如何提高布鲁氏菌病的诊断是当前临床研究的重要课题,本文为了分析RBPT、SAT、GICA对布鲁氏菌病诊断的价值,特选取我中心连续五年共212例从事牛羊养殖、皮毛加工从业受检者作为本次研究对象,现报告如下。

1.资料与方法

1.1资料

选取我中心自2012年1月到2017年12月调查的212例从事牛羊养殖、皮毛加工从业受检者,纳入标准:签订知情同意书。排除标准:严重肝肾功能不全者;免疫系统疾病;血液疾病;精神疾病者。其中男性126例,女性86例;年龄24~59岁,平均年龄(45.42±3.45)岁。

1.2方法

RBPT:采用虎红平板凝集抗原,清晨空腹抽取3ml血液,待血液凝固后获取血清;在清洁玻片上加30μL待检血清,然后加入虎红平板凝集抗原,充分混匀,在5分钟内对结果进行判定。同时每次试验均设立阳性、阴性对照。阴性标准:无凝集颗粒;阳性标准:可见凝集颗粒。

SAT:(1)被检血清稀释:抽取3ml血液,每一份待检血清各准备5支小试管,第1支试管中加入2.3ml生理盐水,第2管不加,第3,4,5管中各加0.5ml生理盐水。第1支试管中加入0.2ml被检血清,待充分混匀后,用该吸管从第1管吸取混匀血清加入到第2和第3支试管中,各0.5ml,以该吸管将第3管混匀,并吸取0.5ml加入到第4管中,混匀。从第4管中取0.5ml加入到第5管中,混匀。再从第1管和第5管各吸取0.5ml弃去。(2)加入抗原:先用生理盐水将抗原原液作1:10稀释,稀释后的抗原加入各稀释的血清管中(第1管不加,作血清对照),每管加0.5ml,混匀。加入抗原后的第2管至第5管,每管总量1ml,血清稀释度从第2管至第5管分别为1:25,1:50,1:100,1:200。(3)对照:阴性血清对照:血清稀释后加抗原。阳性血清对照,其血清稀释到原有滴度,加抗原。抗原对照:适当稀释的抗原加生理盐水。(4)比浊管的制备:取本次试验用的稀释抗原5~10ml,加入等量的生理盐水作倍比稀释。每次试验须配制比浊管作为判定的依据。所有试验管,对照管,比浊管充分振荡后置37℃温箱20~22小时,取出后放室温2小时,然后以比浊管为标准判定结果。阳性标准:血清效价在1:100以上。

GICA:清晨空腹抽取3ml血液,凝固后取10μL的血清,加400μL生理盐水作1:40稀释,作为检测液备用。取试剂一个,吸取150μL(约3~4滴)于试剂圆孔中,2~15分钟内观察检测结果。阳性标准:试剂窗口C和T处出现2条红色沉淀线为阳性,即有布鲁氏菌感染。阴性标准:试剂窗口C处出现1条红色沉淀线为阴性,即无布鲁氏菌感染。

1.3统计学分析

所有数据采用SPSS19.0软件进行统计分析,用百分比计数,采用χ2检验;P<0.05表示差异具有统计学意义。

2.结果

2.1RBPT与SAT检测结果比较

RBPT与SAT检测结果经对比分析,无显著差异(P>0.05)。详见表1所示。

表1RBPT与SAT检测结果比较(%)

3.讨论

布鲁氏菌是一种革兰氏阴性的短小杆菌,牛、羊及猪等动物最容易感染,可引起母畜传染性流产。由于布鲁氏菌病中含有内毒素及菌体自身所引起人体过敏,可出现各种各样的变态反应性病变,布鲁氏菌骨髓炎是血源性布氏杆菌感染的局部表现,多数患者出现急性感染,发烧约2~3周,常常伴随有头痛、乏力及多汗等表现[2]。有时全身症状全部消退后,也可出现局部症状。当患者腰椎受累后,将出现持续性腰背痛,且伴随有肌肉痉挛,限制了活动,影响行走,直接威胁患者生命健康。因此,加强布鲁氏菌病的诊断具有重要意义。

临床对于布鲁氏菌病的诊断方法较多,本次主要比较RBPT、SAT、GICA三种检测方法。RBPT是较常用的诊断方法,该方法操作简单易行,且反应速度较快,适合较大面积及大范围筛查,有着较强敏感性,通过激活IgG的活性去除血清中非特异性的凝集素,有着较低成本。但若血清标本中出现严重的溶血反应或交叉反应,且反应时间超过4分钟,血清中纤维素的凝集将受到明显抑制,使得结果出现假阳性。RBPT法并不能判断布鲁氏菌病是自然感染所致还是人工免疫所致。SAT可定性也可定量判断检验结果,以检测IgM抗体为主,但该方法需要大量的布鲁氏菌凝集抗原,肉眼判定时受到的主观因素影响相对较大,且在24小时内才能够出结果,检测耗时较长,不适用大面积的布鲁氏菌病筛查[3]。GICA的操作过程较简单,但并不能有效调整待检血清标本中的抗体水平。在本次研究中,比较三种检测方法,经统计学分析,无统计学意义。由此表明:采用RBPT、SAT、GICA对布鲁氏菌病进行检测,三种方法检查结果间无显著差异。

综上所述,布鲁氏菌病需结合临床表现、合理应用检查方法来判断其发展阶段,并给予科学规范治疗。

【参考文献】

[1]杨春萍.用RBPT、SAT及GICA诊断布氏杆菌病的效果对比[J].当代医药论丛,2016,14(17):126-127.

[2]朱晓娟,查赟峰,徐德顺,等.布鲁菌病3种血清抗体检测方法的应用比较[J].中国卫生检验杂志,2017,3(14):2029-2030.

[3]何晶晶,刘景瑶,张雁,等.间接酶联免疫吸附试验在人布鲁菌病诊断中的价值研究[J].诊断学理论与实践,2017,3(1):84-87.

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