型胶原蛋白血管化论文-连辉

型胶原蛋白血管化论文-连辉

导读:本文包含了型胶原蛋白血管化论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:阿托伐他汀,CD34,血管内皮生长因子,血管化

型胶原蛋白血管化论文文献综述

连辉[1](2009)在《阿托伐他汀促进大鼠体内Ⅰ型胶原蛋白支架血管化的初步研究》一文中研究指出目的近年来,以生长因子,种子细胞和载体支架为基础的组织工程的研究已经取得了很大进展,然而在临床应用方面的效果却并不理想。究其原因,很大程度上是因为移植物血管网缺乏,血液供应不足而造成的细胞营养供应障碍。以往的研究证实,种子细胞的存活范围在血供弥散的150-200μm内。如果组织工程移植物的血管化问题不能解决,具有较大体积的组织工程移植物的临床应用就难以实现。最近用各种血管生长因子及其转基因技术促进组织工程移植物血管新生的作用有很多报道。但由于多种血管生长因子本身的局限性及转基因治疗中尚存在许多问题,使其在临床上的应用受到了限制,所以寻找以诱导血管新生为基点的方便、有效、实用的药物来促进组织工程移植物的血管生长具有重要的临床意义,是组织工程学研究的一个热点。他汀类药物作为HMG-CoA还原酶抑制剂,是临床常用的降血脂药。体外的血管新生共培养实验表明,阿托伐他汀具有促血管样结构形成的作用。如果阿托伐他汀能做为促血管新生药物用于组织工程移植物中,将会为组织工程移植物的血管化带来新的希望。本实验将Ⅰ型胶原蛋白支架植入大鼠皮下,用阿托伐他汀对实验大鼠进行灌胃,通过观察Ⅰ型胶原蛋白支架中VEGF、CD34的阳性细胞、血管样结构及VEGFmRNA的表达,来探讨阿托伐他汀是否能作为促血管新生药物促进组织工程移植物的血管化。方法1、Ⅰ型胶原蛋白支架的形态学观察(1)伊红染色:长宽高各5mm的Ⅰ型胶原蛋白支架一块,置入冷冻包埋剂中,掖氮速冻后行连续冰冻切片,厚度为8μm。切片置入4%多聚甲醛中固定30min,流水冲洗后行常规伊红染色,光学显微镜下采集图像。(2)扫描电镜:长宽高各5mm的Ⅰ型胶原蛋白支架一块,用2.5%戊二醛固定,梯度乙醇脱水,临界点干燥,喷金,扫描电镜观察并采集图像。2、Ⅰ型胶原蛋白支架的体内植入及分组取Wistar大鼠(40只),雌雄不限,体重90-100g,在双侧大腿背侧中点皮下植入体积为125mm~3的Ⅰ型胶原蛋白支架。手术后随机分为实验组(20只)和对照组(20只)。3、应用阿托伐他汀灌胃从术后第1d开始,实验组大鼠给予阿托伐他汀溶液灌胃(1mg/kg),对照组大鼠则给予等量生理盐水做对照,每曰一次。术后第14d处死大鼠,取出植入的Ⅰ型胶原蛋白支架。一部分置入冷冻包埋剂中,液氮速冻后于-70℃冰箱冷冻保存,以备做免疫组织化学分析;另一部分置入Trizol试剂中,-70℃冰箱冷冻保存,以备做RT-PCR检测。4、免疫组织化学染色将-70℃冰箱冷冻保存的冷冻包埋剂中的Ⅰ型胶原蛋白支架行连续冰冻切片,厚度为8μm。切片分别进行VEGF抗体和CD34抗体免疫组织化学染色,光学显微镜下采集图象。5、RT-PCR检测用RT-PCR检测术后第14d两组大鼠Ⅰ型胶原蛋白支架中VEGFmRNA的表达情况。PCR产物用2.0%琼脂糖凝胶电泳(电泳条件:150V,30min),Tanon凝胶电泳图像分析系统扫描电泳条带。6、统计学处理采用SPSS13.0统计软件进行分析。结果1、Ⅰ型胶原蛋白支架形态学观察结果(1)伊红染色可见,Ⅰ型胶原蛋白支架被染成红色,结构疏松,具有典型的多孔结构,孔径大小150-200μm。(2)扫描电镜观察,Ⅰ型胶原蛋白支架表面光滑,有少许皱褶形成。2、术后大鼠一般情况及切口愈合的观察结果术后1小时,大鼠清醒,活动较好,正常进食饮水,大腿背部的切口干燥整齐。以后体重逐渐增加,至术后第14d,两组大鼠切口均愈合良好,未见感染。3、免疫组织化学染色结果CD34阳性细胞多位于支架边缘部分,棕黄色阳性颗粒均匀的分散于胞膜中,阳性细胞多形成管径为6-10μm的毛细血管样结构。实验组(图2)阳性细胞较对照组多。VEGF染色可见棕黄色颗粒沉淀于细胞质或细胞外基质中。阳性表达部位未见毛细血管样结构形成,周围可见散在的红细胞存在。实验组阳性表达部位较对照组多。4、RT-PCR检测结果实验组VEGFmRNA的表达明显较对照组高。5、统计学分析实验组CD34、VEGF和VEGFmRNA的表达均较对照组高,P<0.05,差异具有统计学意义。结论阿托伐他汀可以上调大鼠体内Ⅰ型胶原蛋白支架中VEGFmRNA的表达,刺激VEGF的分泌,增加CD34阳性细胞数量及CD34阳性细胞构成的血管样结构。(本文来源于《中国医科大学》期刊2009-05-01)

刘静[2](2007)在《bFGF胶原蛋白复合海绵促进多孔羟基磷灰石义眼台血管化的实验研究》一文中研究指出目的:观察碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)胶原蛋白复合海绵及胶原蛋白海绵对珊瑚多孔羟基磷灰石(coralline porous hydroxyapatite,CHA)义眼台纤维血管化的作用,为其临床应用提供实验依据。方法:将45只新西兰白兔随机分为A、B、C3组,每组15只,各组均将CHA义眼台植入兔左眼眶。A组为对照组,植入无包裹的CHA义眼台,B、C组分别植入胶原蛋白海绵包裹的CHA义眼台和bFGF胶原蛋白复合海绵包裹的CHA义眼台。术后每天用肉眼和裂隙灯显微镜观察眼睑、结膜囊及义眼台有无暴露,并分别于术后2w、4w、6w、8w、12w对每组兔双眼进行核素扫描,同时取出3只义眼台行组织病理学检查,比较义眼台纤维血管化程度的差异。结果:术后2w,A组几乎没有血管化,B、C组开始有不同程度的血管化,叁组核素扫描两两之间差异有显着性(A、B组间p<0.05,A、C组间p<0.05,B、C组间p<0.05);术后4w,叁组血管化程度都提高,但均未完全血管化,叁组核素扫描两两之间血管化差异有显着性(A、B组间p<0.05,A、C组间p<0.05,B、C组间p<0.05);术后6w,C组义眼台已完全血管化,其余两组较前有所提高,但未完全血管化,叁组核素扫描两两之间的血管化差异有显着性(A、B组间p<0.05,A、C组间p<0.05,B、C组间p<0.05);术后8w,A、B组义眼台完全血管化,C组较前无明显变化,叁组核素扫描两两之间差异无显着性;术后12w,叁组较前无明显变化。A组中有一例在术后3w出现义眼台暴露,术后12w暴露的义眼台仅很少量的血管化。结论:1)胶原蛋白海绵和bFGF(20μg)胶原蛋白复合海绵对CHA义眼台纤维血管化均有不同程度的促进作用。2)胶原蛋白海绵对早期的CHA义眼台血管化有促进作用,但并没有缩短完全血管化所需要的时间。3)bFGF(20μg)胶原蛋白复合海绵具有比胶原蛋白海绵更强的促血管化作用,在不同时间点均能起到较强的促进血管化的作用,并且能缩短CHA义眼台完全血管化所需要的时间。(本文来源于《南昌大学》期刊2007-05-01)

型胶原蛋白血管化论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的:观察碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)胶原蛋白复合海绵及胶原蛋白海绵对珊瑚多孔羟基磷灰石(coralline porous hydroxyapatite,CHA)义眼台纤维血管化的作用,为其临床应用提供实验依据。方法:将45只新西兰白兔随机分为A、B、C3组,每组15只,各组均将CHA义眼台植入兔左眼眶。A组为对照组,植入无包裹的CHA义眼台,B、C组分别植入胶原蛋白海绵包裹的CHA义眼台和bFGF胶原蛋白复合海绵包裹的CHA义眼台。术后每天用肉眼和裂隙灯显微镜观察眼睑、结膜囊及义眼台有无暴露,并分别于术后2w、4w、6w、8w、12w对每组兔双眼进行核素扫描,同时取出3只义眼台行组织病理学检查,比较义眼台纤维血管化程度的差异。结果:术后2w,A组几乎没有血管化,B、C组开始有不同程度的血管化,叁组核素扫描两两之间差异有显着性(A、B组间p<0.05,A、C组间p<0.05,B、C组间p<0.05);术后4w,叁组血管化程度都提高,但均未完全血管化,叁组核素扫描两两之间血管化差异有显着性(A、B组间p<0.05,A、C组间p<0.05,B、C组间p<0.05);术后6w,C组义眼台已完全血管化,其余两组较前有所提高,但未完全血管化,叁组核素扫描两两之间的血管化差异有显着性(A、B组间p<0.05,A、C组间p<0.05,B、C组间p<0.05);术后8w,A、B组义眼台完全血管化,C组较前无明显变化,叁组核素扫描两两之间差异无显着性;术后12w,叁组较前无明显变化。A组中有一例在术后3w出现义眼台暴露,术后12w暴露的义眼台仅很少量的血管化。结论:1)胶原蛋白海绵和bFGF(20μg)胶原蛋白复合海绵对CHA义眼台纤维血管化均有不同程度的促进作用。2)胶原蛋白海绵对早期的CHA义眼台血管化有促进作用,但并没有缩短完全血管化所需要的时间。3)bFGF(20μg)胶原蛋白复合海绵具有比胶原蛋白海绵更强的促血管化作用,在不同时间点均能起到较强的促进血管化的作用,并且能缩短CHA义眼台完全血管化所需要的时间。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

型胶原蛋白血管化论文参考文献

[1].连辉.阿托伐他汀促进大鼠体内Ⅰ型胶原蛋白支架血管化的初步研究[D].中国医科大学.2009

[2].刘静.bFGF胶原蛋白复合海绵促进多孔羟基磷灰石义眼台血管化的实验研究[D].南昌大学.2007

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