导读:本文包含了蛋白酶自溶论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:刺参,自溶,基质金属蛋白酶,抑制剂
蛋白酶自溶论文文献综述
刘自强,刘玉欣,刘潇阳,刘冰,宋亮[1]（2019）在《刺参体壁自溶过程中基质金属蛋白酶的原位抑制研究》一文中研究指出刺参自溶是一种普遍现象,由内源酶降解结构蛋白所致,在养殖、贮藏及加工过程中破坏海参品质,造成严重的经济损失。研究表明,基质金属蛋白酶能导致海参胶原纤维完全解聚成单根的胶原原纤维或胶原原纤维束,被认为是引起海参体壁自溶的关键内源性蛋白酶。在本研究中,首次将基质金属蛋白酶抑制剂注入海参体腔,通过扫描电子显微镜、化学分析、小动物成像及激光共聚焦显微镜研究其对海参自溶的影响,揭示其作用机制。结果表明,在外界刺激下,活海参体壁中内源性基质金属蛋白酶活性被激活,这可能是引起海参自溶的原因。经体腔注射后,基质金属蛋白酶抑制剂可以扩散到体壁组织,显着延缓自溶海参典型形态和显微结构变化的进程。通过螯合钙离子,基质金属蛋白酶抑制剂可以阻止基质金属蛋白酶的活化,从而通过抑制相邻胶原纤维间蛋白聚糖桥的降解来抑制新鲜海参的自溶。(本文来源于《中国食品科学技术学会第十六届年会暨第十届中美食品业高层论坛论文摘要集》期刊2019-11-13）
颜龙杰[2]（2019）在《刺参（Stichopus japonicas）胶原蛋白及自溶相关蛋白酶的研究》一文中研究指出刺参是一种具有特殊质构的棘皮动物,作为传统的海珍品,在中国、日本、韩国等亚洲国家深受消费者喜爱。我国的刺参产量逐年递增,但是刺参在加工、运输过程中极易出现自溶现象,产生这一现象的主要原因是结构蛋白被降解。胶原蛋白是刺参最主要的营养成分,占总蛋白含量的70%左右,也是最主要的结构蛋白,赋予刺参体壁一定的韧性和强度。胶原蛋白的降解被认为是刺参自溶的主要原因,严重影响刺参体壁的稳定性。本文研究刺参胶原蛋白以及内源性蛋白酶对胶原蛋白的降解作用,为阐明刺参胶原蛋白的代谢和刺参自溶机理提供重要信息。首先,从刺参(Stichopus japonicas)体壁中纯化获得一种胃蛋白酶促溶型胶原蛋白(pepsin-soluble collagen,SjPSC)。SjPSC是由叁条相同的α链构成的同源三聚体,α链的分子量约为130 kDa。傅立叶红外光谱、圆二色谱分析表明,制备的SjPSC具有完整的叁股螺旋结构;差示扫描量热仪检测结果显示SjPSC的热变性温度为34.0±0.12°C。利用高纯度的SjPSC制备抗刺参胶原多克隆抗体,通过Western blot检测发现该抗体只与刺参(Stichopus japonicus)和东海乌参(Acaudina leucoprocta)两种海参的胶原蛋白发生反应,说明该抗体特异性良好。克隆获得SjPSCα的基因序列(SjCOLα),该基因开放阅读框(opne reading frame,ORF)共4203个碱基,编码1400个氨基酸残基,推导的氨基酸序列包含信号肽、N-端前肽、N端、C-端前肽、C端和叁股螺旋区,与多个物种的胶原蛋白α链氨基酸序列相似性均低于50%;叁股螺旋区Gly-Gly-Y的数量(9个)多于鲍鱼、罗非鱼和猪的α链,而Gly-Pro-Pro的数量(21个)却少于这些生物胶原蛋白的α链,这种序列特征与SjPSC的热稳定性较弱有关。刺参胶原蛋白理化性质和氨基酸序列的分析结果为研究刺参自溶过程胶原蛋白的变化以及自溶相关蛋白酶作用机理提供了良好的理论基础。基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)是刺参自溶过程中参与降解胶原蛋白的关键酶类。尽管该酶活力很高,但在刺参体内含量极少,难以纯化获得天然蛋白酶。为研究MMP参与刺参自溶的机理,制备有活性的重组蛋白酶是更有效的方法。本研究克隆获得刺参MMP-2完整的编码区序列,共1977个碱基,编码658个氨基酸残基,推导的氨基酸序列含有信号肽、前肽、包含叁个II型纤维连接蛋白结合域的催化区和C端类血红素结合区。在大肠杆菌表达系统中成功表达和纯化了MMP-2的催化区(rMMP-2),其分子量约为40 kDa。rMMP-2分解明胶的活性需要Ca~(2+)的参与,反应的最适温度为40°C,最适pH为8.5,说明它是一种弱碱性蛋白酶。圆二色谱分析结果显示,其变性温度为56.80±0.25°C。rMMP-2能有效分解刺参胶原,且产物具有清除DPPH自由基和羟基自由基的活性,EC_(50)值分别为3.59 mg/mL和2.77 mg/mL。这些实验结果表明MMP-2在刺参自溶过程中具有降解胶原蛋白的作用。此外,从刺参肠道中纯化获得一种分子量约为34 kDa的蛋白酶,该酶具有分解胶原活性,通过肽质量指纹图谱鉴定其属于丝氨酸蛋白酶(serine proteinases,SP)。但天然SP难于分离纯化,不利于深入研究SP与胶原的关系。因此,运用基因工程表达获得具有活性的重组SP(rSP)显得尤为重要。本研究进一步克隆获得刺参SP完整的编码区序列,共1134个碱基,编码377个氨基酸残基。在大肠杆菌表达系统中成功融合表达并纯化了具有活性的rSP。运用荧光底物分析,表明rSP的最适温度为35°C,最适pH为7.5,与天然SP的性质相似。rSP能有效地降解胶原蛋白,高效液相色谱分析发现降解产物中,分子量小于5 kDa的小肽占88.6%。利用肽质量指纹图谱分析酶切位点,结果表明rSP更易切割蛋白质序列中P_1位为Arg的肽键;同时当P_1位为Lys或Gly时也具有切割作用,但效率较低。这些结果证明SP也是刺参自溶过程降解胶原蛋白的关键酶。一直以来,刺参是国内外研究者热点关注的水产动物之一。本研究以刺参为研究对象,首次报道刺参胶原的基因,对刺参胶原蛋白进行了分析;对刺参MMP-2和SP基因全序列、重组表达、生理生化性质及其与胶原蛋白的关系进行了深入的研究。首次将高纯度、高活性的rMMP-2用于水解刺参胶原蛋白制备生物活性肽。分析了海参SP对SjPSC的酶切位点。本研究结果为深入了解刺参胶原蛋白在新陈代谢过程中的作用,探索刺参胶原的生物活性奠定了基础,并揭示了刺参自溶所涉及的相关蛋白酶及其作用机理。(本文来源于《集美大学》期刊2019-05-08）
胡玲萍,张晓梅,张鸿伟,孙维维,温运启[3]（2019）在《南极磷虾自溶前后氨基酸和胰蛋白酶降解产物的变化》一文中研究指出南极磷虾富含内源自溶酶,死后易快速自溶,限制了其加工利用。为研究南极磷虾自溶特性,测定了不同条件下南极磷虾自溶酶的最适温度和pH值,然后在最适自溶条件下研究了南极磷虾自溶3 h前后的氨基酸态氮含量和组成变化,并对南极磷虾自溶前后的胰蛋白酶降解产物进行了分析。结果表明:南极磷虾自溶酶最适温度为55℃,最适pH值为7.5,在此条件下南极磷虾自溶后氨基酸态氮质量浓度升高;甘氨酸和脯氨酸为南极磷虾的主要游离氨基酸,其次为谷氨酸和丙氨酸,南极磷虾自溶后鲜味氨基酸如谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸质量分数降低,而苦味氨基酸如亮氨酸、异亮氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸质量分数升高;南极磷虾自溶后胰蛋白酶降解产物分子质量分布向小分子质量范围偏移。本实验为进一步研究南极磷虾自溶特性提供了理论依据。(本文来源于《食品科学》期刊2019年11期）
徐锦华,孟泽玲,葛诗琪,薛鹏,张公亮[4]（2019）在《刺参体壁胰/类胰丝氨酸蛋白酶的性质及其在自溶中的作用》一文中研究指出以刺参体壁中丝氨酸蛋白酶为研究对象,对其部分酶学性质及其与刺参自溶的关系进行研究。采用TrisHCl缓冲溶液提取、硫酸铵盐析、透析及超滤获得刺参体壁粗酶液。结果显示,以Boc-Phe-Ser-Arg-MCA为底物时,粗酶液的丝氨酸蛋白酶活力最高;以其为底物,测得该类蛋白酶在pH值为6.2和8.5时呈现较强酶活力峰值,两者最适温度范围均为50～55℃;Cu~(2+)、Fe~(3+)、Pb~(2+)、Zn~(2+)强烈抑制该酶的活性,Ca~(2+)可提高该酶活力;邻菲咯啉、乙二胺四乙酸以及半胱氨酸修饰剂均能够部分抑制该酶活力。4-(2-氨乙基)苯磺酰氟盐酸盐、苯甲基磺酰氟、Na-对甲苯磺酰-L-苯丙氨酸氯甲基酮、(3S)-7-氨基-1-氯-3-磺酰氨基-2-庚酮盐酸盐、大豆胰蛋白酶抑制剂能够显着抑制蛋白酶的活力以及自溶过程中可溶性蛋白、叁氯乙酸可溶性多肽的生成。上述结果表明,刺参体壁中存在至少2种具有一定的金属离子依赖性的胰/类胰丝氨酸蛋白酶,其活性中心或底物识别位点可能有半胱氨酸的参与,该类蛋白酶很可能参与刺参自溶过程中蛋白质的降解。(本文来源于《食品科学》期刊2019年18期）
李锐,邹茜,孙玉林,王林,李想[5]（2019）在《紫外诱导克氏原螯虾虾头自溶制备蛋白酶解液及其鲜味物质研究》一文中研究指出克氏原螯虾虾头中含有丰富的内源酶,通过紫外线照射可诱导其发生自溶反应,制备滋味鲜美的蛋白酶解液。以水解度为指标,通过单因素试验和响应面优化紫外诱导克氏原螯虾虾头的自溶条件,确定最佳自溶条件为:紫外照射时间22. 94 min,自溶初始pH 7. 16,温度50. 06℃,自溶时间3 h。在此条件下克氏原螯虾虾头水解度达44. 39%。通过感官评价和理化指标,对克氏原螯虾虾头原液和自溶产物中的鲜味物质进行分析,结果表明,克氏原螯虾虾头经过自溶后,酶解液中腥味和苦味降低的同时,鲜味和醇厚感显着增加(P <0. 05);与虾头原液相比,自溶产物中鲜味氨基酸总量(2 150. 12 mg/kg)和游离氨基酸总量(8 605. 45 mg/kg)均显着增加,分别增加了1. 41倍和1. 29倍;呈味核苷酸及其关联化合物总量变化不大(P> 0. 05),自溶产物中与鲜味有着密切联系的肌苷酸(IMP)为8. 36mg/kg,增加了47. 18%。通过紫外诱导法制备的克氏原螯虾自溶酶解产物,具有较浓的虾鲜味、口感醇厚,可以作为一种营养、健康、美味的调味基料。(本文来源于《食品与发酵工业》期刊2019年03期）
王玲,年益莹,薛鹏,季晓彤,崔钰婷[6]（2018）在《刺参2种天冬氨酸蛋白酶的酶学性质及其对自溶的影响》一文中研究指出对刺参体内2种天冬氨酸蛋白酶——组织蛋白酶D(cathepsin D,Cat D)和组织蛋白酶E(Cat E)的酶学性质进行探讨,并考察两者可能在刺参自溶中的参与作用。先用Tris-HCl缓冲溶液提取刺参体壁中的粗酶,采用特异性荧光底物法测定Cat D和Cat E的酶学性质。结果表明,Cat D和Cat E的最适pH值分别为5.0和4.0,分别在60℃和40℃呈现最大酶活性,两者在20~40℃活性均较为稳定。Zn~(2+)、Cu~(2+)、Fe~(2+)、Fe~(3+)、Mn~(2+)可抑制CatD的活性,抑制率分别为86%、76.3%、29.2%、56.5%和48.5%。Fe~(3+)、Fe~(2+)、Cu~(2+)可抑制Cat E的活力,抑制率分别为99.1%、82.2%和28.6%。Pepstatin A、Z-Leu-Leu-Leu-H、苯甲基磺酸氟、1,10-菲啰啉能够抑制两者活性,抑制率分别约为98%~99%、65%~78%、30%~35%、19%~23%。二硫苏糖醇、L-Cys和乙二胺四乙酸则可将两者活性分别提升30.4%~31.1%、7.58%~9.64%、6.6%~7.9%。结果表明,刺参Cat D和Cat E为2种具有一定金属离子敏感性和依赖性的天冬氨酸蛋白酶,其活性中心有丝氨酸和半胱氨酸参与其活性调节,且两者很有可能参与刺参自溶过程中蛋白质的降解。(本文来源于《食品科学》期刊2018年14期）
季晓彤,王玲,王婷,崔钰婷,年益莹[7]（2016）在《南美白对虾丝氨酸蛋白酶抑制剂的筛选及其对自溶的控制研究》一文中研究指出本文基于南美白对虾体内丝氨酸蛋白酶(SP)抑制剂的筛选,为控制对虾自溶提供有效方法。首先采用特异性荧光底物法(Boc-Phe-Ser-Arg-MCA),对SP的酶学性质进行研究,结果表明,其最适温度为50℃,在20-50℃之间稳定性较好;最适pH为9.0,在pH7.0-9.0之间稳定性较好;Zn~(2+)可强烈抑制SP的活性;马铃薯、大蒜、黄豆水提物和新鲜蛋清对SP的活性均有显着抑制作用;山梨酸钾、柠檬酸、EDTA也能够在一定程度上抑制SP的活性。利用SDS-PAGE考察了南美白对虾虾糜的自溶情况以及上述抑制剂对其自溶的影响。25℃孵育2h,虾糜发生明显自溶,肌球蛋白重链和肌动蛋白几乎全部降解。马铃薯水提物、柠檬酸可显着抑制虾糜自溶,山梨酸钾、蛋清对虾糜自溶也有一定抑制作用,而黄豆水提物、Zn~(2+)、大蒜水提物、EDTA对虾肉自溶没有明显的抑制效果。结果提示,丝氨酸蛋白酶抑制剂的筛选,是一种快速筛选南美白对虾自溶控制剂的有效方法;另外,对虾体内除了SP发挥自溶作用,很可能存在其他类型参与自溶的蛋白酶。(本文来源于《中国食品科学技术学会第十叁届年会论文摘要集》期刊2016-11-09）
王玲,季晓彤,王婷,顾其丽,年益莹[8]（2016）在《南美白对虾基质金属蛋白酶抑制剂的筛选及其对自溶的控制研究》一文中研究指出本文基于南美白对虾体内基质金属蛋白酶(MMPs)抑制剂的筛选,为控制对虾自溶提供有效方法。首先,用Tris-HCl(pH7.0)提取粗酶,采用特异性荧光底物法考察了温度和pH对MMPs活力的影响;在最适温度和pH务件下,考察了各种金属离子、添加刺和天然成分对MMPs活性的影响,并进一步用SDS-PAGE考察筛选所得MMPs抑制剂对虾糜自溶的控制作用。结果表明,在pH6-12及30~60℃范围内,对虾MMPs活力均维持较高水平,pH10和50℃时酶活力相对最高。Zn~(2+)、山梨酸钾、蛋清、黄豆水提物、马铃薯水提物均对MMPs具有较好的抑制作用。虾糜在25℃孵育2h后发生严重自溶,肌球蛋白重链和肌动蛋白几乎全部降解。马铃薯水提物、Zn~(2+)、黄豆水提物、蛋清、山梨酸钾对虾糜自溶有一定抑制作用,其中马铃薯水提物的抑制作用最显着。上述结果提示,通过筛选MMPs抑制剂,能够快速发现潜在的对虾自溶抑制方法,对提高对虾原料贮藏品质具有一定指导价值。(本文来源于《中国食品科学技术学会第十叁届年会论文摘要集》期刊2016-11-09）
季晓彤,王玲,王婷,薛鹏,年益莹[9]（2016）在《海参组织蛋白酶K的酶学性质及其对海参自溶的影响》一文中研究指出本文对海参体壁组织蛋白酶K(CatK)的酶学性质及其对海参自溶的影响进行了初步探讨。采用特异性荧光底物法(以Z-Gly-Pro-Arg-MCA为底物)考察了CatK的基本酶学性质。结果表明CatK的最适pH为5.0,最适温度为50℃,在20-40℃之间稳定性较好。Ca~(2+)、Mg~(2+)、Mn~(2+)、Zn~(2+)、Fe~(2+)、Cu~(2+)均对该酶产生一定抑制作用,后四种离子对CatK的抑制率均超过87%。CA-074、Z-Leu-Leu-Leu-H(ZLLL)、碘乙酸、E-64、抗痛素、PMSF对CatK的抑制率均在85%以上,1,10-菲啰啉和EDTA对该酶的抑制率分别为16%和39.7%,DTT和L-Cys可将该酶活力分别提高至127.46%和238.3%。在海参肉中加入抑制剂CA-074和ZLLL,于25℃孵育使海参肉自溶,用SDSPAGE研究CatK对海参蛋白降解的影响,结果显示ZLLL能够在一定程度上抑制海参蛋白的降解。上述结果表明海参CatK是一种巯基氨基酸含量较高的半胱氨酸蛋白酶,具有一定的金属离子依赖性,但又易被多种金属离子抑制;CatK有可能直接参与海参自溶过程中蛋白质的降解。(本文来源于《中国食品科学技术学会第十叁届年会论文摘要集》期刊2016-11-09）
李凤梅,祝倩倩[10]（2016）在《南极磷虾自溶过程中胰蛋白酶活性的检测》一文中研究指出为探究南极磷虾(Eup Hausia superba)的自溶因素,将南极磷虾分别置于不同温度(30,40,50,60℃)、不同pH(6,7,8,9,10,11)、不同浓度NaCl溶液(0.2,0.4,0.6,0.8,1.0 mol/L)的条件下自溶3.5 h,提取粗酶液,以BApNA为底物,采用分光光度法检测粗酶液中胰蛋白酶活性的变化。结果显示:在温度为40℃、pH为8.0的条件下,胰蛋白酶活力达到最大值(0.076±0.002)U;在同等温度和pH条件下,随着Na~+浓度的升高,胰蛋白酶的活性逐渐被抑制,当Na~+浓度增大到1.0 mol/L时,胰蛋白酶活力为(0.004±0.547×10~(-4))U。试验结果表明,高温偏碱性的条件会加速南极磷虾的自溶,而高浓度的Na~+可以降低其自溶速率。(本文来源于《水产科技情报》期刊2016年03期）
蛋白酶自溶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
刺参是一种具有特殊质构的棘皮动物,作为传统的海珍品,在中国、日本、韩国等亚洲国家深受消费者喜爱。我国的刺参产量逐年递增,但是刺参在加工、运输过程中极易出现自溶现象,产生这一现象的主要原因是结构蛋白被降解。胶原蛋白是刺参最主要的营养成分,占总蛋白含量的70%左右,也是最主要的结构蛋白,赋予刺参体壁一定的韧性和强度。胶原蛋白的降解被认为是刺参自溶的主要原因,严重影响刺参体壁的稳定性。本文研究刺参胶原蛋白以及内源性蛋白酶对胶原蛋白的降解作用,为阐明刺参胶原蛋白的代谢和刺参自溶机理提供重要信息。首先,从刺参(Stichopus japonicas)体壁中纯化获得一种胃蛋白酶促溶型胶原蛋白(pepsin-soluble collagen,SjPSC)。SjPSC是由叁条相同的α链构成的同源三聚体,α链的分子量约为130 kDa。傅立叶红外光谱、圆二色谱分析表明,制备的SjPSC具有完整的叁股螺旋结构;差示扫描量热仪检测结果显示SjPSC的热变性温度为34.0±0.12°C。利用高纯度的SjPSC制备抗刺参胶原多克隆抗体,通过Western blot检测发现该抗体只与刺参(Stichopus japonicus)和东海乌参(Acaudina leucoprocta)两种海参的胶原蛋白发生反应,说明该抗体特异性良好。克隆获得SjPSCα的基因序列(SjCOLα),该基因开放阅读框(opne reading frame,ORF)共4203个碱基,编码1400个氨基酸残基,推导的氨基酸序列包含信号肽、N-端前肽、N端、C-端前肽、C端和叁股螺旋区,与多个物种的胶原蛋白α链氨基酸序列相似性均低于50%;叁股螺旋区Gly-Gly-Y的数量(9个)多于鲍鱼、罗非鱼和猪的α链,而Gly-Pro-Pro的数量(21个)却少于这些生物胶原蛋白的α链,这种序列特征与SjPSC的热稳定性较弱有关。刺参胶原蛋白理化性质和氨基酸序列的分析结果为研究刺参自溶过程胶原蛋白的变化以及自溶相关蛋白酶作用机理提供了良好的理论基础。基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)是刺参自溶过程中参与降解胶原蛋白的关键酶类。尽管该酶活力很高,但在刺参体内含量极少,难以纯化获得天然蛋白酶。为研究MMP参与刺参自溶的机理,制备有活性的重组蛋白酶是更有效的方法。本研究克隆获得刺参MMP-2完整的编码区序列,共1977个碱基,编码658个氨基酸残基,推导的氨基酸序列含有信号肽、前肽、包含叁个II型纤维连接蛋白结合域的催化区和C端类血红素结合区。在大肠杆菌表达系统中成功表达和纯化了MMP-2的催化区(rMMP-2),其分子量约为40 kDa。rMMP-2分解明胶的活性需要Ca~(2+)的参与,反应的最适温度为40°C,最适pH为8.5,说明它是一种弱碱性蛋白酶。圆二色谱分析结果显示,其变性温度为56.80±0.25°C。rMMP-2能有效分解刺参胶原,且产物具有清除DPPH自由基和羟基自由基的活性,EC_(50)值分别为3.59 mg/mL和2.77 mg/mL。这些实验结果表明MMP-2在刺参自溶过程中具有降解胶原蛋白的作用。此外,从刺参肠道中纯化获得一种分子量约为34 kDa的蛋白酶,该酶具有分解胶原活性,通过肽质量指纹图谱鉴定其属于丝氨酸蛋白酶(serine proteinases,SP)。但天然SP难于分离纯化,不利于深入研究SP与胶原的关系。因此,运用基因工程表达获得具有活性的重组SP(rSP)显得尤为重要。本研究进一步克隆获得刺参SP完整的编码区序列,共1134个碱基,编码377个氨基酸残基。在大肠杆菌表达系统中成功融合表达并纯化了具有活性的rSP。运用荧光底物分析,表明rSP的最适温度为35°C,最适pH为7.5,与天然SP的性质相似。rSP能有效地降解胶原蛋白,高效液相色谱分析发现降解产物中,分子量小于5 kDa的小肽占88.6%。利用肽质量指纹图谱分析酶切位点,结果表明rSP更易切割蛋白质序列中P_1位为Arg的肽键;同时当P_1位为Lys或Gly时也具有切割作用,但效率较低。这些结果证明SP也是刺参自溶过程降解胶原蛋白的关键酶。一直以来,刺参是国内外研究者热点关注的水产动物之一。本研究以刺参为研究对象,首次报道刺参胶原的基因,对刺参胶原蛋白进行了分析;对刺参MMP-2和SP基因全序列、重组表达、生理生化性质及其与胶原蛋白的关系进行了深入的研究。首次将高纯度、高活性的rMMP-2用于水解刺参胶原蛋白制备生物活性肽。分析了海参SP对SjPSC的酶切位点。本研究结果为深入了解刺参胶原蛋白在新陈代谢过程中的作用,探索刺参胶原的生物活性奠定了基础,并揭示了刺参自溶所涉及的相关蛋白酶及其作用机理。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
蛋白酶自溶论文参考文献
[1].刘自强,刘玉欣,刘潇阳,刘冰,宋亮.刺参体壁自溶过程中基质金属蛋白酶的原位抑制研究[C].中国食品科学技术学会第十六届年会暨第十届中美食品业高层论坛论文摘要集.2019
[2].颜龙杰.刺参（Stichopusjaponicas）胶原蛋白及自溶相关蛋白酶的研究[D].集美大学.2019
[3].胡玲萍,张晓梅,张鸿伟,孙维维,温运启.南极磷虾自溶前后氨基酸和胰蛋白酶降解产物的变化[J].食品科学.2019
[4].徐锦华,孟泽玲,葛诗琪,薛鹏,张公亮.刺参体壁胰/类胰丝氨酸蛋白酶的性质及其在自溶中的作用[J].食品科学.2019
[5].李锐,邹茜,孙玉林,王林,李想.紫外诱导克氏原螯虾虾头自溶制备蛋白酶解液及其鲜味物质研究[J].食品与发酵工业.2019
[6].王玲,年益莹,薛鹏,季晓彤,崔钰婷.刺参2种天冬氨酸蛋白酶的酶学性质及其对自溶的影响[J].食品科学.2018
[7].季晓彤,王玲,王婷,崔钰婷,年益莹.南美白对虾丝氨酸蛋白酶抑制剂的筛选及其对自溶的控制研究[C].中国食品科学技术学会第十叁届年会论文摘要集.2016
[8].王玲,季晓彤,王婷,顾其丽,年益莹.南美白对虾基质金属蛋白酶抑制剂的筛选及其对自溶的控制研究[C].中国食品科学技术学会第十叁届年会论文摘要集.2016
[9].季晓彤,王玲,王婷,薛鹏,年益莹.海参组织蛋白酶K的酶学性质及其对海参自溶的影响[C].中国食品科学技术学会第十叁届年会论文摘要集.2016
[10].李凤梅,祝倩倩.南极磷虾自溶过程中胰蛋白酶活性的检测[J].水产科技情报.2016