（佛山市妇幼保健院生殖中心广东佛山528000）
【摘要】目的：观察IVF/ICSI-ET治疗周期中第三天（D3）移植冷冻后剩余可利用胚胎继续体外培养的囊胚形成情况及意义。方法：将D3移植冷冻后剩余的可利用胚胎通过序贯培养至囊胚阶段,将可利用囊胚进行冷冻，在未妊娠患者下一周期将其解冻移植,比较同时期通过冷冻解冻D3移植后的胚胎的植入率、妊娠率、多胎率和流产率。结果：402例不孕症患者D3移植冷冻后剩余的胚胎2807枚形成囊胚2001枚,可利用囊胚1074枚,将可利用囊胚冷冻；其中43例未妊娠患者的65枚囊胚在下一周期解冻后移植,其植入率47.0%极显著高于878例患者的1814枚卵裂期胚胎解冻后移植的植入率21.3%；而妊振率65.1%显著高于解冻后卵裂期胚胎的妊振率37.9%；多胎率和流产率无性显著差异。结论：囊胚体外培养可以筛选出具有发育潜能的剩余胚胎提高可利用胚胎数和临床妊娠率。
【关键词】剩余胚胎；胚胎培养；囊胚；序贯培养
【中图分类号】R714.8【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2017）28-0099-01
在常规IVF/ICSI－ET工作中通常根据D3胚胎形态学分级结合原核评分来选择移植和冷冻胚胎，剩余的低形态学评分胚胎通常被丢弃。但是这些胚胎是否还具有发育潜能其发育潜能与哪些因素有关尚很少有相关报道。仅根据形态学标准来衡量胚胎的发育潜能和种植潜力还无法做到足够科学和准确。本中心将IVF/ICSI-ET中移植及冷冻后剩余的D3胚胎继续培养2～3天以评估胚胎继续发育的潜能。与常规D3冻融胚胎移植进行比对探讨剩余质量较差胚胎是否有继续培养利用的价值。
1.材料与方法
1.1研究对象及分组
收集2015年在本中心接受IVF/ICSI-ET治疗的402例患者移植冷冻后剩余的2807枚可利用胚胎同时收集同一时期的D3冻融胚胎移植的患者作为比较。以上述402例患者D3移植失败后在下一周期解冻囊胚移植43例患者为实验组，以同时期通过解冻D3移植的878例患者为对照组就胚胎植入率、妊娠率、多胎率和流产率进行比较分析。
1.2实验方法
常规超促排卵方案：促排卵方案常规使用GnRH/FSH/hCG方案，待卵泡发育成熟后行阴道B超引导下穿刺取卵术。胚胎培养及评估：胚胎培养采用美国Vitrolife系列序贯培养基培养。按Peter[2]卵裂期胚胎评分系统进行评级，严格按照Gardner标准进行囊胚评级。胚胎冷冻及解冻：试剂采用丹麦Origio冷冻及解冻液，严格按照说明书进行操作。
1.3统计学处理
采用SPSS17.0软件进行统计学分析。组间比较采用卡方检验，P<0.05为差异有统计学意义，<0.01为差异有极显著统计学意义。
2.结果
在402个IVF/ICSI-ET治疗周期中将D3胚胎进行移植和优质胚胎进行冷冻后，将所剩余可利用胚胎2807枚进行体外囊胚培养，形成囊胚2001枚，其中可利用囊胚1074枚，囊胚形成率和可利用囊胚率为56.2%和38.3%。在402例患者中有43个周期进行冷冻解冻囊胚移植，解冻囊胚68枚，存活66枚，囊胚存活率为97.1%。同一时期卵裂期胚胎冷冻解冻移植周期数为878，解冻胚胎1814个，存活1756个，胚胎解冻存活率为96.8%，两者差异无统计学意义(P>0.05)。而D3胚胎和囊胚的植人率为21.3%和47.0%，具有非常显著的统计学意义(P<0.01)，临床妊娠率为37.9%和65.1%两者具有非常显著的统计学意义(P<0.01)，D3胚胎和囊胚的多胎率为24.6%和14.3%无统计学意义(P>0.05)，D3胚胎和囊胚的流产率为5.7%和3.6%两者差异无统计学意义(P>0.05)，结果详见表1。
3.讨论
评估胚胎是否具有高着床潜能是现代辅助生殖技术的重点，目前用于评估胚胎质量的主要参数为原核期评分和D3的形态及发育速度，因此一般在受精后第3天对其分级处理，并移植1～3个优质胚胎剩余评分较高的胚胎进行冷冻保存，剩余的胚胎遗弃处理。但是大量研究[1]证明胚胎的形态学评分不能正确反应胚胎的发育潜能并且主观性很大。我们研究发现虽然D3的剩余胚胎评分低，还是有一些能形成可利用囊胚且解冻后其植人率和妊娠率为47.0%和65.1%，这充分说明形态并不能完全代表其生命力和质量，胚胎在发育过程中是不断进行自身修复的，并且通过继续囊胚培养可以淘汰劣质的胚胎最终获得妊娠[2]。
【参考文献】
[1]田莉峰，黄志辉，丁涛，等.采用玻璃化冻融囊胚技术临床妊娠7例报道[J].江西医药，2011，46(9)：845-847.