锌金属硫蛋白论文-何婧雯,熊海容,王靖,覃瑞,赵平

锌金属硫蛋白论文-何婧雯,熊海容,王靖,覃瑞,赵平

导读:本文包含了锌金属硫蛋白论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:金属硫蛋白,氧化应激,重金属解毒,疾病

锌金属硫蛋白论文文献综述

何婧雯,熊海容,王靖,覃瑞,赵平[1](2019)在《金属硫蛋白的研究现状及进展》一文中研究指出金属硫蛋白是一类存在于生物中低分子量,富含半胱氨酸、不含芳香氨基酸的金属结合蛋白质。对金属硫蛋白的结构、4种类型,以及其重金属解毒、清除自由基、氧化应激等功能和开发利用进行了简要概述,对金属硫蛋白在各种疾病方面的研究进行介绍,同时对金属硫蛋白的开发利用进行了展望。(本文来源于《农产品加工》期刊2019年17期)

阎光宇,余蕾,何建林,孙继鹏[2](2019)在《牡蛎金属硫蛋白重组毕赤酵母菌株高效诱导表达工艺研究》一文中研究指出金属硫蛋白(MT)作为一类广泛存在并高度可诱导的多功能内源性蛋白,具有重金属解毒、抗辐射、清除自由基等功能,近年来已成为研究和开发的热点。为解决MT原料来源的瓶颈问题,本文以一株海洋源MT重组巴斯德毕赤酵母菌株(GS~(-1)15-MT)为研究对象,对其进行培育条件(温度、pH、溶氧、接种量)、诱导表达条件(溶氧、甲醇浓度、菌株生产状况、诱导时间、诱导金属及浓度)综合优化,以获得MT高效表达最佳工艺。结果显示,GS~(-1)15-MT的最佳生长条件为培育温度30℃,培养基初始pH为9,摇床转速240r·min~(-1),接种量4%;最佳MT诱导发酵条件为摇床转速为220r·min~(-1),甲醇浓度为5%,菌液OD_(600)为9.7,诱导24h,Cu~(2+)诱导浓度50μmol·L~(-1)。在以上优化条件下,MT表达量达0.328mg·mL~(-1)。本结果可为海洋源MT的规模化工业生产提供一定理论依据。(本文来源于《生物产业技术》期刊2019年05期)

胡艳瑞,王世磊[3](2019)在《金属硫蛋白1E、糖类抗原153表达与乳腺癌患者临床特征及预后的关系》一文中研究指出目的探讨金属硫蛋白1E(MT1E)、糖类抗原153(CA153)在乳腺癌患者血清中的表达情况及其与患者临床特征及预后的关系。方法选取128例乳腺癌患者为观察组,选取130例同期进行体检的健康女性为对照组,采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测两组受试者血清中MT1E和CA153的表达水平,并对128例乳腺癌患者进行随访。结果观察组患者血清中MT1E、CA153的表达水平均明显高于对照组患者(P﹤0.01)。TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期乳腺癌患者血清中MT1E、CA153的阳性表达率均明显高于TNM分期为Ⅰ~Ⅱ期的乳腺癌患者(P﹤0.01);有淋巴结转移的乳腺癌患者血清中MT1E的阳性表达率明显高于无淋巴结转移的乳腺癌患者(P﹤0.01)。MT1E、CA153阳性表达乳腺癌患者的中位生存时间均短于MT1E、CA153阴性表达的乳腺癌患者(P﹤0.05)。Cox比例风险回归分析结果显示,有淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期、分化程度为中低分化、MT1E阳性表达、CA153阳性表达均是乳腺癌患者预后不良的独立危险因素(P﹤0.05),雌激素受体阳性是乳腺癌患者预后良好的独立保护因素(P﹤0.05)。结论乳腺癌患者血清中MT1E和CA153的表达水平较高,有淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期、分化程度为中低分化、MT1E阳性表达、CA153阳性表达是乳腺癌患者预后不良的独立危险因素,雌激素受体阳性是乳腺癌患者预后良好的独立保护因素。(本文来源于《癌症进展》期刊2019年16期)

沈齐[4](2019)在《金属硫蛋白与肿瘤的关系研究》一文中研究指出金属硫蛋白广泛存在于自然界及生物界中,目前认为金属硫蛋白是一类低分子量、富含半胱氨酸的内源性小分子蛋白物质,其具有较为独特的结构特征、理化性质及生物学特性。研究发现其在多种疾病的发生发展、发病机制、诊疗及药物耐药性等方面发挥着重要的作用,目前尤其是对于金属硫蛋白与各种肿瘤的发病机制、发生发展、诊断治疗、预后评估及抗肿瘤药物耐药性等关系的研究方面,逐渐受到愈来愈多的关注。本文主要对金属硫蛋白的结构与功能、主要生物学功能及其与肿瘤的关系进行综述。(本文来源于《医学信息》期刊2019年16期)

强承魁,秦越华,张明,梁玉莹,曹丹[5](2019)在《小麦金属硫蛋白基因的克隆与组织表达分析》一文中研究指出为了解小麦金属硫蛋白(metallothionein, MT)的分子生物学特征及组织表达特性,本研究从‘徐麦30’(Xm-30)、‘保麦2号’(Bm-2)中克隆出该基因(TaMT)后进行序列分析,并采用实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)解析了其在小麦不同组织间的表达差异。结果表明,2个品种中该基因DNA序列长度分别为339 bp和338 bp且一致性达99.71%,均编码49个氨基酸,含有1个CXC结构和2个CXXXC结构,预测的分子量和理论等电点分别为4.77 kD和4.78,二级结构中α-螺旋、延伸链、β-转角和无规则卷曲各占20.41%、12.24%、8.16%和59.18%,亚细胞定位于细胞核、线粒体、细胞骨架、细胞质和液泡的比例分别为69.6%、13.0%、8.7%、4.3%和4.3%;TaMT蛋白与硬粒小麦的同源性高达100%,与大麦的同源性为95.9%,显示出高度保守性;qRT-PCR检测该基因在2个小麦的4种组织中均有表达,但存在组织特异性,其中茎表达量最高,其次依次为根、叶和籽粒;‘Bm-2’根、茎、叶和籽粒中的表达量均显着高于‘Xm-30’。上述研究结果可为后续开展小麦MT解毒机理和功能等研究提供理论依据。(本文来源于《分子植物育种》期刊2019年14期)

谢秋涛,朱玲风,袁洪燕,李绮丽,魏颖娟[6](2019)在《镉超标籼米麸皮中金属硫蛋白微观结构表征》一文中研究指出以镉超标籼米为原料,将其打磨取麸皮提取金属硫蛋白(Metallothionein,MT),研究其紫外吸光、二级结构、氨基酸组成等微观结构性质。结果表明,MT在291 nm处有最大吸收峰;二级结构组成为α-螺旋26.1%、β-折迭18.7%,β-转角22.6%,无规卷曲32.6%;MT氨基酸组成与原料相比,甲硫氨酸、半胱氨酸等含硫氨基酸含量增高,酪氨酸、苯丙氨酸等芳香族氨基酸含量减少;与镉结合蛋白(Cd-binding protein,CBP)相比各种氨基酸含量均有减少;扫描电子显微镜(Scanning electron microscope,SEM)显示MT微观形态结构呈多孔状,有明显圆球状末端。(本文来源于《食品科技》期刊2019年06期)

茅光耀,郭云海,张仪,肖宁[7](2019)在《Cu~(2+)胁迫对福寿螺金属硫蛋白基因mRNA表达的影响》一文中研究指出探讨不同浓度Cu~(2+)胁迫对福寿螺肝胰腺组织金属硫蛋白(metallothionein, MT)基因表达的影响,取15只福寿螺,在100μg/L Cu~(2+)离子胁迫后的0、 1、 7、 14、 21 d,各取3只福寿螺,分离肝脏,提取RNA,反转录为c DNA,实时荧光定量PCR检测福寿螺金属硫蛋白基因(Pc MT) mRNA的相对表达水平。以cDNA为模板, PCR扩增Pc MT基因完整编码序列,连接至pET28a质粒,转入大肠埃希菌BL21 (DE3)感受态细胞中,挑取阳性克隆进行鉴定与测序。用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导重组蛋白表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表达产物。结果显示, Cu~(2+)胁迫0~14 d,福寿螺肝脏中Pc MT基因mRNA的表达量持续上升,峰值为2.1±0.2, 21 d时下降为1.1±0.1。PCR扩增Pc MT基因,获得长度约300 bp的片段,构建的pET28a-Pc MT质粒经PCR、双酶切和测序鉴定,均与预期大小一致。SDS-PAGE结果显示, Pc MT蛋白的相对分子质量(Mr)约为17 000。(本文来源于《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》期刊2019年03期)

刘然,左利,刘士蒙,杨桂英,李诗雅[8](2019)在《基于金属硫蛋白铜纳米簇的过氧化物酶活性检测尿酸》一文中研究指出将金属硫蛋白铜纳米簇的过氧化物酶活性与尿酸酶的催化活性相结合,设计了比色/光度法检测血液样品中尿酸的生物传感平台。方法检测尿酸的线性范围为25.47~750.00μmol/L,检出限7.72μmol/L,相对标准偏差为3.02%~4.62%,在实际血液样品的测定中加标回收率96.34%~105.39%。方法简便易行,能满足实际应用需要。(本文来源于《应用化工》期刊2019年08期)

李停停[9](2019)在《毛蚶中金属硫蛋白的提取纯化及抗氧化活性分析》一文中研究指出金属硫蛋白(metallothionein,MT)是一类富含半胱氨酸、具有金属结合特性、广泛存在于动物、植物、微生物体内一类低分子量多功能诱导性蛋白。独特的生物学功能使金属硫蛋白成为环境科学、生物毒理学、医学等领域的研究热点之一。国内外学者先后研究了金属硫蛋白多种提取纯化方法及相应的分析技术,但是有关MT的分离和定量分析尚无国际性的标准方法。本研究选取海洋源生物毛蚶为研究对象,探究毛蚶中的活性成分金属硫蛋白的高效提取纯化技术,并对其抗氧化活性进行研究,以期为海洋活性物质质量控制与功能性评价提供理论基础。主要研究内容如下:(1)金属硫蛋白提取原材料的选择:选取毛蚶(Scapharca subcrenata)为研究对象。毛蚶属于滤食性双壳贝类,体内易富集重金属,在我国分布广泛,资源尤为丰富,是提取金属硫蛋白理想的原料。本研究采用50mmol/L氯化锌诱导毛蚶机体产生金属硫蛋白,探究毛蚶中金属硫蛋白的提取方法并优化其制备工艺。诱导后毛蚶组织中Zn~(2+)含量由21.84mg/g增加到72.40mg/g,MT含量由0.39 mg/g增加到0.65 mg/g,诱导效果显着。(2)毛蚶中金属硫蛋白提取工艺的研究:采用性质稳定且与生理体液的相容性好Tris-HCl缓冲液作为提取剂,匀浆离心提取毛蚶中MT。在单因素实验的基础上,以金属硫蛋白提取量作为响应值,根据Box-Behnke实验原理,在四因素叁水平的基础上进行毛蚶金属硫蛋白提取工艺响应面优化分析,得到MT最佳的提取条件。当提取缓冲液pH为8.45,缓冲液浓度0.18 mol/L,提取温度35℃,物料比为1:6时,提取时间为30 min时毛蚶组织MT可获得最佳提取效果,平均提取含量为0.69 mg/g。(3)毛蚶中金属硫蛋白分离纯化技术的优化:首先通过蛋白纯化仪确定毛蚶中Zn-MT最佳紫外监测波长,采用Enrich SEC 70高分辨率分子筛预装柱将毛蚶粗提物中MT与杂蛋白分开,0.01 mol/L的Tris-HCI缓冲溶液进行洗脱,流速为1.00 mL/min,得到初步纯化目标产物毛蚶MTs,提取率为37.96%,纯度为92.43%;将凝胶过滤层析初步纯化得到的MTs进行DEAE阴离子交换层析,0.50 mol/L NaCl缓冲溶液梯度洗脱,流速为1.00 mL/min,分离得到毛蚶中MT-I与MT-Ⅱ组分;最后将分离纯化得到的MT-I与MT-Ⅱ组分进行脱盐处理,收集最终产物,MT-I的提取率为43.66%,纯度为95.12%,MT-Ⅱ的提取率为45.83%,纯度为95.56%。通过ICP-MS检测不同纯化阶段金属硫蛋白锌离子信号值与紫外检测相结合的办法区分不同种MT,建立金属硫蛋白准确高效的双重检测方法,并根据金属硫蛋白结合金属元素的特点实现蛋白的定量分析。(4)毛蚶中金属硫蛋白分子量的测定。通过Tris-Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳测得毛蚶与兔肝中的金属硫蛋白相对分子量较为接近。毛蚶初步纯化产物MTs相对分子量为17.79 kDa,阴离子交换层析分离得到的MT-I、MT-Ⅱ相对分子量分别为17.63kDa、17.16 kDa,对照品兔肝Zn-MTs相对分子量18.12 kDa。(5)毛蚶金属硫蛋白不同纯化阶段抗氧化活性的研究:实验结果表明,通过凝胶过滤层析、阴离子交换层析不同纯化阶段得到的金属硫蛋白,与抗坏血酸(Vc)作对照,具有较好的抗氧化能力(T-AOC),对羟基自由基(·OH)、DPPH自由基具有很强的清除能力。初步纯化得到的毛蚶MTs总抗氧化能力为4.25 U/mg,MT-Ⅰ总抗氧化能力为3.30 U/mg,MT-Ⅱ的总抗氧化能力为3.21 U/mg。50mg/mL的样品溶液对羟自由基清除率大小顺序为:初步纯化MTs(70%)﹥Vc(62%)﹥MT-Ⅰ(57%)﹥MT-Ⅱ(51%)。60mg/mL的样品溶液对DPPH清除率大小顺序为:初步纯化MTs(89%)﹥Vc(78%)﹥MT-Ⅰ(56%)﹥MT-Ⅱ(50%)。(本文来源于《浙江海洋大学》期刊2019-05-15)

严国[10](2019)在《口虾蛄金属硫蛋白的提取与纯化制备工艺研究》一文中研究指出金属硫蛋白(metallothionein,MT)是一类普遍存在于生物体且富含半胱氨酸(Cys)的一类低分子量蛋白,已在包括原核生物、植物、无脊椎动物和脊椎动物等多种生物中分离并被研究应用。通过其半胱氨酸硫醇基团与重金属具有结合能力,在金属稳态和重金属毒性、DNA损伤、氧化应激、拮抗电离辐射等保护中起重要作用,并为其他金属蛋白和金属酶类提供活性中心,在营养保健、医药、生物工程、养殖及环境监测保护方面有着广泛的应用。本研究以口虾蛄(Oratosquilla oratoria)为原料,进行MT的提取与纯化制备工艺研究,一方面为海洋生物资源的开发和利用提供新的思路,另一方面也为后续开展口虾蛄体内重金属元素富集机理研究打下基础。研究内容如下:1.为高效利用口虾蛄制备MT,以口虾蛄MT提取量为指标,考察液料比、Tris-HCl提取液浓度、提取温度、提取液pH、提取时间等因素对MT提取效果的影响。采用单因素试验结合响应面分析法优化试验条件,得到了口虾蛄MT的最佳提取工艺:液料比为4,Tris-HCl提取液浓度为0.02 mol/L,提取温度为51℃,提取液pH为7.8,提取时间1 h;此条件下口虾蛄MT最大提取量为0.232 mg/g,该结果与理论预测值基本相符。2.利用Sephadex G-50凝胶柱和DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换柱对粗蛋白进行分离纯化,获得了口虾蛄MT的分离与纯化制备条件。Sephadex G-50洗脱条件为:0.02 mol/L Tris-HCl(pH 8.0)洗脱、流速0.8 mL/min、8 mL/管,洗脱体积450 mL;DEAE Sepharose Fast Flow洗脱条件为:先用0.02 mol/L Tris-HCl(pH8.6)结合0.02 mol/L Tris-HCl+0.5 mol/L NaCl(pH 8.6)溶液进行洗脱、0.8 mL/min、8 mL/管,洗脱体积500 mL。220 nm下紫外比色同时结合ICP-MS测定金属元素信号进行对比确认。分离物再经Sephadex G-25脱盐得到高纯度的口虾蛄MT-1、MT-2。MT-1经高效液相凝胶过滤色谱法和Tricine-SDS-PAGE电泳测定,其分子量约为15 KDa。由高效液相色谱-荧光检测法和高效液相分子排阻色谱-紫外检测法测定,根据面积归一法计算目标物出峰面积,得到口虾蛄MT-1的纯度大约在91.50%。3.对分离纯化的高纯度口虾蛄MT物进行Cu、Zn等金属元素结合量、等电点、氨基酸组成和纯度测定,再使用紫外光谱法、红外光谱法、圆二色谱法等对纯化产物进行结构表征。结果显示:口虾蛄MT-1主要是以Zn-MT的形式存在,另外还结合了较多的Cu;MT-1的等电点(pI)为4.1;口虾蛄MT中半胱氨酸(Cys)占总氨基酸的32.44%,不含芳香族氨基酸;经紫外光谱分析,口虾蛄MT-1溶液在270 nm左右处有明显的吸收峰,在280 nm处没有吸收峰,加入EDTA处理后270nm处吸收峰消失;红外光谱分析表明口虾蛄MT的吸收带均对应着I型无规则卷曲构型,其中MT-1与MT-2的酰胺带I位分别位于1640.92 cm-~1处和1642.03 cm~(-1)处,主要由酰胺C=O强伸缩振动引起、并伴有NH弯曲振动(剪式);而酰胺带II依次位于1537.32 cm~(-1)处和1539.50 cm~(-1)处,由NH弯曲振动与C-N中度伸缩振动引起,酰胺带III均不太明显,但伴有C-N中度伸缩振动峰;圆二色谱(CD)分析显示口虾蛄MT-1、MT-2的二级结构主要为无规则卷曲构像,伴有一定的β-折迭,且口虾蛄MT-1、MT-2的二级结构较为接近,这与红外光谱分析结果一致。抗氧化活性初步评价试验显示:DPPH自由基的清除能力大小顺序依次为兔肝MT-1>兔肝MT-2>口虾蛄MT-1>口虾蛄MT-2>VC。综上,本研究不仅为金属硫蛋白的制备提供了新的技术路线,也为揭示口虾蛄重金属富集机理提供了基础。(本文来源于《浙江海洋大学》期刊2019-05-01)

锌金属硫蛋白论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

金属硫蛋白(MT)作为一类广泛存在并高度可诱导的多功能内源性蛋白,具有重金属解毒、抗辐射、清除自由基等功能,近年来已成为研究和开发的热点。为解决MT原料来源的瓶颈问题,本文以一株海洋源MT重组巴斯德毕赤酵母菌株(GS~(-1)15-MT)为研究对象,对其进行培育条件(温度、pH、溶氧、接种量)、诱导表达条件(溶氧、甲醇浓度、菌株生产状况、诱导时间、诱导金属及浓度)综合优化,以获得MT高效表达最佳工艺。结果显示,GS~(-1)15-MT的最佳生长条件为培育温度30℃,培养基初始pH为9,摇床转速240r·min~(-1),接种量4%;最佳MT诱导发酵条件为摇床转速为220r·min~(-1),甲醇浓度为5%,菌液OD_(600)为9.7,诱导24h,Cu~(2+)诱导浓度50μmol·L~(-1)。在以上优化条件下,MT表达量达0.328mg·mL~(-1)。本结果可为海洋源MT的规模化工业生产提供一定理论依据。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

锌金属硫蛋白论文参考文献

[1].何婧雯,熊海容,王靖,覃瑞,赵平.金属硫蛋白的研究现状及进展[J].农产品加工.2019

[2].阎光宇,余蕾,何建林,孙继鹏.牡蛎金属硫蛋白重组毕赤酵母菌株高效诱导表达工艺研究[J].生物产业技术.2019

[3].胡艳瑞,王世磊.金属硫蛋白1E、糖类抗原153表达与乳腺癌患者临床特征及预后的关系[J].癌症进展.2019

[4].沈齐.金属硫蛋白与肿瘤的关系研究[J].医学信息.2019

[5].强承魁,秦越华,张明,梁玉莹,曹丹.小麦金属硫蛋白基因的克隆与组织表达分析[J].分子植物育种.2019

[6].谢秋涛,朱玲风,袁洪燕,李绮丽,魏颖娟.镉超标籼米麸皮中金属硫蛋白微观结构表征[J].食品科技.2019

[7].茅光耀,郭云海,张仪,肖宁.Cu~(2+)胁迫对福寿螺金属硫蛋白基因mRNA表达的影响[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志.2019

[8].刘然,左利,刘士蒙,杨桂英,李诗雅.基于金属硫蛋白铜纳米簇的过氧化物酶活性检测尿酸[J].应用化工.2019

[9].李停停.毛蚶中金属硫蛋白的提取纯化及抗氧化活性分析[D].浙江海洋大学.2019

[10].严国.口虾蛄金属硫蛋白的提取与纯化制备工艺研究[D].浙江海洋大学.2019

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