一、糖尿宁对糖尿病性神经病变大鼠激素水平调节的影响（论文文献综述）
刘英琳[1]（2021）在《止血明目方对糖尿病视网膜病变大鼠的治疗作用及机制探讨》文中研究指明
贾晓颖[2]（2021）在《糖络宁对高糖培养下大鼠背根神经元中miR-211及IRE1α-CHOP通路的影响》文中提出研究目的本研究从体外角度,针对miR-211及IRE1α-CHOP通路来探讨糖络宁防治糖尿病周围神经病变（DPN）的作用机理。通过基因沉默和过表达,验证miR-211及IRE1α-CHOP通路在DPN发病中的作用。研究方法60只SD大鼠,随机分为2组,正常组35只,糖络宁组25只,分别予以2.5 g/kg-d的糖络宁生药和等量蒸馏水灌胃。连续灌胃10天,制备正常血清和糖络宁血清。新生大鼠提取背根神经元细胞（DRGn）。采用Lipo2000法进行转染,将细胞分为正常组、模型组、抑制剂对照组、抑制剂组、中药组、激动剂中药对照组和激动剂中药组。使用q-PCR 检测 DRGn 细胞中 miR-211、IRE1α、CHOP 和 XBP1 的基因表达水平;Western Blot法检测DRGn细胞中IRE1α、p-IRE1α、XBP1、CHOP蛋白表达;荧光探针法测定DRGn细胞ROS水平,黄嘌呤氧化酶技术检测SOD活性,硫代巴比妥法测定MDA含量。研究结果1.qRT-PCR检测结果:与正常组相比,模型组的miR-211、IRE1α、XBP1、CHOP mRNA值均显着升高（P<0.01）;与模型组相比,中药组、抑制剂组的miR-211、IRE1α、XBP1、CHOP mRNA值均明显降低（P<0.01）,抑制剂对照组无差异（P>0.05）;与中药组相比,激动剂中药组的miR-211、IRE1α、XBP1、CHOP mRNA值升高（P<0.01）,激动剂中药对照组无差异（P>0.05）。2.Western Blot检测结果:与正常组相比,模型组、抑制剂对照组IRE1α、p-IRE1α、XBP1、CHOP蛋白表达明显增高（P<0.01）;与模型组相比,中药组、抑制剂组IRE1α、p-IRE1α、XBP1、CHOP蛋白表达明显降低（P<0.01）,抑制剂对照组无差异（P>0.05）;与中药组相比,激动剂中药组IRE1α、p-IRE1α、XBP1、CHOP蛋白表达明显升高（P<0.01）,激动剂中药对照组无差异（P>0.05）。3.氧化指标检测结果:与正常组相比,模型组的ROS、MDA显着提高（P<0.01）,SOD活力明显减低（P<0.01）;与模型组相比,中药组、抑制剂组ROS、MDA明显减低（P<0.01）,SOD活力增加（P<0.01）,而抑制剂对照组无差异（P>0.05）;与中药组相比,激动剂中药组ROS、MDA升高（P<0.01）,SOD活力减低（P<0.01）,激动剂中药对照组无差异（P>0.05）。结论1.DRGn细胞通过转染miR-211抑制剂和激动剂可构建有效的miR-211低表达和过表达的模型。miR-211抑制剂可使IRE1α-CHOP通路活性减低,进而缓解高糖对DRGn细胞的氧化损伤。miR-211激动剂能增加IRE1α-CHOP通路的活性,进而使糖络宁对高糖诱导的DRGn细胞的抗氧化作用降低。2.高糖可使DRGn细胞中miR-211表达增加,进而激活IRE1α-CHOP通路,引发内质网应激和氧化应激,使细胞受损;糖络宁含药血清可使miR-211水平减低,降低IRE1α-CHOP通路活性,进而改善内质网应激和氧化应激,缓解细胞损伤。本研究表明,糖络宁可改善高糖诱导的DRGn细胞的氧化损伤,这一保护作用可能依赖于糖络宁能下调miR-211的表达,进而抑制高糖下IRE1α-CHOP通路的活性,缓解氧化损伤,改善DPN。
陈枫[3]（2021）在《基于miRNA-211及PERK/CHOP通路研究糖络宁对高糖环境大鼠背根神经元细胞的影响》文中指出研究目的本研究通过体外实验从细胞凋亡角度探讨糖络宁对高糖培养环境下的大鼠背根神经元（DRGn）细胞中miR-211及其相关PERK/CHOP通路的作用,为阐明中药糖络宁治疗糖尿病周围神经病变（DPN）的部分机制提供依据。研究方法准备清洁级6～8周SD雄性大鼠60只,随机选择其中25只为中药组（CM组,n=25）,其余为正常组（NG组,n=35）,分别按糖络宁组方生药2.5（kg·d）及等体积蒸馏水灌胃,用于制备TLN组及NC组血清。取孕15d的SD胎鼠用于背根神经节细胞取材。将DRGn细胞接种于6孔板。细胞转染实验则分为7组:正常组（NC组）、模型组（DM组）、糖络宁组（TLN组）、DM+miR-211抑制剂对照组（miR-211iNC组）、DM+miR-211抑制剂组（miR-211i组）、DM+TLN+miR-211 激动剂对照组（miR-211mNC组）、DM+TLN+miR-211激动剂组（miR-211m组）,采用实时荧光定量PCR技术检测DRGn细胞中的miR-211、PERK、elF2α、ATF4、CHOP基因表达水平、采用Western Blot技术检测DRGn细胞中PERK、p-PERK、elF2α、p-elf2α、ATF4、CHOP的蛋白表达水平;流式法检测细胞凋亡。研究结果1.糖络宁对高糖培养下DRGn细胞中miR-211、PERK、elF2α、ATF4、CHOP的RNA表达水平的影响与NC相比,DM组DRGn细胞中miR-211、PERK、elF2α、ATF4、CHOP mRNA水平显着增高（P<0.01）;与DM组相比,TLN组DRGn细胞中miR-211、PERK、elF2α、ATF4、CHOPmRNA水平明显降低（P<0.01）;与DM组相比,miR-211iNC组miR-211、PERK、e1F2α、ATF4、CHOP mRNA水平无明显差异（P>0.05）,而miR-211i组值明显降低;miR-211、PERK、elF2α、ATF4、CHOP mRNA水平显着增高（P<0.01）。与TLN组相比,miR-211mNC的miR-21 1、PERK、elF2α、ATF4、CHOP mRNA水平没有显着改变（P>0.05）,miR-211m组的miR-211、PERK、elF2α、ATF4、CHOP mRNA水平明显增高（P<0.01）。2.糖络宁对高糖培养下DRGn细胞中PERK、p-PERK、elF2α、p-elf2α、ATF4、CHOP蛋白水平的影响Western Blot检测结果:与NC组相比,DM组PERK、p-PERK、e1F2α、p-elF2α、ATF4、CHOP蛋白表达水平明显增高（P<0.01）,elF2α磷酸化水平明显升高（P<0.05）;与DM组相比,TLN组PERK、p-PERK、p-elF2α、ATF4、CHOP蛋白表达水平明显降低（P<0.05）,e1F2α磷酸化水平明显降低（P<0.05）;与DM组相比,miR-211iNC组PERK、p-PERK、elF2α、p-elF2α、ATF4、CHOP蛋白表达水平无明显差异（P>0.05）,而miR-211i组PERK、p-PERK、elF2α、p-elF2α、ATF4、CHOP蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。与TLN组相比,miR-211mNC组PERK、p-PERK、p-elF2α、ATF4、CHOP蛋白表达水平没有显着改变（P>0.05）,miR-211m组PERK、p-PERK、p-elF2α、ATF4、CHOP蛋白表达水平是明显增高（P<0.05）。3.糖络宁对高糖培养下DRGn细胞凋亡水平的影响与NC相比,DM组DRGn细胞凋亡水平显着增高（P<0.01）;与DM组相比,TLN组的DRGn细胞凋亡程度明显降低（P<0.01）;与DM组相比,miR-211iNC组细胞凋亡水平无明显差异（P>0.05）,而miR-211i组细胞凋亡水平明显降低（P<0.01）。与TLN组相比,miR-211mNC组的细胞凋亡水平没有显着改变（P>0.05）,糖络宁miR-211m组的细胞凋亡水平明显增高（P<0.01）。结论1.糖络宁可以改善高糖环境下DRGn细胞的细胞凋亡水平;2.糖络宁可能是通过下调miR-211影响其相关PERK/CHOP通路从而而影响细胞凋亡而发挥作用的。
刘琴[4]（2020）在《基于miRNA-200a探讨糖络宁改善高糖下大鼠背根神经元氧化应激机制》文中指出研究目的本研究从体外实验探讨糖络宁对高糖培养的大鼠背根神经元细胞miR-200a及氧化应激的影响,以部分阐明中药糖络宁用于临床治疗糖尿病周围神经病变的可能作用机制。研究方法SPF级SD大鼠灌胃10天制备糖络宁含药血清及大鼠正常血清。提取并鉴定大鼠背根神经元神经节（DRGn）细胞。采用不同葡萄糖浓度（50 mmol/L、75 mmol/L、100 mmol/L）、不同浓度糖络宁含药血清（2.5%、5%、10%、20%、30%）培养DRGn细胞,通过CCK-8法检测细胞活性,确定最佳高糖浓度及最佳糖络宁含药血清浓度;运用荧光探针技术检测DRGn细胞中的ROS水平,黄嘌呤氧化酶法测定SOD活力,硫代巴比妥法检测MDA含量;采用实时荧光定量PCR技术检测DRGn细胞中miR-200a、PI3K的基因表达水平;通过Western Blot技术检测DRGn细胞中PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT的蛋白表达水平。研究结果1.不同浓度葡萄糖及糖络宁含药血清对DRGn细胞活性的影响随着葡萄糖浓度的增加,DRGn细胞活性显着下降,有统计学差异（P<0.01）;50 mmol/L葡萄糖浓度组与75 mmol/L葡萄糖浓度组、75 mmol/L葡萄糖浓度组与100 mmol/L葡萄糖浓度组相比细胞活性均显着下降,有统计学差异（P<0.01）。与24 h相比,各葡萄糖浓度组DRGn在48 h细胞活性均明显下降,有统计学差异（P<0.05或P<0.01）。随着糖络宁含药血清浓度的增加,DRGn细胞活性呈现先升高后下降的趋势,在糖络宁含药血清浓度为10%时细胞活力最大。其中2.5%浓度组与5%浓度组相比细胞活力无统计学差异（P>0.05）,5%浓度组与10%浓度组相比、10%浓度组与20%浓度组相比、20%浓度组与30%浓度组相比细胞活力均有统计学差异（P<0.05或P<0.01）。与24 h相比,同一浓度糖络宁含药血清干预下的DRGn在48h的细胞活性均有所下降,10%糖络宁含药血清干预下细胞活性下降有统计学差异（P<0.05）,其余糖络宁含药血清干预下细胞活性下降无统计学差异（P>0.05）。2.糖络宁对高糖培养下DRGn细胞氧化应激水平的影响与正常组相比,高糖组DRGn细胞中ROS、MDA含量显着增高（P<0.01）,SOD活力显着下降（P<0.01）;与高糖组相比,糖络宁组各组DRGn细胞中ROS、MDA含量显着下降（P<0.01）,SOD活力显着增高（P<0.01）。3.糖络宁对高糖培养下DRGn细胞中miR-200a mRNA、PI3K mRNA表达水平的影响与正常组相比,高糖组DRGn细胞中miR-200amRNA值显着增高（P<0.01）、PI3K mRNA值显着降低（P<0.01）;与高糖组相比,糖络宁组各组DRGn细胞中miR-200a mRNA值显着降低（P<0.01）、PI3K mRNA值显着增高（P<0.01）。4.糖络宁对高糖培养下DRGn细胞中PI3K/AKT通路相关蛋白表达水平的影响与正常组相比,高糖组 PI3K、p-PI3K、p-PI3K/PI3K、p-AKT、p-AKT/AKT 蛋白表达水平均显着降低（P<0.01）;与高糖组相比,糖络宁组各组PI3K、p-PI3K、p-PI3K/PI3K、p-AKT、p-AKT/AKT蛋白表达水平均显着增高（P<0.01）。结论1.糖络宁可以改善高糖环境下DRGn细胞的氧化应激水平;2.糖络宁改善高糖培养下的DRGn细胞中氧化应激水平可能是通过调控miR-200a及PI3K/AKT信号通路实现的。
张伏芝[5]（2020）在《基于网络药理学的糖尿病周围神经病变气虚血瘀证组方筛选与优化》文中进行了进一步梳理中药新药开发不仅是临床治疗疾病的需要,也是医药卫生产业发展的主要动力。中药组方是中药复方新药研发的第一步,是决定中药复方新药研发成功与失败的关键。糖尿病周围神经病变（Diabetic Peripheral Neuropathy,DPN）是指在排除其他原因的情况下,糖尿病患者出现周围神经功能障碍的症状或体征的并发症,其发病率高、病程长且发病后致残、致死率高。有关数据显示,中国糖尿病患病人数以1.14亿人次高居世界第一,而DPN的发病率已达到糖尿病总人数的50%以上。气虚血瘀证是DPN中医临床最为常见的证型,治疗该证的中药复方非常丰富,但目前临床使用的中成药只有木丹颗粒一种。因此,本研究旨在通过文献挖掘和网络药理学相结合的方式,从大量临床治疗DPN文献中发掘药物使用规律,并筛选出适合进行药物开发的新组方,为进一步的新药研发奠定基础。目的:开发中医药文献数据自动抽提系统提高文献数据挖掘的效率,采用文献数据挖掘与网络药理学方法发现中医治疗DPN用药规律,筛选优化新药候选组方,建立基于中医临床文献和网络药理学的中药组方新方法。方法:1、中医药文献数据自动抽提系统的建立制定临床文献抽取系统的数据仓储结构,以糖尿病肾病临床文献作为系统数据源进行抽提,测试系统采集药物的使用结果,人工校验抽提结果完成系统迭代。2、基于中医临床文献分析DPN用药规律收集2008-2019年中国知网（CNKI）,万方数据库,中国生物医学文献服务系统（SinoMed）和维普数据库中发表的主题为“糖尿病周围神经病变”与“中医”的文献以及PubMed 数据库中检索词为（diabeticperipheralneuropathy）ANDTCM 的文献,筛选后建立数据库,采用频次统计、关联规则和构建复杂网络的数据分析方法,分析中医临床用药的功效、频次、性味归经、常用药对及核心药物。3、基于网络药理学的治疗DPN气虚血瘀证的组方优化于TCMSP、TCMID、ETCM数据库搜索候选药物化学成分并通过OB、DL、Caco-2进行筛选,通过SwissTargetPrediction数据库预测药物靶点,于OMIM和GeneCards数据库中检索DPN的相关基因,在HSDN数据库中获取DPN气虚血瘀证症状对应标准词,DPN相关基因与气血血瘀证DPN症状相关基因进行网络模块富集计算获得DPN气虚血瘀证的基因,进行候选中药靶点和DPN气虚血瘀证基因的KEGG通路富集,计算候选中药与DPN气虚血瘀证的相关性系数以及贡献系数,确定累计贡献系数达到80.00%的组方为优化方。4、基于网络药理学的治疗DPN气虚血瘀证新组方与木丹颗粒药效比较计算优化方与木丹颗粒相关性系数总和,比较优化方与木丹颗粒总相关性系数,确认两者疗效差异。结果:1、成功建立了中医药文献数据自动抽提系统,并通过人工校对该系统对糖尿病肾病临床文献的抽提结果,完成了系统改进和迭代。2、纳入治疗DPN的文献461篇,涉及中药275种,总使用频次6361次。频数统计结果显示出现频次最高的中药为黄芪;各类药物功效中以活血祛瘀药使用最多,其次为补气药;药物性味以甘味、温性为主;药物归经以入肝经药物居多。关联规则分析得到支持度最高的药对为当归→黄芪,复杂网络分析得到的核心中药为黄芪、当归、川芎、鸡血藤、桂枝、红花、地龙、赤芍、丹参、桃仁。3、确定候选组方中药为黄芭、当归、川芎、鸡血藤、桂枝、红花、地龙、赤芍、丹参、桃仁、甘草、山药、白术、党参、牛膝、水蛭、川牛膝、延胡索、没药、乳香、姜黄、土鳖虫、穿山甲、苏木。DPN气虚血瘀证相关基因共336个,富集通路214条,相关性系数最高的中药为红花,优化后组方为红花、黄芪、丹参、没药、甘草、山药、延胡索、党参、鸡血藤、牛膝,该组方累积贡献度占总候选组方83.47%。4、木丹颗粒各组成中药的总相关性系数（2.61×106）,低于优化方总相关性系数（4.15×106）。结论:1、开发了可以自动抽提中医临床文献中药物使用情况的新系统。2、发现了益气活血、通络止痛是中医临床防治DPN的主要治法及用药规律。3、运用网络药理学筛选优化了一个治疗DPN气虚血瘀证的候选组方,且其疗效优于木丹颗粒。4、初步建立了一种基于数据挖掘与网络药理学的中药组方筛选优化新方法。
李逸潇[6]（2020）在《基于miR-200a及MAPKs信号通路研究糖络宁对高糖下大鼠背根神经元的影响》文中研究说明研究目的及意义:本次课题从体外实验角度对糖络宁治疗DPN的可能机制miR-200a及MAPKs信号通路进行验证与探索,以部分阐明中药糖络宁用于临床治疗糖尿病周围神经病变的可能作用机制。研究方法:1.清洁级雄性6-8周SD大鼠60只,按随机数字表分类法随机分为4组:高浓度糖络宁组（15只）,中浓度糖络宁组（15只）,低浓度糖络宁组（15只）,正常组（15只）,分别按糖络宁组方生药5 g/kg·d、2.5 g/kg·d、1.25 g/kg·d和等量蒸馏水灌胃;连续给药10天后制备含药血清和正常对照血清。从新生SD胎鼠取材制备背根神经元细胞（DRGn）。2.将DRGn细胞接种于96孔板,随机分为4组:正常组、50、75、100 mmol/L葡萄糖组,分别培养24、48 h后采用CCK-8法检测各个葡萄糖浓度对DRG细胞活性的影响,确定高糖培养最佳浓度及指标检测适宜时间点。3.将DRGn细胞接种于96孔板,随机分为6组:正常组、2.5%、5%、10%、20%、30%糖络宁含药血清组,分别培养24、48 h后采用CCK-8法检测各个糖络宁含药血清浓度对DRGn细胞活性的影响,确定糖络宁含药血清培养最佳浓度及指标检测适宜时间点。4.将DRGn细胞接种于6孔板,随机分为5组:正常组、高糖组、高浓度糖络宁组、中浓度糖络宁组、低浓度糖络宁组,培养24h后,采用qRT-PCR法检测miR-200a、Jun、Mapk8、Map3k8mRNA 表达量,采用 Western Blot 法检测 Jun、JNK、Map3k8 蛋白表达量,流式法检测细胞凋亡。研究结果:1.CCK-8检测结果:时间比较:24h相比,不同浓度葡萄糖各组,48h后大鼠DRGn细胞活性下降较24 h更低,各浓度葡萄糖组不同时间同浓度比较具有统计学意义（P<0.01或P<0.05）。与24h相比,10%糖络宁含药血清中大鼠DRGn细胞活性较48h相比明显下降,有统计学意义（P<0.01）。其他糖络宁含药血清组24 h与48 h相比均有下降,没有统计学意义（P>0.05）。组间比较:在同一时间点,随着高糖浓度的增加,DRGn细胞活性逐渐下降,各浓度葡萄糖组同时间不同浓度比较具有统计学意义（P<0.01）。作用24h后,随着糖络宁含药血清浓度的增加,大鼠DRGn细胞活性呈先高后低的趋势,在10%糖络宁含药血清浓度达到峰值,除5%与2.5%、20%糖络宁含药血清浓度组间比较没有意义（P>0.05）,其余各组间比较均有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。作用48 h后,整体趋势与24 h一致,在10%糖络宁含药血清浓度达峰,除5%与2.5%糖络宁含药血清浓度组间比较没有意义（P>0.05）,其余各组间比较均有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。分析不同浓度下的葡萄糖及糖络宁含药血清干预后的生长曲线,选定75 mmol/L葡萄糖浓度、10%糖络宁含药血清作为干预浓度,药物作用后的24 h为观察点。2.qPCR检测结果:与正常组相比,高糖组miR-200a、Jun、Map3k8、Mapk8mRNA值明显增高,有统计学意义（P<0.01）。与高糖组相比,糖络宁组各组miR-200a、Jun、Map3k8、Mapk8mRNA值明显降低,有统计学意义（P<0.01）。与中浓度糖络宁组相比,高浓度糖络宁组miR-200a、Jun、Map3k8、Mapk8 mRNA值明显升高,有统计学意义（P<0.01）。低浓度糖络宁组miR-200a、Jun、Mapk8mRNA值明显升高,有统计学意义（P<0.01）。3.Western Blot检测结果:与正常组相比,高糖组JNK1、c-JUN、Map3k8磷酸化蛋白表达及磷酸化水平明显增高,有统计学意义（P<0.01）,Map3k8总蛋白水平明显增高,有统计学意义（P<0.01）,JNK1、c-JUN总蛋白表达无明显变化(P>0.（05）。与高糖组相比,糖络宁组各组JNK1、c-JUN、Map3k8磷酸化蛋白表达及磷酸化水平明显降低,有统计学意义（P<0.01）,总蛋白表达均无明显变化（P>0.05）。分别与高、低浓度糖络宁组相比,中浓度糖络宁组JNK1、c-JUN、Map3k8磷酸化蛋白表达及其磷酸化水平降低幅度更大,有统计学意义（P<0.01）。4.流式检测结果:与正常组相比,高糖组细胞凋亡率明显增高（P<0.01）,有统计学意义;与高糖组相比,糖络宁组各组细胞凋亡率明显降低（P<0.01）,有统计学意义;与低、高浓度糖络宁组相比,中浓度糖络宁组细胞凋亡率明显降低（P<0.01）,有统计学意义。研究结论及意义:1.高糖刺激能抑制大鼠DRGn细胞的活性,糖络宁含药血清能明显改善高糖刺激对大鼠DRGn细胞活性抑制。2.高糖刺激能上调大鼠DRGn细胞中的miR-200a水平,激活MAPKs信号通路进而促进细胞凋亡,糖络宁含药血清,尤其是中浓度糖络宁含药血清能通过抑制miR-200a上调,抑制MAPKs信号通路,明显减少细胞凋亡水平。总的来说,糖络宁可能通过抑制miR-200a表达,影响其介导的MAPK信号通路,降低细胞凋亡水平,减少神经损伤,防治DPN的发生及进展。
谢骏[7]（2020）在《中药筋脉通对糖尿病大鼠的髓鞘保护作用及其对肠道菌群的影响》文中进行了进一步梳理[目的]从整体和分子水平探讨中药筋脉通（Jinmaitong,JMT）对链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）诱导的糖尿病（diabetes mellitus,DM）模型大鼠的髓鞘保护作用及对其肠道菌群的影响,探索中药筋脉通防治糖尿病周围神经病变（diabetic peripheral neuropathy,DPN）的潜在机制。[方法]采用一次性腹腔注射STZ 55 mg/kg的方法制备DM模型大鼠,将造模成功后的DM大鼠按随机数字表法分为三组:糖尿病模型对照组（DM）,筋脉通组（JMT）,神经妥乐平（Neurotropin,NTP）组（NTP）,同时配以同周龄的正常对照组（CON）大鼠。分组后分别按JMT 13.9g/（kg·d）、NTP 1.6单位/（kg·d）灌胃给药,CON组与DM组大鼠予以等量蒸馏水灌胃,每日1次,连续12 w。分别于干预前及干预后4w、8w、12w检测各组大鼠随机血糖和体重。灌胃12w后检测各组大鼠机械痛阈值,并收集大鼠粪便样品,腹主动脉采血后取大鼠坐骨神经组织与足底皮肤组织。光学显微镜及透射电子显微镜下观察坐骨神经的形态变化,免疫荧光法检测大鼠坐骨神经中接触蛋白相关蛋白（contactin-associated protein,Caspr）与淀粉样前体蛋白（amyloid precursor protein,APP）的表达,分析大鼠足底皮肤表皮神经纤维密度（intraepidermal nerve fiber density,IENFD）,酶联免疫吸附测定（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）法检测大鼠血清神经调节蛋白 1（Neuregulin 1,NRG1）浓度。同时,提取大鼠粪便基因组并进行16S rRNA基因测序,分析正常组与模型组大鼠肠道菌群组成结构的差异,以及筋脉通干预对模型组大鼠肠道菌群的影响;并将组间差异性肠道微生物的丰度与大鼠随机血糖、体重、机械痛阈值、IENFD、NRG1水平等生理、病理观察指标进行相关性分析。[结果]1.血糖、体重及机械痛阈检测:造模后不同时间点,各造模组大鼠随机血糖均较CON组升高（P<0.05）;同一时间点各造模组大鼠之间的血糖无统计学差异（P>0.05）。干预前各组大鼠体重均无统计学差异（P>0.05）;干预后各时间点,各造模组大鼠体重较CON组均明显降低（P<0.001）。除灌胃第8 w NTP组较DM组体重增加外（P<0.05）,其余时间点各造模组大鼠之间的体重无显着差异（P>0.05）。与CON组相比,除JMT组左侧机械痛阈值外,各造模组大鼠左、右两侧机械痛阈值及平均机械痛阈值较CON组均降低（P<0.01）;与DM组相比,JMT组及NTP组左、右两侧机械痛阈及平均机械痛阈值均显着提高（P<0.001）;JMT组与NTP组相比未见统计学差异（P>0.05）。2.坐骨神经病理结构变化:HE染色显示,大鼠坐骨神经组织轴索与髓鞘呈深红色,雪旺细胞细胞核位于髓鞘边缘呈蓝紫色。CON组大鼠坐骨神经组织致密,轮廓规则,髓鞘完整,分布均匀,DM组大鼠坐骨神经组织松散,轮廓不规则,部分神经纤维髓鞘脱失,轴索萎缩,分布稀疏;透射电镜下可见CON组大鼠坐骨神经轴索饱满、均匀,形态规则,髓鞘致密、均一,结构完整,局部可见髓鞘板层轻微断裂;DM组大鼠坐骨神经轴索形态不规则,髓鞘结构紊乱,板层分离形成大量空泡,部分可见髓鞘向轴索及间质突出,形成“瘤状”结构。形态测量学统计分析显示,DM组大鼠每5000 μm2面积内的有髓神经纤维数量明显减少（P<0.001）,结构形态异常的神经纤维比例增高（P<0.05）;JMT组与NTP组大鼠坐骨神经病变与DM组相似,但程度均较DM组减轻,每5000 μm2面积内的有髓神经纤维数量增加（P<0.05）,结构形态异常的神经纤维比例明显减少（P<0.001）;各组大鼠的gratio值（轴索直径与髓鞘外径比值）无统计学差异（P>0.05）。3.免疫荧光法检测大鼠坐骨神经接触蛋白相关蛋白Caspr与淀粉样前体蛋白APP的表达:与CON组相比,DM组大鼠坐骨神经每mm2面积内对称性的郎飞氏结结侧区数量与比例均降低（P<0.01）、非对称性的郎飞氏结半结比例增高（P<0.01）,DM组与NTP组大鼠坐骨神经中APP与βⅢ-tubulin蛋白共定位表达的区域比例升高（P<0.05）;与DM组相比,JMT组大鼠坐骨神经每mm2面积内对称性的郎飞氏结结侧区数量与比例均升高（P<0.05）、非对称性的郎飞氏结半结比例降低（P<0.01）,JMT组大鼠坐骨神中APP与βⅢ-tubulin蛋白共定位表达的区域比例降低（P<0.05）;与NTP组相比,JMT组大鼠坐骨神经每mm2面积内对称性的郎飞氏结结侧区数量增多（P<0.05）,其余指标二者无统计学差异（P>0.05）。各组间非对称性的郎飞氏结半结数量均未见统计学差异（P>0.05）。4.免疫荧光法检测分析大鼠足底皮肤表皮神经纤维密度IENFD:与CON组相比,DM组与NTP组IENFD降低（P<0.05）,JMT组IENFD与CON组相比无统计学差异（P>0.05）;与DM组相比,JMT组ⅢNFD升高（P<0.05）,NTP组与DM组相比无统计学差异（P>0.05）;JMT组与NTP组之间IENFD无统计学差异（P>0.05）。5.ELISA法检测大鼠血清NRG1的表达:与CON组相比,DM组、JMT组及NTP组大鼠血清NRG1浓度均降低（P<0.001）;与DM组相比,JMT组大鼠血清NRG1浓度升高（P<0.01）,NTP组与DM组相比差异无统计学意义（P>0.05）;JMT组与NTP组之间差异无统计学意义（P>0.05）。6.16S rRNA基因测序分析大鼠的肠道菌群结构变化:基于以上实验结果可判定DPN模型成功,就此更名DM组为DPN组。相比CON组,DPN组和JMT组大鼠肠道菌群的Alpha多样性指数明显降低（P<0.001）,DPN组与JMT组之间的Alpha多样性指数无统计学差异（P>0.05）。Beta多样性的 Weighted-UniFrac 与 Unweighted-UniFrac 分析结果均提示,CON、DPN、JMT 三组大鼠肠道菌群的Beta多样性具有显着性差异（P<0.01）。相比CON组大鼠,DPN组大鼠的肠道菌群中显着富集了以下10种差异性肠道微生物:pBacteroidetes,cBacteroidia,oBacteroidales,fPorphyromonadaceae,fPrevotellaceae,fOxalobacteraceae,gKlebsiella,gCoprococcus,gPrevotella,gOxalobacter。相比DPN组,JMT组大鼠的肠道菌群中显着富集了 17种差异性肠道微生物,且其中有 9 种与 CON 组一致:pActinobacteria,pProteobacteria,cBetaproteobacteria,cActinobacteria,cEpsilonproteobacteria,oBurkholderiales,oCampylobacterales,fHelicobacteraceae,gHelicobacter,说明筋脉通对上述9种肠道微生物的丰度具有回调作用。7.差异性肠道微生物丰度与DPN观察指标的Spearman相关性分析:在DPN组与CON组对比时富集到的10种差异性肠道微生物中,所有肠道微生物丰度均与大鼠第12 w随机血糖水平呈正相关（|r|>0.45,P<0.05）,并且与大鼠第12w体重呈负相关（|r|>0.45,P<0.05）;除fPrevotellaceae与大鼠血清NRG1水平无相关性外（|r|<0.40,P>0.05）,其余9种的微生物丰度还同时与大鼠血清NRG1水平呈负相关（|r|>0.45,P<0.05）。在DPN组显着富集的10种差异性肠道微生物中,fPorphyromonadaceae和gPrevotella的丰度同时与大鼠的机械痛阈值和IENFD呈负相关（|r|>0.40,P<0.05）。筋脉通可显着回调的9种肠道微生物的丰度均与大鼠血清NRG1水平呈正相关（|r|>0.40,P<0.05）。除cBetaproteobacteria和oBurkholderiales外,其余7种肠道微生物的丰度均与大鼠机械痛阈值（|r|>0.5,P<0.05）和IENFD（|r|>0.45,P<0.05）呈正相关。其中,pActinobacteria,pProteobacteria 和 cActinobacteria的丰度同时与大鼠第 12 w体重呈正相关（|r|>0.5,P<0.01）,与大鼠第12w随机血糖水平呈负相关（|r|>0.55,P<0.01）。[结论]1.DM大鼠12 w后出现痛觉过敏,坐骨神经病理形态学改变,及足底皮肤IENFD降低,表明DPN模型建立成功;DM大鼠血清NRG1分泌减少,坐骨神经Caspr表达抑制,APP表达增强,符合典型的糖尿病周围神经病变的病理特征。2.筋脉通可通过升高DM大鼠血清NRG1水平,促进坐骨神经Caspr表达,抑制APP表达,增加足底皮肤IENFD,改善其痛觉过敏及坐骨神经病理形态异常,发挥其髓鞘保护作用。3.筋脉通在维持坐骨神经正常结构形态与对称性的郎飞氏结结侧区数量上优于阳性对照药物NTP。4.DPN组大鼠的肠道菌群结构较CON组发生了明显变化,肠道菌群的物种丰富度、多样性与均匀性显着降低,可能通过富集fPorphyromonadaceae和gPrevotella影响DPN的各观察指标。5.筋脉通改变了 DPN大鼠肠道微生物群落的整体组成,回调了 9种在CON组显着富集的差异性肠道微生物,并可能通过富集pActinobacteria、pProteobacteria和c Actinobacteria参与发挥髓鞘保护作用。[创新点]通过整体动物实验,从分子水平研究了中药筋脉通对糖尿病大鼠坐骨神经组织中接触蛋白相关蛋白Caspr、淀粉样前体蛋白APP,以及血清神经调节蛋白1表达的影响,并尝试从肠道菌群的角度解释中药筋脉通防治DPN与发挥髓鞘保护作用的潜在机制,为中药筋脉通治疗DPN的临床应用提供了新的实验依据。
李小华[8]（2020）在《穿山龙提取物薯蓣皂苷对PDPN小鼠坐骨神经Nrf2/HO-1通路的影响》文中指出目的:探讨穿山龙提取物薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变模型小鼠的抗氧化应激通路的影响,为痛性糖尿病周围神经病变的临床治疗提供了深层次的理论基础。方法:采用随机数字表法,在83只SPF级雄性C57BL/6小鼠中随机选取12只作为正常组（CON）,其余作为造模组,将造模组以高脂饮食喂养8周,连续2天腹腔注射链脲佐菌素（STZ）70mg/kg。将血糖高于16.7mmol/l的小鼠纳入后续研究,以普通饲料喂养6周,6周后测机械痛阈下降50%的小鼠造模成功。将造模成功的小鼠随机分为模型组（DM）,薯蓣皂苷低剂量组（DIO50）（52.26 mg/kg）,薯蓣皂苷高剂量组（DIO100）（104.52 mg/kg）和α-硫辛酸组（ALA）（100mg/kg）,灌胃治疗持续8周。实验期间观察小鼠行为状态,动态监测血糖和体重。通过热尾浸泡试验和爪触觉反应测试来检测薯蓣皂苷对小鼠痛阈的影响。通过免疫荧光和Western印迹分析检测坐骨神经中Nrf2,HO-1和NQO1的表达水平。使用SPSS软件进行统计分析,P<0.05具有统计学意义。结果:1.造模组小鼠精神状态差,气味重,行动缓慢,毛发干枯无光泽,并且出现多饮、多食、多尿伴有消瘦。8周后,各治疗组的小鼠仍存在上述表现,但较模型组相比症状减轻。2.造模组与正常组小鼠相比,血糖水平明显上升（P<0.01）;治疗8周后,各治疗组小鼠的血糖水平与模型组相比均出现降低（P<0.01）,并且高剂量组低于α-硫辛酸组（P<0.01）。3.造模组与正常组小鼠相比,体重明显下降（P<0.01）;治疗8周后,治疗组小鼠的体重水平与模型组相比有所上升（P<0.01）,且薯蓣皂苷治疗组与α-硫辛酸组相比有统计学意义（P<0.05）。4.造模组与正常组小鼠相比,热痛阈明显降低（P<0.01）;4周、8周时治疗组与模型组相比痛阈明显提高（P<0.01）,高剂量组与α-硫辛酸组相比无统计学差异;造模组与正常组小鼠相比,机械痛阈明显降低（P<0.01）;4周、8周时治疗组与模型组相比痛阈明显提高（P<0.01）,薯蓣皂苷治疗组与α-硫辛酸组相比无统计学差异。5.治疗8周后,模型组与正常组小鼠相比,坐骨神经中Nrf2、HO-1、NQO1的表达水平均明显降低（P<0.01）;薯蓣皂苷低剂量组小鼠的HO-1表达水平高于模型组（P<0.05）;薯蓣皂苷高剂量组与α-硫辛酸组小鼠的Nrf2、HO-1、NQO1表达水平均明显高于模型组（P<0.05）,且高剂量组与α-硫辛酸组相比无统计学差异。结论:实验结果表明穿山龙薯蓣皂苷能够改善痛性糖尿病周围神经病变（PDPN）小鼠的精神状态及行为变化,改善痛阈,并调节Nrf2/HO-1信号通路,通过改善氧化应激来发挥神经的保护作用。
何洋[9]（2019）在《复方龙芪汤对2型糖尿病大鼠周围神经病变药效学研究及其化学成分分析》文中提出复方龙芪汤是临床经验方,方中含有黄芪、桂枝、赤芍、当归、鸡血藤、地龙和桑枝,共7味药材,全方具有益气补血,活血通络功效,用于治疗糖尿病周围神经病变。本文研究复方龙芪汤对糖尿病周围神经病变的药效作用,继而探索其相应的作用机制,并对复方龙芪汤化学成分做初步的定性分析。具体内容如下:（1）复方龙芪汤对2型糖尿病大鼠周围神经病变的药效研究采用高脂饲养兼链脲佐菌素（STZ）诱导Wistar大鼠造成2型糖尿病模型,待大鼠血糖稳定4周后,按血糖将其分成模型对照组,木丹颗粒组,龙芪汤高剂量组,龙芪汤中剂量组和龙芪汤低剂量组,以复方龙芪汤的处方比例提取制备干浸膏粉作为受试物,共给药16周。给药4周后测定大鼠血糖、血脂水平;给药5周、9周后分别测定血粘度值和坐骨神经传导速度,给药12周至14周,观测大鼠步态行为学。动物处死后,测定大鼠血清中血糖、糖化血红蛋白、血脂、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、总抗氧化能力（T-AOC）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）生化指标;过碘酸雪夫染色（PAS）法观察大鼠视网膜血管网的病理改变。结果显示复方龙芪汤可以减缓由糖尿病引起的坐骨神经传导速度的下降（p<0.05）,对降低血清中GSH-Px和胆固醇的作用明显,对降低红细胞糖化血红蛋白、血糖、甘油三酯等有一定作用,但均没有显着性差异;视网膜病理结果显示复方龙芪汤有不同程度改善病变视网膜毛细血管细线状态,减少毛细血管瘤的发生,减缓毛细血管内皮细胞的减少。综合上述结果可认为复方龙芪汤对糖尿病周围神经病变具有一定的药效作用。（2）复方龙芪汤改善糖尿病周围神经病变作用机制的探讨使用柱前衍生-高效液相法测定大鼠坐骨神经组织和红细胞中山梨醇含量;结果显示复方龙芪汤能降低糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经组织和红细胞山梨醇的含量（p<0.01）。从大鼠晶状体组织中提取醛糖还原酶,通过设定的酶促反应体系,考察不同浓度复方龙芪汤对体外醛糖还原酶活性的抑制作用,结果显示复方龙芪汤在一定浓度下,具有抑制醛糖还原酶活性的作用。综上,复方龙芪汤具有抑制糖尿病大鼠醛糖还原酶的活性,降低神经组织和红细胞山梨醇的含量。这可能是龙芪汤改善糖尿病周围神经病变的主要作用途径。（3）复方龙芪汤的化学成分分析采用超高效液相联用飞行时间质谱（UPLC/Q-TOF-MS）技术对复方龙芪汤主要成分进行定性分析,通过与组方各单味药比对,对复方龙芪汤中的主要化学成分进行识别和归属。结果从复方龙芪汤中共鉴定出70种化学成分,其来源于黄芪有25种、桂枝有5种、赤芍有25种、当归有8种、地龙有10种、鸡血藤有11种、桑枝有2种,有少数成分有多种来源。成分归属结果表明黄芪、赤芍在药方中起到至关重要作用。本论文用整体研究的思路探索复方龙芪汤对糖尿病周围神经病变大鼠的治疗作用,发现了复方龙芪汤主要通过抑制醛糖还原酶的活性,降低组织中山梨醇含量,改善坐骨神经的传导功能。此外,复方龙芪汤改善视网膜毛细血管,并在血糖、糖化血红蛋白、氧化应激状态有缓和趋势。复方龙芪汤的成分分析为研究其药效物质基础提供线索。本文为复方龙芪汤改善2型糖尿病周围神经病变提供实验数据,为多层次、多靶点治疗特点的中药复方增添基础数据,为开发新的药物提供研究数据和新思路。
王宏伟[10]（2019）在《穿山龙薯蓣皂苷对PDPN大鼠坐骨神经形态及NF-κB蛋白表达影响的研究》文中进行了进一步梳理目的:建立痛性糖尿病周围神经病变的大鼠实验动物模型,研究穿山龙提取物薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经组织形态和痛性糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经核转移因子NF-κB蛋白表达的影响。材料与方法:选择SPF级雄性Wistar大鼠136只,体重180-200g,适应性喂养一周后,按照随机原则,选取24只,分成3组,每组8只,分别为2周、4周、8周对照组,其余112只进行造模,将造模成功后的大鼠,随机分为2周、4周、8周模型组、薯蓣皂苷高剂量组、薯蓣皂苷低剂量组、强的松组（每组不少于8只）。造模采用2%链脲佐菌素溶液（Streptozotocin,STZ）53mg/kg（PH4.2的0.1mol/l枸椽酸缓冲液配制）,将其注入腹腔进行干预。观察给药后2周、4周、8周大鼠行为特征、血糖、体重、神经传导速度、痛阈情况的变化,采用光学显微镜观察大鼠坐骨神经组织形态,并采用免疫组化方法检测大鼠坐骨神经核转移因子NF-κB蛋白表达的变化。结果:1.模型组大鼠精神状态差,多饮、多食、多尿、毛色暗黄无光泽,行动迟缓,蜷卧弓背等,各给药组大鼠状态优于模型组,其中薯蓣皂苷高剂量组和西药强的松组大鼠状态改善较为明显。2.模型组、各给药组较正常对照组大鼠血糖水平有明显的提高（P<0.01）;各给药组较模型组大鼠血糖水平有降低的趋势（P>0.05）。3.模型组、各给药组较正常对照组大鼠体重水平有明显的减轻（P<0.01）,随着病程的延长,模型组和各给药组大鼠体重缓慢增加,各给药组较模型组大鼠体重无明显差异。4.模型组、各给药组较正常对照组大鼠神经传导速度明显降低（P<0.01）,各给药组较模型组大鼠神经传导速度明显升高（P<0.01）。5.模型组、各给药组与正常对照组比较大鼠痛阈值明显升高（P<0.01）,提示PDPN造模成功;2周时,薯蓣皂苷高剂量组、强的松组大鼠痛阈值与同期模型组比较降低（P<0.05）;4周、8周时,各给药组较同期模型组大鼠的痛阈值显着下降（P<0.01）,薯蓣皂苷低剂量组和蓣皂苷高剂量组相比较,同期的大鼠痛阈值明显升高（P<0.01）,强的松组较同期薯蓣皂苷高剂量组大鼠的痛阈值升高（P<0.05）,强的松组较薯蓣皂苷低剂量组大鼠的痛阈值降低（P<0.05）。6.正常组:分别在实验2W、4W、8W后进行观察,可以看出坐骨神经有髓神经的排列均匀、有秩序、成束排列,纤维与纤维之间严密的结合在一起,能够观察到呈紫红色的轴索在每一条神经中间出现。在轴索的外面可见到呈现蓝色的Schwann细胞核,外形呈长圆型。模型组:分别在实验2W、4W、8W后进行观察,可以看到坐骨神经有髓神经的纤维排列不均匀,杂乱无章,较分散,出现数量下降、结构不清晰、形态不规整等变化。在一部分神经当中,能够看到神经出现肿胀,神经纤维之间的缝隙增大,随着时间的增加,这样的变化逐渐加强,2周<4周<8周。2周时,有髓神经可见细小的损伤变化（见附图4）;4周时,可以看到有髓神经纤维的排列不均匀,杂乱无章,有的神经纤维密度不均匀,有的轴索出现收缩（见附图5）;8周时,可以看到有髓纤维的排列更加散乱无秩序,脱鞘、密度不均匀更加严重,大多数轴索都萎缩变细,严重的消失不见,同时雪旺氏细胞核减少（见附图6）。各给药组:采用STZ造模之后,各给药组大鼠的坐骨神经也产生相似的病理变化,不过随着时间的增加,与模型组相比,大鼠治疗组（薯蓣皂苷低剂量组、薯蓣皂苷高剂量组、强的松组）的损伤程度,显着降低,可以看到神经细胞的排列渐渐紧凑规则,肿胀程度降低,在神经纤维四周,可见散在的雪旺氏细胞核,轴索变的清晰可见。在治疗组之间,高剂量组的效果显着,强的松组其次,低剂量组效果最弱,3个治疗组改善效果排列如下:2<4<8周。（见附图7）。7.和正常组相比较,造模组大鼠坐骨神经中核转移因子NF-κB蛋白表达,有显着性的差异（P<0.01）;模型组和各治疗组的NF-κB的表达,在2周的时候相比较,无显着性差异（P>0.05）;4周、8周模型组与各治疗组比较,表达明显上升,具有显着性差异（P<0.01）;2周各治疗组之间比较,无显着性差异（P>0.05）,4周各治疗组之间比较,无统计学意义（P>0.05）,8周各治疗组之间比较,也无统计学意义（P>0.05）。说明穿山龙提取物薯蓣皂苷对NF-κB的激活起到抑制作用;病程不断延长时,各治疗组NF-κB表达具有下降趋势。结论:穿山龙提取物薯蓣皂苷可提高痛性糖尿病周围神经病变大鼠神经传导速度,降低痛阈值,对受损的坐骨神经起到保护的作用,延缓神经损伤的进程。
二、糖尿宁对糖尿病性神经病变大鼠激素水平调节的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、糖尿宁对糖尿病性神经病变大鼠激素水平调节的影响（论文提纲范文）
（2）糖络宁对高糖培养下大鼠背根神经元中miR-211及IRE1α-CHOP通路的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一部分 综述 |
| 综述1 糖尿病周围神经病变的中西医认识 |
| 一. 中医认识 |
| 二. 西医认识 |
| 三. 小结与展望 |
| 参考文献 |
| 综述2 microRNA对糖尿病慢性并发症影响 |
| 一. miRNA |
| 二. miRNA与糖尿病慢性并发症 |
| 三. 小结与展望 |
| 参考文献 |
| 第二部分 实验研究 |
| 前言 |
| 材料 |
| 1. 实验动物 |
| 2. 实验用药 |
| 3. 仪器 |
| 4. 试剂 |
| 方法 |
| 1. 糖络宁含药血清及正常大鼠血清的制备 |
| 2. 大鼠DRGn细胞的分离培养 |
| 3. 干预分组 |
| 4. 细胞转染 |
| 5. q-PCR法检测miR-211及IRE1α-CHOP通路相关基因表达水平 |
| 6. Western Blot法检测IRE1α-CHOP通路相关蛋白的表达水平 |
| 7. 氧化指标的检测 |
| 8.数据分析 |
| 结果 |
| 1. DRGn细胞生长情况 |
| 2. 糖络宁对DRGn细胞miR-211及IRE1α-CHOP通路相关基因表达的影响 |
| 3. 糖络宁对DRGn细胞IRE1α-CHOP通路相关蛋白表达的影响 |
| 4. 糖络宁对DRGn细胞氧化应激水平的影响 |
| 讨论 |
| 1. miR-211在疾病中的作用 |
| 2. 氧化应激与DPN |
| 3. 内质网应激与DPN |
| 4. miR-211与内质网应激、氧化应激 |
| 5. 糖络宁对内质网应激和氧化应激的作用 |
| 6. 问题与展望 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录 |
| 在学期间主要研究成果 |
（3）基于miRNA-211及PERK/CHOP通路研究糖络宁对高糖环境大鼠背根神经元细胞的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一：糖尿病周围神经病变的中医研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二：糖尿病周围神经病变的西医研究进展 |
| 参考文献 |
| 第二部分 实验研究 |
| 前言 |
| 材料 |
| 1 实验动物 |
| 2 实验用药 |
| 3 主要仪器设备 |
| 4 主要试剂 |
| 方法 |
| 1 糖络宁含药血清及正常大鼠血清的制备 |
| 2 大鼠DRGn细胞的分离培养 |
| 3 分组及培养基的配置 |
| 4 细胞转染 |
| 5 实时荧光定量PCR技术检测miR-211、PERK、elF2α、ATF4和CHOP mRNA的表达水平 |
| 6 运用Western Blot技术检测DRGn中PERK/CHOP信号通路相关蛋白表达水平 |
| 7 统计学方法 |
| 结果 |
| 1 DRGn细胞生长情况 |
| 2 糖络宁对高糖培养下DRGn细胞中miR-211 mRNA水平的影响 |
| 3 糖络宁对大鼠DRGn细胞PERK/CHOP信号通路相关蛋白的影响 |
| 4 糖络宁对大鼠DRG细胞凋亡水平的影响 |
| 讨论 |
| 1 miR-211在DPN中的作用 |
| 2 糖络宁与PERK/CHOP通路 |
| 3 miR-211抑制表达和激动表达与PERK/CHOP通路 |
| 4 内质网应激、细胞凋亡与DPN |
| 5 不足与展望 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
（4）基于miRNA-200a探讨糖络宁改善高糖下大鼠背根神经元氧化应激机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词表 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述1 糖尿病周围神经病变的中医认识 |
| 1. 病名认识 |
| 2. 病因病机 |
| 3. 临床治疗 |
| 4. 小结与展望 |
| 参考文献 |
| 综述2 microRNA在糖尿病慢性并发症中的研究进展 |
| 1. miRNA |
| 2. miRNA与糖尿病慢性并发症 |
| 3. 小结与展望 |
| 参考文献 |
| 第二部分 实验研究 |
| 前言 |
| 材料 |
| 1. 实验动物 |
| 2. 实验用药 |
| 3. 主要仪器设备 |
| 4. 主要试剂 |
| 方法 |
| 1. 糖络宁含药血清及正常大鼠血清的制备 |
| 2. 大鼠DRGn细胞的分离培养 |
| 3. DRGn细胞的NSE免疫荧光鉴定 |
| 4. CCK-8法测定DRGn细胞活性 |
| 5. 分组及培养基的配置 |
| 6. 氧化应激水平的测定 |
| 7. 实时荧光定量PCR技术检测miR-200a mRNA、PI3K mRNA的表达水平 |
| 8. Western blot技术检测PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT的表达水平 |
| 9. 统计学方法 |
| 结果 |
| 1. DRGn细胞生长情况 |
| 2. DRGn细胞NSE免疫荧光鉴定 |
| 3. 不同浓度葡萄糖及糖络宁含药血清对DRGn细胞活性的影响 |
| 4. 糖络宁对高糖培养下DRGn细胞氧化应激水平的影响 |
| 5. 糖络宁对高糖培养下DRGn细胞中miR-200a mRNA、PI3K mRNA表达水平的影响 |
| 6. 糖络宁对高糖培养下DRGn细胞中PI3K/AKT信号通路相关蛋白表达水平的影响 |
| 讨论 |
| 1. 氧化应激机制在DPN中的作用 |
| 2. 糖络宁对氧化应激的影响 |
| 3. miR-200家族在DPN中的作用 |
| 4. 糖络宁对PI3K/AKT信号通路的调控 |
| 5. 不足与展望 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
（5）基于网络药理学的糖尿病周围神经病变气虚血瘀证组方筛选与优化（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词表 |
| 文献综述 |
| 综述一 中药复方防治糖尿病周围神经病变的作用机制 |
| 综述二 治疗糖尿病周围神经病变西药的研究进展 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第一章 中医药文献数据自动抽提系统的构建 |
| 1 资料与方法 |
| 1.1 数据仓储设计 |
| 1.2 数据源介绍 |
| 1.3 数据采集 |
| 1.4 抽取结果人工审核与优化 |
| 2 结果 |
| 2.1 系统功能展示 |
| 2.2 系统使用方法 |
| 2.3 测试用数据源 |
| 2.4 输出结果展示 |
| 3 讨论 |
| 第二章 基于中医临床文献分析糖尿病周围神经病变用药规律 |
| 1 资料与方法 |
| 1.1 数据来源 |
| 1.2 文献纳入与排除标准 |
| 1.3 文献数据库构建 |
| 1.4 数据分析方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 单味中药使用频次 |
| 2.2 中药功效频次统计分析 |
| 2.3 中药药性统计分析 |
| 2.4 药对使用情况分析 |
| 2.5 治疗DPN中药核心网络分析 |
| 3 讨论 |
| 第三章 基于网络药理学治疗糖尿病周围神经病变气虚血瘀证的组方优化 |
| 1 资料与方法 |
| 1.1 相关数据资源 |
| 1.2 中药相关活性成分收集及靶点预测 |
| 1.3 DPN气虚血瘀证基因预测 |
| 1.4 DPN气虚血瘀证及中药靶点的KEGG通路富集 |
| 1.5 单个候选中药与DPN气虚血瘀证的相关性系数计算 |
| 1.6 单个中药在组方中对DPN气虚血瘀证的贡献系数计算并优化组方 |
| 2 结果 |
| 2.1 DPN气虚血瘀证症状对应的英文标准词 |
| 2.2 DPN气虚血瘀证相关基因 |
| 2.3 DPN气虚血瘀证相关基因KEGG通路富集结果 |
| 2.4 候选中药的有效成分及靶点 |
| 2.5 候选中药靶点的KEGG通路富集 |
| 2.6 候选中药与DPN气虚血瘀证的相关性系数 |
| 2.7 候选中药对候选组方的贡献度与优化后组方 |
| 3 讨论 |
| 第四章 基于网络药理学治疗糖尿病周围神经病变气虚血瘀证新组方与木丹颗粒药效对比 |
| 1 资料与方法 |
| 1.1 相关数据资源 |
| 1.2 中药相关活性成分收集及靶点预测 |
| 1.3 DPN气虚血瘀证基因预测 |
| 1.4 DPN气虚血瘀证及中药靶点的KEGG通路富集 |
| 1.5 木丹颗粒组成药物与DPN气虚血瘀证的相关性系数计算 |
| 1.6 优化方与木丹颗粒总相关性系数对比 |
| 1.7 优化方与木丹颗粒治疗DPN气虚血瘀证作用通路对比 |
| 2 结果 |
| 2.1 木丹颗粒组成药物的有效成分及靶点 |
| 2.2 木丹颗粒组成药物的KEGG通路富集 |
| 2.3 木丹颗粒与优化方的总相关性系数 |
| 2.4 木丹颗粒与优化方的总相关性系数对比 |
| 2.5 优化方与木丹颗粒治疗DPN气虚血瘀证的作用通路对比 |
| 3 讨论 |
| 结语 |
| 主要研究结果 |
| 创新点 |
| 不足和展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录 |
| 在学期间主要研究成果 |
（6）基于miR-200a及MAPKs信号通路研究糖络宁对高糖下大鼠背根神经元的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一部分 综述 糖尿病周围神经病变的中西医文献综述 |
| (一) DPN的西医研究进展 |
| (二) DPN的中医研究进展 |
| 参考文献 |
| 第二部分 实验研究 |
| 前言 |
| 实验材料 |
| 一、实验动物及实验环境 |
| 二、实验主要药品 |
| 三、实验试剂 |
| 四、实验仪器 |
| 实验方法 |
| 一、糖络宁含药血清及正常大鼠含药血清的制备 |
| 二、SD胎鼠DRG的分离培养及纯化 |
| 三、DRGn细胞的NSE免疫荧光鉴定 |
| 四、CCK-8法检测糖络宁含药血清对高糖培养细胞活性的影响 |
| 五、运用实时荧光定量PCR技术检测DRGn中miR-200a、Jun、Mapk8、Map3k8mRNA表达水平 |
| 六、运用Western Blot技术检测DRG中MAPKS信号通路相关蛋白表达水平 |
| 七、运用流式法检测DRG的细胞凋亡水平 |
| 实验结果 |
| 一、DRGn细胞生长情况 |
| 二、DRGn细胞的NSE免疫荧光鉴定 |
| 三、不同浓度葡萄糖及糖络宁对大鼠DRGn细胞活性的影响 |
| 四、糖络宁对大鼠背根神经元细胞miR-200a、MAPKs信号通路相关基因表达的影响 |
| 五、糖络宁对大鼠背根神经元细胞MAPKs信号通路相关蛋白表达的影响 |
| 六、糖络宁对大鼠DRG细胞凋亡水平的影响 |
| 讨论 |
| 一、DRGn的分离培养及干预条件的确定 |
| 二、糖络宁含药血清对高糖培养的DRGn细胞活性的影响 |
| 三、糖络宁含药血清对高糖培养下的DRGn细胞凋亡影响的机制 |
| 四、问题与展望 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
（7）中药筋脉通对糖尿病大鼠的髓鞘保护作用及其对肠道菌群的影响（论文提纲范文）
| 英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 中药筋脉通对糖尿病大鼠坐骨神经的髓鞘保护作用 |
| 材料 |
| 方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第二部分 中药筋脉通对糖尿病周围神经病变大鼠肠道菌群的影响 |
| 材料 |
| 方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 附图 |
| 参考文献 |
| 综述1 中药筋脉通防治糖尿病周围神经病变的中医理论基础与现代药理学研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述2 基于肠道菌群调节作用的糖尿病中医药干丽究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 博士期间发表论文 |
（8）穿山龙提取物薯蓣皂苷对PDPN小鼠坐骨神经Nrf2/HO-1通路的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 痛性糖尿病周围神经病变的中西医研究进展 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
（9）复方龙芪汤对2型糖尿病大鼠周围神经病变药效学研究及其化学成分分析（论文提纲范文）
| 缩略语及术语简表 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第一章 复方龙芪汤对2型糖尿病大鼠周围神经病变的药效学研究 |
| 第一节 复方龙芪汤对STZ诱导2型糖尿病大鼠周围神经病变的影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 第二节 复方龙芪汤对STZ诱导2型糖尿病视网膜毛细血管的影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 小结 |
| 第二章 复方龙芪汤改善糖尿病周围神经病变作用机制的探索 |
| 第一节 坐骨神经及红细胞中山梨醇含量测定 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 第二节 复方龙芪汤体外抑制醛糖还原酶作用 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 小结 |
| 第三章 复方龙芪汤化学成分分析 |
| 第一节 复方龙芪汤干浸膏粉总糖苷的测定 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 第二节 UPLC/Q-TOF-MS分析复方龙芪汤化学成分 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 小结 |
| 讨论 |
| 总结与展望 |
| 参考文献 |
| 附录图表 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（10）穿山龙薯蓣皂苷对PDPN大鼠坐骨神经形态及NF-κB蛋白表达影响的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 第一部分 穿山龙提取物薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变大鼠神经传导速度及痛阈的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第二部分 穿山龙提取物薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经组织形态及NF-κB蛋白表达的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
四、糖尿宁对糖尿病性神经病变大鼠激素水平调节的影响（论文参考文献）
- [1]止血明目方对糖尿病视网膜病变大鼠的治疗作用及机制探讨[D]. 刘英琳. 华北理工大学, 2021
- [2]糖络宁对高糖培养下大鼠背根神经元中miR-211及IRE1α-CHOP通路的影响[D]. 贾晓颖. 北京中医药大学, 2021(08)
- [3]基于miRNA-211及PERK/CHOP通路研究糖络宁对高糖环境大鼠背根神经元细胞的影响[D]. 陈枫. 北京中医药大学, 2021(08)
- [4]基于miRNA-200a探讨糖络宁改善高糖下大鼠背根神经元氧化应激机制[D]. 刘琴. 北京中医药大学, 2020(04)
- [5]基于网络药理学的糖尿病周围神经病变气虚血瘀证组方筛选与优化[D]. 张伏芝. 北京中医药大学, 2020(04)
- [6]基于miR-200a及MAPKs信号通路研究糖络宁对高糖下大鼠背根神经元的影响[D]. 李逸潇. 北京中医药大学, 2020(04)
- [7]中药筋脉通对糖尿病大鼠的髓鞘保护作用及其对肠道菌群的影响[D]. 谢骏. 北京协和医学院, 2020(05)
- [8]穿山龙提取物薯蓣皂苷对PDPN小鼠坐骨神经Nrf2/HO-1通路的影响[D]. 李小华. 辽宁中医药大学, 2020(02)
- [9]复方龙芪汤对2型糖尿病大鼠周围神经病变药效学研究及其化学成分分析[D]. 何洋. 北京协和医学院, 2019(02)
- [10]穿山龙薯蓣皂苷对PDPN大鼠坐骨神经形态及NF-κB蛋白表达影响的研究[D]. 王宏伟. 辽宁中医药大学, 2019(02)